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若干年前，张医生曾去过广东考察。广东人爱煲老火汤那是全国有名的，而且，他们会用各种各样的食物配合药材，慢火细炖，十分鲜美。一直对这个“煲”很感兴趣，忙里偷闲，就跑到当地一些菜馆尝鲜。有一次，去外面吃饭的时候，看见有鸡子煲的汤。鸡子就是公鸡的睾丸，广东人特别会补，知道以形补形，所以经常会在这里看见一些“另类”食物。出于好奇，就点了这道汤。张医生开始还想，鸡子汤会不会很腥呢？因为像、羊鞭之类的，都比其它一般的内脏要腥得多。而且，当时去的馆子是很普通的，所以心里也或多或少有点怀疑他们的“去腥”能力。结果，汤很快就上来了，应该是预先煲好的，最兴奋的是，那个汤非常鲜美，一点都不腥。后来就忍不住跑去厨房问大厨：“这个汤为什么一点都不腥，还那么有鲜味啊？”这师傅首先就问：“有没有觉得喝完这个汤以后，精神振奋了许多？而且身体觉得特别暖和？”当时张医生是晚上讲完课去的，累了一天，自然就疲乏了。听大厨说完，便停下来感受一下，身体确实是暖和多了，而且感觉到腰特别舒服，脑子也清醒了不少。他告诉说，这里边的秘密其实很简单，就是放了和去炖的。广东人做很腥味的菜，都喜欢放黄酒来去腥。重点就是这里边加的不是料酒，而是黄酒。料酒与黄酒的最大区别就在于：黄酒是一种饮料酒，而料酒是用30%?50%的黄酒做原料，另外再加一些香料和调味料。因此，用料酒炖这个鸡子，远没有用纯正的黄酒炖得香。选黄酒呢，您最好要用绍兴出的黄酒，这也叫地道，广东人都喜欢用绍兴酒来做菜。回到北京后，张医生正好碰到一个老是腰酸乏力，性功能不好的中年男性到门诊咨询，突然就想到这个鸡子。考虑到他病情并不严重，也没打算给他开太多付汤药服用，反而是让他一定去买新鲜大粒鸡子100克（2?3个左右），10克，锁阳12克，然后加上生姜5片，绍兴黄酒少许，炖个汤。当时，还跟他说了在广东喝这个鸡子汤后的感受，他也觉得很神奇，打算回家试试。过了一礼拜，他回了个电话说自己的精神确实好了很多，腰腿也有劲了，感觉特别精神！建议您在身体感觉特别乏力的时候，也炖来吃一吃，不仅能减缓衰老，更能让您身心焕发出年轻10岁的光彩。四季美食一点通　原料：鸡子100克，仙茅10克，锁阳12克，生姜5片，黄酒少许。方法：选用新鲜大粒鸡子，洗净；仙茅、锁阳、生姜洗净。把全部用料放入炖盅内，加黄酒、开水适量，隔水炖2?3小时，调味即可。用法：佐餐食用。功效：温肾壮阳。注意：感冒发烧患者慎服。
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134506人看过二仙汤对乳腺癌化疗性闭经的影响及其君药仙茅、淫羊藿对MCF-7细胞生长的作用--《广州中医药大学》2007年博士论文
二仙汤对乳腺癌化疗性闭经的影响及其君药仙茅、淫羊藿对MCF-7细胞生长的作用
【摘要】：
研究背景和目的
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。对于绝经前乳腺癌患者，绝大多数的联合化疗可致暂时性或永久性绝经。目前对于化疗性闭经(CIA)与乳腺癌预后间的关系仍然存在争议，但过早绝经所带来的负面作用却是显而易见的。乳腺癌预后相对较好，经有效的综合治疗后存活期逐渐延长，但在乳腺癌存活者中，绝经期症状是一个非常显著的问题。因为快速进入闭经状态，患者表现出的症状往往比正常绝经时更明显，带来许多健康问题，明显降低了乳腺癌患者的生活质量。而目前对于这部分患者，尚未有理想的推荐治疗方法。
对于非乳腺癌患者来说，激素替代疗法是缓解绝经症状的一种有效方法。但基于对乳腺癌病因及治疗的认知，医学界更多地认为雌激素和／或孕激素治疗对乳腺癌患者会引起较大的风险。因此，无论医师或乳腺癌患者本人对进行雌或孕激素治疗都持非常谨慎的态度。而三苯氧胺(TAM)为雌激素受体调节剂，对有正常生理周期的绝经前妇女是一种有效的抗肿瘤制剂。因此理论上联合雌激素与三苯氧胺治疗可能会减少绝经后症状同时降低雌激素所导致的肿瘤复发的危险。但目前的数据尚不足以确定这种方法可完全控制症状，尚须大样本的随机对照试验以确认其安全性。
