【摘要】：华法林和华法林和阿司匹林合用分别是抗凝和抗血小板治疗的一线药物临床上很多患者既有动脉血栓形成的风险,又有静脉或心腔内血栓形成的风险,单一抗凝戓抗血小板药物均只能充分抑制其中一种类型血栓形成风险,常需要华法林和华法林和阿司匹林合用的联合疗法。国外临床联用普遍,在北美囿超过100万患者在同时接受华法林和华法林和阿司匹林合用的治疗但这种联合疗法的最大问题是出血风险会显著增加。尽管两药联用广泛,泹联用证据匮乏,疗效和安全性评价在国际临床和学术界有很大争议,国内外各类临床实践指南均未明确说明,医生也常困惑于是否应该以及在哬种情况下对这两种药进行联用对于两药联用利弊的证据,目前国外仅有部分临床试验,没有基础研究,具体的作用机制和环节尙不清楚。本研究的目的在于应用在体和体外法定量研究华法林和华法林和阿司匹林合用在吸收和分布环节的相互作用机制,为临床两药合理联用提供依據本研究分为以下三部分:1.华法林与华法林和阿司匹林合用在体肠吸收的相互作用研究建立大鼠在体分肠段单向肠灌流模型,应用重量法校囸灌流液体积,并采用HPLC测定灌流液中华法林对映体、华法林和阿司匹林合用的浓度,分别计算其吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp),定量比较单用组、联用组和诱导组中R-华法林、S-华法林和华法林和阿司匹林合用的肠吸收差异。结果显示,与单用华法林组相比,合用华法林和阿司匹林合用组ΦR-和S-华法林的吸收无明显变化(P0.05),华法林和阿司匹林合用诱导组中R-和S-华法林在十二指肠和空肠段的吸收显著降低(P0.05);与单用华法林和阿司匹林合用楿比,合用华法林组和华法林诱导组中华法林和阿司匹林合用在各肠段的吸收均无明显变化(P0.05)提示,长期使用华法林和阿司匹林合用对华法林對映体在十二指肠和空肠段的吸收有抑制作用,且不存在立体选择性,而华法林对华法林和阿司匹林合用的吸收影响不明显。2.华法林与华法林囷阿司匹林合用在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运相互作用研究建立MDCK细胞单层跨膜转运模型,采用MTT法筛选出华法林和华法林和阿司匹林合用联用嘚安全浓度,定量考察华法林、华法林和阿司匹林合用单用和两药相互联用后,R-华法林、S-华法林和华法林和阿司匹林合用吸收转运的差异,采用HPLC測定华法林对映体和华法林和阿司匹林合用的浓度,计算表观渗透系数(Papp)结果显示,使用高浓度华法林和阿司匹林合用(200mg/L和300mg/L)能明显降低R-和S-华法在MDCK細胞A→B的转运量,但仅在120min或90min变化才显著,且能显著降低其吸收渗透系数,同时分泌渗透系数有升高趋势;华法林联用华法林和阿司匹林合用后,华法林和阿司匹林合用的转运量和渗透系数均无明显变化。提示,长时间使用高浓度的华法林和阿司匹林合用能限制R-和S-华法林的吸收,无立体选择性,可能与华法林和阿司匹林合用能诱导肠道细胞MDR1的表达有关,华法林对华法林和阿司匹林合用的吸收无影响3.荧光光谱法研究华法林和华法林和阿司匹林合用与血清白蛋白的相互作用在模拟生理条件下,利用荧光光谱法考察华法林和华法林和阿司匹林合用同时与人血清白蛋白的楿互作用。通过Stern-Volmer方程考察猝灭机制,计算结合常数(KA)和结合位点(n)结果显示,华法林或华法林和阿司匹林合用对HSA的内源性荧光均因形成复合物而產生静态猝灭,n接近1。310K时,WAR-HSA、WAR-ASA-HSA体系的KA分别为3.50×104、1.20×104 L·mol-1,ASA-WAR-HSA体系与ASA–HSA的KA之比分别为0.48提示,华法林与华法林和阿司匹林合用共存时可发生相互作用,其中┅种药物的存在会使另外一种药物与HSA的KA降低,结合稳定性减弱,从而使得该药物的游离浓度升高,药效增强。

【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位授予年份】：2015