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&&&体外授精在摘取卵子前36小时—40个小时我该注意些什么？
体外授精在摘取卵子前36小时—40个小时我该注意些什么？
当检测表明卵子成熟至适合体外授精时，医生为我注入hCG排卵诱发剂，之后再过36小时~40个小时就可以摘取卵子了，请问在摘取卵子前我该注意些什么？
因为在摘取卵子的时候需要进行麻醉，所以在摘取卵子的前一天晚上10点以后，你既不能喝水，也不能吃东西，一直持续到第二天中午之前。虽然你可能会觉得饥渴难忍，但是为了你和宝宝的健康，这点苦又算得了什么。
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人工授精取精时有哪些注意事项
来源：寻医问药网 时间：
13:31:03 发布者：
人工授精取精时有哪些注意事项?对于这个问题，很多人不太了解。人工授精是将男方的精液注入女方宫颈内以帮助受孕的过程，所以在实施人工授精术之前，需要将男方的精液取出。人工授精的取精过程看似简单，但是有很多注意事项。下面一起来详细了解清楚。
人工授精技术主要包括诱导排卵、取精并优化处理精液以及精液注入等几个主要步骤。人工授精的成败与精液精子质量有密切的关系，如果取出的精子质量太低或者在留存的过程中感染了细菌，那么会直接影响人工授精的结果。
人工授精取精时有哪些注意事项?
首先，专家建议男性朋友们按照医生的要求取精，因为精子精液在离开体外之后，对外界的环境也有一定的要求，如果取精过早或方法不当，会影响获得的精子质量，从而影响人工授精的结果。
其次，在人工授精取精前数月，男方要戒烟戒酒，保持规律的生活以提高精子质量，同时还需检查以确定是否有生殖系统炎症，若发现有生殖系统炎症要及时进行治疗，以免因炎症影响精子质量。
第三，在人工授精取精前男方需要排精一次，然后禁欲，直到取卵日当天。这是主要是因为精液在体内留存时间过长或过短都会对精子质量造成影响，所以这样做的主要目的是保证取精时能够取到相对优质的精子。
第四，在取精时要严格无菌操作。取出的精子需要放置于无菌的器皿中，然后迅速地传递到实验室内，对精子精液进行优化处理，在这整个过程中，无论是哪一环节都需要保证无菌操作，以免取出体外的精子精液的质量受到影响。
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: &&&&DOI: 10.3969/j.issn.14.27.023
细胞与组织移植 cell and tissue transplantation
比较2种常用授精法在体外授精-胚胎移植中的差异
罗灿峤，李宇彬，李& 涛，肖& 珊，龙玲莉，谢文林，聂钊铭
中山大学附属第一医院，广东省广州市&& 510000
Comparison of two common insemination methods on in-vitro fertilization and embryo transfer
Luo Can-qiao, Li Yu-bin, Li Tao, Xiao Shan, Long Ling-li, Xie Wen-lin, Nie Zhao-ming
The First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510000, Guangdong Province, China
参考文献(0)
体外授精-胚胎移植是卵子和一定量精子在培养系统中共培养授精及其后向宫腔内进行胚胎移植的过程，俗称试管婴儿。自从1978年首例试管婴儿技术诞生以来，此技术目前成为了人工辅助生殖技术最常用及有效的技术手段之一，也被学者们认为是人类300多年来科技积累的结晶[1]。爱德华教授作为人类首例试管婴儿的发明者之一获得了2010年诺贝尔医学奖[2]。在中国辅助生殖技术也是蓬勃发展，紧跟国际水平。然而，虽然试管婴儿技术经过30多年的发展，但是在技术层面上仍然有许多问题亟待改进，研究卵子授精相关影响因素也是其中值得探索的方向之一[3]。目前决定使用授精方式由多方面因素决定的。首先最重要的是男方精液质量[4]，包括精子密度、活动力及功能等，如果上述指标无明显异常，将采用常规体外授精技术进行精卵结合，但是出现严重的少弱畸精症及精子功能异常情况下，临床上一般选择单精子卵胞浆内注射(ICSI)方法进行卵子授精。其次，部分患者卵子异常原因或者不明原因造成受精障碍[5]，也将尝试采取单精子卵胞浆内注射技术。第三，部分特殊技术，如未成熟卵体外成熟[6]、冷冻卵子授精和植入前遗传学诊断等[7-8]，为了确保良好的受精率也采取单精子卵胞浆内注射方式受精。除外上述特殊情况采用单精子卵胞浆内注射技术外，大多数因为女方原因进行试管婴儿助孕的夫妻均采用常规体外授精方式进行。
