细胞库/细胞培养
ELISA试剂盒
实验室仪器/设备
原辅料包材
体外检测试剂
反转录病毒载体介导的基因转移
反转录病毒载体介导的基因转移
来源：互联网
点击次数：1910
反转录病毒载体介导的基因转移
反转录病毒(retrovirus，RV)是一种单链RNA病毒，其病毒颗粒由包膜和核衣壳组成。反转录病毒感染宿主细胞后，脱去蛋白质衣壳，将病毒RNA基因组释放到细胞质中，病毒RNA基因组在反转录酶的作用下被反转录成线性双链DNA分子。双链DNA分子转移至细胞核后，在病毒整合酶作用下被整合到宿主细胞的染色体，作为细胞基因组的一部分复制，建立原病毒状态，使细胞处于一种潜伏感染状态。随着受感染细胞基因组的复制，原病毒DNA转录出全长的RNA，并经过正常的成熟过程形成多种病毒mRNA，剪切产物被翻译形成新的病毒结构蛋白、调节蛋白，它们与全长的病毒基因组RNA结合装配形成新的子代病毒颗粒，最终以出芽的方式离开细胞。
反转录病毒载体介导外源基因表达过程
基因治疗用反转录病毒载体只包括病毒必需的/顷式作用因子如长末端重复顺序(long terminal repeat sequence，LTR)和包装识别信号序列，上述3个基因均被剔除，并以治疗基因取而代之，因此是安全的。在制备和生产过程中，3个基因的功能由病毒包装细胞反式提供。目前，包装细胞系产生的有感染能力的病毒其滴度可达107以上。如果使用不同的病毒包装蛋白，比如疱疹性口炎病毒(vesicular―stomatitisvirus，VSV)的G蛋白，可以将滴度提高到109以上。
反转录病毒载体具有以下的优点：首先，宿主范围广，能感染多种动物和人类的不同类型的细胞而无严格的组织特异性；反转录病毒是一种有胞膜病毒，通过胞膜蛋白与宿主细胞表面特异性受体相互作用进入细胞。由于反转录病毒的受体分布广泛，故宿主范围广。其次，载体基因组能稳定地整合人宿主细胞染色体内，使目的基因长期稳定表达。反转录病毒载体能够高效地感染分裂的宿主细胞，感染细胞后能够将前病毒基因组稳定整合到宿主基因组的随机位点上，通常为单拷贝形式。目前尚未发现能够将反转录病毒的前病毒从宿主细胞染色体上切除的任何机制。从理论上讲，整合到宿主细胞DNA上的载体其DNA能够随着宿主细胞的分裂一直保持下去，从而使目的基因能够长期稳定表达。第三，反转录病毒的免疫原性较低。但也存在缺点：第一，只能感染分裂细胞，而不能感染非分裂细胞；第二，能够插人的外源基因较小(7～8kb)，难以满足较大基因的转移；第三，载体DNA整合人宿主染色体是随机的，并因随机整合使原癌基因激活或抑癌基因失活，从而具有引发癌症的风险；第四，活体直接基因转移对病毒滴度要求高，病毒活体直接注射会受到补体影响而灭活等问题。
基于莫洛尼鼠白血病病毒(Moloney murine leukemia virus，Mo―MLV)改造的病毒载体是应用最广的反转录病毒载体系统。Mo―MLV反转录病毒载体系统的构建是基于把Mo―MLV基因进行包装、反转录和整合所需的顺式作用元件与编码反式作用蛋白的序列分离，分别构建重组反转录病毒载体分子及包装细胞系。在重组反转录病毒载体分子中，外源基因取代了原有病毒结构蛋白的编码区，但病毒复制、转录及包装所必需的序列元件被保留。编码反转录病毒结构蛋白的基因由包装细胞系反式提供，但是包装细胞缺乏病毒包装序列，不能自身包装。当重组反转录病毒载体导人包装细胞系后，在细胞上清液中收获只有一次感染整合能力、无复制能力的反转录病毒颗粒。以此病毒颗粒感染靶细胞，使目的基因稳定整合于靶细胞的染色体基因组，从而实现外源基因的转移。
由于制备高滴度的反转录病毒十分困难，反转录病毒在基因治疗中的应用常为ex vivo途径。为了实现细胞的靶向感染，可以通过对反转录病毒载体进行化学修饰，如偶联细胞表面受体的配体，但不可避免地将导致病毒滴度下降；另外，可通过组织特异启动子来实现外源基因在细胞内的靶向表达。在提高病毒滴度方面(病毒滴度是决定病毒感染能力和临床应用价值的一个重要指标)，人们通过替换包装细胞中病毒外壳蛋白基因来提高病毒的感染能力，如利用VSV的G糖蛋白，包装产生假病毒，可以提高病毒滴度1 000倍，而且还能够扩大感染范围，有效抵抗血清的灭活作用。人们还在探索通过离心浓缩、磷酸钙沉淀包裹病毒颗粒。
反转录病毒载体曾是基因治疗临床试验中应用最广泛的载体。根据journal of Gene Medicine的统计，截至2006年，在全球1192项基因治疗临床试验方案中，使用反转录病毒载体居第二位。第一例基因治疗重症联合免疫缺陷(SCID)成功的病例就是使用反转录病毒载体介导治疗基因转移的。除了遗传病外，反转录病毒载体也广泛应用于恶性肿瘤等的基因治疗，如反转录病毒载体介导TI(基因转移治疗脑胶质瘤等。尽管上千病例的临床试验并未显示明显的毒副作用，然而2003年有报道11例SCID患者在接受反转录病毒载体介导治疗基因转移后，患者的症状虽然都有不同程度的改善，但其中2例出现了类白血病症状。深入研究发现，类白血病的发生是与反转录病毒载体插入到癌基因LM02附近并激活LM02基因有关。从此，反转录病毒载体在基因治疗中的安全性问题进一步引起子人们的关注，其使用的广泛性逐渐降低。
