豚鼠实验测心肌收缩能力细胞收缩变化所用仪器为什么

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猪抗体检测试剂盒采用间接ELISA法,在酶标板条微孔上预包被纯化的JEV病毒。在试验中,加入稀释后的待检血清,经过温育后,若样品中含有JEV病毒特异性抗体,
则与包被板上的抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物;
在微孔中加入TMB底物液,经酶催化形成蓝色产物,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值,吸光度A值与样品中猪乙脑病毒抗体的含量成正相关。
GPH4细胞豚鼠心肌来源细胞
技术的-操作要点
& & 优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.
本文将叙述板式注意要点,要详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果.
& & 1 标本的采取和保存
可用作 ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清),分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,粪便)等。均可作标本以测定其中某种抗体或抗原 成份.
有些标本可直接进行测定(如血清,尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物).大部分ELISA检测均以血清为标本 .血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,
其他成份均同等于血清.制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固,血块收缩后即可取得.除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本.
在ELISA中血浆和血清可同等应用.血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,
溶血标本可能会增加非特异性显色.血清标本宜在新鲜时检测.如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应.如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,
在间接法ELISA中可使本底加深.一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存.冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,
避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡.混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测.反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,
宜少量分装冰存.保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂.GPH4细胞豚鼠心肌来源细胞
2 试剂的准备:按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂. ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的.自配的缓冲液应用pH计测量较正.
& &从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用.试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存.
3 加样在 ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物.加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部 ,并注意不可溅出,不可产生气泡.
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