打狂犬疫苗注意事项苗

狂犬疫苗介绍
狂犬疫苗简介
一、市场上的狂犬疫苗技术、产品和生产厂家
1、纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗(purified hamster kidney cell vaccine, PHKCV)
有前苏联研制成功,1967年以后,开始用Vnukova-32毒株感染原代地鼠肾细胞生产。并在中国推广使用。
缺点:疫苗的效价偏低(小于2.5
IU/剂量),液体稳定性差。1993年卫生部要求对原制疫苗进行浓缩,要求效价达到WHO规定的≥2.5
IU/剂量标准。结果疫苗效价虽然有提高,但是细胞碎片和非蛋白及小牛血清等非特异性物质也相应增加,致使这种疫苗不良反应增加,使得疫苗完成全程注射受影响。
aG株,来源于“北京株”,通过兔脑传代30代,演变成固定毒,31带后用于疫苗生产。北京株经适应PHKC达55代称为a株;为了进一步提高滴度,有经豚鼠脑内和PHKC交替传代,选育出“aG株固定毒”(aG
fixed virus Strain)。
2、人体二倍体细胞狂犬疫苗(human diploid cell rabies, HDCV)
人体二倍体细胞是指正常人体组织在体外培养的细胞。细胞株来源于正常人胚胎或者其他组织的细胞群体,其染色体数目与原供体细胞染色体数目相同,无异种移植致癌性,无外源因子污染,在正常情况下具有有限生命期,故属有限生命细胞株(finite
cell strain)。对病毒敏感谱广,主要用于培养病毒和制备病毒类疫苗。
自1960年以来,开始建立人体二倍体细胞株,其中有2株为国际公认为人体二倍体细胞参考株:
1)、WI-38株,是1961年美国Wistar研究所用人工流产的一个3月龄女性胎儿的肺组织建立的,有限生命为48代。WI-38细胞株曾广泛用于病毒研究和疫苗生产。但在1975年,美国标准菌种收藏中心(ATCC)发现该细胞株早期(8代)已被污染。
2)、MRC-5株,是英国于1966年由一个14周龄的人工流产男性胎儿的肺组织建立的,有限生命为48代。经鉴定,认为该细胞株可用于疫苗生产,将MRC-5代替WI-38作为国际参考株。
3)其他人体二倍体细胞株,
KMB-17株是1973年中国用一个流产的4月龄女性胎儿肺组织建立的,有限生命为67代。
2BS细胞株是1973年中国由一个流产的3月龄女性胎儿肺组织建立的,有限生命为63-65代。
KMB-17和2BS细胞株,在中国已用于脊髓灰质炎活疫苗、甲型肝炎活疫苗的生产。
上世纪70年代,中国将狂犬病毒固定毒株(CTN)感染KMB-17株人体二倍体细胞,经反复传代,获得狂犬病毒HDC(human
diploid cell)适应株(CTN-1),在KMB-17细胞内增殖,病毒滴度可达6.5~7.0
lgLD50/ml。经WHO鉴定认可作为疫苗生产毒株。
1990年,又将CTN-1株适应Vero细胞,病毒滴度可达8.0 lg LD50/ml,现已用于PVRV(purified
vero cell rabies vaccine)试生产。
国外狂犬疫苗产品用人体二倍体细胞生产的产品有:
为欧洲的赛诺菲-巴斯特(Sanofi Pasteur)的产品,毒株为PM-1503-3M,细胞株为MRC-5。
3、纯化Vero细胞狂犬疫苗
1981年,WHO批准使用传代细胞(CCL)生产灭活脊髓灰质炎疫苗(IPV)。1987年,WHO颁布了使用传代细胞生产人用狂犬病毒疫苗规程。
使用传代细胞生产狂犬疫苗的优点在于:细胞来源有保证,省去使用动物制备细胞。传代细胞比原代细胞更一致、更洁净。无外源因子污染、无致癌活性。适于微载体培养,病毒产量高。比人体二倍体细胞疫苗可降低成本4~6倍。
目前,我国已相继建立了4株Vero细胞适应固定毒:
1)、豚鼠脑aG株Vero细胞适应株(RFD);
2)、小鼠脑CTN株Vero细胞适应株(CTN-V);
3)、人体二倍体细胞CTN-1株Vero细胞适应株(CTN-1-V);
