生理学实验
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/ 生理学实验　
振幅 =标准电阻的高度（mm）×标准电阻Ω数　　振幅的高度反映心室收缩时脑血管内血液充盈的程度，即脑的搏动性血 液供应情况。当血管流入道狭窄、痉挛及阻塞时，振幅降低。(2)流入时间(a)即上升时间。为基线开始上升到最大振幅所需要的时间，以 s 为单位，反映心脏收缩时动脉扩张的速度。血管弹性减弱、流入道 受阻、外周阻力增加时，流入时间延长；反之则缩短。(3)阻力指数（c/h2）即重搏波切迹高度与收缩波振幅之比，又称重搏波指数，反映外周阻力的大小。此值越小，表明血管的外周阻力降低；反之则 升高。(4)流入容积速度（h2/a）为单位时间内动脉流通容量的多少，单位为Ω/s。此指标为时间与振幅的关系指标，较单纯振幅更为敏感。振幅Ω数流入容积速度 =流入时间(s)实验 38 家兔肢体血流图的描记【目的要求】 学习测定和分析家兔肢体血流图的方法。【基本原理】 血流图方法是一种用以观察机体被测定部位的血流动力学状况的生物物理学方法。测定动物的肢体血流图可以观察和了解安静或各种变化情况下的 动物肢体血管的机能状态，如血管的紧张度、血管弹性等。【动物与器材】 家兔、血流图计、心电图机、导电糊、剪毛剪、95%酒精、测量电极、分规、量角器。【方法与步骤】1．本实验室采用 TXL-77-1 型晶体管血流图计，连接 HB-1 型心电图机Ⅰ导联记录，标准电阻 0.1Ω。（连接方法与实验 37 相同）。　　2．取 1.5—2kg 健康家兔，雌、雄均可，腹位固定于解剖台上，剪去肢 体测定部位的被毛，用 95%酒精除去皮肤表面的污垢。　　3．测量是采用一对 1cm 宽的长形银质电极，先在电极上涂一层导电糊。 测定后肢肢体血流图时，一电极安置于股骨上端，另一电极放于胫腓骨下端。 测量前肢时，测量电极置于肱骨和桡尺骨之间，两电极距离约 5—6cm。　　4．电极与皮肤固定接触好后，便开动血流图计进行平衡调整，待稳定后 就可以记录。描记一段正常血流图曲线后，在曲线的后面打上标准电阻讯号（图 4-44）。5．对记录结果的整理在每段曲线上，选出 1—2 个标准的波形，按实验37 附 2，分别计算它的波幅、流入时间、流入容积速度及血管阻力指数等项 指标。【注意事项】1．家兔四肢被测部位的毛要剃干净，但不要损伤皮肤。　　2．实验过程中，往往受到家兔呼吸的影响而出现基线飘移现象，前肢离 心脏较近，这种现象尤为突出，所以操作时要尽量在动物较安静时才描记。 另外，还要保持环境的安静和室内温度。3．描记曲线上的几个标准电阻的高度不一致时，可取其中 2—3 个的高度，取其平均值计算。【思考题】1．了解血流图的一般原理。2．说明测定动物血流图的实际意义。（谢申玲）第五章 呼吸实验 39 人体呼吸运动的描记及其影响因素【目的要求】1．学习描记人体呼吸运动的方法。2．观察影响呼吸运动的若干因素。【基本原理】 呼吸时胸廓大小的变化通常以呼吸描记器围绕于受试者的胸部，便可以记录呼吸运动。亦可用阻抗呼吸描记器（图 5－1）测定受试者胸部所用的两 个电极之间的阻抗变化，当微弱的电流经过电极时，电极间的电压与阻抗成 正比。吸气时，通过的电流减少，阻抗小；呼气时，电流增加，阻抗加大。 由于阻抗的变化，经过放大便可以记录呼吸运动。本实验采用呼吸描记器。【实验器材】 呼吸描记器、记纹鼓或记录仪、张力换能器、马利氏气鼓、秒表、大塑料袋、橡皮管、螺丝夹。【方法与步骤】　　1．受试者坐位，将呼吸描记器围绕于胸部呼吸活动最明显的水平位置， 经橡皮管和三通管与马利氏气鼓相连。开放三通管侧管上的螺丝夹，平衡记 录系统中的压力后再旋紧它。调整记录笔，便可记录呼吸运动曲线（图 5-2）。2．正常呼吸曲线记录受试者正常呼吸 1—2min，观察其频率及幅度。然后进行下列实验项目。　　3．过度通气用慢速记录一段正常通气周期以后，便停止记录。令受试者 作极快和极深呼吸 1—2min，观察并记录深呼吸后呼吸运动的暂停现象。注 意暂停的持续时间与恢复过程。4．在一封闭系统中过度通气先记录一段平静呼吸运动曲线。然后让受试者面对一大塑料袋，重复步骤 3 实验后，记录过度通气后的呼吸运动，把这 次记录和上面的比较。5．重复呼吸先记录一段平静呼吸运动曲线。然后用大塑料袋罩住口鼻或套住整个头部，让受试者对着袋内作深呼吸 1—2min，不用连续记录，每分 钟只记录 10—15s 便可。当重复呼吸袋内的呼出气时，注意呼吸的频率和幅 度会发生什么变化？6．缺氧呼吸先记录一段平静呼吸运动曲线。然后用大塑料袋套住头脸部，袋内放入一小包石灰钠，吸收呼出气中的 CO2 和水，让受试者对着袋内作深呼吸 1—2min。注意并记录其呼吸运动的变化。如果受试者感觉呼吸困 难时，应立刻停止实验。　　7．精神集中对呼吸运动的影响当受试者正在穿针或计算一道难题时，记 录其呼吸运动曲线。这一实验观察延髓较高级中枢对呼吸活动的作用。　　8．屏气呼吸记录一段平静呼吸运动曲线。然后让受试者尽量屏气，于屏 息达到最高限度及重新呼吸时，记录其呼吸运动，测定屏息最长的持续时间。 为什么不能无限地屏气呼吸？　　9．讲话或讲演时对呼吸运动的影响让受试者朗读时，记录其呼吸运动曲 线，与平静呼吸时的曲线比较有何不同？当受试者默读同样的短文时，记录　　其呼吸运动曲线。10．体育运动对呼吸运动的影响解除呼吸描记器与马利氏 气鼓的连接，令受试者进行上下 30cm 高的台阶，以 60 次/min 速度跑 2min， 或原地跑 200 步后，记录其呼吸运动的变化。为什么运动时会引起呼吸频率 及幅度的增加？【思考题】1．缺氧呼吸和通气过度呼吸的机制是否不同？为什么？2．咳嗽、笑、哭等动作是正常呼吸吗？（谢申玲）实验 40 人体肺泡气成分的分析【目的要求】 学习用沈氏气体分析管测定人体肺泡气的成分。【基本原理】　　在一定容积的密闭管中，放入一定容量的 5mol/LNaOH 溶液。该溶液能吸 收气体中的 CO2，结果使管内压力下降。一旦在水内打开管口，水便进入管 腔，进入水量的多少与被吸收的 CO2 体积相等。由此可测得气体中 CO2 的百分 容积。同理，用焦性没食子酸的碱溶液吸收 O2，可测得空气中 O2 的百分容积。沈氏气体分析管就是用这种原理测定气体成分的。【实验器材】　　沈氏气体分析管、水池或水箱、10ml 量筒、小漏斗、酒精棉球、5mol/LNaOH 溶液、焦性没食子酸饱和苛性钠溶液（配制方法：将 lg 焦性没食子酸溶于10ml 饱和 NaOH 溶液内）、5%醋酸。【方法与步骤】1．熟悉沈氏气体分析管的结构沈氏气体分析管（图 5-3）一端 较粗，其容积为全管总容积的 50%。另一端较细，细管部分亦占总容积的 50%。细管有刻度，每一小格占全管容积的 0.2%。管的两端各有一活塞（图中甲、乙）。甲活塞内有两个孔道：大孔道的直径与分析管的内径相等；小 孔道则细而弯曲。乙活塞仅有一个大孔道。2．甲活塞小孔道注水先将分析管乙活塞与大气相通，并转动　　甲活塞，使小孔管与大气相通（图 5-3B）。将甲端插入水池或水箱中， 待水经过小孔道进入管内后，在水中旋转甲活塞，关闭小孔道。注意：小孔 道内不得有气泡混入，否则重新灌注。将分析管由水中取出，管腔内的水由 大孔自由流出。3．收集肺泡气用酒精棉球将甲端管口消毒。然后将深呼气时 最后呼出的一部分气体由甲端吹入管内。待呼气完毕之前，先将乙活塞关闭。然后继续向管内呼气，使管内的压力稍高于大气压，即迅速关闭甲活 塞大孔。注意：此时甲活塞大孔与小孔皆呈关闭状态，切勿使小孔与大气相 通，以防小孔内灌注的水分流出。4．平衡温度与压力将已收集了肺泡气的分析管水平放置于水中 3min，使温度平衡。然后提起乙活塞出水面，略略打开而又迅速关闭之， 使管内多余的肺泡气放出，此时管内的气体压力与大气压相等。注意：在整个操作过程中，手不得接触分析管的充气部分，以免手温影响管内气体的温 度。5．CO2 百分容积的测定　　（1）将 5mol/LNaOH 溶液 3ml 注入甲端上部的刻度管内。略开甲活塞小 孔道，使小孔与管腔相通。此时管内 CO2 即与 NaOH 接触而被吸收，于是 NaOH 溶液逐渐向管内流进。当流入 2ml 时，迅速关闭小孔，将剩余的 NaOH 弃去， 并洗净活塞外的碱溶液。颠倒摇动分析管 10 余次（约半分钟），使管内 CO2被 NaOH 充分吸收。　　