假设通过前期什么是研究假设发现一个新的潜在编码蛋白基因,设计实验探究抑癌基因功能和作用机制

我以为你要写标书或者要做课题呢

我只是按照常规的思路想的,没什么标准答案

比如说从组织学上,做组化看看癌和癌旁的表达情况,然后根据染色强度和染色阳性程度的乘积人为打个分一般分数定为0-12分,这样你可以直观的看出到底是不是在癌中出现阳性表达癌旁阴性,通过组化可以下结论發现在你做的某种肿瘤组织中此基因是oncogene,这只是说明一个现象而已;

然后可以买些你想做的这种肿瘤的不同来源的细胞系先通过PCR或者WB检測你这个基因在细胞系中的正常的表达情况,找出高表达目的基因的细胞系弄个目的基因的siRNA,看下表达是否下降如果你这些细胞系中囿低表达这种目的基因的细胞系,那更好再做个目的基金的质粒转染,人为让它高表达再通过PCR或者WB检测表达是否增强,将上述两种方法与侵袭实验和增殖实验结合如果干扰后的癌细胞侵袭和增殖能力减弱,或者高表达目的基因的癌细胞侵袭和增殖能力提高就可以通過正反两方面在细胞水平说明这种基因是原癌基因,反之是抑癌基因

还可以将正常癌细胞、siRNA、和高表达目的基因质粒、空质粒进行动物模型体内成瘤性实验,比较各组肿瘤大小进行统计学分析,亦可得出一致结论

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