来源： 作者：李华伟;王正敏;
干细胞治疗感音神经性耳聋
听觉在我们与周围环境的互相交流中是必不可少的,但很多种有害因素能损害内耳组成细胞。所有的听觉感知都是通过每个内耳中不超过15000个感觉细胞的输出得来的。这些感觉细胞,即毛细胞,是内耳的机械-电换能器。毛细胞顶端静纤毛束的偏曲引起毛细胞基底外侧的递质释放,从而引起听神经纤维产生神经电位。大部分类型的先天性和获得性听力损失由耳蜗毛细胞或相关神经元的损伤或丢失引起。遗传性聋的发病率很高:每一千个儿童中有一个出生时就患有耳聋,另外有千分之一在成年以前发生耳聋。根据发病年龄不同,听力损伤会影响语言、认知和心理的学习和发展。随着世界人口的逐渐增加,老龄化的日益严重,噪音污染的加重,获得性听力损伤的患病率一直在上升。据统计,65岁以上的成年人中三分之一患有残疾性听力损伤,使耳聋成为最常见的慢性疾病之一。2001年全球有超过2500万人患有耳聋。过去几年中,干细胞被引入哺乳动物毛细胞再生新途径的研究领域。使用干细胞替代内耳细胞的疗法一个重要进展是近期发现了胚胎干细胞、成年内耳干细胞以及神经干细胞均可在体内培养分化成毛细胞。这些干细胞是多向性的,理论上,这些细胞可以分化出......(本文共计4页)
　　　　　　　
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治耳科的医院
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干细胞研究与耳鼻咽喉头颈外科
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&&& 近年来国内在干细胞方面的研究发展很快，许多学科在胚胎干细胞、成体干细胞领域的研究中取得了长足进步，部分成果已接近或达到国际先进水平。而国内耳鼻咽喉头颈外科在此领域的研究处于起步阶段，尚需加大研究的力度与深度 &&& 一、胚胎干细胞研究 &&& 受精卵发育至囊胚阶段，分化出的内细胞团细胞可以自我复制，并能分化成包括生殖细胞在内的多种细胞，称为胚胎干细胞 (ES 细胞 ) 。胚胎干细胞的 另一重要来源是胚胎原始生殖嵴细胞 ，又称胚胎生殖细胞 (EG 细胞 ) 。 EG 细胞在内细胞团细胞多向分化能力消失后，仍然继续维持较长时间， ES 细胞与 EG 细胞可统称为胚胎干细胞。胚胎干细胞在不同的诱导条件下，可分化成为不同的细胞，国内已有学者进行了人胚胎干细胞的建系初步研究。以往认为，由于内耳听觉毛细胞难以再生，各种原因引起的毛细胞损伤而导致的感音神经性耳聋，往往是难以治愈的疾病。由于理论上，胚胎干细胞能分化成体内的任何一种细胞，而且目前已可成功将胚胎干细胞诱导分化为神经细胞，这为感音神经性耳聋的治疗提供了新的思路。 胚胎干细胞用于治疗感音神经性耳聋，主要集中在毛细胞再生与螺旋神经节损伤的修复。 &&& 1 ．听觉毛细胞研究 &&& 国内已有学者应用胚胎干细胞进行毛细胞再生方面研究，并取得了可喜进展。徐运等在体外定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为毛细胞，免疫组织化学检测细胞表达的特异性蛋白，发现所得到的细胞具有与毛细胞相似的分子特征。 Li 等用 EGF 和 ICF 诱导体外培养小鼠胚胎干细胞，使其分化成为内耳神经前体细胞，再经 bFGF 诱导，即可表达成熟毛细胞标记物。将这种细胞移植入发育中的内耳上皮损伤处，这些细胞在植入处可表达毛细胞标记物并有纤毛束形成。 &&& 2 ．初级听觉神经元研究 &&& Matstanoto 等观察了胚胎干细胞诱导形成的神经元，修复螺旋神经节神经损伤的可能，结果发现这种神经元可以包绕实验动物听觉上皮中的毛细胞生长，这提示胚胎干细胞有可能用于修复螺旋神经节。 Regala 等制作耳蜗前庭神经损伤的动物模型，将转移有绿色荧光蛋白基因的小鼠胚胎干细胞进行移植，观察细胞的存活与分布情况。结果发现，在模型动物的耳蜗前庭神经及脑干均可检测到绿色荧光蛋白的表达，这提示胚胎干细胞有可能应用于耳蜗与脑干之间神经损伤的治疗。 &&& 虽然胚胎干细胞的研究取得了许多重要的进展，但其研究与应用的结合上仍有许多问题需要解决。 &&& 首先，有可能应用于临床的胚胎干细胞只能取人体胚胎，这涉及到复杂的医学伦理学问题；其次，胚胎干细胞的培养、扩增、保存及定向诱导分化尤其是分化成为有功能的组织细胞，仍需进一步研究；另外值得注意的是，来自异体的胚胎干细胞仍有可能存在机体的免疫排斥问题。 &&& 二、成体干细胞研究 &&& 研究发现，在某些成体组织中，存在成体干细胞。这种细胞没有分化的全能性，但在一定的诱导条件下，这些细胞可向某些成体组织细胞分化。近几年。人们从大鼠和小鼠的神经系统分离出神经干细胞，从骨髓及多种组织中分离出间充质干细胞。 &&& 目前人类对于这方面的认识仍很有限，但是人类成体干细胞研究表明，这些专能干细胞在细胞疗法的研究和发展中具有极大的利用价值。如果能从患者身上分离出成熟干细胞，诱使它们分化并指导它们进行特化发育，而后将它们移植回患者体内，这样的自体同源干细胞，不会发生排斥反应，而且使用成体干细胞进行这样的治疗，显然会降低，甚至避免使用来源于人体胚胎或人体胎儿的干细胞所导致的复杂的医学伦理学问题。 成体干细胞主要分为造血干细胞、间充质干细胞及神经干细胞。 耳鼻咽喉头颈外科研究领域主要 集中于间充质干细胞和神经干细胞。
&&& 1. 在听觉毛细胞再生研究中的应用 &&& 神经干细胞是一类重要的成体干细胞，分布于成人及胚胎的中枢及周围神经系统。 在生长因子、神经递质、激素及损伤、环境因素改变的刺激下，可分化为不同类型的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。 有学者把成年鼠或豚鼠神经干细胞分别移植入新生鼠及豚鼠耳蜗，发现部分细胞可在耳蜗内存活，为感音神经性耳聋治疗带来了希望。目前许多研究致力于寻找神经前体细胞， Rivolta 等从转基因小鼠胚胎的听泡中分离出，条件永生化毛细胞前体细胞，这种细胞可分化为耳蜗毛细胞。 Lawlor 等则利用相同的转基因小鼠，培养出具有双向分化潜能的条件永生化支持细胞系，神经前体细胞可定向分化为两种前庭毛细胞枝支持细胞。 Doetzlhofer 等发现在培养休系中加入 EGF 并与内耳间质细胞共培养时，这种前体细胞在体外即可向毛细胞分化。也有学者采用无血清神经球培养方法，从成年小鼠椭圆囊斑分离坪培养出具有神经干细胞特性的细胞，将这种细胞注入鸡胚听泡中，数日后植入的细胞转化为毛细胞样细胞。 &&& 2 ．在组织工程学研究中的应用 &&& 间充质干细胞在人体的分布极为广泛， 目前已在骨髓、肌肉、脂肪等多种组织中找到间充质干细胞。 间充质干细胞具有多向分化能力， 适当诱导后可发育为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞等 ，是组织工程研究中重要的种子细胞来源。