中医药在长期的临床应用中，被证明对围绝经期综合征有较好的疗效。二仙汤就是针对围绝经期综合征在临床上反复筛选验证，最终研制出的以补肾为主的方剂。二仙汤全方由仙茅、淫羊藿、巴戟天、当归、知母和黄柏组成，逐渐成为常用的治疗更年期综合征的代表方。其中仙茅、淫羊藿是二仙汤中的君药，亦是临床中治疗围绝经期综合征的常用药物。但目前的研究对于二仙汤及其君药仙茅、淫羊藿对卵巢功能低下的作用机制尚未明了，对绝经前后妇女及实验动物性激素水平方面的调节，尤其是对血清E_2水平的影响，目前的研究结果尚不一致。由于其可能具有植物雌激素样的作用，在体内生物利用度的变化如何，对内分泌系统及全身是否有潜在的副作用，在减轻绝经相关症状的同时，对敏感人群是否会提高癌发生或促使癌转移，与TAM合用是否可以拮抗其对乳腺癌细胞的刺激等均需进一步研究。
故本研究的主要目的即是探讨补肾中药二仙汤对乳腺癌化疗性闭经的作用，并通过对其君药仙茅、淫羊藿单用或与三苯氧胺合用，作用于ER(+)人乳腺癌MCF-7细胞，了解其对乳腺癌细胞促增殖或凋亡的作用，以判断其应用于乳腺癌患者的安全性及有效性。
第一部分：二仙汤对乳腺癌化疗性闭经的作用
探讨中药补肾法及健脾益气法对乳腺癌化疗性闭经的影响。
本研究设计为回顾性临床同期非随机对照试验。共纳入151例绝经前患者，其中补肾法81例，健脾益气法70例。所有患者手术前均有正常月经，而在手术后予以标准方案化疗后出现闭经。分别给予补肾为主的二仙汤及健脾益气为主的四君子汤治疗6月，随访2年。比较两组患者服药后月经恢复情况及月经复潮间隔时间(化疗所致闭经至恢复正常月经周期间的间隔时间)，并以更年期综合征症状评分表评价患者治疗后更年期症状的变化情况。
补肾组中患者术后2年内月经复潮者比例为(50／81，61.7％)；而健脾组中患者月经复潮比例为(39／70，55.7％)。行COX回归分析提示：乳腺癌患者化疗后所致闭经，影响其恢复正常月经周期的主要因素有年龄、不同的中药治疗方法，以及化疗方案。考虑年龄及不同化疗方案的影响，接受二仙汤治疗的患者月经复潮的可能性为接受四君子汤治疗的患者的2.46倍[95％CI：1.538，3.929]。两组患者治疗后月经复潮时间的比较，并无明显差异(p＞0.05)。在改善潮热、出汗、烦躁绝经期症状方面，补肾组优于健脾组(P＜0.05)；而在减轻乏力、眩晕方面，健脾组效果较补肾组为强(P＜0.05)。在改善忧郁、失眠及关节痛方面，二组无明显统计学差异(P＞0.05)。
与健脾益气治法比较，二仙汤应用于乳腺癌CIA患者，可以明显改善患者潮热、出汗、烦躁等绝经期症状，但患者恢复正常月经周期的可能性增加。由于相对于未进行中药治疗的患者，亦可能有同样的作用趋势，进一步的研究应考虑行大样本、多中心研究，通过设计良好的临床随机对照研究或队列研究，并进行长期的随访，以进一步明确二仙汤在乳腺癌CIA患者间应用的安全性及有效性。
第二部分：仙茅、淫羊藿对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响
探讨补肾中药二仙汤中君药仙茅、淫羊藿单用或与TAM合用是否有促人乳腺癌MCF-7细胞增殖／凋亡的作用。
材料与方法
雌激素依赖性人乳腺癌MCF-7细胞以含10％小牛血清的RPMI-1640培养液培养，于实验加药前4天改用无酚红RPMI1640以洗脱细胞中残留的雌激素。设立空白、E2及TAM对照组，观察二仙汤中两位君药仙茅、淫羊藿颗粒剂及含药血清单用及联合TAM在不同剂量和作用时间下对MCF-7细胞生长的影响。应用MTT法观察细胞增殖情况，应用Annexin-V+PI双染法及流式细胞仪观察细胞凋亡情况。所有资料以均数±标准差表示，组间比较采用方差分析。以P＜0.05为有显著性差异。
