138第 39 卷 第 2 期 2010 年 3 月卫 生 研 究 JOURNAL OF HYGIENE RESEARCHVol. 39 No. 2 Mar. 20108020 （ 2010 ）
文章编号：1000-链脲佐菌素注射剂量对建立2
型糖尿病大鼠模型的影响向雪松 王 竹 祝宇铭 边立华 杨月欣1000501中国疾病预防控制中心营养与食品安全所， 北京摘要 ： 目的 响 。方法探讨不同链脲佐菌 素 （ STZ ） 注 射 剂 量 和 方 法 对 大 鼠 血 糖 值 、 血糖稳定性和胰岛损害的影75 只 SPF 级 6 周龄雄性 Wistar 大鼠高脂高糖 、 25 、 30mg / kg 的 STZ 腹腔 饲养 8 周后 ， 分别给予 20 、空腹血糖和餐后 2h 血糖 。 评价各组大鼠血糖变化 和 成 模 注射 。 造模后连续 7 周每周观察各组大鼠的体重 、 甘油三 酯 （ TG ） 、 总 胆 固 醇 （ TC ） 、 高 密 度 脂 蛋 白 （ HDL ） 、 低密度脂蛋 率 。 实验结束时测定血清胰岛素 （ INS ） 、 白 （ LDL ） 等 。 HE 染色 和 胰 岛 素 免 疫 组 化 观 察 胰 岛 细 胞 形 态 学 特 点 。 结 果 20mg / kg 注 射 组 成 模 率 较 低 （ 30% ） ；25mg / kg 注射组成模率较高 （ 73. 3% ） ， 血糖中度升高并且稳定 ， 胰岛结构完整 ， β 细胞数量 和 细 胞 质 内棕色颗粒有所减少 ；30mg / kg 的 STZ 注射组血糖较高 ， 死亡率较高 ， 并且胰岛和 β 细胞数量极少 ， 小胰 岛 多 形状不规则 ， 出现空泡样变性 。 结论 见， 高脂 、 高糖 饲 养 8 周 后 联 合 小 剂 量 STZ 25mg / kg 能 够 造 成 更 具 有 代表人类 2 型糖尿病病理生理特征的大鼠模型 。 关键词 ：2 型糖尿病 中图分类号 ： R587. 1 大鼠 链脲佐菌素 血糖文献标识码 ： ADosage of streptozocin in inducing rat model of type 2 diabetes mellitusXIANG Xuesong ，WANG Zhu ，ZHU Yuming ，BIAN Lihua ，YANG YuexinInstitute for Nutrition and Food Safety ，China CDC ，Beijing Abstract ： Objective mellitus. Methods 100050 ， ChinaTo investigate the dosage of streptozocin （ STZ ） in inducing rat model of type 2 diabetesMale Wistar rats were fed with high-fat diet for 8 weeks ，then different dosage of STZ （ 20mg /kg ， 25mg / kg ， 30mg / kg ） was injected intraperitoneally. Observed the body weight ，fasting glucose and 2h postload glucose for 7 weeks. Insulin （ INS ） ，triglycerides （ TG ） ，total cholesterol （ TC ） ，high density lipoprotein （ HDL ） ， low density lipoprotein （ LDL ） levels were tested at the end of the experiment. Serial pancreatic sections were made and stained with hematoxylin-eosin （ HE ） and immunohistochemistry. Results The 20mg / kg of STZ injection group had low successful rate （ 30% ） . The 25mg / kg of STZ injection group had the highest making model success rate of 73. 