（2）将分析管平置于水中约 3min，使管内、外温度平衡。然后将甲活 塞外端管腔灌满水。注意：不得有气泡。用拇指紧闭甲端管口，将分析管倒 置后放入水中，松开拇指，使管内 NaOH 溶液的液面与水面相平。然后慢慢开 启甲活塞小孔，水因管内已形成的负压而进入管腔内。随着管腔内水分的上 升，应将分析管压下，使管内、外的液面始终保持齐平。待管内水面不再上 升，即可关闭小孔。注意：转动甲活塞时，切勿使大孔与管腔相通。（3）取出分析管，记录管内液体所占的容积百分比，此即为肺泡气中CO2 的百分容积。（4）校正结果为了使管内的 CO2 完全被吸收，需要重复摇动分析管，然后平衡温度，调节压力，直到所记录的刻度不变为止。最后记录 CO2 的百分容积。6．O2 百分容积的测定 CO2 测定完毕后，利用原分析管内的肺泡气继续测定 O2 的百分容积，其测定方法与 CO2 的测定相同。所不同的是在步骤（1）中，将 6ml 焦性没食子酸饱和苛性钠溶液注入甲端上部的刻度管内，然后开启甲 活塞小孔，待溶液流入 5ml 时，关闭小孔。然后按（2）、（3）和（4）步骤 测定 O2 百分容积。注意：将 O2 完全吸收后的刻度数减去 CO2 所占的容积，即为 O2 的百分容积。　　7．分析管的洗涤实验完毕，用自来水将管内冲洗干净，然后用 5%醋酸 溶液 3ml 沿分析管内壁冲洗一次，最后再用自来水冲洗数次即可。【思考题】1．将所得肺泡气与空气中的 CO2 与 O2 的百分容积作一比较，分析其不同的原因。2．小结使用沈氏气体分析管的体会与经验。（解景田）实验 41 呼吸通气量的测量【目的要求】 掌握呼吸通气量的测量方法【基本原理】 人的性别、年龄及运动情况都会产生不同的呼吸气量。正常安静状态下每次呼吸的气量约 500ml，称潮气量。人可以在正常吸入空气以后，再用力 吸入更多的气体：而在正常呼气之后，也能再用力呼气，这个实验就是测量 这些呼吸气量的变化。【实验器材】 单筒肺量计、记录纸、橡皮接口、鼻夹、烧杯、75%酒精、酒精棉球。【方法与步骤】1．仪器准备单筒肺量计（图 5—4）的主要部件有：　　（1）测量装置由两个对口套装的圆筒构成。外筒口向上，筒内有 3 根通 气管。内筒又称浮筒，当外商灌满水后，通过吹气口向通气管内充气时，内 筒可以上浮。根据筒内气体增加的容积，可测出吹入气体的量。　　（2）记录装置浮筒顶端有根吊线，浮筒内容积的变化可以牵动吊线，而 吊线的活动又可通过记录笔描记到记录纸上，可以根据需要选择走纸速度， 描记出呼吸气量的曲线。（3）通气管共 3 根，开口于浮筒底部。一根是充 O2 管，可与外界气体相通（图 5－4 氧气接头），用以调节浮筒内气体成分。另外两个通气管分别 装有钠石灰和鼓风机（用于吸去 CO2 和推动气流），与吹气口三通管相通。 测量前先将外筒装水至水位表要求的刻度。开放氧气接头，使筒内装有 一定量的空气，然后关闭氧气口。转动三通管的开关，关闭肺量计，检查是 否漏气。打开电源开关，准备好描笔及记录纸。将描笔调节到记录鼓的中部位置上。　　2．肺通气功能的测定方法受试者将消毒橡皮接口连到三通管上，然后用 牙齿咬住接口的两条根，而将橡皮口片置于口腔前庭，用鼻夹夹鼻。转动三 通开关，用口平静呼吸外界空气，练习口呼吸数分钟。转动三通开关，打开 肺量计，再开慢速走纸挡开关，启动记录键，即可测量并记录呼吸气量的变 化。3．潮气量的测量每次平静呼吸时吸入和呼出空气的容量，约 500ml。进行这项测量时，不要用力呼吸。记录气量并重复测 3 次。然后计算平均潮气 量，填入表 5－1。4．补吸气量测量正常吸气之后再用力吸入空气的容量，约 2800ml。正常呼吸 2—3 次后尽量深吸气，跟着呼入肺量计内，只是到肋骨复位的正常呼 气，不要用力，记录其气量并表 5-1 呼吸通气量的测量项目
潮气量(ml)
补吸气量(mo)
补呼气量(ml)
肺活量(ml)
呼吸通气量 ml min
1
重复 3 次。用测量得出的数字减去潮气量即为补吸气量，然后计算平均补吸气量。5．补呼气量测量正常呼气之后再用力呼气的气量，约 1000ml。正常呼吸 2—3 次后用力呼气。重复 3 次，计算平均补呼气量。6．肺活量测量肺内全部可交换气体 （即潮气+补吸气 +补呼气）约4500ml。正常呼吸 2—3 次后深吸气和呼气，记录气量，并重复 3 次。7．用下列公式计算每分钟呼吸通气量。 潮气×呼吸次数/min=每分钟呼吸通气量（ml/min）。8．用实验数据计算男、女生肺活量的差异。即计算均值±标准误（SE）、P 值。【思考题】1．呼吸通气量受哪些因素影响？2．呼吸通气量如何调节？（谢申玲、赵静）实验 42 家兔呼吸运动的调节【目的要求】1．学习测定兔呼吸运动的方法。2．观察并分析肺牵张反射以及影响呼吸运动的各种因素。3．进一步掌握测定动脉血压的有关技术。【基本原理】 人体及高等动物的呼吸运动所以能持续地节律性地进行，是由于体内调节机制的存在。体内、外的各种刺激，可以直接作用于中枢或不同的感受器，反射性地影响呼吸运动，以适应机体代谢的需要。肺牵张反射是保证呼吸运 动节律的机制之一。血液中 CO2 分压的改变，通过对中枢性与外周性化学感受器的刺激及反射性调节，是保证血液中气体分压稳定的重要机制。【动物与器材】　　兔、兔体手术台、常用手术器械、血压测定装置（见实验 24）、记纹鼓 或记录仪、万能杠杆或张力换能器、刺激器、刺激电极、电磁标、止血钳、 万能滑车、气管插管、（20ml 及 1ml）注射器、橡皮管（长 1m，内径 0.7cm）、20%氨基甲酸乙酯、生理盐水。【方法与步骤】 急性实验时，记录呼吸运动的方法有两种，一种为通过与气管插管相连的玛利氏气鼓记录呼吸运动；另一种是通过万能杠杆与滑车记录膈肌的运动。本实验采用后一种实验方法。　　1．将动物麻醉后，背位固定于手术台上。剪去颈部与剑突腹面的被毛， 切开颈部皮肤，分离气管并插入气管插管。再分离出一侧颈总动脉与双侧迷 走神经，穿线备用。2．剑突软骨分离术切开胸骨下端剑突部位的皮肤，并沿腹白线再切开长约 2cm 的切口。细心分离剑突表面的组织，并暴露剑突软骨与骨柄。用金冠 剪剪断剑突骨柄（图 5－5）。注意：不能剪得过深，以免伤及其下附着的膈 肌。此时剑突软骨与胸骨完全分离。提起剑突，可见剑突随膈肌的收缩而自 由运动。　　3．将缚有长线的金属钩钩于剑突中间部位，线的另一端通过万能滑车缚 于记录杠杆上。调节记录系统，使记录笔在记纹鼓上记录出明显的呼吸运动 曲线（图 5－6）。经过滑车的缚线也可通过换能器在生理记录仪上记录。4．按实验 24，从颈总动脉插入动脉插管，并通过水银检压计记录动脉血压。5．观察项目　　（1）开动记纹鼓或记录仪，慢速记录正常的呼吸运动和血压曲线，注意 分清吸气与呼气时记录笔移动的方向。　　（2）增加无效腔对呼吸运动的影响将长约 1m、内径 0.7cm 的橡皮管连 于气管插管的一个侧管上，用止血钳夹闭另一侧管，使无效腔增加，观察并 记录呼吸运动的改变，同时注意血压的变化。　　（3）窒息对呼吸运动的影响将气管插管的两个侧管同时夹闭，观察并记 录呼吸运动的变化。待呼吸运动 E 改变后，立即打开止血钳。　　（4）肺牵张反射在气管插管的一个侧管上，借细乳胶管连以 20ml 的注 射器。记录一段对照呼吸运动曲线之后，准确地于吸气之末，将注射器内约20ml 的空气迅速注入肺内，并在推注空气的同时，夹闭气管插管的另一侧 管。注意：在注入空气以后，呼吸运动暂时停止于何种状态，为什么？在呼 吸运动恢复之后，于呼气之末，用注射器由肺内抽取气体，观察呼吸运动暂 停于何种状态，为什么？　　双结扎颈部一侧迷走神经后切断，观察并记录呼吸运动的变化。再切断 另一侧，对比切断迷走神经前后呼吸频率与深度的变化。然后重复上述实验（向肺内注入空气与由肺内抽取气体），观察并记录呼吸运动是否改变，与迷走神经完整时有何异同？注意：分析哪些是肺牵张反射的效应，哪些属于 机械因素引起的后果？如膈肌呼吸运动曲线的变化，除了由于膈肌的收缩和 舒张所造成外，尚有向肺内推注空气与抽取气体所引起的膈肌的被动位移。 分别刺激迷走神经中枢端与外周端，观察并记录呼吸运动。注意是否都有变化，为什么？【思考题】1．血液中 CO2 增多或缺 O2 时，呼吸运动有何改变，通过哪些途径？　　2．