4)、兔脑北京株Vero细胞适应株;
以上几个适应株产病毒滴度均已达到WHO规定生产PVRV的要求。
4、纯化鸡胚细胞狂犬疫苗(purified chicken embryonic cell vaccine, PCECV)
日本自20世纪60年代开始研制PCECV,1980年正式投产。
德国采用Flury-LEP狂犬疫苗毒种,适应SPF原代鸡胚细胞(CEC),并用以制备疫苗
二、Vero细胞介绍
Vero细胞的正式名称为“非洲绿猴肾细胞”,是传代细胞的一种。所谓传代细胞可简单的理解为,在体外可以连续传代的细胞系,理论上具有无限传代的寿命。传代细胞系可以通过以下方法衍生而来,(1)正常细胞群的连续传代,繁衍成一个新的具有无限寿命的细胞群,例如非洲绿猴肾细胞的传代细胞系Vero细胞;(2)人或动物肿瘤细胞的原代细胞的系列培养,例如Hela细胞、Namalva细胞等;(3)携带致癌基因的病毒,将致癌基因转化给正常细胞,成为肿瘤细胞,例如EB病毒转化的B淋巴细胞;(4)骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,例如生产单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
由于肿瘤细胞或携带肿瘤基因的细胞具有致肿瘤的危险,所以该类细胞不能作为细胞基质用于疫苗生产;因此用于疫苗生产的细胞系均采用非肿瘤细胞系,即正常细胞群的连续传代后繁衍的细胞系,在一定传代限度内使用,目前使用的Vero细胞属于此类。Vero细胞由于具有传代细胞特性,因此也存在理论上的潜在致肿瘤性。目前WHO认为130~150代细胞无致肿瘤性,可以用于疫苗的生产。目前国内研制的Vero细胞基质的疫苗,细胞致肿瘤试验均为阴性,已批准上市多年的产品,未见有安全性方面的问题。有报导超过170代的Vero细胞致肿瘤试验阳性。
由于传代细胞调控生长的基因失调,使得传代细胞系具有无限的寿命。因此,理论上认为传代细胞系的DNA具有使其他细胞生长失控和产生致肿瘤活性的潜在能力,因此需对疫苗的Vero细胞残余DNA进行质量控制。传代细胞可分泌生长因子(称促生长蛋白),该生长因子可以促进细胞生长,在异常情况下有致肿瘤作用,并需要持续作用。鉴于目前国际上尚无特异性Vero细胞蛋白的检测手段,现仍以疫苗蛋白总量进行间接质控。
综上所述,Vero细胞生产疫苗具有理论上的潜在致肿瘤性风险,控制该风险的措施有两个方面,其一为控制Vero细胞的代次在130~150代,其二为降低Vero细胞残余DNA含量、残余蛋白含量(通过总蛋白含量进行间接质控)。目前国际上及国外公司对Vero细胞残余DNA含量、总蛋白含量的控制标准如下表:
关于Vero细胞DNA残余量,国际上控制标准有所不同:
(1)WHO的标准比较宽松,无论是否用于婴幼儿的,均控制在≤10ng/剂量;
(2)欧盟相对于WHO,提高了婴幼儿使用疫苗的要求,婴幼儿疫苗≤100pg/剂量,非婴幼儿疫苗≤10ng/剂量;
(3)已知的两国外公司对婴幼儿疫苗更提高了要求,控制在≤10pg/剂量。
&&&一家订入规程,一家作为内控标准。
(4)我国上市的狂犬病疫苗≤100pg/剂量,相当于欧盟的婴幼儿使用疫苗的要求。
(5)我国上市的乙型脑炎纯化疫苗(04年上市)使用人群包括婴幼儿,控制在≤10ng/剂量,符合WHO通则、欧盟通则、WHO对婴幼儿疫苗的要求,达不到欧盟对婴幼儿疫苗的要求(≤100pg/剂量),更达不到外企的控制标准(≤10pg/剂量)。
(6)肾综合征出血热纯化疫苗(02年上市)使用人群为成人,控制在≤10ng/剂量, 符合WHO通则、欧盟通则要求。
关于总蛋白含量,因疫苗(病毒蛋白)的免疫原性不同,每种疫苗不尽相同,国际上对IPV要求为≤10ug/剂量;我国要求狂犬病疫苗≤120ug/剂量;据调研,乙型脑炎的剂量≤10ug蛋白具有较好的免疫原性。在此需指出,无论是WHO、欧盟还是中国药典的要求,均为最低要求,企业需在满足上述相关要求的基础上提高要求并拟定注册标准。