近年来由于众多学者对辅助生殖技术安全性的担忧[9-10]，临床上考虑尽量减少对配子、胚胎等进行干扰性操作。单精子显微注射技术由于比常规体外授精技术更加增加了人为干扰因素，增加了后代出生畸形率[11]，也应该减少使用。从这方面考虑，如何改进常规体外授精中授精方法的受精失败率，有着更加长远的意义。
目前在常规体外授精-胚胎移植的授精具体操作方法等方面有多种选择[12]。然而按照是否使用了矿物油覆盖，主要分为有油覆盖的微滴式授精和无油覆盖的敞开式授精法。虽然另外一些授精方法，如4，5孔板或者组织培养中心孔板法也有研究者在使用[13-14]。但是本实验主要关注目前最常用的2种方法：微滴法和敞开式授精法。微滴授精是制作50-100 &L含有精子的液滴，盖上矿物油，然后将卵子加入其中进行孵育授精。在敞开式授精法中，是将特定量经过预处理的精子直接加入含有卵子、不覆盖矿物油的孔板中进行授精[15]。临床上采用何种授精法常取决各实验室的操作常规、操作时间等；但是最重要的决定因素是体外授精-胚胎移植助孕结局。
然而，目前较少文献对微滴法和敞开式授精法的受精结局以及随后的胚胎培养情况进行详细比较。10多年前一项研究提示这2种授精方法在受精率及受精失败率方面差别无统计学意义[16]。但是作者回顾性的内部数据分析提示目前使用微滴法进行体外授精有着更高的受精失败率(未发表)。为了研究这2种方法对受精失败率、胚胎发育及试管婴儿结局等影响，作者在本试验中前瞻性对较大样本的非男性因素的体外授精-胚胎移植周期中进行分析，对2种授精方式的总体受精率、受精失败率和异常受精率进行评估；胚胎发育情况通过卵裂率、优质胚胎率以及妊娠率进行比较分析。
杂志出版内容重点：；；；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；；
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设计：分组对比观察、前瞻性研究。
时间及地点：2012年1月至2013年6月在中山大学附属第一医院生殖中心完成。
对象：进行体外授精-胚胎移植助孕的患者夫妻。
伦理：所有与本研究相关的试验设计以及评估技术都通过了中山大学附属第一医院伦理委员会的批准。
患者的选择与分组：本前瞻性研究募集1 175例患者。按照取卵授精日期，患者随机分配进入2个授精组。如果取卵日期是奇数，则分配进入微滴法授精组；如果取卵日期是偶数，则分配进入敞开法授精组。
纳入标准： ①按照世界卫生组织制定标准，男方精子活动力、密度、形态学以及顶体功能等都在正常范围[17]。②患者年龄不大于38岁，取卵数大于4枚。③在进入周期前3个月内没有使用过激素类药物。④女方没有特殊的影响卵子质量的疾病，例如多囊卵巢综合征、卵巢早衰及自身免疫性疾病等。
排除标准：诊断多囊卵巢综合征、多囊卵巢、卵巢早衰及合并特殊内外科疾病者。
按照取卵授精日期，患者随机分配进入2个授精组。如果取卵日期是奇数，则分配进入微滴法授精组(n=573)，其授精方式是使用矿物油覆盖微滴进行；如果取卵日期是偶数，则分配进入敞开法授精组(n=602)，其授精方式是在不使用矿物油覆盖的开放培养环境中进行。每名患者只募集1个周期。所有患者均签署了知情同意书。
体外授精促排卵及取卵：促排卵使用长方案，黄体中期使用长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)1.0 mg降调节。14 d后抽血确定已经合理降调节后，使用重组促性腺激素进行促排卵。当至少2个卵泡直径&18 mm，结合抽血雌二醇、孕酮情况以及总体卵泡数决定扳机时间。扳机使用250 &g重组人类绒毛膜促性腺激素，36 h左右后进行经阴道取卵术。
取卵后，卵子现在培养液中漂洗，再一并置入盛有&&& 1 mL经过平衡的人类输卵管液授精液的单孔培养皿中(3037)，然后在37 ℃, 体积分数6% CO2的培养箱中平衡3-5 h。如果取卵数超过15枚，则使用两个单孔皿。
精子处理：精液是通过手淫方式收集。在常温经过30-60 min液化后，评估精子密度、活动力和形态。精子的优化是通过两层梯度离心法(80%和40%) (Sage BioPharma, Bedminster)和上游法进行的。精子在授精前在人类输卵管液中在培养箱中预培养3.0-4.0 h。
