blot和免疫组化方法检测肝癌组织中SSX1-5基因在mRNA水平和蛋白水平的表达情况。(3)应用统计学软件SPSS13.0对实验结果进行统计学分析。结果：(1)SSX1-5基因在mRNA水平的表达情况：①在肝癌细胞株中,检测到SSX1-5基因中,SSX1、SSX2和SSX3基因有表达；②在26例肝癌组织标本中,检测到SSX1-5基因均有表达,且SSX1和SSX3基因表达率均在50%左右,SSX2和SSX4基因的表达率次之,SSX5基因表达率最低为26.9%；5种基因的表达率的差异无统计学意义；③SSX1-5基因在mRNA水平共 

0引言SSX系列硬齿面行星齿轮减速器具有广泛的通用性,已应用于矿山、冶金、运输、码头、建材等行业,特别是在煤矿(大同矿务局、新汶矿务局、宁煤集团、陕西黄陵矿、彬县下沟矿等)带式输送机上已得到广泛的使用。近年来,随着煤矿井下运输能力的不断提高及巷道的不断延伸,长距离大功率的带式输送机越来越广泛地用于国内各大煤矿,这就对输送机传动装置提出了更高的要求。与之配套的大功率大转矩SSX系列硬齿面行星齿轮减速器的使用,使冷却润滑系统方面的问题就会更加突出。减速器冷却润滑系统的好坏,将直接影响到减速器及带式输送机的正常与安全运行。硬齿面行星齿轮减速器与中硬或软齿面齿轮减速器相比虽具有体积小、重量轻等优点,但对冷却润滑系统提出了较高要求。1冷却润滑系统的组成及其工作原理SSX系列硬齿面行星齿轮减速器自带润滑油泵和外接高效冷却器实行强制润滑和冷却,其冷却润滑系统包括外部油路和内部油路以及辅助设施(通气罩、散热冷却结构等),其中外部油路主要由滤油器... 

0引言癌-睾丸抗原(cancer testis antigen,CT抗原)是一类可在多种肿瘤组织中表达,而在睾丸以外的其他正常组织几乎不表达的抗原,又称为肿瘤特异性共享抗原(shared tumor specific antigen).利用这一表达特点,一些CT抗原的肿瘤疫苗(如NY-ESO-1,MAGE)已试用于临床治疗并取得较好的效果[1-2].然而,由于CT抗原在一些肿瘤中表达频率不高又限制了其疫苗在这些肿瘤中的应用.因此,在该研究领域中,一方面不断地利用各种新技术寻找和鉴定更多的CT抗原,另一方面则是对已报道的CT抗原进一步深入的研究,了解其表达特征,评价这些新发现的CT抗原用于肿瘤免疫治疗的可能性[3-5].SSX基因又称滑膜肉瘤X断裂点基因(synovial

癌-睾丸抗原(cancer-testisantigen,CTA)是一类限制性表达于正常睾丸和肿瘤的抗原,它曾被认为与癌的发生有关。近几年来,CTA被看作是癌症免疫疗法的理想靶点而倍受关注[1]。CTA的编码基因通过诱导人体的免疫细胞引起特殊的体液免疫和细胞免疫反应。已有报道指出,CTA家族中某些基因已经用于肿瘤的分子诊断和免疫治疗[2]。滑膜肉瘤X断裂点基因(synovial sarcoma,X break-point gene),又称SSX基因,是多个成员的基因家族,它们均位于X染色体p11.23~p11.22位,作为CTA家族成员之一,其只在睾丸、胎盘等具有血液屏障的正常组织中表达。对SSX基因序列和功能研究发现,SSX基因表达产物的主要功能为转录抑制。SSX基因编码的蛋白有两个功能区:SSX-KRAB区(SSX-related kruppel

目的:检测癌-睾丸抗原SSX1-5mRNA在视网膜母细胞瘤(RB)组织中表达情况,以及用于RB免疫治疗的可能性。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测18例RB组织、19非肿瘤病变视网膜组织及19例眼部正常组织中癌-睾丸抗原SSX1-5mRNA的表达情况,并结合临床相关指标进行统计学分析。随机抽取PCR阳性产物进行DNA测序。结果:18例RB组织中,SSX1、SSX2和SSX4 mRNA的表达率分别为33.3%(6/18)、5.6%(1/18)和22.2%(4/18);未检测到SSX3和SSX5的表达。RB组织中,至少表达1个SSX基因者达50.0%(9/18);表达2个或2个以上者达11.1%(2/18)。在非肿瘤病变视网膜组织以及眼部正常组织中无一例表达SSX1-5。SSX1-5基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度和临床分期等无显著相关性(P＞0.05)。DNA测序证实PCR阳性产物为目的基因。结论:... 