对于我国企业采用Vero细胞生产疫苗,需按照注册申请的拟定注册标准(参见日刊登在CDE网站的《关于对预防用生物制品注册标准的理解和拟定原则的考虑》),其中包括Vero细胞DNA残余量及总蛋白残余量,建议在拟定注册标准时作如下考虑:
1.加强去除细胞DNA和去除杂蛋白(细胞蛋白)的工艺研究,最大限度的降低DNA残余量和总蛋白含量。尤其是用于婴幼儿的疫苗(如IPV、乙型脑炎疫苗等),最好能控制在
DNA残余量≤10pg/剂量,总蛋白含量≤10ug/剂量。
2.对于达不到DNA残余量≤10pg/剂量,总蛋白含量≤10ug/剂量的产品,不建议在2岁以下婴幼儿人群中使用。
Vero细胞残余DNA、残余蛋白(包括促生长蛋白)可能对人体有潜在的致肿瘤性及其他危害,建议疫苗生产研究单位研究特异性检测Vero细胞蛋白的方法,为今后制定相关质量控制标准奠定基础。此外,目前阶段应尽量降低疫苗总蛋白含量,间接控制细胞残留蛋白。关于Vero细胞残余DNA危害,除了与残余DNA含量的多少有关外,还与残余DNA片断的大小有关,残余DNA含量越高、片断越大,其潜在的致肿瘤性越大。因此,建议疫苗生产研究单位强化纯化工艺,尽量降低残余DNA含量;此外,研究并建立检测Vero细胞残余DNA片断大小的方法,为今后制定相关质量控制标准奠定基础。
三、细胞基质
大多数现行疫苗是通过组织培养的方法制备的,所谓组织培养是体外培养一定量的动物细胞并接种病毒,利用病毒在细胞内增殖,得到预期的病毒抗原,然后制成疫苗。
众所周知,疫苗的质量控制是全面的质量控制,包括原材料、生产过程、半成品、成品,细胞基质是疫苗生产的主要原材料,其质量控制直接影响终产品的安全性。本文简要介绍WHO对细胞基质质量控制的要求。
1. 细胞基质的种类
-1.原代细胞:动物组织经胰酶消化培养成单层细胞,用于病毒的培养。如地鼠肾细胞、沙鼠肾细胞、猴肾细胞、兔肾细胞、鸡胚细胞等。在疫苗的生产中使用了40多年,证明是安全有效的。
优点:1)相对简单;2)具有广泛的敏感性。
缺点:1)有较严重的潜在的病毒污染问题,动物的级别很难达到SPF级;2)来自不同动物的质量和敏感性有差异;3)动物来源越来越困难,尤其是灵长目动物。
-2.二倍体细胞:具有一定的传代寿命,超过一定代次,细胞衰老。如2BS细胞、MRC-5细胞等。在疫苗的生产中使用了30多年,证明是安全有效的。
优点:1)能够充分鉴定和标准化;2)使用种子库系统生产。
缺点:1)不易大规模生产,尤其是不能微载体生物反应器。2)对培养基及牛血清的要求较高。
-3.传代细胞:理论上具有无限传代的寿命。如Vero细胞、BHK21细胞等。
优点:1)能够充分鉴定和标准化;2)使用种子库系统生产。
3)可大规模生产,可用于微载体生物反应器。4)对培养基及牛血清的要求不高。
缺点:理论上有致肿瘤性的危险。但已证明Vero细胞在134~150范围内使用,无致肿瘤性。
2. 动物细胞的潜在危险
-1.病毒污染:
1)人类或灵长目动物细胞可能携带潜在病毒,如乙型肝炎病毒、逆转录病毒等。
2)禽类组织细胞隐藏着外源和内源性逆转录病毒,
3)啮齿类细胞隐藏着外源和内源性逆转录病毒,
-2.细胞DNA
l原代细胞和二倍体细胞的残余DNA无危险性。
l传代细胞系的DNA具有是其他细胞生长失控和产生致肿瘤活性的潜在能力。并认为<10ng/剂量是安全的。
-3.促生长蛋白
生产细胞可分泌生长因子,认为不构成严重危险。但使用传代细胞生产的疫苗,应进行纯化,去除细胞蛋白。
3.WHO的有关要求
(一)对所有生产细胞的要求
1)规范的操作;
2)原材料的选择,细胞的供体应无传染病或病因不能确定的疾病。
-2.细胞培养中的有关检测
1)牛血清:无细菌、真菌、支原体和感染性病毒。有些国家还要进行无噬菌体的检测;有些国家使用辐射的方法灭活潜在污染的病毒。用TSE非疫区的牛血清。
