第12章抗生素类药物溶液的分析

第┿一章 抗生素类药物溶液的分析,第一节 β–内酰胺类抗生素,第二节 氨基糖苷类抗生素,第三节 四环素类抗生素,抗生素的定义,抗生素是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。,抗生素的来源,1. 生物合成（发酵） 2. 化学合成或半合成,抗生素质量的复杂性,产品稳定性差,分子结构大多不稳 定降解后疗效下 降、失效或增加毒 副作用,发酵过程不易控制 易受污染,生产工艺复杂,发酵液中杂质,无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降解产物、色素、热原、毒性物质,增加 异常毒性、细菌内毒素、热原、 降压物质、无菌,[检查],含量测定方法,（一）生物学方法,测定抗生素抑菌或杀菌的能力,（二）化学及物理化学方法,以理化方法测定主药含量,抗生素的活性以效价单位來表示,每ml或每mg中含有某种抗生素的有效成分的多少，用单位（u）或g 表示 1mg青霉素G钠盐定为1667单位 1mg青霉素G钾盐的单位（u） 1595u/mg,分类（按结构与性质） β–内酰胺类、氨基糖苷类、 四环素类、大环内酯类、 氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、其他抗生素类,,,,第一节 β–内酰胺类抗生素,C,H,青霉素,（青霉素钾、钠）,,氨苄西林 （氨苄青霉素）,,阿莫西林 （羟氨苄青霉素）,,普鲁卡因青霉素,头孢氨苄,,头孢拉啶,,头孢羟氨苄,,头孢噻吩鈉,,,,一、结构特点与性质,,与碱金属Na、K成盐易溶于水,（一）羧基酸性,与有机碱普鲁卡因成盐难溶于水,,普鲁卡因青霉素,,（二）手性C 旋光性,头孢菌素类 C6 C7,青霉素类 C3 C5 C6,,（三）共轭体系 UV,头孢菌素类 母核有共轭体系,青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基,,（四）β–内酰胺环,水溶液 不稳定,干燥纯淨 稳定,不稳定性因素,,四元环张力大,酰胺键易水解,例,青霉素的降解反应,（一）呈色反应,1. 羟肟酸铁反应,β-内酰胺类,二、鉴别试验,（红、棕、褐）,,,2. 茚三酮反应 α-氨基,,,3. 双缩脲反应,似肽键,4. 与重氮苯磺酸反应 头孢哌酮,酚羟基,5. 与变色酸-硫酸反应,青霉素 阿莫西林 氨苄西林,,显色,1. 头孢他啶 聚合物 HPLC法 头孢曲松钠 头孢哌酮钠 头孢噻肟钠 头孢呋辛酯 有关物质和异构体 HPLC法 青霉素钾（钠） 吸收度 紫外分光光度法,第二节 氨基糖苷类抗生素,链霉素 双氢链霉素 新霉素 卡那霉素 庆大霉素 巴龙霉素,链霉胍 链霉糖 N-甲基-L-葡萄糖胺,,,链霉胍,链霉糖,N-甲基-L- 葡萄糖胺,,,,链霉胍,链霉糖,N-甲基-L- 葡萄糖胺,绛红糖胺 脱氧链霉胺 硫酸链霉素在过酸或过碱条件下易 水解失效 庆大霉素性质稳定,3. 氧化还原性,,二、鉴别,1.茚三酮反应 羟基胺结构,△,2.N-甲基葡萄糖胺反應,3. 麦芽酚反应,链霉素特征反应,8-羟基喹啉,4. 坂口反应 链霉胍特有反应,α-萘酚,,,,,,H,5. 硫酸盐鉴别,6. 紫外分光光度法,7.色谱法,三、特殊杂质检查,（一）链霉素雜质,链霉素B（甘露糖链霉素）,1.来源 反应中间体 2.方法 TLC中的对照品法（BP）,发酵菌种不同 工艺差别,规定控制各组分的相对百分含量,（二）庆大霉素C组分的测定,,四、含量测定,微生物检定法 各国药典主要采用,HPLC法 常用于体内药分,第三节 四环素类抗生素,,四环素（TC）tetracycline,,土霉素 OTC oxytetracycline,,多西环素 DOXC doxycycline,脱氧土霉素,,,,,一、结构与性质,（一）两性,1. 与酸、碱均能成盐,2.强酸或强碱中溶解度↑,（三） UV和荧光性质,（四） 与金属离子络合,pH3 7.5 荧光,（二） 旋光性,（五）鈈稳定性,1.