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验证码输入错误，请重新输入宫颈癌差异表达新基因的筛选、克隆及功能分析--《湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会论文摘要汇编》2004年
宫颈癌差异表达新基因的筛选、克隆及功能分析
【摘要】：采用细胞原癌基因、抑癌基因分类表达谱芯片,分析了原发性宫颈癌的基因组表达差异的情况,对目前已知的约300多条细胞内的原癌、抑癌基因进行分析,筛选出存在差异表达的原癌或抑癌基因共11条,占候选基因的3.4%,其中表达明显下调的基因7条。上调基因4条。对其中表达下调最明显的基因—人膀胱癌相关蛋白基因(Homo sapiens bladder cancer assotiated protein,BLCAP)进行了深入研究。制备其全长cDNA并克隆到真核表达载体pLNSX上,转染至宮颈癌细胞系HeLa中,运用G418筛选获得稳定转染的BLACP阳性克隆,经PCR和RNA斑点杂交检测,确定细胞中有重组质粒pLNSX(BLACP)的稳定表达,而且BLACP mRNA的表达水平明显增高。进而检测了BLCAP基因在人正常细胞和不同肿瘤细胞中表达水平的差异;分析了稳定转染BLACP基因的HeLa细胞的细胞形态、细胞生长及增殖和集落生成能力;BLCAP基因裸鼠体内抑瘤实验及DNA Ladder实验。结果显示,BLCAP基因在人不同肿瘤细胞中表达水平较之在人正常细胞中的表达水平低;BLACP导入HeLa细胞后,细胞的体积变大,细胞生长减慢,培养至第六天时,细胞数量约为对照细胞的20%,细胞成集落能力也明显下降,克隆形成率下降59.3%。同等量HeLa细胞注射裸鼠皮下后,稳定转染了BLCAP基因的HeLa细胞较之未转染BLCAP基因的空HeLa细胞及转染了空载体的HeLa细胞出瘤时间晚,最终成瘤体积小,且肿瘤病理切片结果显示,稳定转染了BLCAP基因的HeLa细胞所成肿瘤组织,癌组织被纤维组织包裹,边缘整齐,肌层和脂肪组织未侵犯,部分癌巢边缘癌细胞可见散在类似凋亡细胞的细胞群。而未转染质粒组及转染空载体pLXSN质粒组所成肿瘤组织癌组织突破肌层呈清润性生长,癌巢边缘癌细胞病理性核分裂像多见。在DNA Ladder实验中,稳定转染BLCAP基因的HeLa细胞DNA中出现大小约200bp及其倍体的DNA梯带,而转染空载体pLXSN的HeLa细胞及正常培养的HeLa细胞中则未出现,说明HeLa细胞在转染BLCAP基因后出现了凋亡。综上所述,BLCAP基因与宮颈癌的发生、发展可能存在密切关系。可能是一条潜在的宫颈癌候选抑癌基因。
【作者单位】：
【分类号】：R737.33【正文快照】：
宫颈癌差异表达新基因的筛选、克隆及功能分析@伍欣星$武汉大学医学院病毒所分子生物学研究室
@赵旻$武汉大学医学院病毒所分子生物学研究室
@刘娟$武汉大学医学院病毒所分子生物学研究室
@魏云$武汉大学医学院病毒所分子生物学研究室
@左泽华$武汉大学医学院病
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不同临床特征宫颈鳞癌患者鳞状细胞癌相关抗原水平及治疗后变化
目的:分析不同临床特征宫颈鳞癌患者血清鳞状细胞癌相关抗原(SCC)水平及治疗后变化.方法:选取145例宫颈鳞癌患者(鳞癌组),采用化学发光法检测治疗前后血清SCC水平,并详细记录患者的临床分期、有无淋巴转移、肌层浸润情况、有无静脉栓塞等资料,另选女性体检健康者60例作为对照(对照组),比较不同临床特征患者SCC水平及治疗后变化.结果:与对照组比较,鳞癌组SCC水平明显升高;与0期～Ⅱ期比较,Ⅲ期和Ⅳ期宫颈鳞癌患者SCC水平均升高,Ⅳ期比Ⅲ期升高更明显;有淋巴转移较无淋巴转移患者SCC水平增高;肌层浸润&2/3患者SCC水平高于浸润≤2/3者;有静脉栓塞者SCC水平高于无静脉栓塞者(P均＜0.01).治疗后患者SCC水平较治疗前明显降低(P＜0.01),接近对照组水平(P＞0.05).结论:SCC检测对宫颈鳞癌的辅助诊断及预后有重要临床价值.
作者单位：
湖北省黄冈市黄州区人民医院检验科,黄冈,438000
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