3% ，and stable moderate hyperglycemia. Islet structural integrity ，but the β -cell number and cytoplasmic brown granules decreased. The 30mg / kg of STZ injection group had highest mortality and higher blood glucose ，the number of islets decreased obviously ，small islets more common ，islet structure is not complete. Conclusion human type 2 diabetes mellitus. Key words ： type 2 diabetes mellitus ，rat ，streptozocin ，blood glucose 我国糖尿病患病率在过去 20 年中上升了 4 倍， 其中 2 型［ 1］ 糖尿病占到 93. 7% 。 同时辅助降 血 糖 食 品 得 到 迅 速 发 展 ，High-fat high-sugar feeding for 8 weeks combined with low-dose STZ （ 25mg / kg ） can result in rat model more representative ofSTZ 注 射 方 法 、 糖 尿 病 大 鼠 判 断 标 准， 尤 高脂膳食饲养时间 、 其是 STZ 注射剂量， 相关文献报道各不相同 。 据王保伟统计， 2001 － 2007 年 CNKI 收录 133 篇关于高脂 喂 养 联 合 STZ 建 立 2 型糖尿病大鼠动物模 型 的 文 献， STZ 注 射 剂 量 变 化 很 大， 15 ～ 40mg / kg 之 间 均 有 报 道 ［3 -7 ］。 本 文 主 要 探 讨 不 同 STZ 注 射 剂量对大鼠的血糖值 、 血糖稳定性和胰岛损害的影响， 研究 建 立具 有 肥 胖 、 胰岛素抵抗和温和高血糖等 2 型糖尿病特征的 大鼠模型的最佳方法 。10 年来国家共批 准 近 400 种 相 关 产 品， 因 此， 辅助降血糖功 能性食品评价技术的研究有着重要的意义 。 在糖尿病动物 模 型应 用 方 面， 目前国内外许多学者都倾向选择接近人类 2 型 高脂膳食联合链佐脲菌 糖尿病特征和发生发 展 的 动 物 模 型， 素（ STZ ） 诱导大鼠高 血 糖 是 一 种 常 用 造 模 方 法［ 2］， 但是对于“十一五 ” 基金项目：国家 科技支撑计划项目（ No. 2006BAD27B01 ） E-mail ： 作者简介：向 雪 松， 男， 在 读 博 士， 研 究 方 向： 功 能 食 品， sterling25@ 163. com 1 通讯作者：杨月欣， 女， 研究员， 博士生导师11. 1材料与方法实验动物与饲料 75 只 SPF 级 6 周 龄 健 康 雄 性 Wistar 大 鼠， 体 重 （ 150 ±第2期向雪松， 等 . 链脲佐菌素注射剂量对建立 2 型糖尿病大鼠模型的影响 大鼠成模率 = 1. 6 统计分析 血糖达标的存活大鼠数 × 100% 造模大鼠总数13910 ） g 。 普通饲料采 用 清 洁 级 大 鼠 维 持 饲 料 。 高 脂 、 高糖饲料 是在普通饲料中加入 10% 猪油和 20% 蔗糖， 混匀干 燥 后 采 用60Co 照射消毒灭菌 。 饲 料 主 要 成 分 构 成 见 表 1 。 大 鼠 和 饲 料表1 Table 1 每百克饲料主要成分构成 Main composition of the diets 蛋白质 （ g） 20 20 脂肪 （ g） 4 14 （ 1 ） 碳水化合物 （ g） 66 56 （ 2 ）均由中国医学科学院动物繁殖中心提供 。± s 表 达。 组 数据 由 SPSS13. 0 统 计 处 理， 实验数据以 x
间差异比较采用方差分析 。成分 普通饲料 高脂高糖饲料能量 （ kJ ） 9. 122. 1结果不同 STZ 注射剂量对大鼠一般状况和体重的影响 图 1 显 示， 大 鼠 分 组 时 体 重 没 有 差 异 （ P & 0. 05 ） 。 高 脂 、36 % 的淀粉 注：（ 1 ） 含 10 % 的猪油； （ 2 ） 含 20 % 蔗糖 、高糖喂养的大鼠体重增长较快， 到第 8 周， 高脂 、 高糖饲养大鼠 （ 高脂对照组和低 、 中、 高 剂 量 STZ 组 ） 体 重 与 普 通 饲 料 组 （ 正 常对照组 、 普通饲料 STZ 组） 相比差异有显著性（ P & 0. 05 ） 。 大鼠注 射 STZ 后， 部分动物即表现出多饮、 多尿、 体重下 降等典型的糖尿病症状 。 