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同种异体骨植入材料的研制、产业化和应用研究
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甲醛固定源同种异体骨移植材料制备和移植的实验研究（原版论文）.pdf69页
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第一军医大学 硕士学位论文
甲醛固定源同种异体骨移植材料制备和移植的实验研究 姓名：陆云涛 申请学位级别：硕士 专业：人体解剖学 指导教师：原林 座机电话号码 甲醛固定瀑同种异体膏移植材料制■和移植的实狯研究 中英文对照缩略词表 of 化ommentary EnglishAbbreviation 英文缩写 英文全称 中文名称
ECM matrix Extracellular 细胞外基质
BMP Bone morphogenetic protein 骨形态发生蛋白
PLA acid Polyactic 聚乳酸
PGA acid Polygl3，colic 聚羟基乙酸
DBM Denaineralized bonematrix 脱钙骨基质
DMEM Dulbecco’S modifiedmedium eagle’S DMEId培养基
EDTAEthylenediaminetetra-aceticacid 乙二胺四乙酸
MTT 二甲基四氮唑溴盐 3一[4，5一Dimethylthiazolzy]一2，5-Diphenyl Tetrazolium Bromide
DMSO sulfoxide Dimethyl 二甲基亚砜
Opticaldensity 光密度
FCM Flow cytometry 流式细胞术
SEM electron Scanningmicroscope 扫描电子显微镜
PBS bufferedsaline Phosphate 磷酸盐缓冲液
PI iodide Propidium 碘化丙啶
ALP Alkaline 碱性磷酸酶 phosphatase 甲醛田定谦羁种异体骨移植材料制备和移植的实验研究 甲醛固定源同种异体骨移植材料制备和移植的实验研究 中文摘要 骨缺损的修复几个世纪以来一直是外科工作者不断研究的重要课
题。自体骨移植虽然得到普遍认同，但大面积的骨缺损无法取得足够的 自体骨，而同种异体骨移植材料和自体骨较为相近，具有人骨的三维孔
隙结构、更好的材料学和生物学特性，并在骨传导和骨诱导能力上更强，
具有很好的应用前景。但是目前所用的同种异体骨移植材料都是取自新
鲜人骨组织进行处理，材料的来源主要是死亡的尸体、意外截除的肢体，
来源相对较少。且死亡后的尸体不可避免带有一定病菌，不能保证骨组
织的质量。如何
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同种异体骨移植治疗成人瘤样病变
来源：《中国矫形外科杂志》 作者：田敏，高加智，孙磊，宁廷民，马青元
摘要: 【摘要】
［目的］评价同种异体骨移植治疗成人瘤样病变的临床效果。［方法］自1999年2月～2005年6月，采用同种异体骨移植治疗56例成人瘤样病变。［结论］采用同种异体骨移植治疗成人瘤样病变，经长期随访观察，效果良好，可代替自体骨植骨。
【关键词】 同种异体骨移植。...
专题推荐：
［目的］评价同种异体骨移植治疗成人瘤样病变的效果。［方法］自1999年2月～2005年6月，采用同种异体骨移植治疗56例成人瘤样病变。［结果］术后未发生明显免疫排斥反应。54例病人均获得随访，随访8～47个月，平均20个月。术后3～5个月（平均3.5个月）全部愈合，无患肢肿胀疼痛及功能障碍，无1例复发。［结论］采用同种异体骨移植治疗成人瘤样病变，经长期随访观察，效果良好，可代替自体骨植骨。
