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加微信查订单大豆异黄酮植物雌激素对大鼠乳腺癌细胞和小肠上皮细胞生长的影响及其机理研究--《南京农业大学》2004年博士论文
大豆异黄酮植物雌激素对大鼠乳腺癌细胞和小肠上皮细胞生长的影响及其机理研究
【摘要】：本研究以大鼠乳腺癌细胞系(SHZ-88)为研究对象，观察了2种大豆异黄酮(大豆黄酮、染料木素)对其体外增殖的影响，并从DNA合成、细胞周期与凋亡以及cAMP／PKA信号通路等方面分析了二者抑癌的作用机理。同时，建立了大鼠小肠上皮细胞的培养体系，初步探讨了这2种大豆异黄酮对小肠上皮细胞体外生长的影响。
大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞(SHZ-88)体外增殖的影响
应用~3H-TdR掺入法和MTT法，研究了大豆黄酮、染料木素和雌激素对SHZ-88细胞体外增殖的影响。结果表明：在低浓度时(≤100ng／ml)，大豆黄酮和染料木素对癌细胞的增殖没有明显的影响，而雌激素则表现出一定的促增殖效应(与0ng／ml对照组比较，1ng／ml雌激素、P=0.066，10ng／ml雌激素、P=0.026，100ng／ml雌激素、P=0.054)；同时，各浓度的大豆异黄酮不影响10ng／ml雌激素的促生长作用，但在高浓度时，大豆黄酮(≥10μg／ml)和染料木素(≥5μg／ml)均显著抑制癌细胞的增殖，并存在明显的剂量和时间依赖性；其中大豆黄酮和染料木素的半数抑制浓度(IC_(50))分别为53.74±0.83μg／ml和13.09±0.15μg／ml，说明染料木素对癌细胞的抑制作用强于大豆黄酮；同时，50μg／ml大豆黄酮和15μg／ml染料木素还能降低100ng／ml表皮生长因子对癌细胞的促生长作用，但未能完全抑制。
大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞(SHZ-88)细胞学与生化学特性的影响
在体外培养的条件下，观察了大豆异黄酮对SHZ-88细胞部分细胞学及生化学特性的影响。结果显示：50μg／ml大豆黄酮和15μg／ml染料木素均能够影响癌细胞的生长曲线，延长指数生长期内癌细胞的群体倍增时间(对照组18.3±1.0h，大豆黄酮组21.9±0.7h，染料木素组33.9±1.0h，P＜0.01)，降低癌细胞分裂指数和单细胞克隆形成率(对照组74.2±3.0％，大豆黄酮组47.4±6.5％，染料木素组33.1±8.0％，P＜0.01)；同时还降低了癌细胞内乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和碱性磷酸酶的活性(与对照组比较，P＜0.01)，但提高了胞内总蛋白的含量(对照组0.32±0.06mg／l×10~6个细胞，大
林成招大豆异黄酮植物雌激紊时大鼠乳腺疮细胞和小肠上皮细胞生长的影响及其机理研究
豆黄酮组0.65土0.15 mg/1洲106个细胞，染料木素组0.65土0.04 mg/一106个细胞，
尸a口了);而在短时间内(24h)，对癌细胞的内部超微结构未产生明显的影响.这提
示大豆异黄酮在抑制癌细胞增殖的同时可能诱导了细胞分化，通过某些途径恢复了细
胞功能，增强了细胞蛋白合成的能力.
