中药材二氧化硫残留量检测技术标准研究--《成都中医药大学》2013年硕士论文
中药材二氧化硫残留量检测技术标准研究
【摘要】：硫熏法是一种传统的中药材产地加工方法,利用硫磺燃烧后生成二氧化硫,以达到杀菌防虫、防霉,利于药材的储存养护,并使药材美观增色的目的。由于中药材经硫熏后,其外观、化学成分和药理作用等多会发生变化,且中药材经硫熏后的主要残留物亚硫酸盐对机体神经系统、消化系统和呼吸系统等均有毒性作用,2004年国家食品药品监督管理局(SFDA)在《关于对中药材采用硫磺熏蒸问题的函复》中规定：市场流通领域的中药材及其饮片,通过采用硫磺熏蒸或浸泡达到外观漂白的行为,应按违反《药品管理法》第49和75条的规定(即劣药)进行查处；《中国药典》2005年版一部则已删除葛根、山药等在产地加工时硫熏的规定；2011年6月,国家药典委员会发布了“关于在中药材及饮片中控制S02残留量检测限度的公示”(以下简称限度标准),规定山药、牛膝、粉葛等11种中药材的SO：残留量不得超过400μg·g-1,其他中药材及饮片则低于150μg·g-1。但在经济利益的驱使下,硫熏中药材在市场流通领域仍普遍存在。
本文根据亚硫酸钠、邻苯二甲醛和乙酸铵反应呈紫色,建立显色反应对中药材二氧化硫残留进行快速定性,并可初步半定量的检测方法；基于亚硫酸盐一邻苯二甲醛-铵盐反应生成荧光化合物的原理,首次建立荧光衍生法测定中药材的二氧化硫残留量；同时根据以碱性溶液提取样品,可将药材中可逆结合态的亚硫酸盐释放出来的原理,首次建立碱性溶液振荡提取法用于测定过程中样品的前处理；采用已建立的方法对市购的山药、葛根、黄芪、党参、当归、菊花和薏苡仁等药材的二氧化硫残留量进行检测,操作简便、快速,灵敏度较高;编制中药材二氧化硫残留量检测技术标准草案,为硫熏中药材的质量控制升级提供了有力参考。主要研究内容及结果如下：
1.中药材二氧化硫残留的快速检测方法研究
根据亚硫酸钠、邻苯二甲醛和乙酸铵反应呈紫色,且颜色强度与亚硫酸钠的量成正比关系,建立了显色反应对中药材二氧化硫残留快速定性的方法。采用分光测色分析溶液颜色色度,结果亚硫酸钠加入量与溶液颜色色度在0～25.23μg范围内线性关系良好,可作为中药材二氧化硫残留的初步定量方法。利用本法对市购的山药、葛根、黄芪、党参和薏苡仁的部分样品共20批次进行检测,结果测定的20批次不同样品均检出二氧化硫残留,根据其定量结果,与限度标准进行比较,18批药材的二氧化硫残留量超过规定限量,提示硫熏中药材的情况目前仍普遍存在。本法操作简便、快速,灵敏度较高,可为中药材二氧化硫的快速定性检测提供参考。
2.二氧化硫残留量的测定方法研究
2.1荧光衍生法的建立
2.1.1荧光衍生条件的研究
中药材的二氧化硫残留主要以游离态和结合态的形式存在,游离态包括亚硫酸氢盐(HSO3-)、SO2分子和亚硫酸盐(S032-),并极易与药材中的还原糖、蛋白质、色素、酶、维生素、醛、酮等形成各种形式的结合态二氧化硫残留。由于不可逆结合的亚硫酸盐在生理环境下不发生解离,不会对人体健康发生危害,故一般二氧化硫或亚硫酸盐的检测对象是游离的亚硫酸根及可逆结合的亚硫酸盐。
《中国药典》2010年版一部虽在附录增加二氧化硫残留量测定法,但检测装置复杂,需特制的全玻璃蒸馏装置,且操作过程繁琐,碘滴定液使用前须三氧化二砷标定,不利于方法的推广；文献报道测定中药材二氧化硫残留量的方法主要有盐酸副玫瑰苯胺法、离子色谱法、高效液相色谱法和气相色谱法等,但盐酸副玫瑰苯胺法需使用有毒的四氯汞钠吸收液,而色谱法则会增加检测成本。
