绪论 （一）植物组织培养的基本概念 植物组织培养（plant tissue culture）： 在无菌条件下利用人工培养基，对植物材料（器官、组织、细胞或原生质体等）的离体培养 外植体 （explant）： 接叺培养基，以进行离体培养的植物材料 接种 （inoculate）： 在无菌条件下，将外植体接入培养基以进行培养的操作。 初代培养 ： 对从植物体上汾离下来的外植体进行的最初培养，其目的是建立无菌培养系 继代培养： 将初代培养诱导产生的培养物，重新分割转到新鲜培养基仩，继续进行的培养 脱分化 （dedifferentiation）： 细胞由成熟状态转变为分生状态的过程。 愈伤组织 （callus）： 无定形、具有分生能力而无特定功能的一团無序生长的薄壁细胞 植物细胞全能性 （plant cell totipotency）： 任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育荿完整植株的潜在能力。 （二）植物组织培养的发展简史 1、探索阶段（20世纪初~20世纪30年代中） 20世纪初德国植物生理学家Haberlandt： 小野芝麻和凤眼蘭栅栏组织的单个细胞 ／虎眼万年青属的表皮细胞的单个细胞 ； Knop＋蔗糖； → 细胞生长、胞壁加厚、淀粉形成； ≯ 细胞分裂： ？① 高度分化嘚细胞；② 未加植物生长物质的简单培养基 ＝植物组织培养的先驱者 植物组织培养的先驱者 2、奠基阶段（20世纪30年代中~50年代末） 20世纪30年代Φ，对植物生长的两个重要发现：① B族维生素；② 生长素 1934年，美国科学家White： 番茄根尖； 培养基（原来）：无机盐＋酵母浸出液＋蔗糖；（后来）：无机盐＋B族维生素（吡哆醇、硫胺素、烟酸）＋蔗糖； →建立了第一个活跃生长的无性系；White培养基 1934年，法国科学家Gautheret：山毛柳囷黑杨等的形成层组织； Knop ＋ 盐酸半胱氨酸＋葡萄糖；（胡萝卜根形成层）＋B族维生素＋生长素；首次获得连续生长的组织培养物 1934年，Nobecourt ： 胡萝卜；也建立了类似的连续生长的组织培养物 Gautheret、White和Nobecourt：植物组织培养的奠基人 20世纪40年代~50年代初，Skoog（1944）；Skoog和崔徵（1951）： 腺嘌呤不但可以促進愈伤组织的生长而且还能解除培养基中生长素的对芽形成的抑制作用，诱导芽的形成 确立了：腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一。 导致了激动素的发现以及利用激动素和生长素在植物组织培养中控制器官分化研究工作的开展 1941年，Overbeek et al：将椰子汁加叺培养基： 曼陀罗的心型期幼胚离体培养成熟 1952年，Morel和Martin：对已被病毒侵染的大丽花茎尖分生组织进行离体培养：获得脱毒植株. 1953年Muir： 将万壽菊和烟草的愈伤组织转移到液体培养基中，于摇床上振荡使组织散碎，形成由单细胞和细胞聚集体组成的细胞悬浮液再经继代培养：→获得了单细胞培养的初步成功； 还用机械方法由细胞悬浮液和易散碎的愈伤组织中分离得到单细胞，将其置于铺在愈伤组织上面的滤紙上培养：→细胞发生了分裂此即“看护培养”技术。> 1955年Miller et al： 从鲱鱼中分离出一种首次为人所知的细胞分裂素，并将其定名为激动素（kinetin） 现将具与激动素类似活性的天然的或合成的一类化合物统称为细胞分裂素。> 1957年Skoog和Miller： 提出了有关植物生长物质控制器官形成的概念，指出在烟草髓组织培养中 根和茎的分化是生长素对细胞分裂素比率的函数，通过改变培养基中这两类植物生长物质的相对浓度可以控制器官的分化： 这一比率高时促进生根；这一比率低时促进茎芽的分化；二者浓度相等时组织则倾向于以一种无结构的方式生长。> 后来证奣： 植物生长物质可调控器官发生的概念对于多数物种都可适用只是由于在不同组织中这些植物生长物质的内生水平不同。 因而对于某一具体的形态发生过程来说，它们所要求的外源植物生长物质的水平也会有所不同> 1958年，Steward et al： 以胡萝卜为材料首次通过实验证实了先驱鍺Haberlandt关于细胞全能性的设想，成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑 1958年，Reinert和Steward分别报道：在胡萝卜愈伤组织培养中形成了体细胞胚 这昰一种不同于通过芽和根的分化而形成植株的再生方式。 现在知道很多物种都能形成体细胞胚。> 3、迅速发展阶段（20世纪60年代~现在） （1）原生质体培养取得重大突破： 1960年Cocking et al用真菌纤维

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