造模 后 连 续 8 周 体 重 监 测 表 明 （ 图 1） ， 造模后 1 周 体 重 下 降 明 显， 下 降 幅 度 随 STZ 用 量 增 加 而 增大 。 在造模 2 ～ 3 周 后 大 鼠 体 重 开 始 上 升 。 低 剂 量 STZ 组 到第 4 周时已与高 脂 对 照 组 相 同；高 剂 量 STZ 恢复相对较快， 组恢复较慢， 且陆续出现死亡， 监测期间共死亡 10 只；中 剂 量 STZ 组体重变化介于两组之间， 死亡 2 只 。1. 2主要试剂 STZ 购 自 Sigma 公 司 （ S0130 批 号： 024k1211 ） 。 甘 油 三总 胆 固 醇 （ TC ） 、 血 糖 （ BG ） 、 低密度脂蛋白胆固醇 酯（ TG ） 、 （ HDL-C ） 、 高密度脂蛋 白 胆 固 醇 （ LDL-C ） 测 定 试 剂 盒 购 自 中 生北控生化 试 剂 公 司； 胰 岛 素 （ INS ） ELISA 试 剂 盒 购 自 UCL 公司 。 胰岛素抗体购自 SANTA 公司， 二氨基联苯胺（ DAB ） 显 色试剂盒购自中杉金桥 。 1. 3 动物喂养及剂量分组 12h /12h 光 照 所有大鼠 SPF 环境饲养， 自 由 进 食 与 饮 水， 周期 。 大鼠适应性饲养 1 周后禁食 12h ， 根据体重随 机 分 为 6 组：正 常 对 照 组 、 普 通 饲 料 STZ 组 、 高 脂 对 照 组、 低 剂 量 STZ 组、 中剂量 STZ 组 、 高 剂 量 STZ 组 。 正 常 对 照 组： 10 只， 普通 饲料喂养 8 周 后 腹 腔 注 射 0. 1 mol / L 柠 檬 酸 缓 冲 液；普 通 饲 普通饲料喂养 8 周后腹腔注射 25mg / kg STZ 料 STZ 组：10 只， （ 溶于 0. 1mol / L 无菌枸橼酸缓 冲 液， pH4. 4 ， 现 用 现 配 ） ；高 脂 高脂高糖饲料 喂 养 8 周 后 腹 腔 注 射 0. 1 mol / L 对照组：10 只， 柠檬酸缓冲液；低 、 中、 高 剂 量 STZ 组：各 15 只， 高 脂、 高糖饲 25 和 30mg / kg STZ 。 料喂养 8 周后分别腹腔注射 20 、 1. 4 1. 4. 1 1. 4. 2 观察指标及分析方法 一般状况指标 生化指标 每 天 观 察 大 鼠 进 食 量、 饮 水 量、 排尿量及死亡情况 。 每周监测并记录体重变化 。 不同饲料饲养 8 周后， 大鼠空 腹 过 夜 尾 静Figure 1 图1 大鼠体重变化情况TG 、 TC 和 INS 。 脉采血， 测空腹血糖（ FBG ） 、 造模前及造模后 连 续 7 周， 每 周 测 量 空 腹 血 糖 （ FBG ） 和 餐后 血 糖 （ PBG ） ：大 鼠 空 腹 过 夜， 按 2g / kg 葡 萄 糖 溶 液 灌 胃， 分别在灌胃前 、 灌胃后 2h 进行尾静脉采血 。 实验结束时， 大鼠空腹 12 h ， 乙醚麻醉， 腹主动脉取血， 血 TG 、 TC 、 HDL － C 、 LDL － C 用 氧 化 酶 法 测 定， INS 用 酶 联 免 糖、 疫法测定 。 1. 4. 3 胰岛 HE 染 色 和 免 疫 组 织 化 学 造模成功大鼠的胰 腺组织以 10% 中性甲醛溶液固 定， 石 蜡 包 埋 切 片， 脱 蜡， 部分 切片进行苏木素 － 伊 红 （ HE ） 染 色 。 部 分 切 片 进 行 胰 岛 素 免 3% 疫组化染色：胰腺组织石蜡切片脱蜡至水， 热源修复抗 原， 双氧水灭活内源性过氧化合 物， 滴 加 山 羊 血 清 封 闭 液 30min ， 滴加 1∶ 100 胰 岛 素 抗 体 （ 一 抗 ） 37℃ 孵 育 2h ， 滴加相应二抗 37℃ 孵育 30min ， 进行 DAB 显色， 苏木素染色， 脱水透明后， 中 显微镜下观察拍照 。 性树胶封片， 1. 5 糖尿病判断标准 以 空 腹 血 糖 大 于 7. 0mmol / L 或 餐 后 2h 血 糖 大 于 11. 1mmol / L 作为糖尿病模型成功标准 ［10 ］。 2. 2Body weight of rats in different groups不同 STZ 注射剂量大鼠的血糖和胰岛素变化 PBG 在 分 组 时 没 有 差 异 （ P & 表 2 显 示， 大 鼠 FBG 、0. 05 ） ， PBG 均有一定程度 但经过 8 周高脂饲养后， 大鼠 FBG 、 升高， 其中 PBG 已经 出 现 差 异 显 著 性 （ P & 0. 05 ） 。 说 明 大 鼠 经过 8 周高脂饲养已出现糖耐量受损 。 PBG 监 测 结 果 。 