卵子授精：
矿物油覆盖的微滴授精法：取卵后，使用人类输卵管液授精液将经上述预处理的精子稀释至浓度为：0.3&109 L-1，接着吸取每微滴100 &L的精子混悬液注入有盖培养皿中(3002)，然后盖上矿物油置于培养箱中平衡。经过平衡3.0-4.0 h后，每微滴中加入一两枚卵子进行体外授精，再将含卵子和精子的培养皿置于培养箱平衡16-20 h，直到进行受精评估。
无油覆盖的敞开式授精法：取卵后，卵子在培养箱经过3-5 h的预培养后，将一定量的经过预处理的精子加入到含有卵子的单孔皿(3037)中，将精子浓度调至0.3&109 L-1。每个单孔皿中置入不超过15枚卵子。授精后再将含卵子和精子的培养皿置于培养箱平衡16-20 h，直到进行受精评估。
受精及胚胎形态学评估以及胚胎移植：除外使用了2种不同的授精方式，2组间无论在受精评估、培养方法、胚胎形态评估、胚胎冷冻以及胚胎移植程序等都相同。在精卵接触后16-20 h进行原核(PN)及极体(PB)的观察。正常受精是可见两个原核(2PN)及两个极体(2PB)；多精受精定义为可见超过两个原核。如果未能见到原核判断为未受精。常规体外授精-胚胎移植是使用卵丘复合体进行的，所以卵子成熟度评估只能在取卵后第2天早上进行。卵裂情况评估是在取卵后第3天进行，胚胎质量的评估使用Cummins和Breen制定的改良标准[7]，优质胚胎定义为取卵后第3天的胚胎细胞数含有6-9个细胞或者处于融合状态；胚胎碎片小于20%。按照国家卫生及计划生育委员会的指引，每次移植的胚胎数目不超过3枚；剩余的优质胚胎进行超低温冷冻保存。黄体支持使用油剂黄体酮40 mg，肌注1次/d。
主要观察指标： ①卵子受精率。②受精失败率。③卵裂率。④优质胚胎率。⑤临床妊娠率。
统计学分析：使用SPSS 11.0统计软件分析。两均数比较采用t 检验；多均数比较差用方差分析；率和构成比的比较使用&2检验分析，检验水准&=0.05。
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常规体外授精-胚胎移植中，受精成功率直接影响到后续临床妊娠情况，影响受精成败的影响因素纵多[18]。本实验在精液常规正常人群中对比了目前常用的两种授精法发现，敞开式授精法可能比微滴法有着更低的授精失败率。文献报道正常男性精液夫妻行常规体外授精失败率(包括完全不受精及&25%卵子受精的低受精率等情况)为5%-25%[19-20]。这种不一致性可能因为样本大小不同，或者其他例如精子形态学、顶体反应以及精子透明带结合能力等情况造成的[21]。精子透明带结合能力被认为与精子的顶体酶、穿透、受精失败有关[20，22-24]。经过预处理后用于授精的精子密度对于正常稳定的受精率有着重要的影响。近10年来用于最终授精的精子浓度大幅度下降，本中心研究用于授精的精子密度为0.3&109 L-1。
在本组中研究对象是非男性因素进行体外授精助孕的患者，样本量大，结果可信度高。结果显示：使用微滴法及敞开式授精法其受精失败率差异有显著性意义(P & 0.05)，但是正常受精率(2PN%)及异常受精率(&3PN%)差异无显著性意义(P & 0.05)。微滴法及敞开式授精法两者最大的差别就是两者的液体体积差别(100 &L vs. 1 mL)以及是否使用了矿物油覆盖。虽然矿物油需要通过了鼠胚生物学检测并且经过多次洗涤和平衡后再使用[25]，但是不能排除仍然残存一些物质释放到授精液干预到卵子正常受精[26-27]。例如，Otsuki等[28]研究显示矿物油中的过氧化物会影响到受精和胚胎的发育。因此微滴法与敞开式授精法在使用矿物油上的不同，有可能成为了影响受精率的原因。另外，体外授精中使用的矿物油还可能受到不同牌子的矿物油影响[27]。微滴法相对敞开法有着相对较大的表面积容积比，盖上矿物油后许多可溶性的成份容易被矿物油萃取丢失，特别是甾体类激素。例如研究显示在卵丘复合物中高孕酮浓度会促进精子的活动力等功能[29]。这些有益成份被矿物油萃取后将对精子的受精功能产生不良影响[30]。此外原理上一些重要的蛋白质成份也可能被吸收，进而影响受精过程，甚至胚胎发育潜能[31]。
另外一个值得学者们注意的是卵子及大量的颗粒细胞、精子在相对小的体积溶液中进行授精过程共同耗氧，可能导致酸性环境的产生。Swain等[32]研究表明培养液的pH值及缓冲能力对于配子及胚胎的质量有着重要的影响。他们认为体外授精周期中合适的pH值能够得到更加良好的临床结局[33]。与大容积的敞开式授精法相比较，微滴法原理上更容易产生溶液pH值下降。
