支原体检测试剂盒-公司动态-上海翊圣生物科技有限公司
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支原体检测试剂盒
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR支原体检测试剂盒产品信息产品名称产品编号规格&储存价格（元）促销价（元）GMyc-PCR Mycoplasma Test KitGMyc-PCR支原体检测试剂盒40601ES1010 assays-20℃1120.00 889.00 40601ES2020 assays-20℃1764.00 1409.00 产品描述细胞培养是生命科学研究中常用的实验手段。不像其它常用的实验方法，细胞培养是一个动态的连续过程，细胞通常会对操作失误或污染物有所反应，这些反应往往表现出不正常的细胞状态或培养基外观。如果受到支原体污染时，细胞形态较之无明显变化，极易被忽视，往往直到污染非常严重时才能发现。受污染的细胞膜上可能有几百个支原体，这些支原体竞争营养并释放有毒的代谢产物，严重影响实验结果。研究表明，至少二十多种支原体能污染细胞，其中最常见的有：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）、发酵支原体（M. fermentans）、人型支原体（M. hominis）、唾液支原体（M.salivarium）、肺支原体（M.pulmonis）和梨支原体（M.pirum）等。培养细胞的支原体污染率在4%-92%不等，其污染来源包括工作环境、操作者本身（一些支原体是人体的正常菌群）、培养基、血清、细胞交叉污染、实验器材和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。确认细胞培养过程中出现问题的潜在原因是一项困难且耗时的任务，在细胞培养中，任何突然的变化都应该被怀疑，同时良好的试验规范和定期检测支原体污染也十分必要。支原体检测的方法有很多种，如直接培养、DNA荧光染色、ELISA和PCR法等。GMyc-PCR支原体检测试剂盒主要采用PCR方法对各种生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。它综合了几个优势：灵敏、特异、快速并且可以用直接用细胞培养上清液检测。本制品通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体，所用引物为根据支原体16S-23S rRNA序列保守区域设计，只特异性扩增支原体DNA，检出灵敏度与特异性均较高。PCR扩增及电泳分析只需数个小时，操作方便简单。产品组分编号组分产品编号/规格40601ES1040601ES2040601-AGMyc-1st PCR Mix250&l2×250&l40601-BGMyc-2nd PCR Mix250&l2×250&l40601-CPositive Control Template注1，220&l20&l注1：长期不用时，可-80℃冷冻保存。注2：PCR反应极其灵敏，为防止假阳性，加样时，最后加阳性对照。运输与保存方法冰袋运输。-20℃保存。实验流程此PCR反应为巢式PCR，第一轮PCR结束后，取其反应产物为第二轮PCR模板。根据两轮PCR产物电泳条带之有无及片段大小来分析结果。贴壁细胞培养3-6天后，直接取其上清液进行PCR反应。为排除细胞培养基抑制PCR反应，阳性对照中需加入等量的细胞上清液。悬浮细胞不能作为样品直接检测，会干扰PCR反应，需提取DNA并进行PCR。第一轮PCR：充分融解GMyc-1st PCR Mix，按下列表格配制反应液：试剂实验组阳性对照阴性对照GMyc-1st PCR Mix25&l25&l25&l样品4&l4&l&ddH2O21&l20&l25&lPositive Control Template注1&1&l&注1：为防止Positive Control Template污染，请将实验组和阴性对照组加完以后，最后再将Positive Control Template加入阳性对照组。2.&&&&&&& &按下列条件进行PCR反应：94℃&&&&&&&& 5 min94℃&&&&&&&& 30 s55℃&&&&&&&& 1 min&&&& 30~35 cycles72℃&&&&&&&& 1 min72℃&&&&&&&& 7 min第二轮PCR：充分融解PCR Mix，按下列表格配制反应液：试剂实验组阳性对照阴性对照GMyc-2nd PCR Mix25&l25&l25&lddH2O24&l24&l24&l1st PCR反应液1&l1&l1&l2.&& 按下列条件进行PCR反应：94℃&&&&&&&& 5 min94℃&&&&&&&& 30 s55℃&&&&&&&& 1 min&&&& 30~35 cycles72℃&&&&&&&& 1 min72℃&&&&&&&& 7 min反应结束后，取10&μl 的PCR反应液（不需要加loading buffer）直接进行1.5%琼脂糖凝胶电泳，确认PCR扩增产物。推荐使用频率新细胞进入实验室必检液氮保存前必检定期常规每月检测一次发现污染后每周检测一次发现细胞异常随时检测注意事项1）使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。