间接血凝试验_百度百科
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间接血凝试验(IHA)是将(或)包被于红细胞表面，成为致敏的载体，然后与相应的抗体(或抗原)结合，从而使红细胞拉聚在一起，出现可见的凝集反应。
该技术在临床检验中应用广泛，以下简述其操作过程。红细胞是大小均一的载体颗粒，最常用的为绵羊、家兔、鸡的红细胞及O凝型人红细胞。新鲜红细胞能吸附多糖类抗原，但吸附蛋白质抗原或抗体的能力较差。致敏的新鲜红细胞保存时间短，且易变脆、溶血和污染，只能使用2～3d。为此一般在致敏前先将红细胞醛化，可长期保存而不溶血。常用的醛类有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。红细胞经醛化后体积略有增大，两面突起呈圆盘状。醛化红细胞具有较强的吸附蛋白质抗原或抗体的能力，血凝反应的效果基本上与新鲜红细胞相似。如用两种不同醛类处理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸处理。醛化红细胞能耐60C的加热，并可反复冻融不破碎，在4℃环境中可保存3—6个月，在一20℃的环境中可保存1年以上。致敏用的抗原或抗体要求纯度高，并保持良好的免疫活性。用蛋白质致敏红在低pH，低离子浓度下，用醛化红细胞直接吸附即可。间接法则需用耦联剂将蛋白质结合到红细胞上。常用耦联剂为双耦氮联苯胺(bis-diazotized benzidine，BDB)和氯化铬。前者通过共价键，后者通过金属阳离子静电作用使蛋白质与红细胞表面结合而达到致敏的目可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为1：64，同时设不含标本的稀释液对照孔。在含稀释标本1滴的板孔(或试管)中，加入0．5%致敏红细胞悬液1滴，充分混匀，置室温1～2h，即可观察结果。凡红细胞沉积于孔底，集中呈1圆点的为不凝集(一)。如红细胞凝集，则分布于孔底周围。根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱，以抖凝集的孔为滴度终点。
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两种细胞培养流感病毒的滴度比较
摘　要：目的探讨甲1（A1）型流感病毒在Vero细胞和MDCK细胞培养的可行性,确定最佳培养条件.方法将流感病毒接种于Vero细胞和MDCK细胞,在含有不同浓度胎牛血清或胰酶维持液中培养,于不同时间收获病毒液,检测血凝素滴度（HA）.结果胎牛血清对病毒的繁殖有明显抑制作用.加入适量胰酶（约5μg/ml）可提高病毒产量.最佳收获病毒时间为72～96 h.在MDCK细胞上的病毒HA滴度高于Vero细胞.结论两种组织细胞培养流感病毒结果相近,Vero细胞和MDCK细胞均可用于培养流感病毒.
优质期刊推荐影响EDS76病毒血凝滴度变化的观察--《中国兽药杂志》1996年04期
影响EDS76病毒血凝滴度变化的观察
【摘要】：影响ＥＤＳ７６病毒血凝滴度变化的观察王文成，卫广森，李庆三，张复震，潘长江（辽宁省兽医生物药品厂辽阳，１１１０００）鸡产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）自１９７６年由荷兰学者ＶａｎＥｃＫ首先报道以来，世界上许多国家发生。国外有人把该病列为给养禽业带来巨大经...
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【关键词】：
【分类号】：S858.315.3【正文快照】：
影响ＥＤＳ７６病毒血凝滴度变化的观察王文成，卫广森，李庆三，张复震，潘长江（辽宁省兽医生物药品厂辽阳，１１１０００）鸡产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）自１９７６年由荷兰学者ＶａｎＥｃＫ首先报道以来，世界上许多国家发生。国外有人把该病列为给养禽业带来巨大经济
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【引证文献】
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刘伟;[J];中国兽医杂志;1998年09期
【同被引文献】
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赵余放,杨增岐,张淑霞,何宏全,吴廉甫,康佐文;[J];西北农业大学学报;1996年03期
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魏文进,章金钢,李金中,叶志远,胡敬东,安连波,李茂祥;[J];中国兽医学报;1996年04期
曾力宇,金奇章,金钢,朱雷,姚二梅,李茂祥,李富胜,殷震,侯云德;[J];中国兽医学报;1997年03期
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【二级引证文献】
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韩丽珍,曹蔚,吴彤;[J];山地农业生物学报;2000年03期
汪铭书,程安春,郭万柱,陈孝跃;[J];中国兽医科技;2002年02期
【相似文献】
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罗怡珊，李天宪，冯锋，赵林，姜平，张振兴;[J];畜牧兽医学报;1995年06期
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病毒血凝和血凝抑制试验--(以新城疫为例)
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内容提示：(4)大型养鸡场,每次进行抽测时,抽样率一般不低于0 1%一0 5%,小型鸡群,抽样率应有所增加,一般认为理想的抽样率应为2 0%
(5)鸡群接种新城疫疫苗后,经
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高阳；董雪；康廷国；赵长智；黄智；张效禹
沈阳市卫生防疫站辽宁沈阳110031；辽宁中医学院中药系辽宁沈阳110032
&&&&关键词：ACT；甲1流感病毒；MDCK细胞；血凝滴度
&&&&目的 体外观察牛蒡苷元 (arctigenin,ACT)抗甲 1流感病毒作用 ,为进一步确认 ACT是牛蒡子 Fructusarctii解表功能有效成分提供实验依据。方法 采用 MDCK细胞培养法 ,通过红细胞凝集实验 ,以流感病毒血凝滴度为指标 ,观察 ACT对流感病毒复制的抑制作用。结果
ACT浓度 (m mol/ L )为 6 .7,13.4 ,2 6 .8和 5 3.6的血凝滴度抑制率 (% )分别为 0 .75 ,87.5和 10 0。结论
ACT在体外有直接抑制流感病毒复制的作用 ,是牛蒡子解表功能的有效成分 ,对其进行含量测定作为牛蒡子质量标准的定量指标是适宜和可行的。
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