然而有的受精失败并不能单纯由精子原因来解释，卵子也可能造成受精异常[34]。一些疾病，如多囊卵巢综合征[35]、卵巢早衰及自身免疫性疾病及激素的使用等可能会影响卵子质量进而影响授精率及正常妊娠率[36-37]，所以将这些因素排除在研究人群外。另外，因为卵子有可能在过度的操作中受损或者被异常激活，不同授精方法操作的本身可能对于两组间不同的受精结果有着重要的影响[38]。本组中微滴法组卵子是被转移进含有精子混悬液的微滴中去；而敞开式授精法组精子是混悬液直接注入，卵子没有进行操作的。
虽然微滴法有上述一些缺点，但是也有一些潜在的优点。例如，微滴法中可以使用相对少的精子数进行授精。因为授精是基于精子混悬液的浓度的，培养液容积小的时候需要的精子数目就少，这对有利于有正常活动力的少精症患者进行常规体外授精[14]。小容积的授精环境可能更容易聚集胚胎、卵子或者卵丘细胞自分泌或者旁分泌的因子以促进胚胎的发育[39]。此外盖上矿物油也可以稳定培养环境，免受污染[40]。微滴法授精虽然可能增加了卵子受精失败率，但是两组间胚胎的发育、胚胎的质量及最终的临床妊娠结局毕竟并无显著影响。
受精的生理学目前仍然并未完全明确[41]。本结果未能够完全证实在本组中是由于特殊的矿物油品牌或批号，还是授精方法的本身对受精结局产生影响。下一步作者将对授精液容积及矿物油等不同影响因素分别展开研究。在这里，还要指出本研究设计上有值得改进的之处。例如，考虑到除了精子因素，还有诸如卵子来源等因素可能影响到受精结局[42]。如果将研究对象的卵子平分进入两组中进行授精就能够更好地均衡年龄、超排卵用药及卵子来源的因素影响。这样就能够得到更加详尽可靠的数据，然而这将显著增加工作量。
综上所述，微滴法与敞开式授精法比较可能增加了体外授精中受精失败率。然而因为受精是包含了许多内在及外在影响因素的非常复杂的过程[43-54]，两种授精方法对受精失败率的影响值得进一步研究。
杂志出版内容重点：；；；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；；
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体外授精首先通过手术把卵子从女方的输卵管中取出放到个两佩特里培养皿中，然后与男方的精子混合来受精，人工培养两天后，再把几个细胞胚泡(或胚胎)放入子宫中助育技术。从女性卵巢中取出卵子，并进行短期培养后，在培养皿中，与经过特殊处理的精子结合为受精卵，待细胞分裂为2～8个细胞，即早期胚胎期时，移送到子宫腔内，再如正常妊娠过程着床、生长。又称体外受精及胚胎移植。是医学上治疗不孕症的一种助孕技术。这种技术，是因为这种婴儿，曾在试管中孵育2～3天，故称试管婴儿。对试管婴儿的研究起源于对哺乳动物人工授精的研究，用以繁殖动物。1945年，美籍华裔科学家张明觉教授研究精子获能、受精卵移植，1959年娩出试管免。继之，英国妇产科医生P。斯托普妥与生殖生理学家B。爱德华兹致力于试管婴儿的研究。日，世界首例试管婴儿L。卜朗在英国剑桥诞生。以后，澳大利亚、美国、法国、荷兰等国亦纷纷开展试管婴儿工作，并加以改进。至1992年止，全世界已出生试管婴儿近万名，并衍生出多种助孕技术。日，中国首例试管婴儿在北京出生。试管婴儿的问世，为医学上一大创举，其科学意义不仅在于改变了人类自古以来男女之间通过阴道性交，繁殖子孙后代的途径，夫妇双方未发生性行为，也可获得子女，而且也推动了生殖医学、早期胚胎学、人类遗传学、免疫学和肿瘤防治学等的纵深发展，加强了基础医学和临床医学的联系，还为中国计划生育和优生、优育的发展，提供理论基础。
杂志出版内容重点：；；；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；；
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研究亮点: 文章随机对照分析了目前常用的两种体外授精方法的受精率、受精失败率以及试管婴儿助孕结局的情况，在既往研究基础上结合本实验数据，进一步提出敞开式授精法操作更加简单，能够有着与微滴法的相似的卵子受精率和助孕结局，但是比微滴法有着更低的卵子受精失败率。
基金资助：
国家自然科学青年基金(270750)；中山大学青年教师培育项目(12ykpy24)；广东省自然科学基金资助项目(S0)
杂志出版内容重点：；；；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；；
