这是个机器人猖狂的时代，请输一下验证码，证明咱是正常人~基质金属蛋白酶在人乳腺浸润性导管癌组织不同成分中的表达及其临床意义--《吉林大学》2007年硕士论文
基质金属蛋白酶在人乳腺浸润性导管癌组织不同成分中的表达及其临床意义
【摘要】：
乳腺癌(Breast Cancer , BC)是妇女最常见的恶性肿瘤之一,其发病率占妇女肿瘤的31%,死亡率仅次于肺癌,居第二位。近年来我国乳腺癌患者在逐年上升,其侵袭和转移是造成患者死亡的主要原因。人们通过对肿瘤浸润和转移机制广泛研究后发现细胞外基质在肿瘤的浸润和转移过程中起关键性作用。而MMPs在这方面所起的作用,越来越受到人们的关注。
本实验着重于通过激光显微切割技术,分离乳腺浸润性导管癌组织中的实质与间质成分,分别提取总mRNA,进行RT-PCR反应。检测MMP-2与MMP-7 mRNA在乳腺浸润导管癌癌组织不同成分中的表达情况;并通过免疫组织化学方法检测MMPs家族成员MMP-2与MMP-7的蛋白水平表达。从而进一步探讨两种指标在乳腺浸润导管癌的转移、侵袭过程中及判断预后的作用及意义。
免疫组织化学实验的结果显示,MMP-2和MMP-7两种蛋白的阳性反应物均呈棕黄色颗粒,MMP-2和MMP-7表达阳性为肿瘤细胞浆及部分间质组织细胞浆染色呈棕黄色着色。在乳腺浸润性导管癌组织中MMP-2和MMP-7的阳性表达率分别为70.0 %(21/ 30)和73.3%(22/30)。MMP-2和MMP-7与组织学分级及有无淋巴结转移情况密切相关( P均 0.05),MMP-2和MMP-7的表达与年龄、肿瘤大小无关(P0.0 5)。
半定量RT-PCR实验结果显示方MMP-2和MMP-7 mRNA在正常乳腺组织匀浆中有少量表达;在乳腺浸润性导管癌组织匀浆中表达明显增高,二者间差异有显著性(P0.01)。在分化程度为Ⅱ、Ⅲ级的乳腺浸润性导管癌组织匀浆中MMP-2和MMP-7 mRNA的表达量明显高于分化程度为Ⅰ级的肿瘤组织,而分化程度为Ⅱ、Ⅲ级的肿瘤组织之间无显著性差异(P0.05)。在运用显微切割技术所分离出的肿瘤实质成分中两种基质金属蛋白酶的表达量显示,在分化程度为Ⅱ级的乳腺浸润性导管癌中MMP-2与MMP-7 mRNA的表达量最高,其次为分化程度为Ⅲ级的肿瘤实质成分,最后为分化程度为Ⅰ级的肿瘤实质成分,各组之间均存在显著性差异(P0.01)。而在乳腺浸润性导管癌间质成分中,MMP-2 mRNA表达量随着分化程度的加深而提高,各组间无显著性差异(P 0.05);MMP-7 mRNA在分化程度为Ⅱ级的浸润性导管癌间质成分中表达量最高,其次为分化程度为Ⅲ级的肿瘤实质成分,最后为分化程度为Ⅰ级的肿瘤实质成分,各组之间均存在显著性差异(P
0. 01)。另外,MMP-2和MMP-7 mRNA在的乳腺浸润性导管癌组织中的表达水平与有无淋巴结转移也存在着密切的关系,在有淋巴结转移的肿瘤组织匀浆、肿瘤实质成分及肿瘤间质成分中,MMP-2和MMP-7 mRNA的表达水平明显高于无淋巴结转移的对应组,二者之间差异有显著性(P
0. 01)。我们的实验结果显示MMP-2与MMP-7在肿瘤细胞的表达水平与全部肿瘤组织的表达并不同步,可为乳腺癌转移诊断及预后评估提供新的指标。
【关键词】：
【学位授予单位】：吉林大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2007【分类号】：R737.9【目录】：
内容提要4-6
英文缩写词6-8
1.基质金属蛋白酶(MMPs)9-12
2.激光显微切割(LMD)12-16
材料和方法16-24
一、实验材料16-18
（一） 主要试剂16-17
（二） 主要仪器17
（三） 溶液17-18
二、实验方法18-24
（一） MMP-2 与MMP-7 在乳腺浸润性导管癌组织中蛋白表达的测定18-20
（二） MMP-2 与MMP7 在乳腺浸润性导管癌组织中mRNA 表达的测定20-24
一、MMP-2 与MMP-7 蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达24-27
二、运用激光显微切割技术分离乳腺浸润性导管癌组织的不同成分27
三、MMP-2 与MMP-7 m RNA 在乳腺浸润性导管癌组织中的表达27-37
参考文献42-49
中文摘要49-52
英文摘要52-55
导师简介56
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京公网安备75号KHK的基因在癌细胞与正常肝组织中的表达有所不同_全讯网新2,sp全讯网 - 新全讯
KHK的基因在癌细胞与正常肝组织中的表达有所不同
肝癌是美国第十大最常见癌症，它是造成男性最常见癌症死亡的第五大原因，是造成女性最常见癌症死亡的第八大原因。今年，估计有39,230名美国成年人（其中包括28,410名男性和10,820名女性）将会被诊断出患有原发性肝癌，估计会有27,170人（其中包括18,280名男性和8,890名女性）将死于该疾病。近日，发表在《自然细胞生物学》杂志上，由休斯敦德克萨斯大学MD安德森癌症中心领导完成的一项研究表明，一种被称为KHK（己酮糖磷酸激酶或果糖激酶）的基因在癌细胞与正常肝组织中的表达有所不同。MD安德森癌症中心神经肿瘤学教授，资深作者Zhimin Lu表示，正常肝细胞催化葡萄糖和果糖发生反应产生能量、氨基酸和脂类。然而，我们发现，肝肿瘤停止使用果糖。因此，监测果糖代谢可能被用于肝癌诊断。&KHK-A对于肝肿瘤形成必不可少&果糖是一种天然存在于植物性食物中的糖。然而，在美国人的饮食当中，大部分果糖并非来自新鲜水果，而是来自于用来给软饮料和糖果增加甜味的大量果葡糖浆。KHK基因编码果糖代谢过程的一个激酶。激酶是可以使细胞转移磷酸的一种酶，而磷酸是产生能量和调节蛋白质的一个重要组成部分。健康肝细胞表达的KHK，可以产生激酶，有效地调节果糖代谢。但Lu教授及其同事发现，在肝肿瘤细胞KHK的表达变成了一类叫做KHK-A的，其产生的激酶调节果糖代谢的能力大大降低。他们还发现，KHK-A不仅产生调节血糖的激酶，还调节蛋白质代谢，而且蛋白激酶活性增强了肿瘤细胞DNA和RNA的合成。因此，该研究最近确认KHK-A对肝肿瘤形成至关重要，它不仅能够作为肝癌诊断的生物标志物，也可作为治疗的靶目标。Lu教授总结道：&我们的研究揭示了关于肝和肝肿瘤细胞是利用果糖的一个重要潜在机制，强调了在促进肿瘤发展过程中KHK-A蛋白所起的促进作用。&这是个机器人猖狂的时代，请输一下验证码，证明咱是正常人~}