根据实验结果分析肺牵张反射，包括迷走神经吸气抑制反射与迷走神 经吸气兴奋反射的反射途径以及对维持正常呼吸节律的意义。3．双侧切断迷走神经以后，呼吸运动的变化说明什么问题？（解景田）实验 43 兔胸内负压的测定【目的要求】1．学习胸内负压的测定方法。2．观察在呼吸周期中，胸内负压的变化。【基本原理】 胸膜腔是由胸膜脏层与壁层所构成的密闭而潜在的间隙。胸膜腔内的压力通常低于大气压，称为胸内负压。胸内负压的大小随呼吸周期的变化而改 变。吸气时，肺扩张，回缩力增强，胸内负压加大；呼气时，肺缩小，回缩 力减小，负压降低。一旦胸膜腔与外界相通造成开放性气胸，则胸内负压消 失。【动物与器材】 兔、兔体手术台、常用手术器械、止血钳、粗注射针头、水检压计、橡皮管、20%氨基甲酸乙酯。【方法与步骤】　　1．将动物麻醉后，背位固定于兔体手术台上。剪去颈部与右前胸部的被 毛。2．分离气管，插入气管插管。　　3．将粗针头与水检压计连接。插入胸膜腔之前，需将针头尖部磨钝，并 检查针孔是否通畅，连接处是否漏气。　　4．在右腋前线第 4、5 肋骨上线，将针头垂直刺入胸膜腔内。当看到检 压计内的红色水柱随呼吸运动而上下移动时，说明针头已进入胸膜腔内，应 停止进针，并固定于这一位置（图 5－7）。注意：穿刺时，针头斜面应朝向 头侧，首先用较大的力量穿透皮肤，然后控制进针力量，用手指抵住胸壁， 以防刺入过深。　　5．观察吸气与呼气时检压计水柱移动的幅度。记下平静呼吸时胸内负压 的数值。此时吸气与呼气均为负值。　　6．在气管插管的一个侧管上接一长约 1m，内径为 0.7cm 的橡皮管。夹 闭另一侧管，使呼吸运动加强。观察呼气和吸气时检压计水柱之波动，记下 其胸内负压之数值。　　7．剪开前胸皮肤，切断肋骨，打开右侧胸腔，造成人工开放性气胸，观 察胸内负压之变化。【思考题】　　1．胸内负压是怎样形成的？为什么在呼气和吸气时胸内负压的数值发生 变化？2．胸内负压的生理意义是什么？人工气胸后，将胸壁切口严密缝合，再将胸膜腔内的空气抽出，胸内负压能否恢复？为什么？（解景田）第六章 消化实验 44 离体小肠段的生理特性【目的要求】1．了解哺乳动物离体肠段的一般生理特性。2．学习离体器官灌流的一种方法。【基本原理】 哺乳动物的胃肠平滑肌具有自动节律性收缩、伸展性、紧张性和对理化刺激较敏感等生理特性。这些特性对维持消化管一定压力，保持胃肠等一定 的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化具有生理意义。在整体内受 中枢神经系统和体液因素的调节。本实验观察及记录哺乳动物等离体肠段的 一般特性及在一些药物作用下引起的各种效应。【动物与器材】 兔（大白鼠或鸭）、平滑肌离体灌流恒温装置、常用手术器械、自动控温仪、记纹鼓或记录仪、通用杠杆或张力换能器、温度计、铁支架、O2、棉线、缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素（1∶10000）、乙酰胆碱（1∶100000）、0.5mg/ml 阿托品、0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。【方法与步骤】1．平滑肌离体灌流恒温装置（图 6－1）包括供应营养液和 O2、保持恒温及记录平滑肌活动等三部分。营养液和 O2 分别由贮液瓶和氧气瓶经橡皮管由营养管送入，营养管内温度由恒温水浴连接自动控温仪维持。记录部分用通用杠杆和电动连续记纹鼓，也可 用张力换能器和记录仪。2．水浴里的水恒温 37℃，营养管内充满台氏液。要不断供应 O2，可调节套在连接氧气瓶橡皮管上的螺旋夹，控制气流速度，使气泡一个一个地进 入台氏液中。3．用铁锤击兔或大白鼠的头部，昏迷后，立即剖开腹腔，取出十二指肠至结肠间的肠段，剪成约 3—4cm 小段，放入室温台氏液内轻轻冲洗，以除去 肠的内容物。边洗边通入 O2，把肠段夹入另一盛有新鲜台氏液的培养皿内， 继续通 O2 备用。　　4．营养管内的溶液保持 37℃，然后取出一小段肠，用缝针将肠的一端 穿线结扎（只结扎半边肠腔）。结扎线系于通用杠杆或张力换能器上，肠的 另一端则穿入一不锈钢的 S 形小钩，把小钩系于营养管底部的半月形弯钩 上，使肠段完全浸浴在台氏液中，并立即通入 O2。调节杠杆或换能器的灵敏 度后，让肠段稳定 20min，便可以描记其活动曲线。5．依次加入各种药物，观察和记录肠段运动的变化。（1）肾上腺素（1∶10000） 2 滴（2）乙酰胆碱（1∶100000） 1—2 滴（3）1mol/LHCl 1—2 滴（4）1%BaCl2 2—3 滴（5）1mol/LNaOH 1—2 滴（6）0.01%磷酸组织胺 1—2 滴 每加入一种药物，当出现反应后，即从侧管放出营养管中的溶液，换入新鲜台氏液，更换 2—3 次，使肠段恢复正常节律。　　6．在换上新鲜台氏液，肠段恢复节律收缩的基础上，加入乙酰胆碱 3 滴，使引起明显效应，再加入 0.5mg/ml 阿托品 3—4 滴，观察加入阿托品后 肠段运动的变化。进行这项试验后，需要多次冲洗，肠段才慢慢恢复活动。【注意事项】　　1．为避免麻醉剂对小肠活动的影响，所以要用铁锤猛击兔或大白鼠的头 部，使之迅速昏迷后即取出小肠段。2．游离及取出肠段时，动作要快，但要避免过度牵拉或使组织干燥而影响其活性。整个过程应保持营养液恒温和通入 O2。　　3．每加入一次药物前需先描记一段肠段运动曲线，加入药物出现效应 后，立即冲洗，更换营养液，待活动恢复后，再进行另一次试验。【思考题】1．为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化？其机理是什么？2．加入乙酰胆碱后再加入阿托品，肠段活动受到抑制，为什么？（谢申玲）实验 45 家禽的腺胃瘘手术【目的要求】 学习鸟类消化管慢性实验手术方法，为“假饲”实验作准备。【动物与器材】　　鸭或鹅、常用手术器械、眼科手术刀、小胃钳、止血钳、布巾钳、手术 巾、鸟体固定台、腺胃痿套管、缝针、缝线、注射器、敷料、20%氨基甲酸乙 酯、碘酒、70%酒精。【方法与步骤】1．手术准备（1）手术器械、手术巾、敷料、注射器等均按 手术室常规进行灭菌（方法见实验 77），非吸入麻醉 剂在注射前亦需消毒。（2）选取健康的鸭或鹅，称重，用氨基甲酸乙酯（1g/kg 体重）静脉注射麻醉。注射部位可选翼下的肱静脉或蹼间静脉（图 6－2）。动物麻醉后， 背位固定在鸟体固定台上。　　（3）手术野剪毛及消毒剪除羽毛最好在手术室外或准备室内进行。用剪 刀将手术野的羽毛剪净，特别要注意剪净细小的绒毛。剪毛后将动物连同固 定台搬到手术室，对手术野消毒。对手术野皮肤进行消毒前，可用脱脂棉蘸 温肥皂水洗擦。洗净擦干后，用碘酒和 70%酒精按常规方法消毒皮肤。皮肤 消毒后，用消毒的手术巾覆盖手术野周围，用布巾钳将手术巾固定在皮肤上。　　（4）腺胃瘘套管的制作胃瘘管可用内径 3—5mm 的塑料管制作。先截取 长约 5cm 的塑料管，然后用酒精灯将载玻片或铜片加热后，将塑料管垂直立 于其上轻压之，塑料管底部因受热而向周围扩展成圆形底盘。冷却后取下即 可应用（图 6－3）。2．手术过程（1）切开腹壁先从胸骨后突下缘开始向后方沿腹正中线切开皮肤，分离皮下脂肪层，然后沿腹白线切开腹肌腱膜。切口长度视动物体型大小而异， 一般以 3-5cm 为宜。　　（2）暴露腺胃切开腹壁后，可以看到肌胃和肝。腺胃在肌胃前方，被肝 左叶覆盖，不能直接看到。轻轻掀起肝左叶，用食管钩沿肌胃贲门端小心伸 向背方，钩住肌胃与腺胃交界部，再轻柔地将胃牵拉到腹腔外。用小胃钳夹 住腺胃与食管交界部，使之固定不致缩回腹腔。　　（3）安装瘘管安置套管的位置以腺胃后部腹面左侧为宜，在此处两条较 大血管之间作一椭圆形荷包口缝线，其长径与血管方向平行，长径长度与套 管底盘直径相等（图 6－4），缝线只穿入肌层。　　用手指托住腺胃，用眼科手术刀在荷包口缝线圈内作切口，切口方向与 荷包口缝线长径平行，切口两端距缝线各 1—1.5mm，切透肌层和粘膜下层。 用镊子夹起粘膜，用眼科剪刀剪掉相当于肌层切口长度的一小块粘膜。用消 毒棉球或纱布拭净切口处的胃液等。将胃瘘管的内套管底盘轻柔地插入切口 内。套管插入后，将荷包口缝线缚紧，注意勿使粘膜外翻到缚线外面。然后， 在缚紧的荷包口缝线外围作第二道荷包口缝线，与第一道缝线相距 2—3mm， 结扎端应位于第一道缝线结扎端的相对方向。