2）操作时应尽量少说话，因口腔中也含有支原体，可能引起样品污染，而造成假阳性；整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行，以避免交叉污染。3）实验时，试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀（混匀时禁止激烈振荡，只需要进行上下倒置多次进行混匀）。4）反应管中加好所有的试剂后，应尽快上PCR仪进行扩增，以免形成过多的二聚体。5）细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度，建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。6）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。附录各种支原体扩增片段大小Species第一轮PCR第二轮PCRM. hyopneumoniae& 681237M. neurolyticum501196M. fermentans491195M. pulmonis 477189M. hyorhinis 448211M. orale& 423179M. capricolum&& 415179M. arthritidis&& 408157M. salivarium&&& 403151M. hominis&&& 370,369147,148M. arginini& 369145U. urealyticum 482,481154相关产品产品编号产品名称规格价格（元）促销价（元）40601ES10GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit 10 assays1120.00 889.00 40601ES20GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit 20 assays1764.00 1409.00 40602ES09GMyc-1& Antibiotic Solution (100×) 4×1.5ml249.00 199.00 40602ES12GMyc-1& Antibiotic Solution (100×) 8×1.5ml439.00 349.00 40602ES56GMyc-1& Antibiotic Solution (100×) 40×1.5ml1706.00 1369.00 40603ES09GMyc-2 Antibiotic Solution (100×) 4×1.5ml169.00 139.00 40603ES12GMyc-2 Antibiotic Solution (100×) 8×1.5ml289.00 239.00 40603ES56GMyc-2 Antibiotic Solution (100×) 40×1.5ml1149.00 919.00 40604ES09GMyc-3 Antibiotic Solution (100×)& 4×1.5ml269.00 209.00 40604ES12GMyc-3 Antibiotic Solution (100×)& 8×1.5ml479.00 389.00 40604ES56GMyc-3 Antibiotic Solution (100×) 40×1.5ml1959.00 1569.00 40605ES02GMycSpray 支原体喷雾剂（即用型）500ml549.00 449.00 40605ES03GMycSpray 支原体喷雾剂（即用型）2×500ml979.00 789.00 40605ES08GMycSpray 支原体喷雾剂（即用型）10×500ml4169.00 3349.00 &
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荧光PCR及培养法检测解脲支原体结果对比分析
目的：用荧光定量PCR及培养法检测解脲支原体，对两种方法的检测结果进行分析比较。方法收集856例女性患者的宫颈分泌物样本，分别用荧光PCR及培养法检测样本中的解脲支原体。结果856例样本荧光PCR法检测出351例解脲支原体阳性，阳性率达41%，351例荧光PCR检测阳性的样本中67例培养法检测阴性；培养法检测出289例解脲支原体阳性，阳性率达33.7%，其中有5例培养法检测阳性样本用荧光定量PCR检测为阴性；两种方法检测均为阳性284例。两种方法的阳性检出率有显著差异（P&0.05）,荧光PCR的阳性检出率明显高于培养法。结论荧光PCR敏感、特异、快速，培养法不需要特殊设备，操作简单，同时还可做药敏试验，建议临床根据不同目的，结合荧光PCR和培养法检测解脲支原体，克服了各自单独使用的弊端，提高对解脲支原体感染的检测水平。
作者单位：
广东 518101 广东省深圳市宝安区人民医院检验科
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采纳率：32%
还是阳性就继续吃药。在你月经的第四天服药。
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