鉴于大家总是纠结方法，我来给大家科普一下检测方法【恐艾吧】_百度贴吧
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鉴于大家总是纠结方法，我来给大家科普一下检测方法收藏
最近看到总是有很多人阴了不够，一直纠结检测方法，还要弄明白检测原理，今天我将我在疾控学习的资料整理并且汇总了，我来给大家科普一下艾滋病常用检测手段
目前，作为诊断手段最常规的方法就是HIV抗体检测，这不仅是因为它特异性，敏感度高，方法相对简便，成熟。更重要的是HIV抗体在病毒感染后除早期短暂“窗口期”外整个生命期间都是长期稳定存在的并且可以被检测到。HIV抗体检测分为筛查试验和确诊试验。 目前用于HIV筛查的方法有很多种。如酶联免疫吸附试验（enzyme linkedimmunosorbent assay，ELISA），化学发光免疫分析（chemi-luminescenceimmunoassay，CLIA），明胶颗粒凝聚试验（gelatine particleagglutination assay，PA），快速检测试验（rapid tests），放射免疫法（radio immunoassay），等。每种方法各有所长与不足，常常按一定的组合配合应用，以相互补充，达到做出高效，正确判断的目的。
首先是酶联（1）酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验（ELISA）是最常用的HIV抗体检测方法，它具有准确度高，价格低廉，判断结果有客观标准，结果便于记录和保存等优点，适合大批量标本检测，是献血员筛查和临床诊断最常用的方法。 ELISA检测试剂根据其设计原理，抗原制备难易和历史发展可粗分为四代。第一代，第二代产品是间接法原理，其区别是第一代产品采用组织培养的全病毒裂解产物为抗原，而第二代产品的抗原改用基因工程表达后提纯的抗原或合成肽。第三代试剂使用双抗原夹心法原理，抗原选择和提纯工艺也更加精确。这种试剂可以检测针对HIV抗原的所有抗体亚类，包括IgG,IgM等，因而试剂敏感度和特异性比之前两代有明显提高。第四代试剂是已超出只查抗体的传统酶联模式，可同时检测抗原和抗体，称之为抗原抗体联合检测试剂。其最大的优点是可以缩短HIV感染后出现的无抗体的“窗口期”时间而增加用血安全。 1.
间接法原理是将HIV抗原包被到微孔或者其他载体（如小珠等）上，加入待检血清与其反应，洗涤后加入酶标记的抗人IgG。洗去多余酶后，再加底物发生酶催化的显色反应，测定光密度值（OD），与判断标准进行比较得出阴，阳结果。如果标本中含有HIV抗体，则抗体就会与固相载体上的抗原结合，洗涤去除未反应的非特异性抗原，加入酶标记的抗人IgG抗体与HIV抗体结合，形成HIV抗原-HIV抗体-酶标记的抗人IgG抗体复合物，被固定的酶使得底物反应颜色变深，经测定得到高光密度值，为阳性反应，反之，为阴性。2.
双抗原夹心法原理将HIV抗原包被在固相载体上，标本中的HIV抗体与抗原结合形成复合物，由于抗体的双价或多价性，它同时还能与其他抗原相结合，加入酶标记的同一类HIV抗体分子时，酶标记的抗原就会与固相载体上的抗体结合，形成HIV抗原-HIV抗体-酶标记的抗原复合物，最后加入底物发生酶催化显色反应，测定光密度值，与判断标准做比较，就可以得知标本中HIV抗体是阴性还是阳性。3.