【关键词】& 同种异体骨移植；
瘤样病变；
　　瘤样病变在骨科中较常见，其治疗方法主要有病灶刮除植骨或加内固定术，本院自1999年2月～2005年6月收治56例瘤样病变病人，行病灶刮除+同种异体骨修复骨缺损，通过随访，疗效满意，现报道如下。
　　1& 临床资料
　　1.1& 一般资料
　　使用同种异体骨治疗的成人瘤样病变共56例。男31例，女25例；年龄18～46岁，平均26.8岁；其中骨囊肿26例，动脉瘤样骨囊肿11例，骨纤维异常增殖症9例，骨嗜酸肉芽肿10例。按部位分：肱骨近端12例，桡骨1例，骨盆5例，股骨近端16例，股骨远端12例，胫骨近端5例，胫骨远端6例，跟骨1例。44例因肿物或疼痛不适而就诊，12例因疼痛不适并合并病理性骨折就诊。囊腔最小3.5 cm&5.0 cm，最大8.5 cm&11.5 cm。116例曾行囊内药物注射治疗，效果差，转而求助于治疗。
　　1.2& 治疗方法
　　1.2.1& 同种异体骨制备
　　所有同种异体骨均来自本院骨库。术前将同种异体骨剪成2～4 cm碎松质骨粒，置入37 ℃庆大霉素生理盐水中复水，良好复水后，75%酒精浸泡30 min，双氧水及70 ℃生理盐水反复冲洗，置入37 ℃庆大霉素生理盐水中进一步复水备用。
　　1.2.2& 手术方法
　　手术在持续硬膜外麻醉或气管插管全麻下进行，术前根据影像学检查（X线片、CT等）结果准确定位，根据不同病变种类（动脉瘤样骨囊肿、骨纤维异常增殖症等）、不同的病变部位采取相应手术入路，充分显露病灶，对于并发病理性骨折的病例一般需根据骨折部位行适当内固定；钢板或髓内钉，本组中29例股骨中上段和1例肱骨中段患者应用钢板内固定，1例股骨中段患者应用髓内针。常规开较长的骨窗，便于彻底刮除病灶，应用50%氧化锌或石炭酸烧灼囊腔四壁，再用浓酒精或生理盐水彻底冲洗后，选择同种异体骨骨粒紧密地填塞于腔内，不留死腔；对于较大的骨缺损，可用异体腓骨或尺桡骨干作支撑固定，再用钢板内固定；也可用同种异体骨充填缺损处，并用自体大块髂骨骨板外盖病变处，尽可能缝合骨膜。常规放置引流，依次关闭切口。
　　1.2.3& 术后处理
　　患肢于功能位固定，上肢悬吊或支具外固定，骨盆及股骨近端病变患者术后卧床休息，可适当下床不负重活动。股骨以远患者术后行石膏托或支具外固定，抬高患肢，可适当下床不负重活动。常规应用抗生素4～6 d，6～8周去除外固定，逐步进行功能锻炼。使用髓内钉患者可适当提前进行功能锻炼，术后第2 d即可床上不负重活动。
　　2& 结果
　　2.1& 术后早期
　　早期49例体温在38 ℃以下，切口无红肿渗出，切口Ⅰ期愈合；7例术后体温超过38 ℃，持续3～7 d，有淡黄色渗出液，经抗生素、激素等治疗，1～3周后渗出液消失，切口愈合。
　　2.2& 随访结果
　　56例病人2例失访（因迁居外省），随访8～47个月，平均20个月。术后3～5个月，平均3.5个月愈合，无患肢肿胀疼痛及功能障碍，无1例复发。
　　3& 典型病例
　　患者，女，35岁，因劳累后右髋关节疼痛，不能站立，摔倒致患肢活动受限1 d住院。查体：右下肢屈膝、屈髋及外旋畸形，右髋各方向被动活动引起疼痛，右髋关节外侧压痛。右大转子上移，有叩击痛，右下肢纵向叩击痛。右下肢较左下肢短缩约2 cm。X线检查示：右股骨大粗隆及股骨颈基底部膨胀囊性变，骨皮质变薄，股骨颈基底骨折，骨折端嵌插。诊断：右股骨粗隆骨囊肿并股骨颈病理骨折（图1）。入院后第3 d在硬膜外麻醉下行病灶清除+同种异体骨+解剖钢板螺丝钉内固定术。术中见：右股骨粗隆骨囊肿已侵及股骨，呈蛋壳样。
　　图1典型病例：右股骨动脉瘤样骨囊肿合并病理性骨折X线片（略）
　　1a.术前正位片；1b.术前股骨正侧位片；1c.同种异体骨加钢板螺钉内固定术后61d.术后4个月移植骨与宿主骨完全愈合，骨囊肿治愈