3大豆异黄酮抑制大氛乳旅病细她(SH各88)增殖的机理研究
主要应用同位素掺入法、流式细胞术、放射免疫测定法和R不PCR等方法，分析
了细胞DNA合成、周期变化以及凋亡情况，并检测了细胞环腺普酸(c AMP)的浓度、
腺普酸环化酶(Ac)、磷酸二醋酶(P DE)和cAMP依赖性蛋白激酶伊KA)的活性以及
cAMP反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达的变化，研究大豆黄酮和染料木素抑
制乳腺癌细胞增殖的可能作用机理.结果表明:50“留ml大豆黄酮和15。岁ml染料
木素均能降低癌细胞3H一TdR的掺入量，抑制其DNA的合成;增加s期细胞的比例，
阻滞细胞的周期活动;但未引起明显的细胞凋亡.与对照组相比，在大豆黄酮和染料
木素处理后，smin胞内cAMP的含量显著提高附照组1 .042土0.037Pm。漪匕，大豆黄
酮组l一4一士o.o72pmol琦L，染料木素组x .157士o.os4pmoU孔，尸a盯)，一omin差异
达极显著(对照组1 .037土0.056卿oU孔，大豆黄酮组1 .355土0.o65pmoU孔，染料木素
组1 .455士o.070pmoU孔，P0.01)，20min后开始回降:在试验处理时间内AC的活性
不受影响;PDE的活性在smin时被显著抑制(对照组23.742土4.483U/mg，大豆黄酮
组1 7.035土2.726U/mg，染料木素组一7.002士4.55oU/mg，尸ao万)，lomin后逐渐回升:
PKA的活性在20min时显著升高(对照组0.341土0.045 pmol·min-l·陀一，大豆黄酮
组0.429士0.03 lpmol·min一’·林g一，，染料木素组0.417士0.061 pmol·min‘，·林g‘，，尸a盯)，
4omin仍维持高水平(对照组0.333土0.脸3 pmol·min一，·仁g‘，，大豆黄酮组0.437土0.080
pmo一min.’·林g”，染料木素组0.422土0.053 pmol·min”·林g-’，尸0.0万):e既Bm洲A
的表达量在3一6h内显著提高(3h时照组0.930士0.097，大豆黄酮组1 .224土0.063，染
料木素组1 .405士0.342:6h对照组0.961土0.184，大豆黄酮组1.307士0.087，染料木
素组1 .303土0.213，尸a仍)，12h后恢复到对照水平.这些结果说明大豆异黄酮类物
质能够抑制大鼠乳腺癌细胞DNA的合成能力;阻滞癌细胞的周期进展;激活胞内
cAMP用KA信号通路，且PDE活性的抑制起了主导作用.由此提示激活cAMP/P KA
信号通路可能是大豆异黄酮抗癌的作用机制之一
4大豆异黄酮对大裁小肠上皮细胞生长的影响
应用酶消化法分离培养了大鼠小肠上皮细胞.来源于成年大鼠的小肠上皮细胞难
以成活;而来源于其乳鼠(出生7天内)的小肠上皮细胞于24h内贴壁铺展，第一周
内生长缓慢，6一7天后生长加快，10一12天细胞长满70%左右.细胞角蛋白免疫组化鉴
定结果表明所获得的细胞主要为上皮成分.应用3H一TdR掺入法检测了大
【关键词】：
【学位授予单位】：南京农业大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2004【分类号】：R737.9【目录】：
中文摘要6-9
英文摘要9-15
第一篇 文献综述17-49
第一章 异黄酮植物雌激素的研究进展17-27
1 异黄酮植物雌激素的来源、性质、吸收与代谢17-21
2 异黄酮植物雌激素的主要生物学功能21-27
第二章 大豆异黄酮植物雌激素与肿瘤防治27-36
1 大豆异黄酮植物雌激素抗肿瘤的研究27-31
2 大豆异黄酮植物雌激素抗肿瘤的主要作用机理31-36
第三章 细胞信号传导与抗肿瘤研究36-49
1 抗肿瘤研究中主要的相关信号通路36-41
2 cAMP／PKA信号通路41-49
第二篇 试验研究49-101
第一章 大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞(SHZ-88)增殖的影响49-60
1 材料与方法49-51
2 结果与分析51-57
3 讨论与小结57-60
第二章 大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞(SHZ-88)细胞学与生化学特性的影响60-70
1 材料与方法60-62
2 结果与分析62-67
3 讨论与小结67-70
第三章 大豆异黄酮抑制大鼠乳腺癌细胞(SHZ-88)增殖的机理研究70-87
1 材料与方法70-75
2 结果与分析75-83
3 讨论与小结83-87
第四章 大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长的影响87-95
1 材料与方法87-89
2 结果与分析89-92
3 讨论与小结92-95
第五章 大豆异黄酮对小肠葡萄糖与氨基酸吸收的影响95-101
1 材料与方法95-96
2 结果与分析96-98
3 讨论与小结98-101
总体讨论101-105
全文结论105-106
参考文献106-122
致谢122-123
博士期间论文发表情况123
欢迎：、、)
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您好：您好！大豆异黄酮软胶囊它适用于改善内分泌失调，月经不调，需要补充雌激素的人群。主要成份为亚麻籽油、蜂王浆冻干粉、大豆油、碳酸钙、大豆提取物、蜂蜡、卵磷脂、维生素E、维生素D3；外壳(明胶、甘油、水、二氧化钛、日落黄)。每日1次，每次2-3粒。 祝您早日康复！
您好：你好，大豆异黄酮是从植物中提取，与雌激素有相似结构能够弥补30岁以后女性雌性激素分泌不足的缺陷，改善皮肤水分及弹性状况，缓解更年期综合症和改善骨质疏松。建议你检查一下头昏脑胀头疼腿疼的具体原因，确诊后再用药。服用大豆异黄酮效果可能不会很显著。
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植物雌激素(大豆异黄酮)可提高和改善皮肤质量
作者单位：
上海银康医药科技研究中心
母体文献：
第十一届东南亚地区医学美容学术大会论文汇编
会议名称：
第十一届东南亚地区医学美容学术大会
会议时间：
会议地点：
主办单位：
中国保健协会
在线出版日期：
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