差向异构化,淡黄→黑,蓝色荧光,,,差向四环素,,,,,（土霉素、多西环素不易差向异构化）,2. 降解反应,（1）酸性下降解,,,λmax 445nm,λmax 435nm,橙黄色,脱水金霉素,脫水四环素,四环素 金霉素,＜,2,pH,,（2）碱性下降解,,二、鉴别试验,（一）浓H2SO4反应,（二） FeCl3反应,（三）氯化物反应 （四）比旋度 美他环素除外 （五）紫外吸收 （六）荧光 （七）薄层色谱,,三、特殊杂质检查, 4-差向四环素（ETC） 脱水四环素（ATC） 差向脱水四环素（EATC） 盐酸金霉素（CTC）,HPLC法（2005版）,（一）鹽酸四环素中有关物质检查,（二）吸收度,lmax490nm A≤0.20,盐酸土霉素,杂质吸收度,取供试品配成每毫升10mg/ml的溶液至4cm的吸收池中，在530nm处测定其吸收度不得超過0.12。,应严格控制温度和时间,,四、含量测定,HPLC法,盐酸四环素的测定 系统适用性试验盐酸四环素、有关 物质及ATC峰间的 分离度均应符合要 求 定量方法外标法以峰面积计。,

第十一章 青霉素 氨苄西林（氨苄圊霉素） 阿莫西林（羟氨苄青霉素） 头孢拉定 头孢羟氨苄 （二）手性C 旋光性 （三）共轭体系 UV 青霉素类母核无明显UV多数有苯环取代基 头孢菌素类 母核有共轭体系 （四）β–内酰胺环 链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a oxytetracycline 多西环素 (DOTC) doxycycline 第十一章 复習内容 1. 熟悉抗生素类药物溶液分析的特点及其 常规检验项目。了解抗生素类药物溶液的分析现状熟悉生物学法与物理化学法测定效价的原理及优缺点。 2. 掌握β－内酰胺类抗生素的结构、 性质、鉴别及含量测定。 下列哪个药物会发生羟肟酸 铁反应 A. 青霉素 B. 庆大霉素 C. 红霉素 D. 链霉素 E. 维生素C 中国药典(1995年版)测定头 孢菌素类药物的含量时多数采用的方法是 A. 微生物法 B. 碘量法 C. 汞量法 D. 正相高效液相色谱法 E. 反相高效液相色谱法 屬于?-内酰胺类的抗生素药物有 A. 青霉素 B. 红霉素 C. 头孢菌素 D. 庆大霉素 E. 四环素 能和茚三酮发生呈色反应的物质有 A．链霉素 B．庆大霉素 C．土霉素 D．氨基酸 E．苯巴比妥 青霉素类药物可用下面哪些方法测定 A. 三氯化铁比色法 B. 汞量法 C. 碘量法 D. 硫醇汞盐法 E. 酸性染料比色法 能发生重氮化一偶合反应的忼生素类药物溶液是 A. 青霉素 B. 庆大霉素 苄星青霉素 盐酸四环素 E. 普鲁卡因青霉素 以下反应可适用的药物 A. 青霉素 B. 链霉素 C. 两者均能 D. 两者均不能 Kober反应 羥肟酸铁反应 坂口反应 N—甲基葡萄糖胺反应 在酸性溶液中水解 可以鉴别的药物是 A. 链霉素 B. 庆大霉素 C. 两者均可 D. 两者均不可 用Kober反应 用坂口反应 用麥芽酚反应 用三氯化铁反应 用茚三酮反应 问题 A. 茚三酮反应 B. 麦芽酚反应 C. 坂口反应 D. FeC13反应 E. 羟肟酸铁反应 头孢唑林钠 金霉素 链霉素 庆大霉素 青霉素 ㈣环素在酸性条件下的降解产物是 A. 差向四环素 B. 脱水四环素 C. 异四环素 D. 去甲四环素 E. 去甲氧四环素 一、 （二）手性C （三）共轭体系 （四）β–内酰胺环 四、 含量测定 ChP、USP HPLC法（外标法） 系统适用性试验 1. 防护柱 2. 预试溶液 4-差向脱水四环素 四环素 3. RSD≤2.0% JP 比色法（标准曲线法） 标 △ 样 △ 原理 3. 掌握氨基糖苷类抗生素的结构、性 质及鉴别，了解其检查及含量测定 4. 掌握四环素类抗生素的结构及性质了解其鉴别、检查及含量测定 5. 了解抗生素类药物溶液的质量考察方法 D A B B C D A A D C E D E A ABC 课 件 素 材 酸性 结构与性质 Na 与碱金属(Na+、