　　4& 讨论
　　瘤样病变虽然属于骨组织良性瘤样病损，但严重降低骨骼的坚固性导致病理性骨折，其并非真正的，主要包括骨囊肿、动脉瘤样骨囊肿、骨纤维异常增殖症等。虽然儿童多发，但成年人的瘤样病变也并不少见。因瘤样病变一般无明显症状，或有轻微疼痛，故成年人的瘤样病变病程较长，病损一般较大，因此手术病灶刮除需植骨量较大。
　　骨科中在修复各种原因造成的骨缺损，通常取自体骨或异体骨作为移植修复材料，取自体髂骨时，骨量不足是困扰外科医生的主要问题之一，无法满足大量植骨的需要，而且大量取自体骨后常导致供骨部位的缺陷，增加病人的痛苦，增加感染机会，取骨处疼痛等缺点；取自体骨，还会延长手术时间，医疗费用也会增加，因此不易为病人所接受。同种异体骨具有生物学特性和形态结构与自体骨相近，可以长期储存等优点，是最常用的替代自体骨移植材料〔1〕。同种异体骨解决了大剂量植骨时骨来源问题，骨量丰富，保证了植骨的成功率，临床使用安全可靠，患者避免了取自体骨所致的损伤和痛苦，因此它是目前可供临床使用的较理想的植骨材料〔2〕。本组56例病人均采用同种异体骨治疗。
　　异体骨移植也有其特点，最常见的并发症是免疫排斥反应，主要属于Ⅳ型由T细胞介导的DTH；多发生在术后1～2周，临床表现为体温升高，局部肿胀、疼痛、渗出。适当对移植骨进行预处理可减弱其引发的宿主排异反应，提高治疗效果。用于降低其免疫原性的方法有很多比如低温冷冻，冷冻干燥、电离辐射、脱钙脱脂等〔3〕。采取低温冷冻或冷冻干燥方法保存同种异体骨，减弱移植骨的抗原性〔4〕，于移植前刮除不必要的软组织、骨膜及骨髓，用50 ℃ ～60 ℃生理盐水反复冲洗，这不但有助于去除骨髓脂肪等抗原成分〔5〕，不破坏移植物的骨诱导活性〔6〕，还可灭活潜在的病毒等〔7〕。3%双氧水可脱除移植骨颗粒表面部分蛋白，进一步减弱移植骨的抗原性，庆大霉素浸泡有助于预防感染〔8〕。本组49例术后均未见严重的免疫排异反应，有7例骨移植术后早期有少量淡黄色渗出液，经激素等药物治疗1～3周后渗出液消失，最终移植骨与宿主骨愈合良好。异体骨移植的第2个缺点是宿主骨爬行替代慢。移植物的转归均为爬行替代。同种异体骨爬行替代较慢。从骨的生成方面考虑，异体骨对新生骨形成仅起支架作用〔9〕。所以，术后早期适当的外固定还是必要的。
　　同种异体骨移植中最令人担忧的是疾病的传播，特别是HIV、或。作者选择髋关节置换切除的股骨头作为同种异体骨移植物，容易得到患者的同意，符合社会伦理，能够保证异体骨无菌，同时由于术前检查完善，病史采集详实，可进行仔细的供体筛选。因此，同种异体骨移植传播疾病和引起的危险完全可以得到有效的控制。就现代骨库而言，由于采取了诸如严格供体筛选、严格灭菌等措施，疾病传播的可能性几乎为零〔10〕。本院自使用同种异体骨以来，尚未发现有HIV或病毒性疾病传播、感染者。
　　关于防止术后复发。首先，术中彻底刮除病损组织以及对病灶腔壁的处理也非常重要，作者采用50%氧化锌或石炭酸渗透力非常强，可达骨质下6 mm，使蛋白质凝固，细胞变性死亡，并将骨面研磨至渗血，为启动骨再生过程，对促进异体骨吸收和新骨形成起着重要作用，从而减少复发率。其次，从文献上分析，早期采用自体骨治疗时，复发率高可能与植骨量不足也有关。由于同种异体骨丰富，使植骨彻底，使手术可达边缘性外科彻底治疗，大大降低了病变的复发率〔11〕。本组病例随访的54例病人，平均随访20个月，无1例复发，达到良好治疗效果。
【参考文献】
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　　〔11〕
田敏，刘勇，孙磊，等.同种异体骨移植治疗儿童骨囊肿［J］.中国矫形外科杂志,):.
作者单位：解放军第88医院全军骨科中心，山东泰安
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