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Abstract：BACKGROUND: The in-vitro fertilization and embryo transfer technique has been widely applied in human insemination. The rate of successful insemination is gradually rising, and the in-vitro fertilization directly determine the insemination outcome.
OBJECTIVE: To evaluate the difference between the two common using insemination methods, microdrop and open, in in-vitro fertilization and embryo development.
METHODS: A randomized study was conducted to compare microdrop and open insemination methods among non-male factor patients undergoing in-vitro fertilization and embryo transfer. A total of 1 175 cases were enrolled in the research. There were 573 cases in the microdrop group, and 602 cases in open insemination group. The fertilization rate and embryo development in the two groups were compared.
RESULTS AND CONCLUSION: The fertilization failure rate [total fertilization failure rate + low fertilization rate(& 25% oocytes fertilized)] in the microdrop insemination group was higher than in the open insemination group (11.9%, 3.3%, P & 0.001), while the good quality embryo rate and pregnancy rate did not differ significantly between the two groups (all P & 0.05). The open insemination method is a simple insemination method with a lower fertilization failure rate. As the fertilization is a highly complicated process involving many extrinsic and intrinsic factors, further study is needed to confirm the effects of the two insemination methods on in-vitro fertilization outcome.
杂志出版内容重点：；；；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；；
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Key words：
中图分类号:&
基金资助: 国家自然科学青年基金(270750)；中山大学青年教师培育项目(12ykpy24)；广东省自然科学基金资助项目(S0)
李宇彬，博士，主治医师，中山大学附属第一医院，广东省广州市
作者简介: 罗灿峤，男，1971年生，广东省廉江市人，汉族，2004年广州医科大学毕业，副主任技师，主要从事病理生理基础研究。
引用本文: &&
罗灿峤,李宇彬,李
涛等. 比较2种常用授精法在体外授精-胚胎移植中的差异[J]. 中国组织工程研究, ): .
