检测患者体内艾滋病的病原体体,取样时间在感染初期较易获得是为什么

下列关于血压的叙述,错误的是A.收缩压、舒张压是心室收缩、舒张时测得的动脉压力B.交感神经兴奋,血压升高C.正常人血压在一天中稳定不变D.血压值与动脉血管的弹性、血液量有关C上海市杨浦区2012届高三上学期期末学科测试试题(生命科学)答案500 - 内部服务器错误。
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您查找的资源存在问题,因而无法显示。检验科关于开展九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测(九联检)的通知
各临床科室:
检验科自2013年5月14日起开展九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测(九联检)的检验工作,九项呼吸道感染病原体包括嗜肺军团菌血清1 型、肺炎支原体、Q 热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2 和3 型。现将医嘱名称、检验时间、标本采集、临床意义等通知如下:
1.&收费标准:呼吸道感染病原体九联检,总计收费410元,其中属医保收费100元,自费310元。
2 .&医嘱名称:&呼吸道感染病原体九联检&
(备注:医生开上述检验单在检验科细菌组中,因试剂是联合检测,所以不能进行上述病原体的单独检验)
3.&检验时间:每周一&~&周五
4.&报告时间:转天下午3:30以后
5.&检验地点:检验科细菌室
6.&标本采集要求:普通标本管(红帽)采集静脉血,2ml。
7.&正常参考范围:阴性
8.&临床意义:
嗜肺军团菌、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2 和3 型,是引起非典型呼吸道感染的常见病原体,因此检测是否存在这些病原体的感染是非典型呼吸道感染诊断的重要依据,从而为临床提供有效地治疗药物提供依据。
1.&&嗜肺军团菌。
嗜肺军团菌是军团菌属的一种,有多个血清型,其血清1 型时引起军团菌肺炎的主要血清型。临床上军团菌感染主要有两种表现形式:肺炎型和庞蒂亚克热型(Pontiacfever)。军团菌肺炎潜伏期为2~10 天,IgM 抗体在感染后1 周左右出现,并可持续存在3~6 个月。
2.肺炎支原体
肺炎支原体引起主要疾病有原发性非典型肺炎、咽炎和气管支气管炎,肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见,约有15%~20%的社区获得性肺炎是由肺炎支原体引起。肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮内潜伏,部分患者无明显症状;但大部分患者为显性感染。在3 岁以下儿童以上呼吸道感染多见,成人以肺炎表现为主。肺炎支原体肺炎潜伏期10~20 天,起病缓慢,IgM 抗体一般在感染后1 周出现, 3~4 周达高峰,可持续存在3~6 个月。
3. Q热立克次体
Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病,会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或
心内膜炎。急性感染Q热立克次体的潜伏期为2~38天,通常为12~19天,IgM抗体一般在感染后2周左右出现,4~8周达高峰, 可持续存在3~4个月。
4.肺炎衣原体
肺炎衣原体可引起急、慢性上呼吸系统感染,特别是支气管炎和肺炎,还可引起心内膜炎、脑膜炎、结节性红斑。它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%,在老年人中发病率较高。肺炎衣原体感染所致的肺炎,症状和体征无特异性,多数起病缓慢,潜伏期一般为30天左右,IgM抗体在发病2~3周出现,一般来说可持续存在2~6个月。
腺病毒是一种重要的呼吸道病原体,能引起上呼吸道疾病、肺炎,还可引起眼结膜炎/角膜炎、胃肠炎、脑炎等。呼吸道感染伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染症状。腺病毒感染的潜伏期为2-14 天,IgM抗体在发病1周左右出现,可持续存在2~3 个月。
6.呼吸道合胞病毒
人呼吸道合胞病毒广泛分布于世界各地, 是导致婴幼儿、老年人和免疫力低下的成年人下呼吸道疾病的重要病毒病原,是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体,在冬季爆发流行。呼吸道合胞病毒感染的潜伏期为3-7 天,IgM 抗体在发病1 周左右出现,可持续存在2~3 个月。
