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OD值表示抗体效价科学吗？急急急急
问题如题，请问抗体效价如何表示，我一开始是准备直接倍比稀释，得出抗体效价后直接表示的，但是问题来了，组内的抗体效价差异很大，比如说我用2的倍比稀释，最后得出的效价可能是：16 64 32等等，不好进行组间比较，我查阅了文献，有的文章说可以直接将血清稀释到一定的倍数，测定OD值，用OD值进行表示
那么我的问题是：用OD值表示抗体效价对具体的稀释倍数有要求吗？这样的表示方法科学吗？？？
打个比方说我做１０倍，１００倍，１０００倍稀释的时候，ＯＤ值可能都处于1.6-2.0之间啊，这该怎么确定呢，而且每组可能都有超过5个以上的数据，就会有5个以上的结果，组间比较效价差异的时候就会变得很困难的，所以我在看文献的时候看到有的就稀释到比如说2000倍，测定OD值分析差异，实验组的OD数据差不多在0.5左右，所以我奇怪对稀释度有没有具体要求的？还是必须保证OD在0.5左右的
我是第一次做抗体这块的 所以很多方面都不清楚，但是我看到论文中很多表示抗体滴度都是稀释一定倍数，OD0-1之间的，所以心存疑惑了
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扫描下载送金币本人看了很多论坛和资料,大多的elisa都是测未知抗原和抗体,因为我是从植物内混合蛋白质中测出目的蛋白的浓度,我们目前有需检测蛋白的相关抗原、自己免疫的多克隆的一抗和HRP-标记的二抗,是不是我们包被的时候用包被液倍比稀释抗原,并将需检测的蛋白也按照设定的1:20、1:40、1:80、1:160稀释后一起包被过夜?我在想我是不是可以认定我们有的这个抗原则为我们的标准品,然后来检测我们的蛋白.不甚感激~我们目前的设计流程是：1.包被抗原和待测蛋白 4℃过夜（抗原按照倍比稀释加入包被液为:10,5,2.5,1.25,0.625,0.25,0 单位是μg/ml 蛋白1:100稀释都加入)2.第二天弃液,PBST洗板3次,拍干3.每孔加入3％BSA封闭至满孔,37℃湿盒湿育 2h4.洗版,5.每孔加入稀释好的一抗（1:80）100μl,37℃湿盒湿育 2h6.洗版,7.每孔加入辣根酶标记的IgG(1:ul,37℃湿盒湿育 1h8.9.每孔加入100ul底物反应液（现用现配）暗反应15min10.加入50μl 2MH2SO4 停止反应上机在450nm下测标曲并读值.目前的问题是：如何能确定我们蛋白的最佳稀释浓度,和一二抗的最佳工作浓度?
具体做法要看你的实验设计,是要做夹心ELISA还是间接ELISA. 看你的描述应该是夹心法: 包被单抗到孔板上,然后加抗原标准品和未知样品孵育, 然后加HRP标记的二抗,最后TMB显色.所以你第一步应该是包被液稀释你的一抗,过夜包被,第二天BSA做封闭, 然后测样品.建议楼主动手前先了解一下基本的ELISA技术知识. 请用google搜索引号内的内容: "Technical Guide for ELISA filetype:pdf" 补充: 你这种方式是直接ELISA,也是最不靠谱的一种方法. 如果你们坚持这样做的话...1. 标准品和样品的最佳稀释度,这个得做实地测试,看看待测蛋白的信号是个什么水平,再做调整2. 一二抗的稀释度, 你需要做一个滴定, 比如,给定一定量的标准品,测试1:1000 到1:10000 的一抗和二抗组合,看看那个组合信号高, 同时背景低.
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我觉得我姐好像有心理问题，她经常不高兴，处于悲观状态，认为全世界都在与她做对，只有她自己是正确的[其它问题]咨询次数：1浏览：30好评系数：0第1次咨询我姐在上大学期间以及上高中期间都与同学有过冲突，但是都说是被同学欺负，然后被孤立，现在上班有与同事发生冲突，工作也干不好，她学的是环境艺术，但是是大专生，现在干的却是会计，她把希望寄托于父母，希望家人去学习会计然后教她，她极度缺乏自学能力，比如说，你问他为什么不这样做，他就会说，又没有人教我。但毕竟我们不能事事教她，这种情况下该怎么办你好，欢迎到访。很理解你关心姐姐的心情。但这是......查看完整解答，请先或此次回复获来访者评价：未评价本案例最近访客数据加载中...
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