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肝特异性条件性可调控的Cre重组酶转基因小鼠品系的建立和肺癌的methylome研究.pdf80页
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硕士学位论文
肝特异性条件性可调控的Cre重组酶转基因小鼠品系的建立和肺
癌的methylome研究
姓名：周小羽
申请学位级别：硕士
专业：病原生物学
指导教师：朱景德
肝特异性，条件性可调控性的Cre／LoxP位点特异性重组酶系统转基因小鼠，
是研究正常发育中和肝癌发病过程中肝细胞谱系invivo基因功能的必要前提。
就肝细胞特异性而言，已有以白蛋白启动子或LAP启动子驱动Cre酶基因的肝
细胞特异性剔除小鼠模型，但这类小鼠模型尚无法有效地避免渗漏表达及发育相
关基因被敲除引起的胚胎致死等缺点。
因此，本项目将联合运用肝特异性启动子LAP控制的tet．off诱导系统在转
录水平及Tamoxifen激活系统对Cre重组酶活性在蛋白相互作用水平上尝试建
立高效的肝特异性，条件性可调控Cre．ERT2转基因小鼠。
为此，我们将前期构建好的转录和转录后水平双重调控的肝特异性表达Cre
重组酶的载体导入小鼠ES细胞，得到15只可稳定遗传该基因系统的转基因小
告小鼠杂交，通过RT-PCR和LacZ染色的方法检测转基因小鼠的Cre重组酶活
性的肝特异性、Dox和Tamoxifen的可调控性。通过子代基因型和表型的研究，
我们可能获得了两只肾特异性表达Cre．ERT2的小鼠品系，但并没有获得肝特异
性的剔除小鼠。这可能与LAP启动子的肝细胞特异性有限和转
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