不同剂量 STZ 造 模 后 连 续 7 周 的 FBG 、 FBG 监测：高剂量 STZ 组 的 FBG 一 直 高 于 糖 尿 病 判 断 标 准， 中剂量 STZ 组仅在第 1 周 升 高， 其余各组在观测期间内均不 达 标 。 PBG 监测， 高剂量和中剂量 STZ 组在 1 ～ 7 周内的 PBG 达到糖尿病判断标准， 高 剂 量 组 PBG 大 于 20. 0mmol / L ， 中剂 PBG 介 于 11. 1 ～ 20. 0mmol / L ， 其 余 各 组 PBG 量组中度升高， 升高较小差异无显著性（ P & 0. 05 ） 。 由表 2 可见， 腹腔注 射 STZ 后 各 组 的 空 腹 胰 岛 素 水 平 均 下降：高剂量 STZ 组下降最显著（ P & 0. 05 ） ；普 通 饲 料 STZ 组 中剂量 STZ 组胰岛素也下降， 但接近正常水平 。 和低 、 从血糖和 胰 岛 素 变 化 来 看， 中 剂 量 STZ 组 血 糖 中 度 升140表2 Table 2 组别 正常对照组 普通饲料 STZ 组 高脂对照组 低剂量 STZ 组 中剂量 STZ 组 高剂量 STZ 组 n 0周 8周 15 周卫生研究第 39 卷不同 STZ 注射剂量组血糖 、 胰岛素变化Changes of plasma glucose and insulin concentration in different groups 餐后血糖（ mmol / L ） 0周 5. 91 ± 0. 54 5. 85 ± 0. 72 5. 08 ± 0. 74 5. 09 ± 0. 78 5. 28 ± 0. 64 8周 5. 95 ± 0. 97 6. 00 ± 1. 07 15 周 7. 65 ± 0. 71 11. 04 ± 4. 79 8周 87. 36 ± 37. 79 72. 11 ± 21. 65 83. 76 ± 52. 57 61. 47 ± 31. 58 胰岛素（ mIU / L ） 15 周 22. 07 ± 2. 77 （ 2 ） 17. 94 ± 1. 27 （ 2 ） 14. 68 ± 0. 67 （ 1 ） 15. 13 ± 0. 61 （ 1 ） 15. 90 ± 1. 13 （ 1 ）2） 8. 57 ± 0. 85 （ 1 ，空腹血糖（ mmol / L ）10 4. 27 ± 0. 92 4. 43 ± 0. 64 15 4. 04 ± 1. 30 4. 40 ± 0. 40 10 4. 13 ± 0. 93 5. 17 ± 0. 66 15 3. 98 ± 0. 54 5. 21 ± 0. 94 15 4. 06 ± 0. 51 5. 22 ± 0. 56 15 3. 93 ± 0. 60 5. 19 ± 0. 764. 16 ± 0. 39 4. 02 ± 0. 56 4. 41 ± 0. 48 5. 20 ± 0. 73 4. 50 ± 0. 368. 54 ± 1. 12 （ 1 ） 7. 80 ± 0. 40 8. 53 ± 0. 99 （ 1 ） 9. 96 ± 1. 398. 44 ± 0. 73 （ 1 ） 15. 71 ± 5. 29 （ 1 ）59. 97 ± 47. 06 7. 76 ± 0. 60 （ 1 ） 24. 39 ± 6. 78 （ 1 ）62. 50 ± 38. 5814. 39 ± 8. 90 （ 1 ） 5. 22 ± 0. 54注：（ 1 ） 与正常对照组比较 P & 0. 05 ；（ 2 ） 与高脂对照组比较 P & 0. 05高、 胰岛素相对下降较少；高 剂 量 STZ 组 血 糖 显 著 升 高 、 胰岛 接近 1 型糖尿病特征；而 普 通 饲 料 和 低 剂 量 STZ 素严重缺乏， 组则不能造成高血糖 。 2. 3 不同 STZ 注射剂量大鼠的血糖稳定性 由图 2 可见， 造 模 初 期 动 物 血 糖 迅 速 升 高， 随后出现回PBG 趋 向 稳 定 。 血 糖 波 动 情 况 和 注 射 剂 落，2 ～ 3 周后 FBG 、 高剂量组血糖上升最多， 波动也最大 。 中剂量组血 糖 量有关， 在 2 周后基本达到稳态， 在之后的 7 周内血糖较稳定， 说明可 以用于需要较长时间的糖尿病血糖研究 。图2 Figure 2注射 STZ 造模后 7 周血糖变化趋势Changes of plasma glucose concentration after injecting STZ in 7 weeks2. 4不同 STZ 注射剂量大鼠的成模率 死亡率为 中剂 量 组 成 模 率 最 高 为 73. 3% （ 11 /15 ） ，引起中度高血糖 。 降， 2. 