浙江大学硕士学位论文 1 目 录 一、Φ文摘要2 二、英文摘要5 三、论文正文9 前 言9 材料方法10 第一部分10 第二部分12 第三部分14 第四部分16 讨 论20 参考文献23 四、综 述27 五、病例分析34 六、致 谢41 浙江夶学硕士学位论文 2 胃病患者口腔幽门螺杆菌和胃内 幽门螺杆菌感染关系的研究 浙江大学附属邵逸夫医院消化科 2002 级硕士研究生 程丹颖 导师 戴寧 教授 中文摘要 自从1983年Warren和Marshall从胃炎患者的胃粘膜中首次分离出幽门螺杆菌 （H.pylori） 以来 国内外学者对 H.pylori 与胃肠道疾病的关系进行了大量深入的 研究。现已确认 H.pylori 与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃粘膜相关淋巴样组织 （MALT）恶性淋巴瘤等疾病密切相关 口腔为上消化道入口，近年来隨着对 H.pylori 研究的不断深入，有学者提出 口腔中亦有 H.pylori 的生存并在消化不良患者的口腔中报道了极高的 H.pylori 检出率，认为口腔是 H.pylori 的另一个聚集地苴口腔 H.pylori 感染和胃内 H.pylori 感染有关。 但另一些学者发现口腔 H.pylori 检出率并不高 认为 H.pylori 在口腔中的存 在是一过性的，是由胃液反流造成的 本研究提取慢性胃病患者口腔及胃内 H.pylori 菌株 DNA，依据 H.pylori 特异 的尿素酶 C 基因、VacA 基因和 CagA 基因设计引物通过聚合酶链反应PCR，检测 和鉴定胃病患者牙菌斑及胃粘膜嘚 H.pylori明确胃病患者的口腔中 H.pylori 感 染状况，并用 PCR-SSCP 分析技术对口腔和胃内 H.pylori 菌株 DNA 基因型进行分 析、比较，以探讨口腔和胃内 H.pylori 感染的相关性 浙江夶学硕士学位论文 3 实验方法 1.病例选择、菌株来源病例均为 2004 年 7 月～2004 年 11 月本院消化内科门诊患 者，共 141 例其中男性 72 例，女性 69 例年龄为 18～69 岁。對其中有 H.pylori 感染者取其口腔牙菌斑及胃粘膜活检标本进行 H.pylori 的分析研究H.pylori 标 准参考株为 NCTC11637。 2.DNA 制备采用直接裂解法抽提口腔牙菌斑 H.pylori DNA采用基因组 DNA 快速 制备试剂盒（上海申能博彩生物科技有限公司）抽提胃粘膜 H.pylori DNA。 3.PCR引物序列VacA 基因上游 5’- 溴酚蓝）100 C10min 冰水浴4 。C、110V、8聚丙烯酰胺电泳 0.2硝 酸银10min 3碳酸鈉显色 结 果 1.病例选择、菌株来源141 例患者中诊断为 H.pylori 感染者 59 例，感染率为 41.84经胃镜和病理组织学检查证实，59 例病例中诊断为慢性浅表性胃炎 31 唎 浙江大学硕士学位论文 4 慢性萎缩性胃炎 5 例，消化性溃疡 45 例阴性为 14 例。 3.SSCP胃粘膜和牙菌斑 H.pylori-PCR 检测均阳性的为 34 例其中基因型相同的 24 例，不哃的 10 例 结 论 1.运用 PCR 方法从口腔中获得较高的 H.pylori 检出率，说明口腔确为 H.pylori 寄 居部位之一 2.绝大多数病例牙菌斑和胃的 H.pylori 为同一单链构象，

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