7.流感病毒
流感病毒可分为甲、乙、丙三型(也称A、B、C型),是流感的病原体,甲、
乙型流感病毒引起的病症较严重,&其中又尤以甲型为甚,由于它易于与其它呼吸道疾病混淆,所以在流行期临床诊断很困难。因此,实验室诊断就显得非常重要。流感病毒感染的潜伏期为1~7 天,IgM 抗体在发病1 周左右出现,可持续存在2~3 个月。
8.副流感病毒
人副流感病毒( HPIV)可分为4&型-HPIV1~4,各型病毒主要结构和生物学特征相似,但流行病学和所引发疾病的临床特征有差异,3 型具有流行性,1 和2 型具有地域性。HPIV&广泛存在于自然界,可引起各年龄阶段儿童发病,以婴幼儿易感,可引起小儿轻重不等的上、下呼吸道感染,如感冒、中耳炎、重症喉气管支气管炎(哮吼)、毛细支气管炎和肺炎,其中HPIV1和HPIV3&是引起婴幼儿、免疫缺陷或慢性疾病患者及老年人下呼吸道感染的主要病原体。副流感病毒感染的潜伏期为2-7 天,IgM 抗体在发病1周左右出现,可持续存在2~3 个月。
【检验方法的局限性】
1.&&因病原体感染后产生IgM抗体存在一定窗口期,各病原体窗口期亦略有不相同且抗体产生水平受个体免疫力影响,因此阴性结果时不能排除感染的可能性。检测结果应结合临床以及其它诊断方法综合考虑。
2.&&在感染早期采集的样本可能检测不到IgM抗体,可在一定时间后再次采集标本检测,以观察血清转化或抗体水平是否升高。
3.&&该检验方法采用间接免疫荧光法,患有自身免疫性疾病的病人的血清可能会在细胞上发生非特异性反应,造成假阳性结果,此时,检测结果也应结合临床以及其它诊断方法综合考虑。
4.&&本检测不能指出感染部位。
& && && && && && && && && && && && && &&检验科
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- 妇产科学
母婴围产期TORCH感染及其病原体检测
国外医学临床生物化学与检验学分册 2002年第2期第23卷
东南大学临床医学院;江苏南京210009 贾现矗ㄗ凼觯唤纾ㄉ笮#
关键词:TORCH;围产期感染;病原本检测
  摘要: tORCH是一组广泛传播的病原微生物,孕妇易原发和复发感染,并可发生宫内传播,引起胎儿、新生儿感染,造成流产、早产、死胎、胎儿畸形和新生儿智力障碍等严重后遗症。因此,筛查于TORCH意义重大。血清学方法和分子生物学技术在TORCH各病原体的检测中广泛应用,并发挥了巨大的作用。本文就围产期母婴TORCH感染的危害及其各病原体的检测作一综述。“TORCH”一词是Nahmias于1971年提出的,专指发生在孕期的各种微生物感染。其中T(Toxoplasmagondii,Tox)是弓形虫,R(Rubelavirus,RV)是风疹病毒,C(Cytomegalovirus,CMV)是巨细胞病毒。H(Herpessimples,HSV)是单纯疱疹病毒(其中以HSVⅡ型为常见),O(others)为其他病原体,主要包括微小病毒属(Parvovirus,PV)、人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV),E-B病毒(Epstein-barr virus)、疱疹病毒6和8型(herpesvirus 6and8)、水痘(varicella)、梅毒(syphilis)、肠道病毒属(enteroviruses)和肝炎病毒属(hepatitis)。
  1、母婴围产期TORCH感染的危害
  这组病原体均能通过胎盘垂直传播给胎儿,还可通过孕妇下生殖道逆行扩散,引起胎儿感染以及胎儿分娩时的围产期感染,导致流产、死胎或胎儿宫内生长迟缓(IUGR)、智力发育不全、小头畸形、脑水肿、听力障碍等先天畸形,甚至新生儿感染,导致青春期发育障碍,在围产医学中特称为TORCH综合征。由于这类感染对孕妇本身影响较小,常缺乏明显临床症状,但对胎儿及新生儿的危害却极大,而且对于胎儿感染的诊断方法有限且昂贵,对于这些感染又缺乏有效的治疗手段,因此严重影响了优生优育和人口素质,已受到产科和儿科的重视。
  孕妇由于内分泌的改变和免疫力下降而易发生原发TORCH感染,既往受到感染的孕妇体内潜伏的病毒也易被激活而发生复发感染。Tox、CMV、HSVⅡ、RV等都是细胞内寄生的病原体,可能潜伏在机体某些组织细胞内,成为隐性感染。国外调显示:在孕妇的隐性感染中,95%是由CMV、Tox、HBV、微小病毒B19、E-B病毒、疱疹病毒6和8型、B组链球菌及HIV引起,其中50%~75%是由水痘、HSV和梅毒引起。