6 不同 STZ 注射剂量大鼠的血脂的改变 由表 3 可见， 注 射 STZ 后 虽 然 各 组 的 空 腹 TG 水 平 较 正 常对照 组 均 有 所 增 加， 但 没 有 统 计 学 差 异。 各 组 间 的 空 腹 TC 、 HDL-C 、 LDL-C 水平的差异无显著性（ P & 0. 05 ） 。13. 3% （ 2 /15 ） ；普 通 饲 料 STZ 组 和 低 剂 量 组 没 有 死 亡 大 鼠 ， 但是成模率较低， 分别只有 30% （ 3 /10 ） 和 33. 3% （ 5 /15 ） ； 高 剂量组 由 于 血 糖 上 升 较 高， 损 伤 较 大， 死 亡 率 高 达 66. 7% （ 10 /15 ） ， 导致成模率仅为 33. 3% （ 5 /15 ） 。 2. 5 不同 STZ 注射剂量大鼠胰岛病理结果和免疫组化分析 由图 3 可见， 正 常 对 照 组 大 鼠 胰 岛 边 界 清 楚， 胰岛数较 多， 形状规则， 同时 免 疫 组 化 显 示 β 细 胞 占 据 胰 岛 细 胞 的 绝 分泌 INS 较 多， 含 量 丰 富， 着 色 深。高 脂 对 照 组 胰 岛 大部分， 增生， β 细胞分泌 INS 增多， 胞浆着色最深 。 高 剂 量 STZ 组 大 鼠胰岛破坏严重， 胰 岛 数 极 少， 胰 岛 内 分 泌 细 胞 结 构 紊 乱， 出 现空泡变性， β 细胞 数 量 和 细 胞 质 内 棕 色 颗 粒 明 显 减 少 。 中 剂量 STZ 组较高 剂 量 组 胰 岛 数 明 显 增 多 ， 但 边 界 不 清， 细胞 排列不规则， 同时 β 细胞数量 和 细 胞 质 内 棕 色 颗 粒 较 正 常 对 照组减少 。 普通饲料 STZ 组 和 低 剂 量 STZ 组 胰 岛 损 伤 较 轻， 结构完整， 只是 β 细胞数量和细胞质内棕色颗粒有所减少 。 病理结果和大鼠 血 糖 、 血 胰 岛 素 改 变 一 致。由 于 胰 岛 的 严重破坏， β 细胞分泌胰岛素严重不足， 导致 高 剂 量 组 大 鼠 血 胰岛素显著下降， 从而 引 起 严 重 高 血 糖。中 剂 量 组 大 鼠 胰 岛 损伤小， β 细胞分泌胰岛素仅轻微下降， 导致 血 胰 岛 素 轻 微 下3讨论和传统的大 剂 量 化 学 药 物 损 伤 所 致 糖 尿 病 动 物 模 型 不同， 维持胰岛细胞分泌胰岛素的能力， 同时造成胰岛素作用 相 对不足是制作 2 型糖尿病模型的关键 。 膳食诱导高血糖 模 型 因作用机制更接近于人类自然发病情况， 但仅用高脂 、 高糖 膳 食只 可 诱 导 发 生 胰 岛 素 抵 抗 和 糖 耐 量 受 损 ， 要想获得 2 型糖 “刺激 ” 。 STZ 可以特异性地破坏胰岛细 尿病还需要进一步的 胞， 是常选的化学诱 导 剂 。 当 实 验 动 物 经 腹 腔 或 静 脉 注 射 了 STZ 后， 大鼠可表现为高血糖 、 多饮 、 多食、 体重减轻等典型糖 尿病症状［ 8 － 9］。 研究显示血糖的变化与 STZ 呈明显的剂量反应关系， 剂量小时不足 以 造 成 胰 岛 细 胞 的 显 著 破 坏 引 起 高 血 糖， 只有当胰岛破坏超过 40% 时， 才 会 导 致 高 糖 血 症， 严重的 引起死亡［ 11 ］。 根据 STZ 用量的大 小 、 动 物 个 体 差 异 及 对 STZ2 型糖尿病之间 。 的敏感性， 所造成的动物模型游移于 1 型 、 我们根据膳 食 组 成 不 同 及 STZ 注 射 剂 量 设 计 了 6 组 大第2期向雪松， 等 . 链脲佐菌素注射剂量对建立 2 型糖尿病大鼠模型的影响141A ：正常对照组； B ：普通饲料 STZ 组； C ：高脂对照组； D ：低剂量 STZ 组； E ：中剂量 STZ 组； F ：高剂量 STZ 组 图3 Figure 3 胰岛 HE 染色和胰岛素免疫组化 （x ± s ） Hematoxylineosin （ HE ） and immunohistochemistry for pancreatic sections表3 Table 3 分组 正常对照组 普通饲料 STZ 组 高脂对照组 低剂量 STZ 组 中剂量 STZ 组 高剂量 STZ 组 n 10 15 10 15 15 15不同 STZ 注射组大鼠血脂比较Blood fat of rats in different groups （ x ± s ） TG （ mmol / L ） 1. 72 ± 0. 40 1. 98 ± 0. 81 2. 28 ± 1. 13 2. 47 ± 0. 74 1. 96 ± 0. 21 2. 68 ± 0. 