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怎样通过图示来判断细胞分裂的各个时期
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人体内的细胞是如何组织起来的？
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内容提示：人体内的细胞是如何组织起来的？,组织,人体,细胞,是怎样,细胞是,人体内的细胞,人体是怎样,人体内一种细胞,人体细胞
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[新购得的细胞株怎么处理(细胞株,营养液,培养瓶)] 从上海细胞所刚购来的细胞，显微镜下观察，细胞量中等，细胞状态也较好，要不要消化，换新瓶和新的营养液呢？还有他们寄来的细胞是用50ml的培养瓶，并装满营养液的，那么它的营养液要不要留下来？有人说他们的营养液应该丢掉，可是有人说应该用他们的营养液养先让细胞适应一段时间，再用自己的营养液。到底应该怎样呢？ 关键词:[营养液 细胞株 培养瓶]…
从上海细胞所刚购来的细胞，显微镜下观察，细胞量中等，细胞状态也较好，要不要消化，换新瓶和新的营养液呢？还有他们寄来的细胞是用50ml的培养瓶，并装满营养液的，那么它的营养液要不要留下来？有人说他们的营养液应该丢掉，可是有人说应该用他们的营养液养先让细胞适应一段时间，再用自己的营养液。到底应该怎样呢？
回复细胞先培养过夜，于第二天根据细胞生长情况及密度观察是否可以传代。这点要借平时培养细胞的经验来判断，一般细胞都会很快生长。培养一二天后的细胞经离心后重新分瓶传代至两瓶或三瓶，注意培养瓶一半用新的，一半用上海所给的培养瓶进行传代。至于营养液根据外观情况也可以留着传代用或弃之，等到细胞生长至一定的密度后赶紧进行液氮冻存。回复谢谢楼上的回复谢谢楼上的回复谢谢楼上的回复不好意思，网速太慢，发重了回复由于购买的细胞所使用的与你手头的不一定相同，大多数时候是不一样的。所以原来细胞瓶中的培养液不要丢弃，用你手头的血清与原来的培养液配合使用，逐渐增加你现在血清的比例。若突然更换血清，细胞的生长肯定要受到影响。待细胞完全适应了你的血清，可以考虑冻存。回复由于购买的细胞所使用的血清与你手头的血清不一定相同，大多数时候是不一样的。所以原来细胞瓶中的培养液不要丢弃，用你手头的血清与原来的培养液配合使用，逐渐增加你现在血清的比例。若突然更换血清，细胞的生长肯定要受到影响。待细胞完全适应了你的血清，可以考虑冻存。我也是这样想的，可是细胞所的人说，细胞是邮寄过来的，所以原瓶中的培养基可能活性降低，所以要用自己的真得不清楚到底怎样是对的
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学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法
【来源/作者】中国微生物菌种网 【更新日期】 11:10:56
掌屋凋亡细胞的形态特征2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法
二、实验原理
细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的组合，是细胞遵循一定规律自己结束生命的自主控制过程。细胞凋亡具有可鉴别的形态学和生物化学特征。
在形态上可见凋亡细胞与周围细胞脱离接触，细胞变园，细胞膜向内皱缩、胞浆浓缩、内质网扩张、细胞核固缩破裂呈团块状或新月状分布、内质网和细胞膜进一步融合将细胞分成多个完整包裹的凋亡小体，凋亡小体最后被吞噬细胞吞噬消化。在凋亡过程中细胞内容物并不释放到细胞外，不会影响其它细胞，因而不引起炎症反应。
在生物化学上，多数细胞凋亡的过程中，内源性核酸内切酶活化，活性增加。核DNA随机地在核小体的连接部位被酶切断，降解为180-200bp或它的整倍数的各种片断。如果对核DNA进行琼脂糖电泳，可显示以180-200bp为基数的DNA ladder（梯状带纹）的特征。
相比之下，坏死是细胞处于剧烈损伤条件下发生的细胞死亡。细胞在坏死早期即丧失质膜完整性，各种细胞器膨胀，进而质膜崩解释放出其中的内容物，引起炎症反应，坏死过程中细胞核DNA虽也降解，但由于存在各种长度不等的DNA片断，不能形成梯状带纹，而呈弥散状。
一些温和的损伤刺激及一些抗肿瘤药物可诱导细胞凋亡，通常这些因素在诱导凋亡的同时，也可产生细胞坏死，这取决于损伤的剧烈程度和细胞本身对刺激的敏感程度。
三尖杉酯碱（HT）是我国自行研制的一种对急性粒细胞，急性单核白血病等有良好疗效的抗肿瘤药物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范围内作用2小时，即可诱导HL-60细胞凋亡，并表现出典型的凋亡特征。本实验用1μg/ml HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡，同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）对细胞进行双重染色，可以区别凋亡、坏死及正常细胞。
细胞膜是一选择性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿过质膜。当细胞坏死时，质膜不完整，PI就进入细胞内部，它可嵌入到DNA或RNA中，使坏死细胞着色，凋亡细胞和活细胞不着色。而一些活细胞染料由于为亲脂性物质，可跨膜进入活细胞，因而可进行活细胞染色。Hoechst33342是一种活性荧光染料且毒性较弱，它是双苯并咪唑的一种衍生物。与DNA特异结合（主要结合于A-T）碱基区），显示凋亡细胞和活细胞。凡是看到有凋亡小体的细胞都是凋亡细胞。
三、实验用品
1、试剂：三尖杉酯碱（HT），300μg/ml，100mmol/L Tris-HCl（pH7.5），5mol/L EDTA缓冲液、碱性裂解液：0.2mol/L NaOH, 1%SDS、醋酸钠：3mol/L KAc（pH4.8）；异丙醇；70%乙醇；溴酚蓝，指示剂。TBE电泳缓冲液，1%琼脂糖，溴乙锭。PI母液：500μg/ml；Ho33342母液：2mmol/L。 2、仪器设备：荧光显微镜，电泳仪，电泳槽，微量加样器（1ml，100μl）0.5、1.5ml离心管，载玻片，盖玻片。
四、实验材料
人早幼粒白血病HL-60细胞，用含10%小牛血清的RPMI1640培养基在37℃，5%CO2条件下培养。
五、方法步骤
1、三尖杉酯碱诱发HL-60细胞凋亡（1）实验前约24小时，接种两瓶HL-60细胞，标记①、②，每瓶含约6ml培养液，置37℃，5%CO2培养箱培养。（2）实验前约2.5小时，当细胞密度达到70%，①号瓶加入三尖杉酯碱200μl，使终浓度为1μg/ml，②号瓶中加入同等量PBS（pH7.4）作对照。共同放入培养箱中继续培养2.5小时。
2、Ho33342和PI双重染色鉴别三种细胞（1）染色：将瓶中的细胞摇匀取200μl于1.5ml的离心管中，加入Ho33342母液2μl，PI 20μl，染色15分钟。（2）滴片：取一载玻片用双面胶围成一小室，从离心管中各取以上染色后的细胞悬液10μl，加入小室内盖上盖玻片，荧光镜下用紫外激发光，高倍镜下观察，区别三种细胞，并注意三者比例。
六、注意事项
1、诱导培养HL-60细胞时间要准确；2、荧光显微镜下观察细胞时，由于荧光易碎灭，观察时要尽量快。
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