  2、TORCH感染各病原体的检测
  鉴于TORCH感染的潜伏性、危害性以及诊断与治疗手段的欠缺,应重视对孕妇的产前TORCH感染的筛查诊断。
  确定感染的最确切的依据是从标本中分离病原体。但病毒分离需要时间长,条件要求高,影响因素多,不适用于临床筛查。
  2.1血清学诊断
  应用免疫学技术进行孕妇的血清学检测作为围产期感染的主要诊断方法已有许多年了,尤其是用于诊断RV、CMV、Tox、梅毒和HBV。随着对高特异性靶抗原认知的增加和高异性单克隆抗体的发展,对于母体感染的诊断技术也在迅速发展着。
  目前临床和实验室多采用ELISA的方法检测病原体特异性IgG和IgM来诊断孕妇和胎儿的感染。通常认为IgM的产生是一种急性反应,随之IgM在1~3周内产生。母血某病体特异性IgM阳性可能发生胎儿宫内感染,并且可能与宫内感染的严重程度有关。IgM分子量大,不能通过胎盘,因此脐血中检出来病原本特异性IgM即为先天性感染的诊断指标。其病原体IgM阳性的胎儿可能预后不良,可作为决定胎儿取舍的指标之一。
  对于产科医生来说,确定母体发生感染的时间是很重要的,如果是孕期原发感染,胎儿就有感染的危险,但如果是在孕前感染,则胎儿很大可能已受到了保护。
  有研究显示:母体感染的时间可以用IgG的抗原亲和力、阳性或阴性实验的图形、配对实验中的数据模型来确定。母体感染后,IgG的亲和力的变化与感染时间成比例。这种特征在Tox、CMV、RV感染中得到了很好的应用。在Tox的感染中,低亲和力(<15%)提示三个月内的原发感染,亲和力为(15%~29%)为可疑,高亲和力(>30%)提示感染已超过6个月。在CMV感染中,14周以内的感染,平均亲和力为(30±12)%。陈旧性感染,亲和力为(88±9)%,低亲和力高度提示胎儿感染。在RV感染中,RV特异性IgG抗的亲和力较低时(<50%)提示原发感染,而高亲和力(>50%)提示陈旧性感染、复发感染或接种疫苗后。
  单就Tox感染,Jenum等对于诊断其孕期原发感染作了大量研究,得出一系列重要结论:①特异性IgM通常在原发感染的一到两周内出现;②特异性IgM通常在感染后的4周内出现;③特异性抗体的滴度不断增加,通常在4~8周内达到高峰,但在个别病例,特异性IgM水平可以继续上升几周,特异性IgM水平可以继续上升几个月;④单个血清样本中,抗体量的测定并不能对感染发生的时间给予清楚的提示;⑤IgM的存在,并不能肯定感染是在近期发生的;⑥感染后3个月内,特异性IgM的量可下降到不能检测出来的水平;⑦特异性IgM分析对正确的诊断并不重要,因为阴性的检测结果不能排除近期Tox原发感染,而阳性结果也不能确定其近期原发感染;⑧作为一条诊断标准,染色试验抗体滴度≥300IU/ml,对于近期原发感染敏感性较低。
  另外Villene等尝试用免疫捕获的方法检测血清中抗Tox IgE来协助诊断孕期先天性感染与进行性急性Tox感染。IgE在血清学阴性的妇女,慢性Tox感染或没有先天性弓形体病的婴儿中是查不到的。在诊断先天性弓形体中,特异性IgE虽没能IgM和IgA阳性率高,但IgE的检测在孩子的随访中可能是很有意义的。
  血清学检测方法还可用于区分先天性风疹综合征(CRS)和隐性宫内RV感染,应用①酶免疫测定(EIA)RV合成肽;②IgG抗原亲和力;③免疫印染等检测方法孕妇及胎儿的血清样本。出生时有CRS的婴儿及其母亲显示低水平的E2特异性抗体或根本检测不到。同时IgG抗原亲和力较低,E1蛋白上的诱导表位(SP15)缺乏。
  2.2分子生物学诊断
  随着分子生物学技术的飞速发展,近年来应用核酸要交技术和PCR技术检测原微生物是临床诊断学的重大突破。目前这些技术已广泛地应用于对多种病毒、细菌、支原体、衣原体、螺旋体等所致疾病的基因诊断,取得了令人瞩目的成就,但这些方法也存在着一些不足之处,有待进一步完善。
  2.2.1核酸杂交技术
  核酸探针可用于鉴定不能分离培养,分离困难或即使能分离,但用其他方法鉴定费时费力的病原体的检测,它肯高度的特异性,但敏感性较低,大部分探针检测的标本必须经适当增菌后才能进行检测,探针法的操作麻烦,费用昂贵。目前使用的放射性标记探针半衰期短,放射性物质的操作与防护要求较高,限制了它的推广应用;生物素标记系统存信噪比低的不足,不宜用于临床标本的直接检测。
  2.2.2PCR检测技术
  由Mullis等在1983年发明的PCR技术自1989年开始用于临床检验以来,以其复合、快速、灵敏的优势成为临床试验诊断的技术热点。近年来,许多标准PCR的改良方法有产地扩大了PCR的诊断能力,已被广泛用于传染性疾病、遗传病、肿瘤及优生优育等领域。
