曲古菌素A对三唑类药物体外抗白念珠菌活性的增效作用及机制研究--《北京协和医学院》2013年博士论文
曲古菌素A对三唑类药物体外抗白念珠菌活性的增效作用及机制研究
【摘要】：第一部分曲古菌素A对唑类药物体外抗白念珠菌活性增效作用的研究
第一章曲古菌素A对唑类药物体外抗白念珠菌等常见病原真菌活性的影响
目的选择敏感性不同的白念珠菌菌株、组蛋白去乙酰化酶基因缺失株及其它常见病原酵母菌和丝状真菌,研究曲古菌素A对氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑抗白念珠菌等常见病原真菌的活性是否有增效作用。方法微量稀释法检测0.25μg/m1曲古菌素A与氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑分别合用时对白念珠菌敏感株、耐药株和常见病原真菌的最低抑菌浓度,并检测白念珠菌的最小杀菌浓度,检测组蛋白去乙酰化酶编码基因缺失株HDA1△和RPD3△对三种唑类药物的体外敏感性。结果0.25μg/ml曲古菌素A与氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑合用可不同程度地减少白念珠菌的拖尾现象,或表现为生长孔菌量减少,少数菌株的24h最低抑菌浓度降低,对最小杀菌浓度无明显影响；曲古菌素A不影响其它常见病原酵母菌和丝状真菌与唑类药物的体外敏感性；与同源株比较,HDA1△和RPD3△,体外敏感性增加。结论曲古菌素A对唑类抗真菌药物体外抗白念珠菌活性有增效作用,对其体外杀菌作用无影响。曲古菌素A与唑类抗真菌药物合用对除白念珠菌外的常见病原酵母菌和丝状真菌的体外敏感性无增效作用。组蛋白去乙酰化酶编码基因HDA1和RPD3可能与白念珠菌体外敏感性相关。
第二章曲古菌素A对唑类药物体外增效作用的机制初探
目的研究白念珠菌组蛋白去乙酰化酶编码基因的表达水平,以及组蛋白去乙酰化酶编码基因和外排泵基因在体内外获得性耐药形成过程中表达水平的变化。应用罗丹明123(Rh123)检测曲古菌素A对白念珠菌外排泵功能的影响。方法体外诱导白念珠菌对氟康唑耐药,收集药物作用前的白念珠菌和氟康唑环境下的体内外获得性耐药的白念珠菌。Trizol法提取白念珠菌RNA,白念珠菌ACT1作为内参基因,荧光定量RT-PCR检测白念珠菌临床株组蛋白去乙酰化酶编码基因HDA1、RPD3、 Hos1、HOS2、HOS3的表达水平,以及组蛋白去乙酰化酶编码基因和外排泵基因CDR1、CDR2、MDR1和FLU1在体内外获得性耐药形成过程中表达水平的变化。应用荧光染料Rh123处理白念珠菌,荧光分光光度计检测白念珠菌临床株、体外诱导耐药菌株在曲古菌素A作用下的荧光变化,以检验白念珠菌外排泵功能的变化。结果药物作用前,白念珠菌的组蛋白去乙酰化酶编码基因有不同程度表达,与菌株自身敏感性和曲古菌素A对菌株的增效作用无关；体内外获得性耐药形成过程中HDA1、RPD3、HOS1、HOS2和HOS3表达水平有不同程度增高,外排泵基因CDR1、CDR2、MDR1表达水平呈不同程度增加,LU1表达水平变化不明显。曲古菌素A对白念珠菌临床株短时间作用后,外排泵功能无明显变化,氟康唑／曲古菌素A诱导组的Rh123荧光值高于氟康唑诱导组的Rh123荧光值。结论组蛋白去乙酰化修饰可能是白念珠菌外排泵基因水平变化的上游机制之一。
第二部分念珠菌对常见抗真菌药物的体外敏感性测定
第一章微量稀释法检测念珠菌对抗真菌药物敏感性的两种观察结果方法的比较