相关实验方法
本网站所有注明“来源：丁香园”的文字、图片和音视频资料，版权均属于丁香园所有，非经授权，任何媒体、网站或个人不得转载，授权转载时须注明“来源：丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系，我们将立即进行删除处理。
难度系数：
共436人点评打分
难度系数：
共190人点评打分
难度系数：
共157人点评打分
难度系数：
共151人点评打分
难度系数：
共130人点评打分
丁香通采购热线：400-
Copyright (C)
DXY All Rights Reserved.君，已阅读到文档的结尾了呢~~
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
反转录病毒
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口扫二维码下载作业帮
1.75亿学生的选择
下载作业帮安装包
扫二维码下载作业帮
1.75亿学生的选择
反转录病毒的基因组复制方式是
Gay多姿Sez隙
扫二维码下载作业帮
1.75亿学生的选择
反转录病毒有一个从RNA到DNA的逆转录过程,即病毒在反转录酶的作用下,以病毒RNA为模板,合成互补的负链DNA（与mRNA互补的DNA）后,形成RNA-DNA中间体.中间体的RNA被RNA酶水解,进而在DNA聚合酶的作用下,由DNA复制产生+DNA,形成双链DNA.再进行正常的转录和翻译.双链DNA也可整合入宿主DNA,一起复制.最后转录,分离出+RNA,形成新病毒.
为您推荐：
RNA--DNA--RNA
是DNA复制？RNA复制？反转录？中心法则？DNA-RNA？哪一个答案是对的？
太深奥， 没接触过都
太深奥, 没接触过都
扫描下载二维码反转录病毒感染与肿瘤发生--《微生物与感染》2009年03期
反转录病毒感染与肿瘤发生
【摘要】：病毒感染与癌症的关系是生物医学领域中非常重要的研究方向,估计当前全世界至少20%人类肿瘤的发生与病毒感染有密切联系。本文对反转录病毒诱发肿瘤的各种作用机制进行了详细阐述。根据致病速度的快慢,反转录病毒被分为两大类:能迅速诱导肿瘤产生的急性转化反转录病毒和缓慢诱导肿瘤产生的非急性转化反转录病毒。急性转化反转录病毒通过其自身携带的癌基因快速诱导肿瘤产生,而细胞原癌基因的插入激活则是非急性转化反转录病毒引起肿瘤的主要机制。对反转录病毒致瘤机制的研究揭示了肿瘤发生过程中的一些重要原理和机制,包括原癌基因激活以及肿瘤抑制基因失活等,对探讨非病毒引起的人类肿瘤的发生机制同样具有重要的参考意义。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R730.2【正文快照】：
1前言病毒感染与癌症的关系是100多年来生物医学领域中非常重要的研究方向。早在1908年科学家就发现禽类成髓性白血病病毒(avian myeloblastosisvirus,AMV)能感染鸡并引发急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)[13]。1911年又发现劳斯肉瘤病毒(Rous sarcoma virus,RSV)
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式，仅支持PDF格式
【同被引文献】
中国期刊全文数据库
李艳;崔治中;孙淑红;;[J];病毒学报;2007年03期
赵振华,顾玉芳,王凤龙,郝永清,佟程浩,王海燕,曹鸿国,赵满达;[J];动物医学进展;1999年03期
李晓燕;樊青霞;王瑞林;赵培荣;王留兴;;[J];肿瘤基础与临床;2006年04期
崔治中;[J];动物科学与动物医学;2001年04期
丁家波,崔治中,于立娟,孙淑红,姜世金;[J];微生物学报;2004年05期
秦爱建,崔治中
,LEELUCY,FADLYALY;[J];畜牧兽医学报;2001年06期
崔治中;[J];畜牧兽医学报;2003年05期
张志,庄国庆,孙淑红,崔治中;[J];畜牧兽医学报;2005年01期
崔治中;孟珊珊;姜世金;魏建萍;;[J];畜牧兽医学报;2006年02期
廖惠芳;廖雪珍;周玖瑶;;[J];中国临床药理学与治疗学;2005年12期
