抗生素类药物和人血清白蛋白相互作用的研究--《山西大学》2012年硕士论文
抗生素类药物和人血清白蛋白相互作用的研究
【摘要】：有关药物小分子与生物大分子方面的研究,是生物化学领域的重要研究内容,特别是血清蛋白与药物分子相互作用方面,研究甚为广泛。作为生物体血浆中含量最丰富的运输蛋白质,血清白蛋白具有维持血液胶体渗透压,清除自由基等生理学和药理学功能。它可以存储和运输许多内源性和外源性物质如氨基酸、阴阳离子、类固醇激素、药物等。因此,在毒理学和药代动力学上,对于药物等小分子与SA的相互作用机理的研究,具有十分重要的意义。本论文综合利用荧光光谱法、高效液相色谱法对药物小分子与血清蛋白相互作用进行研究。
第一章：抗生素药物与人血清白蛋白相互作用的文献综述。介绍了抗生素药物的定义及分类,人血清白蛋白的晶体结构及功能特点,并详细叙述了研究药物小分子与蛋白质相互作用所采用的方法,以及各种方法的原理。因抗生素药物发挥药效均需通过血清白蛋白的贮存与运输,到达受体部位,进而发生药理作用,所以研究抗生素药物与人血清白蛋白相互作用,对新药研发、配伍禁忌等方面提供参考。
第二章：在pH=7.30的Tris-HC1缓冲溶液,运用荧光光谱法研究了头孢哌酮(CPZ)和乳酸环丙沙星(CFLX)单独存在与同时存在时和人血清白蛋白(HSA)的相互作用机理,实验结果表明,头孢哌酮、乳酸环丙沙星单独与HSA相互作用时,药物与蛋白荧光的猝灭属于静态猝灭,测定了20℃和37℃时头孢哌酮、乳酸环丙沙星与HSA结合常数分别为(O.18X103L·mol-1,0.11X103L·mol-1)和(1.79X103L·mol01,0.42X103L·mol01)、热力学参数平均值(△HCPZ=-20.4kJ·mol-1,△HCFLX=-60.3kJ· mol-1)、作用位点数nCPZ (0.63和0.57),nCFLX(0.65和0.75)。本章还研究了头孢哌酮、乳酸环丙沙星共存时与HSA的相互作用。结果表明,头孢哌酮与乳酸环丙沙星之间存在相互作用,使得药物与蛋白间的结合常数增大,结合稳定性升高,游离药物含量减少,造成药效降低。
第三章：通过对色谱条件的选择及优化,建立了采用高效液相色谱-荧光检测分析法测定阿莫西林。本文所建立的样品分析方法线性范围为2.5μ g/ml～2000μ g/ml,线性回归方程：Y=1.5×106X+29.105,相关系数r=0.9995；日内和日间RSD5.0%。与药典中高效液相色谱-紫外检测分析方法相比,线性范围更宽,检测限相当,响应时间短,方法更准确、可靠。
第四章：运用测定药物游离浓度的方法——超滤法,结合高效液相色谱荧光检测分析法对阿莫西林与人血清蛋白的结合率进行测定分析。经实验结果表明：阿莫西林与人血清白蛋白在20.0.50.0.80.0.120.0μ mol/L下的血浆蛋白结合率分别为37.5%、39.7%、36.15%、34.53%。同时测定了阿莫西林与人血清白蛋白相互作用的结合常数为0.679×103,结合位点数为1.04,与文献中采用荧光猝灭法测定的结果基本相符。
第五章：用紫外可见吸收光谱、荧光光谱研究了羟丙基-β-环糊精与头孢噻肟的包合作用。利用荧光光谱法测定了35℃、45℃和55℃下,羟丙基-β-环糊精对头孢噻肟的包合稳定常数为84.4L.mol-1,60.8L·mol-1,45.6L·mol-1,包合比为1：1。并探讨了pH为4.0,5.0,6.5,7.5时HP-B-CD与头孢噻肟的包合常数为31.9L·mol-1,29.8L·mol-1,32.8L·mol-1,17.3L·mol-1。从实验结果可以得知：羟丙基-β-环糊精对头孢噻肟的包合效果不理想。
【关键词】：
【学位授予单位】：山西大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2012【分类号】：R96【目录】：
中文摘要10-12ABSTRACT12-15第一章 绪论15-37 1.1 抗生素药物概述15-18
1.1.1 抗生素药物的定义及分类15
1.1.2 抗生素药物的作用机理及联合应用15-18 1.2 人血清白蛋白(HSA)18-20
1.2.1 人血清白蛋白的结构18-19
1.2.2 人血清白蛋白的功能特点19-20 1.3 药物-蛋白相互作用的研究方法20-25
1.3.1 常规方法20-21
1.3.2 光谱法21-24
1.3.3 色谱法24-25 1.4 药物与蛋白相互作用的研究内容25-28
1.4.1 药物与蛋白的结合常数和结合位点数25-27
1.4.2 药物与蛋白的相互作用力27-28 1.5 本论文的立题背景以及研究内容28-29
1.5.1 立题背景28
1.5.2 研究内容28-29
1.5.3 创新之处29 参考文献29-37第二章 头孢哌酮、乳酸环丙沙星同时与人血清白蛋白分子作用的荧光光谱研究37-49 2.1 前言37-38 2.2 实验部分38-39
2.2.1 试剂与仪器38-39
2.2.2 实验方法39 2.3 结果与讨论39-46
2.3.1 CPZ(CFLX)与HSA的荧光光谱研究39-40
2.3.2 猝灭机理及结合位点和形成常数的确定40-44
2.3.3 头孢哌酮、乳酸环丙沙星分别与HSA之间相互作用力的确定44
2.3.4 头孢哌酮和乳酸环丙沙星对HSA-CFLX,HSA-CPZ体系的影响44-46 2.4 结论46 参考文献46-49第三章 高效液相色谱荧光检测分析法测定阿莫西林49-59 3.1 前言49-50 3.2 实验部分50-51
3.2.1 仪器及试剂50
3.2.2 实验方法50-51 3.3 实验结果及讨论51-57
3.3.1 阿莫西林的荧光光谱51-52
3.3.2 色谱条件的选择52-56
3.3.3 线性范围和灵敏度56-57
3.3.5 精密度和加标回收率57 3.4 小结57-58 参考文献58-59第四章 超滤法-HPLC测定阿莫西林血清蛋白结合率59-67 4.1 引言59 4.2 实验部分59-60
4.2.1 仪器与试剂59-60
4.2.2 实验方法60 4.3 结果与讨论60-63
4.3.1 系统适应性试验60-62
4.3.2 阿莫西林的血浆蛋白结合率62
4.3.3 阿莫西林与人血清白蛋白结合位点及形成常数的确定62-63 4.4 结论63 参考文献63-67第五章 HP-β-CD与头孢噻肟包合作用研究的初探67-75 5.1 前言67 5.2 实验部分67-68
5.2.1 仪器和试剂67-68
5.2.2 实验方法68 5.3 结果与讨论68-74
5.3.1 头孢噻肟及包合物的吸收光谱特性68
5.3.2 头孢噻肟及包合物的荧光光谱68-70
5.3.3 热力学研究环糊精对头孢噻肟的包合作用70-73
5.3.4 pH值的影响73-74 5.4 结论74 参考文献74-75攻读学位期间取得的研究成果75-76个人简况及联系方式76-77致谢77-79
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