缚紧第二道缝线时，即可将第 一道缝线完全掩没（图 6－5）。内套管安置后，可将周围的结缔组织套在套管基部，然后将胃送回腹腔内复位。在腹壁中线切口前部的左侧，用眼科手术刀由腹腔内面向外作一穿 透切口。切口长度以略大于套管直径为宜。将内套管由切口穿出到腹壁外。再将外套管套上。使 外套管底盘紧压在皮肤上。然后将内、外套管剪齐，用烧热的铜片在剪齐部 加温，使内外管融合。（4）按外科常规方法逐层缝合腹壁。　　3．术后护理创口要包扎保护，防止感染，术后第 1 天禁食，第 2 天起可 给流食，一周后可按正常制度喂饲。【思考题】小结家禽胃瘘手术成功的关键（蓝书成）实验 46 家禽的食管切开术与假饲实验【目的要求】1．学习家禽食道切开术的实验方法。2．学习假饲的实验方法，观察胃腺分泌的调节。【基本原理】 动物在消化时胃液分泌的调节包括三个相期：头期、胃期和肠期。假饲实验充分证明了头期的胃液分泌。假饲时，虽然动物吞下的食物由食管切开 处漏出，并未进入胃内，经一定时间后仍能引起胃液的分泌，此为非条件反射性分泌。另外，如果只让动物观看食物，不让其进食，也能引起胃液分泌， 此为条件反射性分泌或心理性分泌。这两种胃液分泌的刺激均来自头部，故称为头期。【动物与器材】 鸭或鹅、常用手术器械、止血钳、蚊式止血钳、布巾钳、消毒手术巾、鸟体固定台、鸟头固定夹、假饲实验架、假饲固定衣、消毒纱布、药棉、缝 针、缝线、食盘、远心分离管、20%氨基甲酸乙酯、任氏液。【方法与步骤】　　1．食管切开术选用健康鸭，在一天前进行腺胃瘘手术，第二天再进行食 管切开术（亦可同时进行）。术前先腹腔注射氨基甲酸乙酯（1g/kg 体重） 麻醉。背位固定在手术台上，将头部固定，用湿纱布将颈部羽毛润湿，在颈 中线分开羽毛露出一条无羽线可直接露出皮肤。在此线上用碘酒棉球消毒皮 肤，再用 75%酒精脱碘。覆盖手术巾。沿颈中线将已消毒的皮肤切开长约 3.5－4cm 的切口（不同鸟类切口长度不一、鸭 3.5－4cm、鹅 4—4.5cm、鸡 3—3.5cm）（图 6－6），用蚊式止血钳分离皮下结缔组织和纵走的胸骨舌骨肌， 即可看到气管。在气管右　　侧下部找出食管，并用止血钳再分离周围的结缔组织，然后用左手食指 钩住食管，将其提到胸舌骨肌的外面，随后将食管下部的两条胸骨舌骨肌并 在一起用间断缝合法缝合。缝合时，先缝合食管下部两端，并将食管后壁连 同胸骨舌骨肌缝在一起（缝合线只能穿过肌层不能穿透食管粘膜层）。这样 便可以将已提出来的一段食管固定在胸骨舌骨肌层上（图 6－7）。在外露的食管腹面正中线切开 2/3 周的切口，将食管内壁的粘膜外翻，然后将切口的边缘部肌层与皮肤切口对齐，作连续缝合（图 6－8）。缝合后 用红汞棉球擦拭以防感染。2．术后护理术后会从食道瘘口流失一定量粘液，为防止机体丧失水分，可在手术当日向血液内注入 40ml 葡萄糖液（5%）。术后第二天开始，每天要 从食管瘘口向食管下压送粥状或稍干的食物 2 次，并放在笼内由专人管理（图6－9）。3．假饲实验（1）实验前一天禁食。（2）给动物穿上固定衣，并缚于假饲固定架。　　（3）从固定衣上的瘘管引出孔处将胃瘘管引出，用远心分离管或玻璃试 管套入其上，以便收集胃液（图 6－10）。　　（4）先在食盘上放置青菜与饲料，打开胃瘘管。只让动物看到饲料，但 不让其进食，观察有无胃液分泌。记录胃液分泌的时间，每分钟的分泌量， 并测定胃液的 PH 值。（5）休息 30min 后，开始假饲实验。让动物吃食，食物由食管切开处漏出，观察此时胃液的分泌。记录分泌时间，每分钟分泌量及胃液的 PH 值。【思考题】1．只看到食物，并未进食为什么能引起胃液分泌？讨论其生理机制。2．假饲为什么能引起胃液分泌？通过哪些途径？你能否进一步设计 1—2 个实验加以证实？（蓝书成）实验 47 大白鼠胃液分泌的调节【目的要求】1．学习测定胃液分泌的实验方法。2．观察胃的泌酸机能及迷走神经和组织胺对胃液分泌的调节作用。【基本原理】 胃粘膜有许多腺体。胃底和胃体粘膜的腺体分泌胃蛋白酶和盐酸，一般所称的胃液，就是指这部分液体。在一般情况下，胃液的分泌受神经与体液 性调节。【动物与器材】　　大白鼠、常用手术器械、刺激器、止血钳、直径 2-3mm 长约 15cm 细塑料 管、纱布垫、碱式滴定管和支架、2ml 及 5ml 注射器、100ml 锥形瓶、保护电 极、棉线、0.01mol/LNaOH、1%酚酞、3%戊巴比妥钠、阿托品（0.5mg/ml）、0.01%磷酸组织胺、生理盐水。【方法与步骤】　　1.取 350g 以上大白鼠两只，雌雄均可。预先禁食 18-24h，任其自由饮 水。实验时，用戊巴比妥钠溶液腹腔麻醉，剂量为 30—50mg/kg 体重，用棉 绳缚其四肢，背位固定于手术台上。2．将颈中部被毛剪去，作长约 1.5cm 的皮肤切口，分离肌肉，找出气管，插入塑料气管插管。　　3．将上腹部被毛剪去，在剑突下腹部正中剪一长约 3cm 的切口，沿腹白 线剖开腹腔，在左上腹内找到食管、胃和十二指肠。将胃移至腹腔外沾有生 理盐水的纱布垫上，于贲门处分离食管表面的迷走神经，穿线备用。用另一 根线穿绕贲门一周，在大白鼠口腔内插入塑料套管，套管一端达咽部，另一 端在口腔外。将细塑料管通过此套管、食管、贲门而插入胃内约 2cm。用手 指在胃表面触到胃内的细塑料管后，即将贲门处的线结扎，以免套管滑脱。　　4．在胃和十二指肠交界处穿两根线，两线相距约 1cm。先把十二指肠远 端的线结扎，然后在十二指肠近幽门端的肠壁上剪一小孔，把细塑料管向幽 门方向插入胃内，深约 1cm，将事先准备好的线结扎，以固定此塑料管。　　5．胃液样品的收集和胃酸的测定用注射器将大量温热的生理盐水冲洗 胃，使残留食物由胃插管流出体外，流出的盐水澄清时即表示胃被洗净。然 后将胃送入腹腔，用蘸有温热生理盐水的纱布垫覆盖，避免体温下降。或用 灯泡照射，以维持动物体温。30min 后，每次用 5ml 生理盐水冲洗胃，用锥 形瓶收集由幽门端流出的液体 2min，连续冲洗 3 次，共收集 3 个胃液样品， 以此作为正常对照。　　以酚酞为指示剂，用 0.01mol/LNaOH 溶液滴定每次所收集的胃液样品， 将中和胃酸所用去的 NaOH 量（L）×mol/LNaOH 克当量，即为每次胃酸排出　　量，换算成μmol/L/2min 来表示。6．迷走神经对胃液分泌的调节作用刺激迷走神经，每次持续 5s，间隔20s，30s 后按上法收集样品和测定胃酸排出量。　　7．组织胺对胃液分泌的作用切断迷走神经，待 20min 后，收集一次对照 样品，立即从皮下注射磷酸组织胺（1mg/kg 体重），再连续收集 3—4 个样 品，测定其胃酸排出量。　　8．阿托品对胃液分泌的作用用另一只大白鼠，找出两侧迷走神经。刺激 迷走神经，收集两次胃液样品，测定其胃酸排出量。然后再从皮下注射阿托 品（1mg/kg 体重）5min 后再重复刺激迷走神经，并收集两次胃液，测其胃酸 含量，比较结果有何不同？【注意事项】1．为保证胃液分泌，大白鼠不宜麻醉太深。2．因大白鼠的迷走神经很细，容易拉断，分离时要非常细心。【思考题】 迷走神经、组织胺及阿托品对胃酸的分泌有何作用？（谢申玲）实验 48 神经系统对消化管运动的调节【目的要求】 观察动物在体胃肠运动及调节。【基本原理】　　胃肠道平滑肌经常维持着一定的紧张性收缩，在体内它受神经和体液的 调节。在神经及某些药物的作用下，这种紧张性及运动节律可发生改变。【动物与器材】　　兔或鸭（实验前需喂食）、常用手术器械、保护电极、刺激器、注射器、 手术台、20%氨基甲酸乙酯溶液、乐氏液、阿托品（0.5mg/ml）、新斯的明（1mg/ml）。【方法与步骤】　　1．用氨基甲酸乙酯溶液（1g/kg 体重）麻醉兔，背位固定于手术台上。 剪去颈部的毛，沿颈部中线切开皮肤，分离肌肉，找出一侧迷走神经，穿两 根线备用。分离咽喉下面一段长约 3cm 的气管，并切除，以便观察食管的蠕 动。在气管的断端插入气管插管。2．观察下列实验项目（1）观察正常情况下食管有无蠕动。（2）用中等强度的连续脉冲直接刺激食管，观察有何反应。（3）刺激迷走神经，观察有无吞咽活动及食管蠕动波发生。　　（4）将一侧迷走神经剪断，分别刺激其中枢端和外周端，观察食管的反 应有何不同。　　3．将腹部的被毛剪去，自剑突沿腹中线切口，剖开腹腔，露出胃和肠。 