目的应用微量稀释法检测念珠菌体外抗真菌药物敏感性,比较肉眼观察和体视显微镜观察结果的一致性及优缺点。方法参考CLSI的微量稀释法M27-A3,检测203株念珠菌对4种唑类药物(咪康唑、酮康唑、益康唑、联苯苄唑)及4种非唑类药物(制霉菌素、利拉萘酯、萘替芬、特比萘芬)的体外敏感性,并同时应用肉眼和体视显微镜两种方法观察结果。结果1.唑类药物：咪康唑、酮康唑、益康唑和联苯苄唑的一致性范围为：87.68%～96.06%；2.非唑类药物：制霉菌素、利拉萘酯、萘替芬、特比萘芬的一致性范围为91.63%～99.51%。3.与肉眼观察比较,体视显微镜观察结果具有以下优点：成像有立体感；可以观察到肉眼看不见的微量菌生长；易于区分待测菌和污染菌生长；4.除利拉萘酯、萘替芬和联苯苄唑外,咪康唑、酮康唑等均对念珠菌有良好的体外抑菌作用。结论对于微量稀释法体外检测念珠菌的抗真菌药物敏感性,应用体视显微镜可以辅助观察结果,且与肉眼读取结果有较好一致性,两种方法结合有助于体外抗真菌药物敏感性结果的判断。
第二章卢立康唑及其它6种咪唑类抗真菌药物对常见念珠菌的体外活性检测
目的评价卢立康唑及其它6种咪唑类药物对临床分离常见念珠菌的体外敏感性。方法参考CLSI的微量稀释法M27-A3方案,检测5种共183株临床分离念珠菌对卢立康唑、酮康唑、咪康唑、益康唑、克霉唑、舍他康唑、联苯苄唑7种咪唑类药物的体外敏感性。结果酮康唑、咪康唑、益康唑、克霉唑、舍他康唑和联苯苄唑的体外最低抑菌浓度范围(几何均数)分别为0.03-8(0.067)μg/ml、0.03-16(0.071)μg/ml、0.03-8(0.207)μg/ml、0.03-8(0.061)μg/ml、0.03-16(0.187)μg/ml.和0.03～16(1.050)μg/ml。抗真菌新药卢立康唑对5种念珠菌均有较好的体外敏感性,最低抑菌浓度范围0.03～8μg/ml,几何均数为0.087μg/ml, MIC50和MIC90分别为0.06μg/ml和0.5μg/ml。包括卢立康唑在内,各受试药物均有部分菌株相对不敏感。结论除联苯苄唑外,卢立康唑等其它6种咪唑类药物均对念珠菌有良好的体外抗菌活性,但存在少数菌株相对不敏感。
【关键词】：
【学位授予单位】：北京协和医学院【学位级别】：博士【学位授予年份】：2013【分类号】：R756.5【目录】：
导师组成员4-8全文摘要8-10Abstract10-13前言13-17第一部分 曲古菌素A对唑类药物体外抗白念珠菌活性增效作用的研究17-69 第一章 曲古菌素A对唑类药物体外抗白念珠菌等常见病原真菌活性的影响19-49
第一节 白念珠菌对三唑类药物体外抗真菌药物敏感性及拖尾现象的研究19-30
第二节 曲古菌素A对伊曲康唑抗白念珠菌活性影响的初探30-39
第三节 曲古菌素A对唑类药物抗白念珠菌等常见病原真菌活性的影响39-49 第二章 曲古菌素A对唑类药物体外增效作用的机制初探49-69
第一节 白念珠菌获得性耐药形成过程中组蛋白去乙酰化修饰水平的变化49-64
第二节 曲古菌素A对白念珠菌外排泵功能的影响64-69第二部分 念珠菌对常见抗真菌药物的体外敏感性测定69-83 第一章 微量稀释法检测念珠菌对抗真菌药物敏感性的两种观察结果方法的比较71-78 第二章 卢立康唑及其它6种咪唑类抗真菌药物对常见念珠菌的体外活性检测78-83参考文献83-90全文小结90-92英文缩略词92-93综述93-105 组蛋白去乙酰化修饰与白念珠菌相关研究进展93-98
参考文献96-98 免疫正常宿主的深部念珠菌感染98-105
参考文献101-105在读期间发表文章105-107致谢107-109
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京公网安备74号外用药酮康唑有新用途
核心提示：酮康唑是一种广谱抗真菌药物，临床上常用于治疗表皮和深部真菌病，包括皮肤和指甲癣（局部治疗无效者）、胃肠道酵母菌感染、局部用药无效的阴道白色念珠菌病等。