Luo Can-qiao,Li Yu-bin,Li Tao et al. Comparison of two common insemination methods on in-vitro fertilization and embryo transfer[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, ): .
2.1&两组间一般情况比较& 微滴法与敞开式授精法的两组间包括女方年龄、不孕年限、身高体质量指数、促性腺激素的用量、刺激天数、获卵数以及成熟卵子数等均无明显差异(P & 0.05，表1)。
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2.2&精液参数比较& 在梯度离心及上游法前后，两组间精子的的密度及活动力差异均无显著性意义(P & 0.05，表2)。
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2.3&受精情况比较 &本组中从1 175名妇女中总计取到14 360枚卵子。在微滴授精组，收集573名妇女的6 887枚卵子；而在敞开式授精组收集了602名妇女7 473枚卵子用于研究。在微滴式授精组28例患者出现了完全不受精(TFF)，40例患者出现低的受精率(&25%卵子受精)，即68/573 (11.9%)；然而在敞开式授精组只有7例患者完全不受精，13例患者患者出现低的受精率，即20/602(3.3%)。因此微滴式授精组比敞开式授精组出现更高的受精失败率，分别是11.9%和3.3%(P & 0.001，表3)。但是正常受精率(2PN%)、成熟卵子正常受精率和多精受精率在两组间差异均无显著性意义(表3)。
2.4&体外授精-胚胎移植临床结果&& 胚胎卵裂率、优质胚胎率在两组间差别也无显著性差异(表3)。在微滴法组每移植周期的妊娠率为41.9%，与敞开式组妊娠率43.2%间差异亦无显著性意义(P=0.654，表3)。上述结果显示2种授精方法并未影响到体外授精助孕新鲜周期临床结局。
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没有本文参考文献
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人工授精前男人要做好什么准备
人工授精，就是将精子或卵子取出体外，经过处理或培养成胚胎后，再植入人体内。但是如何取精子，以及要做什么准备，男性朋友们知道吗？人工授精如何取精子？对于人工授精的精子来源可分为夫精人工授精术和供精人工授精两种，那麽对于取精子当然也分为两种情况：1、如果是采用丈夫的精子，那麽丈夫就需要采用手淫的方法取精，在此过程要采用医院提供专门的取精瓶，不能有任何的污染，取完精子后要马上送到医院；2、对于另外一种的人工授精法，就不需要这麽麻烦了，只要通过夫妇双方的一致同意后，就可以从精子库中取精捐赠者的精子即可，不过此方法也存在著伦理问题，所以说如果丈夫的精子可以那麽就最好采用丈夫的精子。人工授精的取精方法其实和试管婴儿技术也差不多，只是成功率就低很多，但是费用和试管婴儿技术相比也差很多，身体伤害更小。人工授精前男方要做什么准备工作？1、收集精液前应禁欲3—5天，节制抽烟、饮酒及避免有可能对精子伤害的药物。2、通常采用手淫法收集，症者手淫法不行时，可用电按摩器采集精液。全部精液收集在特制的毒无菌干燥的采精容器中，保存在一定的温度条件下（不低于20℃，不高于40℃）。在1小时左右使用，使用前进行精液常规检查。3、逆行射精的患者，先排空膀胱，再用无菌生理盐水冲洗膀胱，最后在膀胱内注入少量的精子培养液或其他对精子无害的液体。手淫或性交射精后立即排尿或导尿，取得精液后作离心和洗涤处理再进行人工授精。4、精液量及精子数少的患者，可采集几次精液加以浓缩后进行人工授精。5、如果因宗教信仰或其他原因不采用手淫法收集精液，也可用特制的套在性交过程中收集精液。人工授精途要注意些什么，你知道了吗？
（责任编辑：梁土清 ）
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擅长：泌尿科内窥镜技术，熟练治疗膀胱肿瘤，膀胱结石，前列腺增生，尿道狭窄等疾病。
擅长：不孕症诊治、生殖内分泌疾病诊治、生殖助孕技术及优生优育
擅长：擅长各种月经病和不孕症的诊治。
副主任医师
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广东省中医院
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