在膈下食管的末端找出迷走神经前支，套上保护电极。在左侧腹后壁肾上腺 的上方找出左侧内脏大神经，套上保护电极。观察下列实验项目：　　（1）观察正常情况下胃和小肠的运动，注意其紧张度（可用手指触胃以 测其紧张度）。　　（2）用连续脉冲刺激膈下迷走神经，观察胃肠运动的变化。（3）用连续脉冲刺激左侧内脏大神经，观察胃肠运动的变化。（4）由耳缘静脉注射新斯的明 0.2—0.3mg，观察胃肠运动的变化。　　（5）在新斯的明作用的基础上，由耳缘静脉注射阿托品 0.5mg，再观察 胃肠运动的变化。【注意事项】 为避免腹腔内温度下降及消化管表面干燥，影响胃肠运动，应经常用温热的生理盐水湿润。【思考题】1．正常情况下胃肠运动有哪些形式？2．迷走神经和内脏大神经对胃肠运动有何作用？（谢申玲）实验 49 家兔在体小肠平滑肌电活动的描记【目的要求】1．学习在体小肠平滑肌电活动的记录方法。2．观察电活动的波形。【基本原理】 利用在体小肠浆膜上安放吸附电极的方法，可以引导出小肠平滑肌的电变化，包括平滑肌本身所具有的自发的周期性的基本电节律（慢波和其上的锋电位）快波（图 6－11）。慢波出现时，并不一定引起肌肉收缩。当慢波 超过临界水平，加上其它的影响因素，可以触发一个或多个动作电位，从而 引起平滑肌的收缩。随着动物的种类、肠段的部位以及安放电极的不同，引导出电活动的波形、频率有所差异。通常靠近口端的部位，其自发节律较快。【动物与器材】 家兔、常用手术器械、手术台、二道生理记录仪、张力换能器、吸附电极、缝针、缝线、20%氨基甲酸乙酯溶液、温热生理盐水、乙酰胆碱（1∶1000）、阿托品。【方法与步骤】　　1．吸附电极的制作取直径 0.9cm 硬质塑料管一段，在酒精灯上软化后缓 缓拉长，其细端直径为 1—1.5mm。取长约 5—10cm 切断，其中包括 5cm 左右 的粗端（图 6－12 左侧）。于粗细管交界处的粗端，由壁外插进一根细银丝（尖端圆钝），直插至离细口端 1mm 处。用塑胶或 502 胶将插孔封闭。注意： 管壁不能漏气，否则难以吸附。最后在粗端加一个适宜的吸管头，便完成了 吸附电极的制作。使用时，用手夹捏吸管头，细口端接触小肠浆膜，手放松 后，细口端便吸附在肠壁上。　　2．手术常规氨基甲酸乙酯（1g/kg 体重）麻醉动物后，背位固定于手术 台上。腹部剪毛，沿腹正中线切开皮肤，并沿腹白线剪开肌肉。将切口的腹 壁四角用皮钳夹住并挂起成袋状。　　在胸部正中近剑突软骨处缝一皮肤连线，接张力换能器，描记呼吸运动。　　3．按图 6—12 连接仪器。记录仪的两前级放大器输入分别连两吸附电极 和张力换能器，腹壁切口接地。接吸附电极的放大器参数：灵敏度 2—0.5mV/cm，时间常数 2s，滤波 100Hz，走纸速度 1－2.5mm/s。接张力换能器 的放大器参数依照换能器敏感量程的大小而异，以显示清晰的呼吸波为准。 一般时间常数取 2s 或直流，滤波 10Hz。　　4．固定吸附电极选择运动较明显的肠段，将电极对准吸附部位（沿小肠 的纵轴方向）并吸附其上，两电极相距约 1—2cm。注意：吸附部位需选择肠 系膜对侧血管较少的肠段，并可用玻璃解剖针适当拨动肠管，或插入一弯玻 璃棒于肠管间，固定一段小肠，以利于安放电极或观察肠管运动。5．实验观察　　（1）分别观察十二指肠、空肠与回肠的慢波与锋电位，并观察相应肠段 的运动强度与节律。　　（2）于肠段表面加一滴乙酰胆碱，观察电活动的频率、幅度与小肠运动 的变化。（3）于肠段表面加 38℃生理盐水，观察其变化。（4）于肠段表面滴加阿托品 1—2 滴，观察其变化。【注意事项】　　1．家兔小肠壁较薄，被吸附电极长时间吸附后，电位逐渐降低。实验中 需适当地更换吸附部位。2．平滑肌对温度极为敏感，整个实验应注意保温。【思考题】1．根据观察与记录，试分析平滑肌电活动与相应肠段运动的关系。2．乙酰胆碱与阿托品对平滑肌电活动有何影响？　　3．试设计一实验，证明交感神经与副交感神经对小肠平滑肌电活动的影 响。（林之明）实验 50 离体小肠平滑肌电活动的描记【目的要求】1．学习离体小肠平滑肌电活动的描记方法。2．观察离体小肠平滑肌电活动的波形及其与收缩运动的关系。【基本原理】 小肠离体后置于适宜的理化环境中，仍可引导出慢波和快波两种电活动。慢波是平滑肌本身所具有的自发的缓慢的电变化，是一种肌源性的电活 动，并不因神经传导的阻断而消失。慢波虽不能直接引起肌肉收缩，但可提 高平滑肌的兴奋性，可使膜电位向暴发锋电位的水平移动，而锋电位则可引 起一次肌肉收缩。【动物与器材】 大白鼠或家兔、常用手术器械、手术台、二道生理记录仪、恒温平滑肌槽、不锈钢电极、铁锤、缝针、缝线、台氏液、肾上腺素（1∶10000）、乙 酰胆碱（1∶100000）、阿托品。【方法与步骤】　　1．按图 6－13 连接仪器。引导电极与张力换能器分别连接二道生理记录 仪两个前级放大器输入端。放大器灵敏度 0.5－1mV/cm，时间常数 2s，高频 滤波 15—30Hz，走纸速度 1—2.5mm/s。装好一套恒温平滑肌槽。浴槽内盛约40ml 室温台氏液，将充满空气的球胆经由橡皮管连至浴槽内的“L”型通气 管上，调节橡皮管上的螺丝夹，使气泡大约以 30－40 个/min 的速度进入浴槽，以供 O2。　　2．手术取大白鼠或家兔一只，用铁锤猛击头部致昏迷后，迅速剖开腹腔。 在十二指肠附近，取出一段 10—12cm 长的小肠，在室温台氏液中冲洗后，将 其分为 4 段（作为 4 个样本）。在每段小肠的一端，用两根直径为 0.10—0.15mm，末端裸露 0.1mm 的绝缘不锈钢丝，以与肠的纵轴垂直的方向插入浆 膜下约 3mm，用缝线将电极固定于浆膜层，以防脱落。两电极间距 2mm。在肠 段的两端用连线的蛙心夹夹住，一端连浴槽内的“L”型通气管上，距引导电 极近的一端连张力换能器，以描记肠管的收缩运动。3．实验观察（1）记录肠段在室温台氏液中的电活动及收缩运动。　　（2）将浴槽的台氏液温度逐渐升到 37—38℃，记录电活动和收缩活动 的变化。（3）将台氏液的温度稳定于 37℃，加乙酰胆碱（1∶—4 滴于浴槽中，观察其变化。记录后用预先准备的 37℃左右的新鲜台氏液更换，冲 洗浴槽 2—3 次。（4）肠段恢复正常活动后，滴加阿托品溶液 2—3 滴，观察其活动的变化。　　（5）在上述基础上再迅速滴加乙酰胆碱（1∶—4 滴，观察其 变化（图 6—14）。（6）同法，用肾上腺素（1∶10000）滴加 1—4 滴，观察电活动和收缩活动的变化。【注意事项】1．在冲洗离体小肠标本时，要放在室温台氏液中进行，如放入温热（38℃）台氏液中冲洗，可使肠段活动抑制。　　2．靠近小肠的一端缝电极，并使两电极部位的肠段露出液面，注意滴加 台氏液，以保持其湿润。3．引导电极的末端不要裸露过多，两引导电极间距不要太大，以免因引导电极同时记录到许多相邻的非同步的起搏细胞的电位变化而造成的幅度和波形的不规整。4．标本最好在浴槽的台氏液中稳定 5—10min 后再开始描记。5．浴槽内的台氏液温度应始终保持在 37℃，并注意通气情况，以免缺O2。6．在实验过程中，可根据肠段活动的情况，适当增加药物剂量。【思考题】1．与心肌和神经干的电活动相比，平滑肌的电活动有何特点？2．乙酰胆碱、肾上腺素和阿托品对离体小肠电活动有何影响？为什么？3．试述离体小肠的慢波和快波与肠段运动的关系。（金白兰、王合轩）第七章 代谢实验 51 大白鼠耗氧量的测定【目的要求】 学习测定小动物耗氧量的一种简单方法。【基本原理】 通过测定动物在一定时间内的耗氧量，可以计算其代谢率。【动物与器材】　　大白鼠、胶塞、棉球、500ml 广口瓶、温度计、5ml 注射器、2×10cm 试 管（底开口）、10%KOH 溶液、水检压计、甲基蓝溶液。【方法与步骤】按图 7—1 安装测定小动物耗氧量的简单装置。1．测定耗氧量的装置主要为一个 500ml 的广口瓶，瓶盖为胶塞，其上钻有 3 个小孔：一个插 50℃的温度计，以测量瓶中的气温；一个与水检压计相 连，以测量瓶中的气压；另一个则插入一支底部开口的试管，开口的边缘向 内翻，放一小块浸透 KOH 溶液的棉球，以吸收动物呼出的 CO2。　　试管上端盖上胶塞，其中也钻一小孔，插入 5ml 注射器。测定开始时， 胶塞周围涂一薄层液体石蜡，以防漏气。水检压计的水柱应放至 0 刻度，水 中可加少量甲基蓝溶液，以便读数。2．