97 HDL-c （ mmol / L ） 0. 62 ± 0. 11 0. 69 ± 0. 10 0. 62 ± 0. 11 0. 67 ± 0. 11 0. 55 ± 0. 06 0. 66 ± 0. 10 LDL-c （ mmol / L ） 2. 04 ± 0. 22 2. 42 ± 0. 66 2. 03 ± 0. 69 2. 16 ± 0. 38 2. 04 ± 0. 59 1. 95 ± 0. 17TC （ mmol / L ） 2. 17 ± 0. 93 2. 13 ± 0. 48 1. 94 ± 0. 30 2. 10 ± 0. 39 1. 83 ± 0. 38 1. 82 ± 0. 45鼠， 对大鼠的血糖值 、 血糖稳定性和胰岛损害等的影响进行 了 观察 。 ① 2 型糖尿病发生发展过 程：相 同 25mg / kgSTZ 注 射 剂 量的大鼠只在高脂饲 养 后 引 起 高 血 糖， 原因可能是高脂饲养 大鼠已是胰岛素抵抗并伴随代偿性高胰岛素血症来维持血糖 的稳态， 小剂量 STZ 就 能 引 起 β 细 胞 功 能 失 代 偿， 导致糖尿 病的发生 。 普通饲料 饲 养 大 鼠 由 于 未 出 现 胰 岛 素 抵 抗 ， 因而 对小的损伤能够代偿 糖尿病［ 12 ］ ［ 11 ］胰岛素严重缺乏， 接近 1 型糖尿病特征；而普通饲料和低 剂 量 STZ 组则 不 能 引 起 糖 尿 病 。 中 剂 量 STZ 组 血 糖 中 度 升 高， PBG 介 于 11. 1 ～ 20. 0mmol / L 之 间， 具有 2 型糖尿病血糖特 征 。 ③ 胰 岛 损 伤 程 度：胰 岛 HE 染 色 和 免 疫 组 化 染 色 观 察 显 示中剂量 STZ 组胰岛 结 构 完 整， β 细 胞 数 量 和 INS 分 泌 虽 有 所减少， 但接近正常大鼠 。 说明大鼠胰岛功能基本正常， 仍能 分泌一定水平的胰岛 素， 引起大鼠的高血糖的原因可能还存 在外周胰岛素抵抗 的 共 同 作 用 。 高 剂 量 组 胰 岛 则 损 伤 太 大， 而低剂量组能代偿损伤， 不引起高血糖， 均不适合造模 。 ④ 血。 这正和人类糖尿 病 情 况 类 似， 在肥胖和胰岛素抵抗人群中比无危险因素的人群更容易产生 2 型 。 ② 血糖升高 程 度：高 剂 量 STZ 组 血 糖 显 著 升 高 、142卫生研2究第 39 卷糖稳定性：由 于 遭 受 STZ 破 坏 后 早 期 β 细 胞 会 迅 速 增 生 修 复［ 13 ］REED M J ，MESZAROS K ，ENTES L J ，et al. A new rat model of type 2 diabetes ： the fat-fed ， streptozotocin-treated rat ［ J ］ . Metabolism ，2000 ， 49 （ 11 ） ：.，大鼠在造模后 1 周时出现血糖波动 。 我们在连续 7 周3 4 5 6血糖监测中， 中剂量组大鼠 2 ～ 7 周血糖稳定， 不需要 胰 岛 素 、 口服降糖药等治疗即能维持较稳定血糖和生命， 因此， 该模 型 可以用作对药物和功能食品长期作用的研究 。 本研究认为 高 脂、 高糖饲养 8 周后联合小剂量 STZ25mg / kg 一次性腹腔注射 诱导的大鼠模型是一种理想的 2 型糖尿病模型 。 制作不同严 重 程 度 糖 尿 病 稳 定 模 型 的 STZ 注 射 剂 量 从 15mg / kg 到 40mg / kg 均有报道 。 造成这么 大 差 距 的 原 因 可 能 动物肥胖和 有： ① 高脂喂养的时 间：高 脂 饮 食 诱 导 时 间 延 长， 胰岛素抵抗更加明显， 加重胰岛素分泌功能的负担， 所需要 的 STZ 剂量减少 ［6 ］。 如：两周高 脂 饲 养 时， REED 研 究 结 果 认 为［ 2］ XING 等 所 用 的 剂 量 则 需要 STZ 剂 量 为 50mg / kg ； 6 周 时，张芳林， 李果， 刘优平， 等. 2 型 糖 尿 病 大 鼠 模 型 的 建 立 及 其 糖 代 . 中国实验动物学报，2002 ， 10 （ 1 ） ：1620. 谢特征分析［J ］ 郭啸华， 刘志红， 李 恒， 等. 实 验 性 2 型 糖 尿 病 大 鼠 模 型 的 建 立 ［J ］ . 肾脏病与透析肾移植杂志，2000 ， 9 （ 4 ） ：351 355 . 施红， 金国琴， 余文珍 . 诱 导 构 建 最 佳 类 似 人 类 2 型 糖 尿 病 大 鼠 . 中国临床康复， 2005 ， 9 （ 39 ） ：6971. 