　　酮康唑是一种广谱抗真菌药物，临床上常用于治疗表皮和深部真菌病，包括皮肤和指甲癣（局部治疗无效者）、胃肠道酵母菌感染、局部用药无效的阴道白色念珠菌病等。内服此药后，可有恶心、呕吐、头痛、嗜睡、腹痛、皮肤瘙痒等反应，停药后可消除。妊娠妇女、霉菌性脑膜炎患者及有肝病史者，应禁用此药。经过不断的研究，发现酮康唑还有以下4种新用途：
　　治疗寻常痤疮　　用法：①酮康唑200毫克，每日晚餐时口服，4周为一个疗程；②2％酮康唑霜适量，用手薄薄涂于患处，同时宜用手轻轻按摩患处皮肤，每天3次，连续用药30天，直至痤疮消失为止。　　疗效：治疗寻常痤疮患者185例，总有效率为96.54％，明显优于用西咪替丁或消痤霜治疗痤疮的疗效。
　　治疗脂溢性皮炎　　用法：用药前先用温水清洗局部(若头皮受损者，宜剃去头发)。然后外搽2％酮康唑霜，每天2次，14天为一个疗程，一般用药1～2个疗程即可收效。　　疗效：治疗脂溢性皮炎患者97例，其中治愈率为57.8％，总有效率为100％，疗效明显优于用外涂冷霜治疗的对照组。
　　治疗皮质醇增多症　　用法：口服酮康唑，每次200～400毫克，每天2次，餐后服用。　　疗效：用药后可使血、尿皮质醇及睾酮均明显下降，肾上腺皮质增生者，临床症状得到较好改善。
　　治疗银屑病　　用法：每天口服200毫克，共服4周。　　疗效：可使患者红斑消退、鳞屑减少及止痒，总有效率达68.5％，疗效明显高于对照组。患者皮肤的糠秕孢子菌带菌量明显减少。　
（实习编辑：莫景云）&
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作用与功效（功能主治）
用于手癣、足癣、体癣、股癣及花斑癣及皮肤念珠菌病。
局部外用，取本品适量涂于患处。一日2～3次。为减少复发，体癣、股癣、花斑癣及皮肤念珠菌病，应连续使用2～4周，应连续使用4～6周。
可见刺痛或其他刺激症状，偶见瘙痒等反应。
1.避免接触眼睛和其他黏膜（如口、鼻等）。
2.用药部位如有烧灼感、红肿等情况应停药，并将局部药物洗净，必要时向医师咨询。
3.不得用于皮肤破溃处。
4.不宜大面积使用。
5.股癣患者，勿穿紧贴内裤或化纤内裤，在外用乳膏剂时可散布撒布剂（如痱子粉）。
6.足癣患者，浴后将皮肤揩干，特别是趾间。宜穿棉纱袜，每天更换。鞋应透气，散布撒布剂或抗真菌粉剂于趾间、足、袜和鞋中，每日1次或2次。
7.为减少复发，对体癣、股癣和花斑癣，疗程至少需要2-4周。
8.孕妇及哺乳期妇女应在医师指导下使用。
9.对本品者禁用，过敏体质者慎用。
10.本品性状发生改变时禁止使用。
11.请将本品放在儿童不能接触的地方。
12.儿童必须在***监护下使用。
13.如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。
对本品组成成分、其他吡咯类、氨基糖苷类及皮质激素类药物禁用。
详细说明【药品名称】酮康唑乳膏
【英&文&名】Ketoconazole　Cream 【商&品&名】金达克宁 【通&用&名】酮康唑乳膏 【药品类别】本品为皮肤科用药类非处方药药品。【主要成份】本品含主要成份酮康唑，辅料为硬脂酸、白凡士林、单硬脂酸甘油脂、防腐剂（羟苯乙脂）。 【性&&&&状】本品为乳剂型基质的乳白色或微红色软膏。【规&&&&格】15g：0.3g 【剂&&&&型】膏剂【药理作用】酮康唑为抗真菌药，对皮肤癣菌如毛发癣菌属、表皮癣菌属、小孢子菌属及酵母菌如念珠菌等具有抑制作用。局部外用几乎不经皮肤吸收。【药物相互】如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用，详情请咨询医师或药师。【批准文号】国药准字H 【贮&&&&藏】密封。【企业名称】西安杨森制药有限公司
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关节炎牛皮鲜酮康唑片有副作用没
来源：绍兴网资讯频道 时间: 08:23:01
　　关节炎牛皮鲜酮康唑片有副作用没?