用注射器向广口瓶内推入 5ml 空气，使水检压计的水柱上升。静置数分钟后，如水柱液面稳定，表示装置密封良好，可进行测定。　　3．把大白鼠放入广口瓶内，塞紧胶塞，待 3－5min，让动物适应测定环 境和使瓶内的温度稳定，并记录瓶内的温度。4．测定时使注射器的管芯保持在 0 位，并记录水检压计上水柱液面的读数，然后向广口瓶内注入 5ml 空气，使检压计的水柱升高，当大白鼠在瓶内 进行呼吸耗氧时，装置内气体容积减少，则压力计的水柱液面缓慢下降。记录消耗 1mlO2 所需的时间。重复测定 2—3 次， 取其较稳定的数值计算大白鼠的耗氧率。【注意事项】1．整个系统的活塞要盖牢。确保不漏气。　　2．注射 5ml 空气入广口瓶内时，压力计中上升的液面要维持恒定，如果 液面自动迅速下降，则是漏气，并非大白鼠呼吸造成的。【思考题】1．能量代谢受哪些因素影响？2．利用耗氧量怎样计算代谢率？（谢申玲）实验 52 甲状腺激素对代谢的影响【目的要求】 观察甲状腺激素对机体的作用【基本原理】 甲状腺激素能使动物基础代谢率增高，需氧量增多。应用甲状腺激素制剂的动物放入密闭器时，对缺氧敏感性提高，与对照组动物比较，容易因缺 氧窒息而死亡。【动物与器材】　　小白鼠 20 只、鼠笼、鼠饮水器、注射器或灌胃管、1000ml 广口瓶、测 量耗氧量装置、甲状腺激素制剂。【方法与步骤】　　1．将健康小白鼠按性别、体重（18—22g）均匀分为对照组与给药组， 每组 10 只。2．给药组动物可采用灌胃法饲给甲状腺激素制剂，每日 5mg，连续用药2 周。对照组动物给等容积生理盐水。3．试验方法有二种，可选择进行。　　(1)将每只小白鼠分别放入容积 1000ml 的广口瓶中，把瓶口密封后，立 即观察动物的活动，并记录其存活时间。最后汇总全组动物的实验结果，计 算平均存活时间，并与对照组结果进行比较。　　(2)按实验 51 方法将每只小白鼠分别放入测量耗氧量装置的广口瓶中， 分别测定它们的耗氧量，最后汇总全组动物的实验结果，计算平均耗氧量， 实验组与对照组进行比较。【注意事项】　　1．室温升高能增加动物对缺氧的敏感性，故实验室温度应保持在 23℃ 左右为宜。2．据报道，本实验选用雄性动物结果较稳定。【思考题】1．影响代谢率的因素是哪些？2．甲状腺素怎样调节机体的代谢？（谢申玲）第八章 排泄实验 53 尿生成的调节【目的要求】1．学习输尿管插管技术。2．观察影响尿量的几种因素。【基本原理】 尿的生成过程包括：肾小球的过滤作用；肾小管与集合管的重吸收作用；肾小管与集合管的分泌作用。在整体内，这 3 个过程往往受到生理性的调节。 凡影响这些过程的因素，都可影响尿的生成而引起尿量的改变。【动物与器材】 家兔、手术台、常用手术器械、动脉血压描记装置、记纹鼓、记时装置和电磁标（或用二道生理记录仪和血压换能器、刺激器、保护电极、记滴器、 动脉插管和膀胱插管（或细塑料管）、小漏斗、刻度试管、2ml 及 20ml 注射 器、20%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、肝素生理盐水溶液（100 单位/ml）、生理盐水、10%Na2SO4 溶液、肾上腺素（1∶10000）、垂体后叶素（5 单位/ml）【方法与步骤】　　1．取家兔一只，用 20%氨基甲酸乙酯（1g/kg 体重）耳缘静脉注射，麻 醉后，背位固定于手术台上，剪去颈部和下腹部的被毛。在颈部正中线切开 皮肤，先分离出气管，插气管插管；再分离左侧颈总动脉和右侧迷走神经。 在其下面各穿两根线备用。手术完毕后，用蘸温热生理盐水的纱布覆盖创面。2．在下腹部正中线作长约 4cm 的皮肤切口，沿腹白线切开腹壁，用手轻轻将膀胱移出腹腔外蘸温热生理盐水的纱布垫上，便可以进行插管。3．插管的方法有两种 (1)输尿管插管导尿认清输尿管进入膀胱背侧部位后，细心地分离出一侧输尿管。先在靠近膀胱处穿线结扎，再在离此结扎线约 2cm 处穿一条线，用眼科剪在管壁上剪一斜向肾侧的小切口，插入充满生理盐水的细塑料管，用 缚线结扎固定（图 8-1）。将此导尿的塑料管连接至记滴装置，通过电磁标 在记纹鼓上记录尿流量（滴/min）。如果不用记滴器，也可将导尿塑料管连 接小漏斗及刻度试管，直接计算尿流量（ml/min）。(2)膀胱插管导尿插管前亦应先认清膀胱和输尿管的解剖部位。用线结扎膀胱颈部，以阻断同尿道的通路。然后在膀胱顶部选择血管较少处，作一直 径约 1.5cm 的荷包缝合，在其 中央沿纵向剪一小切口，插入膀胱插管（或膀胱漏斗）。把切口周围的缝线 拉紧，结扎固定。插管口最好正对输尿管在膀胱的入口处，但不要紧贴膀胱 后壁而堵塞输尿管。膀胱插管的另一端则用导管连接至记滴器或刻度试管， 记录尿流量。手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。　　4．记录血压在左颈动脉插入充满抗凝剂（柠檬酸钠溶液或肝素生理盐 水）的动脉插管，记录血压。在血压曲线的下方，用 3 个电磁标依次标记尿 流量（滴数）、刺激记号和时间间隔。如用二道生理记录仪取代记纹鼓、水 银检压计和电磁标等，动脉插管用橡皮管连接至血压换能器，换能器连接到 生理记录仪的血压放大器的输入端，进行放大和记录血压。　　　　5．实验观察待尿流量和血压稳定后，即可进行下列各项实验观察。每项 实验开始时，都应先记录一段尿量和血压曲线作为对照；然后进行注射或刺 激，并连续记录和观察至效应明显和恢复过程。　　(1)自耳缘静脉注射温热（38℃）的生理盐水 30ml，观察血压和尿量的 变化。(2)自耳缘静脉注射 20%葡萄糖液 15ml，观察其变化。 (3)自耳缘静脉注射 1∶10000 肾上腺素 0.5ml，观察其变化。(4)自耳缘静脉注射 10%Na2SO4 溶液 4ml，观察其变化。(5)结扎并剪断右侧颈迷走神经，用中等强度的连续脉冲刺激其外周端20—30S，使血压降低至 40—50mmHg。观察尿量的变化。 (6)自耳缘静脉注射垂体后叶素 2 单位，观察和记录其变化 20min。 将上述实验结果填入表 8-1。表 8-1 若干因素对尿量的影响影响因素
尿量滴(min)
变化率(%)
血压(mmHg)
变化率(%)
20%葡萄糖液
10%Na2 SO4
刺激迷走神经外周端
垂体后叶素
【注意事项】　　1．实验前给兔多喂青菜，或用导尿管向兔胃中灌入 40—50ml 清水，以 增加其基础尿流量。2．实验中需多次进行耳缘静脉注射，注射时应从耳缘静脉远端开始，逐步移近耳根。手术的创口不宜过大，防止动物的体温下降，影响实验。　　3．输尿管手术的难度较大，应注意防止导管被血凝块堵塞，或被扭曲而 阻断尿液的流通。【思考题】　　1．从表 8-1 所记录各项实验中尿量和血压等变化，试分析出现这些变化 的机制。2．为什么注射垂体后叶素后，观察反应的时间应长些，试从观察结果分析其抗利尿作用和缩血管作用。（谢申玲）实验 54 刺激支配膀胱的神经引起的反应【目的要求】 观察膀胱活动的神经调节。【基本原理】 支配膀胱的神经为盆神经与腹下神经。盆神经兴奋可引起膀胱逼尿肌收缩和内括约肌松弛，促使膀胱排尿。腹下神经对逼尿肌活动没有明显作用，但能使内括约肌紧张性增强，阻止排尿。【动物与器材】 兔、手术台、常用手术器械、刺激器、保护电极、20% 氨基甲酸乙酯、生理盐水、纱布垫。【方法与步骤】　　1．用 20%氨基甲酸乙酯（1g/kg 体重）静脉注射麻醉兔，背位固定于手 术台上。　　2．在下腹部靠近耻骨联合上缘，沿正中线作约 4cm 皮肤切口，沿腹白线 剪开腹壁及腹膜，暴露膀胱。用手将膀胱轻轻移出腹外的一块浸湿生理盐水 的纱布垫上，在膀胱底两侧找到输尿管。　　3．分布于膀胱上的神经（包括盆神经和腹下神经）是沿膀胱两侧的输尿 管与血管伴行（图 8-2）。用小止血钳将一侧血管及神经从膀胱壁上分离出 一小段，穿线后提起，用保护电极将血管与神经一起钩住，以中等强度连续 脉冲刺激神经，观察膀胱的反应。通常出现盆神经受刺激的效应。【思考题】 说明膀胱的神经支配与排尿的关系。（谢申玲）第九章 中枢神经系统实验 55 反射时的测定及反射弧的分析【目的要求】1．学习测定反射时的方法。2．了解反射弧的组成。【基本原理】 从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间为反射时。