耳鼻咽喉头颈主要以骨和软骨构成支架，多种组织复合，结构精细复杂，各种原因造成的组织缺损修复困难，因此很多研究致力于将组织工程技术引入这一领域。其中，骨髓间充质干细胞易于获得、可大量扩增并具有多向分化能力，因此对其研究较多。 &&& 1976 年， Friedenstein 首先发现成人骨髓中存在间充质干细胞，具有很强的成骨能力 。后来的研究发现，骨髓间充质干细胞不仅具有成骨能力，还具有向其他细胞分化的能力，如转化为软骨细胞及脂肪细胞。同时，骨髓间充质干细胞如果经过适当诱导，可以从一种起源的组织向不同的方向分化，即骨髓间充质干细胞的可塑性。 Sanchez-Ramos 等发现骨间充质千细胞可分化为神经元， Ferrari 等则发现间充质干细胞可参与骨骼肌的修复 。由于间充质干细胞具有多向分化能力并具有可塑性，因此被称为成体干细胞，并广泛用于组织工程种子细胞研究，也应用于耳鼻咽喉头颈外科。也有学者将骨髓间充质干细胞在体外进行三维立体培养，并成功诱导成为软骨细胞，国内一些研究表明，在体外培养人、骨髓间充质干细胞，可在适当条件下诱导成为骨细胞及软骨细胞，因而认为骨髓间充质干细胞适用于骨及软骨组织工程种子细胞。柴岗等即应用人骨髓基质干细胞形成组织工程化骨，成功修复多例颅颌面骨缺损。 &&& 实际上，在基础及临床的许多学科研究领域，都将目光投向间充质干细胞，某些方面的研究已经进入临床试验阶段。海军总医院耳鼻咽喉头颈外科组织工程实验室正在以骨髓间充质干细胞作为种子细胞，进行了组织工程化人工听骨的构建研究，已经取得了初步成果 这些研究为耳鼻咽喉头颈外科在组织缺损的修复重建方面提供新的思路与方法。 &&& 总之，胚胎干细胞及神经干细胞研究，为感音神经性耳聋的治疗带来新的希望。成体干细胞，尤其是间充质干细胞的研究，则为耳鼻咽喉头颈外科利用组织工程技术进行修复与重建提供了新的途径。
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干细胞治疗神经性耳聋最新动态
人类胚胎干细胞针剂 治疗沙鼠耳聋效果好
　　据新华社电 记者荆晶 英国研究人员使用人类胚胎干细胞治疗耳聋的沙鼠，取得明显效果，为治疗人类神经性耳聋打下坚实基础。
　　英国设菲尔德大学以18只沙鼠为研究对象。研究人员解释说，之所以选择沙鼠而不是实验室中常见的小白鼠，是因为沙鼠的听力范围与人类相似。
　　研究人员先用药物破坏沙鼠的听觉神经，令它们的一只耳朵失聪。接着给它们注射含有约5万个人类胚胎干细胞的针剂。这些干细胞事先经过培养，可以转变成恢复听力所需要的耳部细胞。
　　沙鼠接受注射后，听力得到不同程度恢复。研究人员说，恢复状况取决于新细胞与耳蜗的结合程度。
　　主持这项研究的马塞洛·里沃尔塔在报告中写道，研究人员通过测试沙鼠脑中的电信号发现，它们的听力平均恢复46%。
　　路透社12日援引里沃尔塔的话报道：“如果这是一名病人，这种听力恢复程度意味着他从听不到卡车从街上驶过的声音转变成能与人正常交流。这项研究显示，人类干细胞能令听觉功能恢复，这前所未有。”
　　造成耳聋原因之一是耳内的听觉毛细胞或听觉神经受损。听觉毛细胞只在胚胎发育过程中形成，一旦受损就无法修复，会造成永久性失聪，只能靠人工耳蜗移植来部分解决这一问题。但若是听觉神经受损，重获正常听力几乎无望。
　　里沃尔塔说，干细胞治疗有望帮助解决因听觉神经受损导致的失聪问题。他说，研究人员有可能在“几年之内”进行用干细胞治疗人类失聪的临床试验。
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