视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤,对视力和生命有严重的威胁和危害。即使摘除眼球也可能因早期全身转移而死亡,目前主要的治疗手段是手术摘除及局部放疗,但其死亡率仍较高。因此急需寻求新的治疗方法,而免疫治疗正是这些新的治疗方法中的一种。然而开展免疫治疗的前提是特异性肿瘤抗原的存在。目前已发现了众多的肿瘤相关抗原,其中一类为“癌-睾丸抗原”(cancer/testis antigen,CTA),这类抗原有着共同的表达模式,即在各种肿瘤组织中有不同频率的表达,而在正常组织中的表达仅限于睾丸,因而是一类适用于肿瘤免疫治疗的靶抗原。目前已有部分CTA研制出肿瘤疫苗并用于临床[1]。部分SSX基因家族成员已被证实为CTA,但该基因家族在RB中的表达目前尚未见相关文献报道。本研究检测了SSX1~5基因在RB中的表达情况,以期为探索免疫治疗RB提供理论依据。1材料和方法1.1材料来源所有标本均来源于广... 

carcinoma,HCC)占原发性肝癌的90%,是世界上发病率第六位的常见肿瘤,在由肿瘤致死的病因中位居第三。目前,在我国以及很多其他国家肝癌的发病率和死亡率仍在不断升高。由于肝癌的病因以及确切的分子机制尚不明确,导致其早期诊断困难,缺乏有效的预防和治疗手段,加之肝癌患者在长期用药过程中产生的耐药,使得预后复发、转移,存活率很差。因此,进一步深入了解肝癌发生发展的分子机制,寻找新的治疗方案及诊治靶点具有重要的临床意义。PLK1(polo-like 1)是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,通过参与检查不同的细胞周期检查点来调控细胞周期。有研究表明,PLK1与肿瘤的发生发展有很大的关系,在许多肿瘤中都有高表达,其表达缺失可激活促凋亡途径和抑制肿瘤细胞生长。目前,PLK1作为抗肿瘤药物的靶点被广泛关注,PLK1的抑制剂也层出不穷。Volasertib为PLK1的特异性抑制剂,能在体内外抑制多种肿瘤的生长。因此,对PLK1的研究以及围绕PLK1展开的新的治疗法案具有实际意义,对肿瘤的靶向治疗具有指导作用。目的:探讨PLK1抑制剂volasertib单药及联合常规化疗药顺铂(DDP,cis-Dichlorodiamineplatinum)在体内外对肝癌细胞以及肝癌移植瘤的作用及其机制研究以寻找有效且安全的的抗肝癌疗法。方法:1、MTT法检测不同浓度梯度volasertib单药以及联合DDP对肝癌细胞增殖的影响。2、流式细胞仪检测分析volasertib单药及联合DDP对肝癌细胞周期分布以及凋亡情况的影响。3、荧光显微镜观察检测不同浓度volasertib对肝癌细胞纺锤体形成的影响。4、移植瘤实验检测volasertib体内的抑瘤作用。5、Western G2细胞周期阻滞于G2/M期,进而诱导凋亡。不同浓度的联合作用组凋亡率明显上升,对照组与单药组之间有统计学差异。3、Volasertib能够诱发BEL7402和Hep G2细胞纺锤体形成异常。4、Western blot显示,PARP剪切片段、Cyclin B1和PLK1表达量增加,Wee1表达量减少,并呈现时间与剂量依赖性。5、15 mg/kg volasertib能够抑制BEL7402以及Hep G2移植瘤的生长。结论:PLK1抑制剂volasertib能够在体内外抑制肝癌的生长增殖,volasertib联合DDP对肝癌细胞BEL7402和Hep G2有协同抑制作用。PLK1可能是抑制肝癌增殖的分子靶点,volasertib有望成为治疗肝癌的新靶向药物,但是其与DDP的联合作用机制还需进一步研究。

【学位授予单位】：暨南大学
【学位授予年份】：2015