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大鼠泌乳素放射免疫分析法的建立
摘　要：目的:利用大鼠泌乳素(rPRL)的纯品和抗体,建立rPRL放射免疫分析(RIA).方法:以氯胺-T法制备125I标记rPRL,采用平衡竞争法建立rPRL RIA,并测定大鼠血清和垂体组织中rPRL含量.结果:本方法灵敏度为0.24 μg/L;批内和批间变异系数分别为2.6%～8.9%和9.1%～12.7%;回收率为90.2%～109.8%;标准曲线范围为0.39 μg/L～50μg/L.用本方法测定了经人心房利钠多肽(ANP)诱导的大鼠血清及垂体组织中rPRL含量,其结果与实验动物实际情况相吻合.结论:本方法是检测rPRL水平的有效方法,为大鼠垂体分泌rPRL的基础研究提供了一种可靠的检测手段.
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来源：　　作者：邵凤民,楚天舒,张小玲,朱长连,程银桢
用放射免疫法测定尿毒症患者血透前后血浆内皮素的研究　 我们用均相竞争法直接测定血浆中的内皮素 (ET)含量 ,1 2 5 I- ET与标准或样品同时竞争性地与 ET抗体结合 ,根据样品管中放射性的含量直接从标准曲线上查找出相应的ET的含量 ,以期用放射免疫法测定尿毒症患者血透前后血浆ET的含量变化。本文对 16例健康人和 2 2例尿毒症患者血液透析前后进行了血浆 ET含量测定。结果健康人血浆 ET为41.1± 14.8pg/ ml,尿毒症患者血透前后血浆 ET分别为187.0± 116 .3pg/ ml、 6 9.9± 34.1pg/ ml,二者血浆 ET含量均高于正常人 (P<0 .0 0 1) ,而尿毒症血透前后血浆 ET亦有明显差异 (P<0 .0 0 1) ,且 ET含量与血 BUN (P<0 .0 5 )、Scr(P<0 .0 5 )、血压 (P0 .0 5 )和透析时间 (P>0 .0 5 )无明显相关。研究提示血浆 ET与慢性肾功能不全患者肾脏损害程度有关 ,血液透析可使血浆 ET水平下降。　　 ET是 1984年由日本 Yanagisawa等 〔1(本文共计2页)　　　　　　　　　　
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->->酶联免疫吸附试验-竞争法
酶联免疫吸附试验-竞争法
录入时间: 11:52:38
来源：海博生物
间接法测抗体
间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体）以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法 。
竞争法测抗体
当抗原材料中的干扰物质不易除去，或不易得到足够的纯化抗原时，可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。
标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP（辣根过氧化物酶），也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。
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海洋活性物质23吲哚醌对雄性大鼠生殖系统的作用研究
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