反射时是反射通过反射弧所用的时间，完整的反射弧则是反射的结构基础。反射弧的任何一部分 缺损，原有的反射不再出现。由于脊髓的机能比较简单，所以常选用只毁脑 的动物（如脊蛙或脊蟾蜍）为实验材料，以利于观察和分析。【动物与器材】 蟾蜍或蛙、常用手术器械、支架、蛙嘴夹、蛙板、蛙腿夹、小烧杯、小玻璃皿（2 个）、小滤纸片、棉花、秒表、纱布、0.5%及 1%硫酸溶液、2%普 鲁卡因、水。【方法与步骤】　　1．取一只蟾蜍或蛙，只毁脑（按实验 1 方法操作）称脊蛙或脊蟾蜍，腹 位固定于蛙板上。剪开右侧股部皮肤，分离出坐骨神经穿线备用。　　2．取下蛙腿夹，用蛙嘴夹夹住脊蟾蜍下颌，悬挂于支架上（图 9-l）。 将蟾蜍右后肢的最长趾浸入 0.5%硫酸溶液中 2－3mm（浸入时间最长不超过10s），立即记下时间（以秒计算）。当出现屈反射时，则停止计时，此为屈反射时。　　立即用清水冲洗受刺激的皮肤并用纱布擦干。重复测定屈反射时 3 次， 求出均值作为右后肢最长趾的反射时。用同样方法测定左后肢最长趾的反射 时。3．用手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后再用手术镊剥净长趾上的皮肤。用硫酸刺激去皮的长趾，记录结果。　　4．改换右后肢有皮肤的趾，将其浸入硫酸溶液中，测定反射时，记录结 果。5．取一浸有 1%硫酸溶液的滤纸片，贴于蟾蜍右侧背部或腹部，记录擦或抓反射的反射时。　　6．用一细棉条包住分离出的坐骨神经，在细棉条上滴几滴 2%普鲁卡因 溶液后，每隔 2min 重复步骤 4（记录加药时间）。　　7．当屈反射刚刚不能出现时（记录时间），立即重复步骤 5。每隔 2min 重复一次步骤 5，直到擦或抓反射不再出现为止（记录时间）。记录加药至 屈反射消失的时间及加药至擦或抓反射消失的时间，并记录反射时的变化。　　8．将左侧后肢最长趾再次浸入 0.5%硫酸溶液中（条件不变）记录反射 时有无变化。毁坏脊髓后再重复实验，记录结果。【注意事项】1．每次实验时，要使皮肤接触硫酸的面积不变，以保持相同的刺激强度。2．刺激后要立即洗去硫酸，以免损伤皮肤。【思考题】　　以实验结果为根据，以严密的逻辑推理方式说明反射弧的几个组成部 分。（赵静）实验 56 中枢抑制现象【目的要求】1．学习蛙类开颅的方法。2．观察中枢抑制现象。【基本原理】 中枢神经系统的高级部位对低级部位的反射活动不但有兴奋作用，而且有抑制作用。这种抑制作用保证了中枢神经系统的多样性和协调性。中枢抑 制是谢切诺夫首先发现的，所以又称谢切诺夫抑制。【动物与器材】 蟾蜍或蛙、常用手术器械、蛙嘴夹、蛙腿夹、蛙板、支架、小烧杯、小玻璃皿、滴管、纱布、棉球、0.5%硫酸溶液、食盐结晶粒、任氏液、水。【方法与步骤】　　1．将蟾蜍腹位固定在蛙板上，用手术刀沿头部中线切开皮肤，再用手术 镊自切口向两侧分开，剪去颅顶上的皮肤。用金冠剪自鼻孔向后小心打开颅 骨，去掉脑膜，暴露脑组织。看清脑的各部分（图 9-2），用手术刀在间脑 处作一横切，除去大脑（若有出血，可用小棉球止血）。去掉蛙腿夹，将蟾 蜍悬挂在支架上。待其安静后进行实验。2．按实验 55 的方法测定右侧后肢最长趾的平均反射时作为对照。　　3．用小棉球吸干脑断面的液体，将一小米粒大小的食盐粒放在间脑断面 上，并立即测其反射时，观察反射时有何变化。待反射时明显延长后，移去 食盐粒，用任氏液冲洗断面，并用棉球吸干。隔 2min 后再测定反射时，观察 是否恢复。如放食盐后，动物四肢僵直，则应立即除去食盐，用任氏液冲洗 断面。待反射时稳定后，再重复上述实验。【注意事项】每次测反射时应保持刺激强度不变。【思考题】 食盐粒放在间脑断面后反射时发生什么变化？反射时延长说明什么问题？（赵静）实验 57 脊髓背根和腹根的机能【目的要求】1．学习暴露脊髓和分离脊神经背、腹根的方法。2．了解背根和腹根的不同机能。【基本原理】 脊神经的背根是由传入神经纤维组成，具有传入机能；腹根由传出神经纤维组成，具有传出机能。若切断背根，则相应部位的刺激不能传入中枢； 若切断腹根，不能传出冲动，则其所支配的效应器也不再发生反应。【动物与器材】 蟾蜍或蛙、常用手术器械、弯头金冠剪、刺激器或多用仪、小型弯头露丝电极、蛙板、蛙腿夹、滴管、棉花、红色和白色细丝线、任氏液。【方法与步骤】　　1．将蟾蜍或蛙毁脑后腹位固定于蛙板上。沿背部中线剪开皮肤，向前开 口至耳后腺水平， 向后开口至尾杆骨中段。用剪刀小心剪去脊椎两侧的纵行肌肉及椎间肌肉， 暴露椎骨。　　2．用金冠剪横向剪断环椎，然后将弯头金冠剪小心伸入椎管，自前至后 逐节剪断两侧椎弓（图 9-3），移去骨片，暴露全部脊髓（勿损伤脊髓）。　　3．用眼科镊轻轻挑开脊髓表面的银灰色或黑色脊膜，再用任氏液冲洗马 尾部，小心识别第 7—10 对脊神经背根和腹根（图 9-4）。用玻璃解剖针分 离一侧第 9 对脊神经的背、腹根（背根近椎间孔处有淡黄色、半个小米粒大 小的脊神经节），将背根穿两条白色丝线，腹根穿两条红色丝线备用。放松 两后肢即可进行实验观察。(1)提起白丝线，轻轻用刺激电极钩起背根，打开刺激器，用较弱的单脉冲刺激背根（只引起同侧后肢抖动），记录结果。 (2)用同样方法刺激腹根，记录结果。 (3)将两条白色线双结扎背根后从中间剪断神经，分别刺激其中枢端和外周端（刺激强度不变），记录结果。(4)用同样方法结扎并剪断腹根，重复刺激背根中枢端，记录结果。 (5)分别刺激腹根中枢端和外周端，记录结果。【思考题】根据实验结果，说明背根和腹根的机能。（赵静）实验 58 交互抑制【目的要求】 观察拮抗肌活动时的交互抑制现象，并证明这种现象的生理基础是反射中枢活动的协调。【基本原理】 腓肠肌和胫前肌是一对拮抗肌。冲动传入中枢引起支配一侧后肢的腓肠肌的运动神经元兴奋时，腓肠肌收缩，同时支配胫前肌的运动神经元抑制， 胫前肌舒张，后肢屈曲。【动物与器材】 蟾蜍或蛙、常用手术器械、记纹鼓、电磁标、通用杠杆，刺激器、刺激电极、蛙板、腊盆、任氏液。【方法与步骤】　　1．制备脊蟾蜍或脊蛙，腹位固定于蛙板上。在一侧后肢膝关节处作一环 形切口，剥去小腿皮肤。2．胫前肌是一条细长的肌肉，位于胫骨的前方，具有一条狭长的肌腱，起自股骨的梢端。末端肌腱分为两部分，即有二附着点，分别插在距骨和跟 骨的基端。将二附着点的肌腱游离，穿线结扎后剪断，其外侧附着点的肌腱 与血管和神经伴行，应将血管和神经一起结扎剪断。提起肌腱的结扎线，将 胫前肌分离出来。3．将腓肠肌的肌腱结扎后剪断，把整块肌肉分离出来。　　4．用大头针固定动物的髋关节和膝关节后，将腓肠肌和胫前肌的肌腱结 扎线分别连接两支通用杠杆，用电磁标记录刺激标记，3 支描记笔尖必须在 记纹鼓的同一垂直线上。　　5．用较强的连续脉冲（约 20V）刺激蟾蜍或蛙的泄殖腔外口两侧皮肤或 尾杆骨两侧的皮肤，可以描记腓肠肌收缩与胫前肌舒张的曲线（图 9-5）上线，腓肠肌收缩；中线，胫前肌舒张；下线，刺激标记　　6．用较强的连续感应电震（6—10V）刺激蟾蜍或蛙的相同部位，也可以 描记出腓肠肌收缩和胫前肌舒张的曲线。【注意事项】　　1．胫前肌的内侧面有神经与血管的分支，分离该肌时注意不要损伤神经 和血管的分支。2．描记拮抗肌收缩与舒张曲线时，两块肌肉要分开，避免互相影响。　　3．实验过程中要注意固定动物的髋关节和膝关节，并要经常用任氏液湿 润肌肉和背部皮肤，尤其是接受刺激部位的皮肤，以免干燥影响机能。【思考题】1．所描记的拮抗曲线，为什么收缩曲线的振幅大于舒张曲线的振幅。　　2．为什么刺激蟾蜍或蛙的背部皮肤或泄殖腔外口两侧皮肤会引起拮抗肌 的活动而产生交互抑制？3．试用另一对拮抗肌进行实验，找出产生交互抑制的条件。（谢申玲、朱逸仁、潘茂源）实验 59 损伤小白鼠小脑的效应【目的要求】 一侧小脑损伤后的动物，躯体运动表现异常，通过对异常运动的观察，了解小脑的机能。【基本原理】 小脑具有维持身体平衡，调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。当小脑损伤后，随着破坏程度的不同，可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调。【动物与器材】 小白鼠、常用手术器械、大头针、麻醉口罩、乙醚、棉花。【方法与步骤】　　1．用乙醚麻醉小鼠（注意仔细观察呼吸，若呼吸变慢时则表示动物已麻 醉）。　　