　　关节炎牛皮鲜酮康唑片有副作用没?牛皮鲜是许多患者的心头痛，尽管尝试了很多药物治疗，不是这不行就是那有问题，总是反反复复，不能除根。其实，牛皮鲜是顽疾，治疗需要一定的时间，患者不可急不可待的治疗，不能乱用药物，要知道是药三分毒，盲目用药，不仅治不好牛皮鲜，还会给身心带来很大的伤害。专家提醒，科学治疗牛皮癣很关键，那么，什么药能治好牛皮鲜呢?关节炎牛皮鲜酮康唑片有副作用没?我们请教一下牛皮鲜专家赵宏喜医生。
　　关节炎牛皮鲜酮康唑片有副作用没?关节炎牛皮鲜除具有典型的牛皮鲜皮肤症状外，还可伴有关节病变。虽然多数是发生在已确诊的活动性皮肤病患者，但也有些病人(特别是儿童)的关节病发生在牛皮鲜之前。牛皮鲜的皮肤损害程度，虽与关节炎的发生相关性不大，但有椎关节病及指/趾甲有泛发性点状凹性改变家族史的人，发生牛皮鲜关节炎的风险增加。
　　酮康唑片的适应症主要有：系统真菌感染， 如系统性念珠菌病、副球孢子菌病、组织胞浆菌病、球孢子菌病和芽生菌病;由皮肤癣菌和(或) 酵母菌引起的皮肤、毛发和指(趾)甲的感染(皮肤癣病、甲癣、念珠菌性甲周炎、花斑癣、干性糠疹、马拉色菌毛囊炎、慢性皮肤粘膜念珠菌病等)，当局部治疗无效或由于感染部位、面积及深度等因素不宜外用治疗时，可用里素劳酮康唑片治疗;胃肠道酵母菌感染;局部治疗无效的慢性、复发性阴道念珠菌病;尚可用于预防治疗因免疫机能降低(遗传性及由疾病或药物引起的) 而易发生机会性真菌感染的患者。
　　专家称，酮康唑片治疗牛皮鲜有一定的副作用，而关节型牛皮鲜虽然比较少见，但是如果患者治疗不及时或者治疗不当，都会使牛皮鲜恶化，甚至造成瘫痪。尽快治疗关节型牛皮鲜迫在眉睫。我们知道无论任何疾病，只有对症治疗才能做到真正的标本兼治，尤其是牛皮鲜，更要从病根入手，因病施治。为此，河北三甲医院的专家们，针对牛皮鲜的病根脾肾阳虚的特点，经过多年临床实验，研究出牛皮鲜的专用药——中医扶阳克癣系列组方，治愈了不少牛皮鲜患者，深受患者的大加赞赏。
&&&&&&& 三甲名医赵宏喜主任详述中医扶阳克癣系列组方如何治愈牛皮鲜不复发
　　赵宏喜主任在多年的临床治疗与研究中，发现牛皮鲜脾肾阳虚的真正病机，并通过对火神派中医理论的深入研究，综合各家所长，并结合多年临床治疗经验，带领我院专家团队总结出以扶阳固本为主的中医扶阳灭癣疗法，同时从几千味中草药中，反复遴选出几十味可入药的纯正中药，经过最新中药萃取技术，精制成中医扶阳克癣系列组方。该组方配合中医扶阳灭癣疗法的治疗理论，包含五种中成药及汤药系列，可以根据不同的病情，及不同的病情恢复时期，进行组方配药，对症治疗，安全有效，达到真正治愈牛皮鲜抗复发的标准。
　　河北三甲牛皮鲜医院保证：每一位牛皮鲜患者都能得到赵宏喜主任亲诊
　　作为国家级三级甲等医院，对每一位患者都必须做到负全责，从诊断、用药、愈后康复指导，全程一对一针对治疗，并由赵宏喜主任亲自指导治疗。治疗过程的采用的纯中药制剂——中医扶阳克癣系列组方，全部由我院自主研发的，精选中药，精制而成。在经过赵主任亲诊诊断，确诊病情的前提下，一人一方，区别用药，并实时跟踪患者用药情况，调整用药，保证用最少的药物，达到最佳的治疗效果。
&&&&&&&&&&& 寻常型牛皮鲜症状的康复病例
　　【患者资料】：姚先生，30岁，全身分散斑块状寻常型牛皮鲜，病史5年。于日来河北三甲牛皮鲜医院就诊。
　　【患者病症】全身斑块状皮损症状分散分布，腿部，胸腹部密集分布，皮损易浸润肥厚，伴苔癣样变，少屑，痒痛感明显。伴有口干苦、畏寒、便秘等不适症状，无甲损现象，早期治疗不当，产生药物副作用，引发病情反弹。初步判断，精神因素也是导致该患者病情加重的重要原因。
　　【治疗方案及效果】采用中医扶阳克癣系列组方，加汤药联合服用，连续服用一个月，针对治愈情况，再定下一步治疗方案。同时全身分散斑块状寻常型牛皮鲜，病情较重，但是由于病因明确，治疗有针对性，见效也快。治愈难度较小。日复诊时该患者皮肤干燥症状已经完全消失，还有少量早期发病部位皮肤颜色较为暗沉，须慢慢恢复。
【河北三甲牛皮鲜医院--温馨小贴士】牛皮鲜的治疗要到专业的医院进行对症治疗，切勿擅自盲目用药，以免加重病情。另外在饮食方面也要做好配合，禁忌不食对牛皮鲜治疗有害的食物，多食对牛皮鲜治疗有益的;同时多做运动，增强体质，提高免疫力;及时缓解紧张情绪和心理压力;并尽量避免外伤等等，将更有助与牛皮鲜的预防。
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