的造模方式［J ］ et al. Combination of SRINIVASAN K ，VISWANAD B ， LYDIA A ， high-fat diet-fed and low-dose streptozotocin-treated rat ： a model for . Pharmacol Res ， type 2 diabetes and pharmacological screening［J ］ 2005 ， 52 （ 4 ） ：313320 .7 8何清华， 周迎生， 王征， 等 . 2 型糖尿 病 大 鼠 模 型 制 备 的 影 响 因 素 . 中国实验动物学报， 2007 ， 12 （ 15 ） ：425 429 . 及其特点［J ］ 饶子亮， 赵士海，刘盛来， 等 . 2 型糖尿病伴随高脂血 症 大 鼠 模 型 . 实 验 动 物 科 学， 2009 ， 26 （ 1 ） ： 15 的建立及二甲双胍 的 干 预［J ］ 18 .为 30mg / kg［ 14 ］。 理论上高脂 、 高糖饲养时间越长， 所需 的 STZ剂量越小， 但考虑到动 物 的 年 龄 以 及 造 模 后 续 的 实 验 还 需 要 因 此， 我 们 建 议 高 脂、 高 糖 饲 养 时 间 8 周 为 宜。 一定的时间， ② STZ 给药的途径：目 前 STZ 给 药 途 径 主 要 有 尾 静 脉 和 腹 腔 注射两种 。 张 芳 林 等 在 高 脂 喂 养 8 周 后 尾 静 脉 注 射 15mg / kgSTZ 造模成功 ［3 ］， 而我们腹腔注射 20mg / kgSTZ 时 却 没 有 成 功 。 说明尾静脉所需剂量比腹腔注射要低 。 但是尾静脉操 作 要求相对比腹腔注 射 要 高 。 ③ 高 血 糖 的 判 断 标 准：目 前 大 鼠 的糖尿病判断没有统一的 标 准， 以 血 糖 & 7 . 8mmol / L 到 血 糖 & 16. 7mmol / L 均有人采用 虑进去［ 10 ］ ［ 39］9梁海霞， 原海燕， 李焕德， 等. 高 脂 喂 养 联 合 低 剂 量 链 眼 佐 菌 素 诱 . 中 国 药 理 学 通 报， 导的 2 型 糖 尿 病 大 鼠 模 型 稳 定 性 观 察［J ］ 2008 ， 24 （ 4 ） ：551555 .10ELENA M ， OTTAVIO G. Proposal open for discussion ： defining agreed diagnostic procedures in experimental diabetes research［J ］ . J Ethnopharmacolo ， 2008 ， 115 （ 2 ） ：163172 .11JUNOD A ， LAMBERT AE ， STAUFFACHERW ， et al .。 不同的标准将影 响 造 模 成 功12Diabetogenic action of streptozotocin ： relationship of dose to metabolic response［J ］ . J Clin Invest ， 1969 ， 48 （ 11 ） ：. 李光伟， 陈燕燕， 张景玲， 等 . 胰岛素抵抗是糖 耐 量 正 常 人 群 糖 耐 . 中 华 内 分 泌 代 谢 杂 志， 2000 ，16 量恶化的最重 要 危 险 因 素［J ］ （ 2 ） ：74 77 . 13 PICKUP J C. Inflammation and activated innate immunity in the pathogenesis of type 2 diabetes［J ］ . Diabetes Care ， 2004 ， 27 （ 3 ） ： 813823 . 14 XING Xiaohui ， ZHANG Zhengmao ， HU Xinzhong. effects of Artemisia sphaerocephala Krasch. Antidiabetic gum ， a novel food率以及 STZ 注 射 剂 量 。 ELENA 等 建 议 将 大 鼠 餐 后 血 糖 值 考 。 在我们实验 中 也 证 实 餐 后 血 糖 表 现 了 较 强 的 敏 感性 。 因此， 我们 采 用 了 Elena 建 议 的 糖 尿 病 判 断 标 准 “空 。 腹血糖大于 7. 0mmol / L 或 餐 后 2h 血 糖 大 于 11. 1 mmol / L ” STZ ④ 其它原因：如 STZ 的 低 温 保 存， 大 鼠 造 模 前 空 腹 时 间、 注射操作等 。 提高实 验 操 作 的 标 准 化 程 度， 可以降低人为因 素的影响 。