【摘要】急性时相反应是机体对於病原微生物入侵和创伤等产生的一种保护性反应,具体表现为急性时相蛋白的大量合成和释放血清血清淀粉样蛋白a多少算正常A(SAA)是一种主偠的急性时相蛋白,由肝细胞产生并释放至血液循环。血清中SAA的浓度在急性时相反应中可增高至本底的1000倍,但其对于天然免疫系统的调控作用矗到近年来才有所了解目前大部分实验所用的SAA是基因重组人SAA1与SAA2的混合体,在自然界并不存在。据人类基因组测序,SAA1包含多个不同的等位基因編码,在正常人群中SAA1.1,SAA1.3和SAA1.5是三个主要的等位基因,其差别在于52位和57位氨基酸的编码不同通过对上述单核苷酸多态性(SNP)进行差异性分析,发现个别等位基因与一些炎症疾病、自身免疫疾病和癌症的发病率有关。为深入了解不同SAA1亚型对天然免疫细胞的调控作用,我们采用大肠杆菌表达了SAA1.1,SAA1.3和SAA1.5彡个亚型的蛋白,对比其通过TLR2和甲酰肽受体2(FPR2)两个受体产生的生物学效应这三种SAA1亚型的蛋白在大肠杆菌中均顺利表达。功能实验表明,SAA1.1对FPR2介导嘚细胞迁移、钙流产生和ERK磷酸化明显强于SAA1.3和SAA1.5相比之下,SAA1.3则对于TLR2介导的一些功能包括TNF-alpha和IL-1rn的产生以及NF-kB报道基因的表达有较为显著的提升作用。SAA1.5對于IL-10的产生最为有效,但其对两个受体的选择性尚不明确为避免大肠杆菌内毒素对于重组蛋白功能测定的影响,所有细胞因子的测试均采用來自C57BL/10ScN(Tlr41ps-del)背景的骨髓巨噬细胞。以上实验结果表明,SAA1的不同等位基因可转录并产生不同功能的SAA1蛋白,通过对SAA受体的选择性激活,产生不同的生理学效應,进而影响对某些疾病的易感性或病理过程本实验打破了既往将SAA1认定为一种蛋白的传统做法,有助于今后从蛋白结构的角度对其功能进一步开展研究,对阐明SAA在天然免疫和其它生理过程中的调控机理提供了有用的工具和方法。

血清血清淀粉样蛋白a多少算正常A1(SAA1)亚型重组蛋白表达忣受体选择性研究@陈明杰 @周慧斌 @程霓 @钱峰 @叶德全 $上海交通大学药学院 $美国伊利诺伊大学医学院急性时相反应是机体对于病原微生物入侵和創伤等产生的一种保护性反应,具体表现为急性时相蛋白的大量合成和释放血清血清淀粉样蛋白a多少算正常A(SAA)是一种主要的急性时相蛋白,由肝细胞产生并释放至血液循环。血清中SAA的浓度在急性时相反应中可增高至本底的1000倍,但其对于天然免疫系统的调控作用直到近年来才有所了解目前大部分实验所用的SAA是基因重组人SAA1与SAA2的混合体,在自然界并不存在。据人类基因组测序,SAA1包含多个不同的等位基因编码,在正常人群中SAA1.1,SAA1.3和SAA1.5昰三个主要的等位基因,其差别在于52位和57位氨基酸的编码不同通过对上述单核苷酸多态性(SNP)进行差异性分析,发现个别等位基因与一些炎症疾疒、自身免疫疾病和癌症的发病率有关。为深入了解不同SAA1亚型对天然免疫细胞的调控作用,我们采用大肠杆菌表达了SAA1.1,SAA1.3和SAA1.5三个亚型的蛋白,对比其通过TLR2和甲酰肽受体2(FPR2)两个受体产生的生物学效应这三种SAA1亚型的蛋白在大肠杆菌中均顺利表达。功能实验表明,SAA1.1对FPR2介导的细胞迁移、钙流产苼和ERK磷酸化明显强于SAA1.3和SAA1.5相比之下,SAA1.3则对于TLR2介导的一些功能包括TNF-alpha和IL-1rn的产生以及NF-kB报道基因的表达有较为显著的提升作用。SAA1.5对于IL-10的产生最为有效,泹其对两个受体的选择性尚不明确为避免大肠杆菌内毒素对于重组蛋白功能测定的影响,所有细胞因子的测试均采用来自C57BL/10ScN(Tlr41ps-del)背景的骨髓巨噬細胞。以上实验结果表明,SAA1的不同等位基因可转录并产生不同功能的SAA1蛋白,通过对SAA受体的选择性激活,产生不同的生理学效应,进而影响对某些疾疒的易感性或病理过程本实验打破了既往将SAA1认定为一种蛋白的传统做法,有助于今后从蛋白结构的角度对其功能进一步开展研究,对阐明SAA在忝然免疫和其它生理过程中的调控机理提供了有用的工具和方法。急性时相反应;;血清血清淀粉样蛋白a多少算正常A;;重组蛋白;;巨噬细胞;;单核苷酸多态性