2)胰酶:无细菌、真菌、支原体和感染性病毒,特别进行牛或猪细小病毒的检测;有些国家使用辐射的方法灭活潜在污染的病毒。
3)生产结束时的检测:无细菌、真菌、支原体。
4)生产结束时检测外源性病毒。
(1)25%的对照细胞(不接种病毒)无病变;(2)豚鼠红细胞血吸附法检测阴性;(3)转种人二倍体细胞、本细胞系的其他批次、其他种属的细胞系无病变并血吸附阴性。
(二)对传代细胞的要求
-1.建立主代细胞库、工作细胞库
对于主代细胞库须进行一次全面的外源因子检定,检测可能存在的内源性和外源性外源因子,特别注意已知以潜伏状态存在于来源物种中的因子。主代种子库检定合格后,工作种子库和生产细胞只进行一般的外源因子检查。
l无菌试验(细菌、霉菌、支原体)
l细胞法检测病毒外源因子:至少用107细胞转种人二倍体细胞、本细胞系的其他批次、其他种属的细胞系,无病变并血吸附阴性。
l用动物和鸡蛋检测病毒因子:
1)乳鼠2窝(每窝至少10只),脑内、腹腔注射。
2)成鼠10只,15~20克,脑内、腹腔注射。
3)豚鼠5只,350~450克,腹腔注射
4)家兔5只,1.5~2.5kg,皮下注射
5)鸡胚10只,9~11日龄,尿腔囊。
6)鸡胚10只,5~6日龄,卵黄囊。
以上每组接种待检细胞数量不少于107个,动物观察至少4周,鸡胚至少观察5天,应键存。
l逆转录病毒的检测:一般用高敏感性的细胞扩增待检细胞培养物中的逆转录病毒,然后进行检测。
1)感染性检测
2)透射电镜检测
3)逆转录酶分析
l致肿瘤性检测
动物:1)裸鼠;2)新生小鼠或大鼠经抗胸腺血清处理;3)无胸腺小鼠。
每只动物皮下注射107细胞,以Hela细胞(106
)作阳性对照,有结节的观察1~2周,解剖做病理检查。无结节的,一半观察21天,另一半观察12周,解剖做病理检
查,应为阴性。
3. 二倍体细胞
除要传代细胞的检测项目外,增加细胞染色体分析。
检测200个分裂中期的细胞,计算染色体数目,检测超二倍体、亚二倍体、多倍体、断裂和结构异常的比例。
细胞基质在疫苗生产中必不可少,其质量的优劣可直接影响疫苗的质量。细胞基质无外源因子污染,是保证疫苗具有安全性的重要因素之一。对于已使用多年并被实践证明是安全的细胞系,可通过细胞种子库及检定进行质量控制;对于一个新的细胞系,应进行全面的系统的鉴定和检定,确保其不含有内源性和外源性的污染。
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狂犬疫苗有效期是多久
病情描述(发病时间、主要症状等):我今年7月20多号打完狂犬疫苗最後一针 12月15号又被咬了 是否还需要再次注射 我看有些人说是半年有些人说一年 还有人说是三个月 完全晕了 求个解~~~
提问者采纳
接种狂犬疫苗的抗体可以在体内维持一年以上。根据卫生部“狂犬病暴露预防处置工作规范”第21条的规定,接种疫苗后在半年内再次被动物咬伤的,只需要及时清洗伤口,不需要重新接种疫苗。今年7月20多号打完狂犬疫苗最後一针,12月15号又被咬了,不需要再次注射疫苗。
提问者评价
原来是这样,感谢!
来自团队:
病症名称:疫苗治疗方案:病情分析:你好,一般狂犬苗保持一年
诊断建议:你最好是接种疫苗,给伤口用肥皂水清洗后涂擦碘伏预防措施:注意狗狗的状态和伤口卫生清洁干燥
营养专家建议:
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接种狂犬疫苗的抗体可以在体内维持一年以上。根据卫生部“狂犬病暴露预防处置工作规范”第21条的规定,接种疫苗后在半年内再次被动物咬伤的,只需要及时清洗伤口,不需要重新接种疫苗。今年7月20多号打完狂犬疫苗最後一针,12月15号又被咬了,不需要再次注射疫苗。最主要还要看您7月20日左右接种的疫苗是不是正规厂家,再就是疫苗的存储条件是不是符合标准,如果感觉不把稳的话还是要重复注射的。
来自:求助得到的回答
你 是不是把医生当空气了?