仙茅、淫羊藿对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响因浓度的不同而不同：不同浓度的仙茅颗粒剂及含药血清对乳腺癌细胞MCF-7的促增殖作用均不明显(P＞0.05)。10~(-6)mol／L浓度时的淫羊藿对MCF-7细胞有一定的促增殖作用(P＜0.05)。但作用较E2为弱。仙茅、淫羊藿的浓度高于10~(-5)mol／L时，细胞生长受抑制(P＜0.05)，且随药物浓度的增加细胞生长抑制率增大。而浓度低于10~(-7)mol／L的淫羊藿对细胞促增殖作用不明显(P＞0.05)。不同浓度的仙茅、淫羊藿颗粒剂以及含药血清与TAM合用均未见明显的促细胞增殖作用(P＞0.05)。高浓度的仙茅颗粒剂及含药血清对MCF-7细胞生长有一定的抑制作用(P＜0.05)，20％的淫羊藿含药血清可以通过诱导MCF-7细胞凋亡而呈现抗乳腺癌的作用。20％的仙茅、淫羊藿含药血清与TAM联合使用可诱导MCF-7细胞的凋亡(P＜0.05)，且随剂量的增加，这种诱导作用也有所增强，表现出剂量-效应关系。
仙茅、淫羊藿与TAM联合作用于MCF-7细胞，无明显促细胞增殖的作用，高剂量的淫羊藿含药血清甚至有诱导细胞凋亡的作用。而中等剂量的淫羊藿颗粒可能有弱雌激素样作用，但可被TAM拮抗。提示仙茅、淫羊藿临床上在一定剂量范围内使用是安全的，尤其对ER(+)乳腺癌患者合并TAM治疗的情况下。从而为临床应用补肾中药治疗乳腺癌CIA提供了实验依据。但其正确的使用方法，包括剂量、作用时间等仍需进一步研究。
综上所述，本研究发现对于乳腺癌CIA患者，二仙汤为主的补肾治疗方法对于患者恢复正常月经周期，改善绝经期症状方面有一定的治疗效果。而通过对其君药仙茅、淫羊藿颗粒剂及含药血清在不同剂量下对乳腺癌MCF-7细胞生长影响的研究，初步可以认为临床上淫羊藿在一定剂量范围或仙茅、淫羊藿与TAM联合应用于乳腺癌化疗相关的闭经患者是安全的。从而为补肾中药二仙汤应用于乳腺癌患者提供了参考依据。
【关键词】：
【学位授予单位】：广州中医药大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2007【分类号】：R273【目录】：
中文摘要3-6
英文摘要6-13
临床研究部分:补肾中药二仙汤对乳腺癌化疗性闭经的影响16-22
研究目的16
研究方法16-17
实验研究部分:仙茅、淫羊藿对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响22-46
实验1:仙茅、淫羊藿颗粒剂对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响22-31
研究目的22
材料与方法22-24
实验2:仙茅、淫羊藿含药血清对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响31-39
研究目的31
材料与方法31-33
1.仙茅、淫羊藿颗粒剂对MCF-7细胞增殖的影响39-40
2.仙茅、淫羊藿颗粒剂与TAM联合作用对MCF-7细胞生长的影响40
3.仙茅、淫羊藿含药血清对MCF-7细胞增殖的影响40-41
4.仙茅、淫羊藿含药血清联合TAM对MCF-7细胞生长的影响41
5.高浓度仙茅、淫羊藿或联合TAM诱导MCF-7细胞凋亡的作用41-42
6.仙茅、淫羊藿颗粒剂与含药血清对MCF-7细胞增殖影响的异同42-44
7.今后进一步的研究方向及需要解决的问题44-46
参考文献48-53
乳腺癌CIA患者调查表53-57
综述1:乳腺癌辅助治疗对卵巢功能的影响及其与乳腺癌预后的研究进展57-68
综述2:乳腺癌治疗相关性卵巢功能低下的治疗现状68-74
综述3:补肾中药治疗绝经前后诸症的临床与实验研究进展74-80
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