中国硕士学位论文全文数据库
吉荣;[D];扬州大学;2002年
王锡乐;[D];山东农业大学;2005年
许文东;[D];沈阳药科大学;2006年
【相似文献】
中国期刊全文数据库
林洪生;许炜茹;张英;;[J];中国肿瘤;2011年08期
景绍武;王雅棣;;[J];癌变·畸变·突变;2011年04期
邵营波;张瑾;;[J];中国全科医学;2011年23期
李骐含;董晓萱;李瑾;;[J];中国医药指南;2011年23期
邹芳芳;罗芳;熊丽霞;;[J];南昌大学学报(医学版);2011年04期
陈春晓;张宇忠;;[J];医学综述;2011年17期
任琳琳;房静远;;[J];中国癌症杂志;2011年06期
徐学静;张葵;顾光煜;钱晖;许文荣;;[J];临床检验杂志;2011年05期
薛杭;王妍;;[J];医学信息(上旬刊);2011年09期
王福飞;李勇;;[J];江西医药;2011年06期
中国重要会议论文全文数据库
杨继建;葛秀国;窦忠英;;[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
陈宪全;程克俭;林靖纶;;[A];海峡两岸第三届毒理学研讨会论文摘要[C];2005年
韦娜;糜漫天;王斌;;[A];首届中国西部营养与健康、亚健康学术会议论文集[C];2005年
仇灏;陈克平;吴士良;周嘉梁;周迎会;;[A];第八届全国复合糖生物化学与分子生物学学术会议论文摘要论文集[C];2004年
韦娜;糜漫天;王斌;;[A];全国公共卫生与食物营养高层论坛暨中国营养学会与保健食品分会第四届学术研讨会论文集[C];2006年
曹雪涛;;[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
俞延芳;张连生;;[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
莫赛军;张淑伟;杨胜利;;[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2011年
徐小燕;夏蒲;聂小毳;杨雪;郑华川;;[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2011年
古习文;邢丽娟;时广森;刘志炜;王晓翰;瞿志鹏;吴曦;高翔;刘耕;杨凌;徐璎;;[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库
李明烈;[N];中国中医药报;2004年
程万里;[N];医药养生保健报;2007年
;[N];广东科技报;2002年
宫盈玖;[N];科技日报;2006年
赵欣;[N];农村医药报（汉）;2007年
北京振国肿瘤研究中心主任、振国肿瘤医院院长
王振国;[N];健康时报;2008年
南方医科大学珠江医院肿瘤中心副主任医师
叶芳 通讯员
肖爱萍;[N];广东科技报;2008年
健康时报特约记者
朱丽丽;[N];健康时报;2007年
任勇?通讯员
胡颜;[N];天津日报;2008年
聂松义;[N];中国医药报;2001年
中国博士学位论文全文数据库
何顺;[D];北京协和医学院;2011年
周玮;[D];华中科技大学;2011年
满江红;[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
陈永对;[D];浙江大学;2009年
王鸿雁;[D];华中科技大学;2012年
王启明;[D];四川大学;2006年
陈晓巍;[D];中国协和医科大学;1995年
顾玉梅;[D];南京医科大学;2008年
刘蓉;[D];中国协和医科大学;2007年
王春婷;[D];四川大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库
董承伟;[D];四川大学;2005年
张斌;[D];第四军医大学;2008年
林丽萍;[D];第二军医大学;2009年
俞延芳;[D];兰州大学;2011年
吴春利;[D];安徽医科大学;2009年
余宁乐;[D];苏州大学;2001年
黄勇;[D];第四军医大学;2002年
高玮;[D];中南大学;2007年
刘晓燕;[D];福建医科大学;2007年
臧红;[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 大众知识服务
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
订购热线：400-819-82499
服务热线：010--
在线咨询：
传真：010-
京公网安备75号相关词典网站：}