醇类沉淀法提取尿液蛋白的优化策略--《广东医学》2012年11期
醇类沉淀法提取尿液蛋白的优化策略
【摘要】：目的研究提取条件,探讨提取尿液蛋白的优化策略。方法收集健康志愿者的混合尿液标本,采用甲醇、乙醇、异丙醇沉淀法在不同的条件下提取尿蛋白,这些条件包括:醇类试剂的种类、醇类试剂的比例、醇类试剂与尿液作用的不同温度及作用时间、不同的温度处理程序等。然后测定提取的蛋白浓度,评价蛋白回收量;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)评价总蛋白条带;蛋白免疫印迹评价在不同条件下提取的目的蛋白条带。结果孵育条件固定为4℃30 min时,溶剂为75%乙醇可提取蛋白最多为(649.03±28.33)μg;SDS-PAGE和免疫印迹结果显示,在不同醇类溶剂条件下提取的总蛋白条带和目的蛋白条带呈趋势变化。提取试剂条件固定为75%乙醇时,改变孵育的温度方案,显示先4℃孵育30 min后,再-20℃过夜提取的总蛋白最多为(599.93±42.20)μg;SDS-PAGE和免疫印迹结果都显示,孵育温度方案不同,所提取的总蛋白条带和目的蛋白条带无明显差异。结论 75%乙醇,在4℃孵育30 min后,-20℃过夜条件下,可高效提取尿中胰淀粉酶(AMY),用于尿AMY定性定量检测。醇类溶剂的比例对提取的总蛋白量影响很大,且对不同分子量蛋白有选择性;孵育温度条件主要影响总蛋白量。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R446.1【正文快照】：
尿蛋白成分,尤其是低丰度蛋白是良好的生物标志物来源,在疾病的诊断、监测、预后等方面很有价值,有广阔的应用前景[1-3],但尿蛋白浓度太低,很多手段无法检测,因此,对尿蛋白浓缩是实现临床应用前亟待解决的关键问题。尿蛋白提取和浓缩方法主要包括:沉淀法(有机溶剂和盐类)、超
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京公网安备74号女孩子的尿液中的白色沉淀物是什么拜托了各位 谢谢_百度拇指医生
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?女孩子的尿液中的白色沉淀物是什么拜托了各位 谢谢
正常人尿液中也可能有沉淀物，是由盐类结晶所致。因为尿液中含有尿酸盐、草酸盐等，它们在尿液较少时浓度较高，就会析出结晶，放置后就会在底部有沉淀物；盐类结晶在气温较低时其溶解度降低，亦会析出结晶，所以冷天尿就特别容易有沉淀物。 补充 正常人的新鲜尿液应该是淡黄色或琥珀色，澄清，无异味。判断尿液是否正常应以新鲜尿为准，尿液送检最好清洗外阴后留中段尿，才较为准确。 1.尿液有泡沫，应考虑有可能为以下几种情况所致：①尿液是否新鲜？存放久了的尿液（尤其是热天）会发酵而产生泡沫和絮状物（亦即棉球样物）； ②正常人在排尿时由于尿液的冲击会产生泡沫，但这种泡沫较大且很快会消失；③由蛋白尿所致，经过尿液检验可以证实。 2.尿中含有其他混入物，如阴道分泌物等，以及存放久了的尿液（尤其是热天）会发酵而产生絮状物（亦即棉球样物）。 3.正常人尿液中也可能有沉淀物，是由盐类结晶所致。因为尿液中含有尿酸盐、草酸盐等，它们在尿液较少时浓度较高，就会析出结晶，放置后就会在底部有沉淀物；盐类结晶在气温较低时其溶解度降低，亦会析出结晶，所以冷天尿就特别容易有沉淀物。这种情况是属于生理状态（非疾病引起）的尿液沉淀。只要注意多饮水，尿液达到毫升/天，就可减少出现结晶。还要注意饮食均衡。 对是否为结晶尿？您不仿做个小试验：将有沉淀的尿液加热（或加酸、或加碱后再加热），如果沉淀物消失，尿液变澄清，就是盐类沉淀引起。 从以上分析来看，您尿液有异常表现可能与上述因素有关，多半是生理性的尿液沉淀。
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小便中有细小黄色沉淀物是怎么回事?
考虑为泌尿系结石、泌尿系炎症等（泌尿系统包括肾、输尿管、膀胱、尿道等）。不知最近是否有上呼吸道感染史。
1、到医院查尿常规、沉渣，必要时行泌尿系B超检查。
2、平日多喝水、多小便，注意饮食结构（例如菠菜不宜与豆腐合食）的合理搭配。
3、加强身体锻炼，预防感冒的发生。
答: 病情分析：
你好，半月痕一般正常是指甲的五分之一，超过五分之一，就是中医所说阳气过剩引起的
指导意见：
半月痕过大，由于体内阳气过剩，可以出现心肌肥大，易患高血...
大家还关注
生气就心跳加速头晕无力会晕倒是怎么了 去...
上次去大海游泳，游好了，背上就红起来，还...只要检查一个尿常规吗
是的。如果有问题，再进一步检查。
一般营业性的医院也行吗
建议最好去公立的医院。
是不是包皮也会导致这个情况
如果是导致局部感染会这样的。
今天我去看了，他说不用查，把包皮割掉在看
说在做手术之前都会检查的
是这样的。
我问一下那现在最好的割包皮要多少钱
这个很多的价格是没有规定的，私立医院可以到几千元钱。
我今天又查了下尿，什么都正常，而且那个医生还说包皮不用开，那有白色沉淀物是为什么啊
要把有白色沉淀物的尿液去检查。
额，白色沉淀物也就是尿液慢慢沉淀出来的呀。。看不出的，除非放一两天
如果是这样，关系不大。
不是尿出来就有白的，是沉淀的，为什么他说包皮不用开啊。他说明天再去查下血，看有没有蛋白流失。。
你这种是1&2天时间出现的白色物质，没有意义的。抽血需要空腹的。
是的，是空腹。。那那个白色物质是什么呢？？那包皮为什么他说不用开呢？？
白色物质以后出现的，都要1&2天时间才出现，没有意义的。
哦，那为什么别人没有呢？？
你检查是正常的，就不没有关系，你这个是放置很久才出现的症状，没有意义的。
今天检查血，检查出个乙肝表面抗体129
什么个意思
还有一个什么结合蛋白低
有抗体就可以的，这是好的。如果是第1项是阳性，就是乙肝了。
那视黄醇结合蛋白23，正常是30到60没事吧
偏小一点点。关系不大。
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