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EMMPRIN在人肝癌细胞SMMC-7721中对多药耐药的调节作用pdf.pdf38页
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EMMPRIN 在人肝癌细胞SMMC-7721 中
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对多药耐药的调节作用
对多药耐药的调节作用
对对多多药药耐耐药药的的调调节节作作用用
目的：采用两种方法构建人肝癌多药耐药细胞模型，封闭其EMMPRIN（CD147）基因的
表达研究其生物学特性。探讨EMMPRIN 在肝癌细胞中对多药耐药的作用。
1..应用人肝癌细胞株SMMC-7721，采用浓度梯度诱导法和高浓度阿霉素间接诱导法构建人..
肝癌多药耐药细胞模型（7721/Adm 和7721/Adm 细胞）。
2.将EMMPRIN-siRNA转染至两种耐药模型中，应用RNA干扰（RNAi）技术封闭EMMPRIN
基因的表达，并设立对照组，构建封闭 EMMPRIN 基因表达的人肝癌多药耐药细胞
7721/Adm /RNAi 和7721/Adm /RNAi。
3.RT-PCR检测耐药细胞及亲本细胞的EMMPRIN、多药耐药基因1（multidrug resistance 1
gene ,MDR-1） mRNA 表达水平。
4.Western blot 检测耐药细胞及亲本细胞的EMMPRIN蛋白、P糖蛋白（p-glycoprotein ,P-gp）
的表达水平。
5.MTT 法检测耐药细胞及亲本细胞对多种化疗药物的敏感性。
1.成功采用两种方法构建人肝癌细胞 SMMC-7721 的多药耐药模型 7721/Adm 和
7721/Adm ，两种多药耐药模型均表现出稳定的多药耐药性，可用于肝癌多药耐药研究。
以上三组细胞内均有内源性EMMPRIN 的表达，但两组耐药细胞中EMMPRIN mRNA 及其
蛋白表达水平较
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富硒蚕蛹氨基酸诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的研究
摘　要：目的研究富硒蚕蛹氨基酸对人肝癌细胞SMMC-7721的作用.方法以人肝癌细胞SMMC-7721为模型,采用原子荧光分光光度计测定蚕蛹硒含量,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长及活力,用倒置荧光显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪研究细胞的凋亡及细胞周期变化.结果①陕西紫阳县蚕蛹中硒的含量为普通蚕蛹硒含量的215倍,②富硒蚕蛹氨基酸在0.5、1.5和2.5 μmol·L-1硒浓度下能显著性抑制肝癌细胞生长,并具有浓度和时间依赖性.亚硒酸钠对细胞生长的抑制作用不如富硒蚕蛹氨基酸.相反,普通蚕蛹氨基酸促进细胞的生长.③富硒蚕蛹氨基酸作用于细胞后,倒置荧光显微镜观察到细胞形态学变化及细胞存活率降低.④流式细胞仪检测到0.5、1.5和2.5 μmol·L-1富硒蚕蛹氨基酸所致细胞凋亡及细胞周期的变化,该氨基酸能阻滞SMMC-7721的细胞周期于G2/M期,使G2/M期细胞比例增加,而G0/G1期细胞比例下降.结论富硒蚕蛹氨基酸能诱导SMMC-7721细胞的凋亡,其抗癌机制可能与其改变细胞周期进而诱导细胞凋亡相关联.
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