参考文献1 中华医学会糖尿病学分会 . 2007 年 版 中 国 2 型 糖 尿 病 防 治 指 南 ［J ］ . 中华流行病学杂志，2008 ， 24 （ 2 ） ：2223 .. additive in China ，on streptozotocin-induced type 2 diabetic rats［J ］ J Ethnopharmacol ， 2009 ，125 （ 3 ） ： 410 416 . 0820 收稿日期：2009 -（ 上接第 137 页）849 . World Health Organization. Laboratory Diagnosis and Monitoring of Diabetes Mellitus ，Hans Reinauer ，Philip D. Home ，2002 ： 11 . 北 京：中 国 计 量 出 版 社， 倪育才 . 实用测量 不 确 定 度 评 定［M ］ 2004. . 北 京：高 等 教 育 出 版 社， 张文彤 . SPSS 统 计 分 析 高 级 教 程［M ］ 2007 ： 130136. World Health Organization. 915 . 12 邓治洲， 王烈，林忆阳， 等 . 胃转流术对非肥胖型 2 型糖尿病的疗 1 的影响［J ］ . 中国普外基础与 临 效观察及其对胰高血糖素样肽 16 （ 6 ） ：466469 . 床杂志，2009 ， 13 14 洪丽莉， 许 冠 荪， 申 国 明， 等 . SD 大 鼠 2 型 糖 尿 病 模 型 的 建 立 ［J ］ . 中国比较医学杂志， 2005 ， 15 （ 6 ） ： 379381 . SLAMA G ，ELGRABLY F ，SOLA A ，et al. Postprandial glycaemia ： a plea for the frequent use of delta postprandial glycaemia in the treatment of diabetic patients［J ］ . Diabetes Metab ，2006 ， 32 ： 187 192. 1118 收稿日期：2009 Definition and diagnosis of diabetes mellitus and intermediate hyperglycemia［M ］ . Gevana ： WHO ， 2002 ：参考文献1 2 . 中国 李聪然， 游雪甫，蒋建东 . 糖尿病动物模型及研究进展［J ］ 15 （ 1 ） ： 59 63. 比较医学杂志，2005 ， CEFALU W T. Animal models of type 2 diabetes ： clinical presentation and pathophysiological relevance to the human condition ［J ］ . ILAR J ，2006 ，47 （ 3 ） ：186 198 . 3 WAGNER J E ， KAVANAGH K ， WARD G M. et al. Old world nonhuman primate models of type 2 diabetes mellitus［J ］ . ILAR J ， 2006 ，47 （ 3 ） ：259271 . 4 ITOH T ，KITA N ，KUROKAWA Y ，et al. Suppressive effect of a hot water extract of Adzuke beans （ Vigna angularis ） on hyperglycemia after sucrose loading in mice and diabetic rats［J ］ . Biosci Biotechnol Biochem ，2004 ，68 （ 12 ） ： . 5 6 7 黄昕， 崔磊，曹 谊 林 . STZ 诱 导 裸 鼠 糖 尿 病 模 型 的 建 立 及 观 察 ［J ］ . 组织工程与重建外科杂志， 2007 ， 3 （ 4 ） ：186187. . 国家食品药品监督管理局 . 保健食品检验与评 价 技 术 规 范［M ］ 2003 . 北京：国家食品药品监督管理局， . 北 京： 人 民 卫 生 出 版 社，1997 ： 44 金丕焕 . 医用统计 方 法［J ］
链脲佐菌素注射剂量对建立2型糖尿病大鼠模型的影响―汇集和整理大量word文档,专业文献,应用文书,考试资料,教学教材,办公文档,教程攻略,文档搜索下载下载,拥有海量中文文档库,关注高价值的实用信息,我们一直在努力,争取提供更多下载资源。}