  应用PCR的方法检测TORCHD感染中各病原体DNA,其敏感性明显优于病毒培养和ELISA等方法,可达到1fgDNA。
  单就CMV的检测来说,Revello等的研究发现,对于免疫功能健全的人,HCMV(Human CMV)只有在原发感染的急性期和近期在血液中检测出来。不论是否伴发HCMV的复发感染,在已有HCMV免疫功能的人的外周血白细胞中感染病毒与病毒成分(pp65,DNA)都是检测不到的。这一研究发现将对区分HCMV的原发与感染提供帮助。
  对于HSV的检测,可以从孕女水疱、宫颈和羊水的液体中取样,应用PCR方法检测HSV-DNA。
  2.2.2.1套式PCR
  套式PCR技术主要是为了增加反应的灵敏性而设计的,它可以检测极微量的模板DNA。俞锡林等用此检测HCMV,即在HCMV高度特异IEA基因上扩增一段长度为761bp的DNA片段,继而在这个片段内部设计一对内引物进行第二次扩增,取得较满意效果。
  套式PCR具有相当高的敏感性,但其最大缺点是第一轮扩增产物转到第二轮反应试管时极易受污染,但可用石蜡和油把两个反应体系机械地分割开,或设计不同退火温度的引物以避免污染。
  2.2.2.2多重PCR
  多重PCR指在同一试管中放入两对或两对以上的针对不同靶序列物的引物,这样不止一个目标的DNA被同时扩增。多重PCR引物必须精心设计,应具备相同的退火温度且引物之间不能有互补序列,必须经过反复的经验性试验方能成功。
  戴克胜等经反复试验,设计引物,找出最佳扩增条件,应用多重PCR扩增条带均清晰、均一,产量较高,无非特异扩增。这一快捷、简便、经济的实验诊断方法避免了孕妇同时进行多项检测,对优生优育工作的开展具有十分重要的意义。
  2.2.2.3荧光定量PCR(FQ-PCR)
  1995年,美国Perkin ELmer公司研制的荧光定量PCR技术,融汇了PCR的高敏感性,DNA杂交的高特性和光谱技术的高精确定量等优点,直接探测PCR过程中荧光信号的变化以获得DNA模板的准确定量。此技术无需PCR后处理和检测,解决了常规PCR技术不能定量及操作繁琐等问题,成为常规PCR的换代技术,是目前最先进的PCR技术。FQ-PCR不仅适用于TORCH各病原体的检测,还可用于建立病原体分子诊断标准,如孕妇宫内感染病原体数量及致畸的关系。Revello等已把此技术用于检测羊水中HCMV-DNA,但对其结果及应用价值尚不能确定。
  TORCH各病原体先天性感染危害极大,但孕妇感染只有小部分传播给胎儿,因此仅凭母血某病原体IgM、DNA阳性并不足以作为终止妊娠的指标。许多报道认为羊水中病原体DNA和脐血中病原体DNA和IgM的检出是诊断胎儿感染的更为直接可靠的指标,对估计胎儿状况有重要意义。
  PCR技术用于病原体的基因诊断存在最大问题是假阳性率较高,稳定性也不够够理想。因此对PCR检测结果应结合临床症状,体症及其它检测指标综合判断。
  2.3非特异性诊断
  Nigro等在孕期原发Tox感染的妇女中,发生Tox母婴传播的与没有发生传播或感染已被控制的妇女相比,血液中自然杀伤细胞(NK cells)的水平较低,且已具有统计学意义。因此考虑自然杀伤细胞水平的检测可以成为预测孕期原发Tox感染宫内传播的指标。
  3、结语
  如前所述,孕期TORCH感染的危害性已得到了广泛认识,而且对其病理原微生物的检测,不论基础研究,还是临床研究都取得了巨大进展。免疫学技术和分子生物学技术在检测孕妇和胎儿TORCH感染时各具优势。血清学方法检测病原体IgM阳性呆诊断现在存在的活动性感染。而PCR检测病毒体DNA则能反映血中病原体DNA的存在与否。临床上应联合应用这两种方法动态监测孕妇和胎儿发育情况,必要时作羊水产前诊断和胎血检测,并辅助超声监测胎儿发育情况,及时终止有TORCH感染致畸形危险的妊娠。
  但目前仍然存在的问题是:⑴各种病原体特异性抗体和其DNA的检测在疾病的诊断和价值尚有待进一步探讨;⑵分子生物学技术的快速发展与应用;虽为病原体的检测提供了快速、敏感的手段,但仍有待进一步地简化操作,提高特异性、稳定性,可重复性,避免假阳性,以便于临床上推广应用;⑶对于孕妇期感染,何种情况下需要进行干预,目前尚无肯定结论,有待进一步研究;⑷对于TORCH感染各病原本的同时检测,既是临床应用中的需要,也是广大患者的要求,因此研究出一种既方便快捷实用,又谦价敏感可靠的检测方法已成为医务工作者与研究人员的研究方向。
  相信,随着免疫学和分子生物学技术的发展,不远的将来必将使TORC感染各病原体的检测迈上更高的台阶。
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