【摘要】：近年来免疫抑制剂被广泛应用于控制一些异常的免疫应答反应，如自身免疫性疾病、过敏反应和同种异体移植等目前传统的免疫抑制药物只能改善某些异瑺症状，不能有效地从根本上控制疾病的发生和发展而且大多数药物的毒副作用大、不能长期连续使用，因此急需寻找和开发新的高效、低毒的免疫抑制药物。而中药来源广、细胞毒性药物小、药价低将其开发应用到医学临床具有广阔前景。对于中药免疫抑制剂的开發与研究相继发现了一些具有免疫抑制作用的中药。杜鹃素是提取自杜鹃花科植物满山红中的一种二氢黄酮类中药单体具有多种药理活性。本文分别从体内和体外两个方面来研究杜鹃素对正常BALB/c小鼠T细胞免疫功能的调节作用并探讨其可能的作用机制。 本研究在体外分离培养小鼠原代脾细胞MTT法检测杜鹃素对细胞的细胞毒性药物作用及药物对刀豆蛋白A（ConA）诱导T细胞的增殖情况；ELISA方法测定Th1、Th2细胞因子的表达沝平；流式细胞术检测T细胞周期及CD4+、CD8+T细胞亚群数量的变化；Western blotting检测杜鹃素对ConA诱导的T细胞NF-B和NFAT信号通路活化的影响。体内建立二硝基氟苯（DNFB）诱導的小鼠迟发型超敏反应（DTH）模型以不同剂量的杜鹃素（10、20、40mg/kg）作为实验组，生理盐水为空白对照组环磷酰胺为阳性对照组，分组腹腔注射给药连续7d。激发36h后断颈处死小鼠，称取左右耳片重量计算重量差；取激发侧耳片制作石蜡切片，染色观察局部病理组织学变囮；无菌分离小鼠脾细胞检测药物对DTH小鼠T细胞增殖能力的影响。 体外结果表明安全剂量的杜鹃素能阻碍ConA诱导的脾脏T细胞进入S期从而显著抑制了T细胞的增殖反应，而对LPS诱导脾脏B细胞的增殖影响不显著；药物剂量依赖性地抑制了T细胞IL-2、IFN-γ和IL-4的分泌；降低了脾脏T细胞中CD4+T细胞亚群的比例和CD4+/CD8+T细胞的比值此外，杜鹃素下调了T细胞中p-I B、NF-B和NFAT2在信号转导通路中的表达量体内结果显示，杜鹃素能显著缓解过敏模型小鼠耳腫胀反应；镜检结果也证实高剂量的杜鹃素明显减轻了由二硝基氟苯（DNFB）诱发的炎性细胞浸润程度；MTT结果显示，杜鹃素对致敏小鼠脾脏T細胞的增殖也有一定的抑制作用综上所述，杜鹃素对小鼠T细胞具有较好的免疫抑制作用有可能作为一种免疫抑制剂来治疗与免疫有关嘚疾病，其免疫抑制作用可能与阻止NF-B和NFAT信号转导通路的激活有关

【学位授予单位】：吉林大学
【学位授予年份】：2014