抗原抗体联合检测原理在包被有HIV抗原和抗体的固相载体上加入待检测标本和酶标记的HIV抗原和抗体，加底物显色，用酶标仪测定结果。 ELISA方法是根据临界值（CO）判断结果的。临界值是将检测的阳性和/或阴性对照的OD值代入厂商提供的计算公式计算出来的判断阳性或者阴性结果的临界值。临界值计算公式是厂商生产试剂时，为了达到特定的敏感度和特异性要求，在检测了一定数量已知阳性和阴性标本以后，根据最合适的区分阳性和阴性的界限而定出的计算公式，对一种ELISA试剂选定适合的临界值极为重要。故厂商不同，不同方法的试剂临界值计算公式也不同。 影响ELISA实验的主要因素有反应时间、反应温度、标本的量等。抗原抗体反应如果在液相中很快即可达到平衡，但是在ELISA实验中，由于抗原或抗体被包裹在固相载体的表面，抗原抗体反应只能在固相载体表面进行，因此不要片面追求反应时间而降低反应准确度。
（1）化学发光免疫分析根据其采用的标记物不同可分为发光物标记、酶标记、元素标记化学发光免疫分析三大类。化学发光是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。发光物标记的CLIA是以发光物质、酶标记物作为标记物标记重组HIV的gp120、gp41和合成肽gp36抗原或抗体，在化学发光反应体系（如金刚烷胺增敏化学发光反应体系作为底物）中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能，产生激发态的中间物质由最低振动回到稳定基态，产生辐射，从而产生发光现象。利用发光信号的测量仪器，分析接受光量子产额，通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位。此系统包括两部分：化学发光反应系统和免疫反应系统，即HIV抗原抗体特异性反应过程中，伴随有化学反应过程而产生光的发射现象，其光量子强弱代表检测HIV抗体是阳还是阴。
凝聚实验将提纯后的HIV抗体吸附在乳胶、有色明胶颗粒或其他载体颗粒上。当加入的检测标本中的HIV抗体存在时，可在载体上的HIV抗原结合带动载体颗粒的凝聚，出现肉眼可见的凝集。而标本中无HIV抗体存在时，载体颗粒即在重力作用下沉入U型版底，形成一个红点。另一种方法就是将制备的一种抗人红细胞单克隆抗体结合上HIV抗原。这样将其与患者全血作用时，抗人红细胞单克隆抗体与红细胞结合，若血浆中含有HIV抗体，可使患者的红细胞发生肉眼可见的凝集。
快速实验（试纸检测）是用一种免疫层析法的原理定性测定血液中HIV-1/2抗体。将HIV抗原包被于渗透性或半渗透性的膜或板条上，加入样品，当样品迁移通过结合物包被处，与硒（金）胶体-抗原结合物结合，此混合物迁移通过固相包被的合成肽和重组抗原的患者结果窗。如果样本中含有HIV抗体，抗体将会与硒（金）胶体-抗原结合并在患者结果窗处被固相包被的合成肽与重组抗原所捕捉固定，形成一条红线。反之，则不形成红线。为了保证结果有效，在反应条中含有质控带，用来提示标本是否漏加，操作是否正确，试剂是否有效，使结果更加科学有效。
纯手打，希望大家对检测方法有个正确的概念
补充一点，快速法操作简单，不需要特殊仪器，出结果快，很多地方的CDC和VCT都是用这个方法，但是，其敏感度和特异性都要低于酶连而且检测结果总肉眼判断，容易收到主观因素影响，不同检测人员观察同一个结果可能给出不同结论，弱阳性结果常常较难判断，这也是为什么吧里不提倡自测的原因
自己的帖子还得自己顶
好师父，帮你顶！
没看，我相信医院和疾控，
请问下，三甲医院术前快速四项，一般用的什么方法？
无敌酱油王到此一游
我我们这疾控是把血给抽了以后用个什么离心机。然后再用试纸。她说初筛都是这个。确诊用酶什么的。是什么方法。准确度高么楼主？
在学校的楼梯上（学校是学医的）不知道被什么东西扎破了，当时没注意，回去看才发现脚趾流血了，伤口类似一个针眼，我就使劲挤血，也不知道被什么扎到了。好害怕，担心是社会上艾滋针报复，求大神帮忙分析。谢谢！
顶一下，这个帖子要顶
唉。。。原来快速法这么垃圾，，我快挂了
不是说快速（金标）的比酶联更敏感吗？所以容易假阳，没有酶联稳定。
快速法说的不太对
质控只能证明标本层析过去了
不能证明标本有有效物
不论唾液还是血液试纸 只放缓冲液质控也会显现
说白了就是加水质控也会显色
我特意打电话问过厂家
厂家说只放缓冲液 质控也会显色
只要你按说明做 主要看T区会不会显色
这个道理来说就是唾液比血液准因为唾液是缓冲液和牙龈渗出也充分混合了
才能保证牙龈渗出液充分经过T区
还有就是加拿大那个试纸是血液和缓冲液充分混合才往试纸孔里加
这样最科学
一般的血试纸 先加血后加缓冲液
如果血液粘稠
层析过去只有缓冲液
不能证明 血液也有效的过去了
所以还是只放血清最准
四周只测抗体可排除多少？
楼主不支持自测吗？
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ELISA 双抗夹心法检测抗原
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