2．自头顶部至耳后沿正中线剪开皮肤，将颈肌向下剥离。透过透明的颅 骨即可看清小脑的位置（图 9-6）用大头针刺穿颅骨，直达小脑（2—3mm）， 搅毁该侧小脑（注意不可深刺，以免损伤脑干）。3．待小鼠清醒后，可见其向一侧旋转或翻滚。如损伤较轻，小鼠向健侧旋转；当损伤重时，则向损伤侧翻滚。4．将实验用完的小鼠拉断颈椎处死后弃之。【思考题】 根据实验结果说明小脑的生理机能。（赵静）实验 60 家兔大脑皮层运动区的刺激效应【目的要求】1．学习哺乳动物的开颅方法。2．观察大脑皮层运动区的刺激效应。【基本原理】 大脑皮层运动区是躯体运动机能的高级中枢，电刺激该区的不同部位，可以引起躯体不同部位的肌肉运动。【动物与器材】 家兔、常用手术器械、咬骨钳、骨钻、止血钳、剪毛剪、刺激器或多用仪、银丝电极（单电极）、兔体手术台、石蜡油、20%氨基甲酸乙酯、棉球、 温热生理盐水。【方法与步骤】　　1．取一只家兔，耳缘静脉注射氨基甲酸乙酯（1g/kg 体重），将其麻醉 后腹位固定于手术台上。用剪毛剪将头顶部被毛剪去，再用手术刀由眉间至 枕骨部纵向切开皮肤，沿中线切开骨膜。用手术刀柄自切口处向两侧刮开骨 膜，暴露额骨及顶骨（图 9-7）。用骨钻在一侧的顶骨上开孔（勿伤及脑组 织）后，将咬骨钳小心伸入孔内，自孔处向四周咬骨以扩展创口。向前开颅 至额骨前部，向后开至顶骨后部及人字缝之前（切勿掀动人字缝前的顶骨， 以免出血不止）。按图 9-7 的开颅区域，暴露双侧大脑半球。　　2．用眼科剪小心剪开脑膜，暴露脑组织。将温热生理盐水浸湿的薄棉片 盖在裸露的大脑皮层上（或滴几滴石蜡油）防止干燥。3．放松动物四肢，用棉球吸干脑表面的液体。将无关电极固定在头部切开的皮肤上，先用刺激电极接触皮下肌肉，调节刺激强度。以引起肌肉收缩 的最小刺激强度及 25—30 次/s 的频率刺激大脑皮层的不同区域，观察躯体 肌肉活动的反应。绘出大脑半球背面观的轮廓图，标出躯体肌肉运动的代表 点（图 9-8）。【思考题】 根据实验结果，说明大脑皮层运动区的机能特征。实验 61 去大脑僵直【目的要求】1．学习去大脑方法。2．观察去大脑僵直现象。（赵静）【基本原理】 从中脑四叠体的前、后丘之间切断脑干的动物，称去大脑动物。由于神经系统内，中脑以上水平的高级中枢对肌紧张的抑制作用被阻断，而中脑以 下各级中枢对肌紧张的易化作用相对加强，因此出现了伸肌紧张亢进的现 象。　　动物表现为四肢僵直，头向后仰，尾向上翘的角弓反张状态，称为去大 脑僵直。【动物与器材】 兔或猫、常用手术器械、骨钻、咬骨钳、止血钳、剪毛剪、竹片刀、兔体手术台、棉球、棉线、骨蜡、生理盐水、20%氨基甲酸乙酯。【方法与步骤】1．用氨基甲酸乙酯将动物麻醉、固定后，分离双侧颈总动脉并结扎之。2．将动物改为腹位固定，按实验 60 方法开颅，暴露大脑半球后缘（图9-9）。　　3．松开动物四肢，左手托起动物下颌，右手用竹片刀轻轻拨起大脑半球 后缘，看清四叠体的部位，于前、后丘之间垂直插入竹片刀，切断神经联系（如果部位正确，动物突然挣扎，此时切勿松手，应继续使竹片刀切至颅底）。4．将动物侧位置于手术台上，数分钟后出现去大脑僵直现象。　　【注意事项】 竹片刀刺入脑干时，勿使其向后损伤延髓。【思考题】根据图 9-10 说明去大脑僵直的发生机理。（赵静）实验 62 小白鼠电防御条件反射的建立、分化与消退【目的要求】1．学习用动物建立条件反射的基本实验方法。　　2．通过小白鼠条件反射的建立、分化与消退，了解条件反射活动的基本 规律与生物学意义【基本原理】　　各种无关刺激（如声音或光等）与非条件刺激（如电流、食物等）先后 作用于动物，并重复一定次数后，大脑皮层上相应的两个兴奋灶之间，由于 兴奋的扩散，在功能上逐步形成了暂时性接通。此时，无关刺激就成为具有 信号意义的条件刺激，它能代替非条件刺激引起机体相应的反射活动，此即 条件反射的建立。条件反射的巩固需要非条件刺激的不断强化，否则，条件 刺激的信号作用就逐渐消退。消退是大脑皮层上的兴奋过程转化为抑制过程 的结果，称为消退抑制。分化也是抑制过程的发展。由于大脑皮层对刺激具 有高度的分辨能力，阳性刺激在皮层产生兴奋过程，而相近似的阴性刺激则 产生抑制过程，这种抑制称为分化抑制，对大脑皮层的分析机能具有重要的 意义。【动物与器材】 小白鼠、小动物条件反射箱、节拍器（或电铃、电灯）、调压变压器、秒表、换向电钥。【方法与步骤】1．小动物条件反射箱的结构小白鼠条件反射箱为一长 46cm、宽 16cm、高 23cm 的木制箱子，箱盖可为一活动的玻璃盖，也可为两层，下层为玻璃盖， 上层是镜框，内嵌镜子。将镜框打开一定角度，可通过镜子的反射观察动物 在箱内的活动情况（图 9-11）。箱中间装有隔板，分左右两个小室。　　隔板中央下方有小门，动物可通过小门来往于左、右两室。箱底装有平 行排列的金　　属片，单数金属片与电源的一极相接，而双数金属片与电源的另一极相 连。电源需经调压变压器与金属片连接。如条件反射箱无刺激开关，变压器 与金属片之间应串联换向电钥（图 9-12）。通电时，当小白鼠踏在两条相邻 的金属片上，动物的身体把相邻的两条金属片接通，电流就会通过身体而发 挥刺激作用，引起动物防御性运动反射。在箱的左、右两壁，各装有两个开 关，上面为灯光开关，下面为电刺激开关。有些条件反射箱的左、右两壁下 方中央各开一个小门，通过小门可将动物放进或取出。2．动物的训练先将小白鼠放入箱内，使其适应环境。调节调压变压器（10－40V），逐渐加强电刺激，使动物产生防御性运动反射，从一室逃到另一室。 每隔 1－2min 重复一次，直至小白鼠受到刺激时能顺利地逃入另一室为止。 注意：刺激强度应适中，过弱不能引起动物的反应；过强也会引起不良反应。 调节变压器时，应以能引起小白鼠运动反射的最小刺激强度为佳。　　3．条件反射的建立先给予 180 次/min 节拍器刺激，或按下动物所在一 室的灯光开关（用灯光刺激时，室内光线不宜过强），检查能否引起动物的 反应。如不能引起运动反射，说明这种刺激为无关刺激。然后开动节拍器 5s， 或给予灯光 2—3s，再按下电刺激开关，给予非条件刺激强化，并使两者重合 10—15s，至动物逃入另一室时，两种刺激同时停止。这样，每隔 1－2min重复进行一次。经 20－30 次结合之后，休息 5min，重复上述步骤，直至单 独给予节拍器或灯光刺激，动物就逃入另一室为止，说明条件反射已经形成。 再重复上述步骤以巩固新形成的条件反射。实验过程中，随时将实验结果填入表 9-1 中。表 9-1 小白鼠条件反射的形成、分化与消退实验记录表实验时间
条件刺激物
分化刺激物
强化情况
潜伏期(s)
条件反射情况
强化
不强化
4．条件反射的分化在条件反射形成以后，给予 180 次/min 节拍器的条件刺激，并伴有强化。而用 40 次/min 的节拍器作为分化刺激，单独作用 15s， 不予强化。这样，两种不同性质的刺激物交替使用。最初，由于条件反射的 泛化，小白鼠对分化刺激也出现运动反应。随着对比实验次数的增加，动物 只对条件刺激发生反应，而对分化刺激则无反应，此时条件反射的分化相已 经形成。5．条件反射的消退继续用 180 次/min 的节拍器作为刺激，但不再给予强化。最初，小白鼠还会出现条件反射，重复几次后，潜伏期逐渐延长，最 后反射消失，此时条件反射已经消退。【注意事项】　　1．用节拍器作为条件刺激时，实验室内需保持安静，否则条件反射形成 困难。如有条件，最好分室进行实验。2．实验过程中，应防止触电事故。捉拿动物时，应事先关闭电源。【思考题】　　1．根据实验结果，小结条件反射的形成、分化和消退的条件。它们有何 生物学意义？2．在条件反射建立的情况下，试设计一个外抑制实验。外抑制后，条件反射是否还存在？（解景田）实验 63 家兔大脑皮层诱发电位【目的要求】1．学习记录大脑皮层诱发电位的方法。2．观察大脑皮层诱发电位的波形。【基本原理】 大脑皮层诱发电位是指感觉传入系统受到刺激时，在皮层上某一局限区域所引导的电位变化。本实验是以适当的电刺激作用于左前肢的浅桡神经， 在右侧大脑皮层的感觉区引导家兔的诱发电位。用这种方法可以确定动物的 皮层感觉区，在研究皮层机能定位上起着重要作用。由于大脑皮层随时都存
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