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据马鞍山市疾控中心犬伤门诊部主管医师黄兴琼介绍,今年1月份以来,在市疾控中心接受注射狂犬疫苗者已有4000多人次,“仅7月份就高达700人次”。黄兴琼提醒,即便动物每年准时注射狂犬疫苗,被其咬伤的人仍需接种狂犬疫苗,“因为动物接种狂犬疫苗后保护率并非100%,仍可能存在感染狂犬病病毒的情况”。
原标题:两岁女童厂门口玩耍遭恶犬咬颈 民警赶到将恶犬击毙
8月13日上午,马鞍山经济技术开发区某厂房门口,2岁女童婷婷(化名)正在独自玩耍。就在婷婷玩得正高兴时,突然窜出两只大型犬将其围住,其中一只迅速将婷婷扑倒在地后发疯似的咬住婷婷的后颈。顿时,婷婷的后颈鲜血淋漓。
家人听到婷婷的哭喊声后赶了过来,这才发现婷婷被恶犬咬颈,赶紧拿着棍棒驱赶两只恶犬将婷婷救下,并报了警。后婷婷被紧急送往医院救治。
接到报警后,马鞍山市银塘派出所民警火速赶到现场。到达现场后,为了避免周围群众再次受到两只恶犬的攻击,民警立即上前隔离人群,并与厂区员工一同将两只恶犬赶至一处无人居住的房屋内。
被赶入房屋后,两只恶犬狂咬窗户钢筋准备向外逃窜。见情况十分危急,现场民警立即与市公安局治安支队取得联系,请求派员携带长枪火速驰援。支援民警带长枪赶至现场,两只已经完全失控的恶犬被当场击毙。
经现场了解,民警得知两只恶犬并非本地居民所有,很可能从外地流浪至此。
目前,婷婷的伤口已缝合无大碍。
110:今年前7个月接到狗伤人报警近400起
被狗攻击一定要护住头部和颈部
随着养狗人的增多,狗伤人事件也频频发生。据马鞍山市110指挥中心调度室主任范光达介绍,今年1月份以来,该中心已接到狗伤人事件报警近400起。
&市民出门在外,如果遇到狗示威狂叫,一定要冷静。&马鞍山市公安局刑警支队警犬防暴大队大队长冯璜提醒说,当狗已经出现了袭击的预兆,一定不能跑,要装作若无其事的样子往前走,要流露出凶狠的眼神,慢慢与狗拉开距离,动作要缓慢。在一段距离后,大部分的狗会自然选择放弃攻击。&如果这样做了万一还是被狗攻击,这时一定要保护好自己的头部和颈部。&
此外,冯璜还提醒说,狗在进食时,特别是大型犬在进食时,有护食的习惯,攻击性强,这时不要去招惹它。&天气热时,狗易烦躁比较具有攻击性。养狗的人外出遛狗时最好给狗拴上狗链,以免伤人。&冯璜说,市民出门在外不要去逗弄陌生的狗,特别是带小孩出门的家长,要看管好小孩不要与陌生的犬类接触,以免激怒它们。
新闻大数据
天气热犬类动物易烦躁冲动
7月份700人次接受注射狂犬疫苗
8月17日上午,记者在马鞍山市疾控中心犬伤门诊部看到,短短十来分钟,就有3位市民前来注射狂犬疫苗。
据马鞍山市疾控中心犬伤门诊部主管医师黄兴琼介绍,今年1月份以来,在市疾控中心接受注射狂犬疫苗者已有4000多人次,&仅7月份就高达700人次&。
&每年的6&9月份,是狗等动物伤人的高发期。&黄兴琼解释说,一是因为天气热造成狗等动物性情急躁;二是因为夏季,人们穿着单薄,一旦受到动物攻击,很容易被咬伤或抓伤。&除了猫狗等常见动物,被兔子、老鼠等动物咬伤,也需要接种狂犬疫苗。&
&如果被狗等动物咬伤,首先要做清洗和消毒。&黄兴琼说,一旦被狗等动物咬伤后,要立即用清水或肥皂水对伤口进行长时间反复冲洗,然后用酒精或碘酒对伤口进行消毒,&要在24小时内立即去注射狂犬病接种疫苗&。
&有的市民在认识上存在一些误区,认为被狗等动物咬伤后超过24小时打针会无效。&黄兴琼提醒说,狂犬疫苗注射原则上是接种越早效果越好,但是只要在疫苗刺激机体产生足够的免疫力之前,人还没有发病,疫苗就可以发挥效用。
黄兴琼提醒,即便动物每年准时注射狂犬疫苗,被其咬伤的人仍需接种狂犬疫苗,&因为动物接种狂犬疫苗后保护率并非100%,仍可能存在感染狂犬病病毒的情况&。
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[责任编辑:李燕飞]
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