基于亚硫酸盐-邻苯二甲醛-铵盐反应生成荧光化合物的原理,首次建立了荧光衍生法测定中药材的二氧化硫残留量。通过对影响荧光衍生化反应的因素包括pH、衍生试剂用量、反应温度和时间等进行单因素考察,确定荧光衍生的最佳条件。该法具有灵敏度高、操作简便、快速准确等特点,可为中药材二氧化硫残留量的测定方法提供借鉴。
2.1.2样品前处理方法研究
《中国药典》2010年版一部规定使用酸蒸馏法对样品进行前处理,需特制的全玻璃蒸馏装置,操作过程繁琐,且可逆结合的亚硫酸盐在酸性条件下稳定,在pH7时则分离成亚硫酸根(H2SO3(？)H'+HSO3-,HSO3-(?)H++SO32-)。
本文对二氧化硫残留量测定时供试品溶液的制备方法进行了研究。以碱性溶液对样品进行前处理,可释放出药材中可逆结合的亚硫酸盐,同时采用振荡提取法,自动化程度高,能大大缩短提取时间,适用于大批量样品的处理。本文首次建立了碱性溶液振荡提取法对样品进行前处理,可为中药材二氧化硫残留量测定过程中样品的前处理过程提供参考。
2.2中药材二氧化硫残留量的测定
2.2.1荧光衍生分析方法的验证
本文以未经硫磺熏蒸处理的山药样品(阴性对照)为研究对象,分别硫熏30、60、90、120和150min,以碱性溶液振荡提取法对样品进行前处理,采用荧光衍生法测定阴性对照样品和不同硫熏时间样品的二氧化硫残留量,结果未经硫熏的山药二氧化硫残留量为0,而硫熏山药样品均检出二氧化硫残留,且二氧化硫残留量随硫熏时间的增加而增大。表明利用荧光衍生法测定中药材二氧化硫残留量具有可行性。
2.2.2本方法与药典方法的比较
以碱性溶液振荡提取法对山药、党参、当归和薏苡仁共4批样品进行前处理,采用荧光衍生法测定其二氧化硫残留量,与《中国药典》2010年版一部收载的二氧化硫残留量测定法比较,结果采用本文所建方法测定的二氧化硫残留量比药典方法高约10倍,推测与样品前处理过程中,本文采用碱性溶液可提取出样品中可逆结合态的亚硫酸盐,而药典方法采用酸性溶液仅能提取出游离态的亚硫酸盐,因此本法的测定结果更能接近药材的实际二氧化硫残留量。
2.2.3样品测定
利用本法对市购的山药、葛根、黄芪、党参、当归、薏苡仁和菊花等88批次药材的二氧化硫残留量进行测定,与限度标准对比,结果仅约22%的样品二氧化硫残留量符合限量要求,表明硫磺熏蒸中药材的情况目前仍普遍存在。
3.中药材二氧化硫残留量检测技术标准草案的编制
通过对荧光衍生法测定中药材二氧化硫残留量进行系统研究,编制了荧光衍生法测定中药材二氧化硫残留量的检测技术标准草案,可为硫熏中药材的质量控制提供科学依据,为国家标准的制定提供参考。
【关键词】：
【学位授予单位】：成都中医药大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：R284【目录】：
中文摘要2-5Abstract5-111.前言11-17 1.1 文献综述11-15
1.1.1 硫磺熏蒸中药材的历史沿革11
1.1.2 硫熏中药材的弊端11-13
1.1.3 中药材二氧化硫残留的检测方法13-15 1.2 立题依据15 1.3 研究工作内容15-17
1.3.1 二氧化硫的快速检测方法研究15-16
1.3.2 二氧化硫残留量的测定方法研究16-17
1.3.3 中药材二氧化硫残留量检测技术标准草案的编制172.实验部分17-49 2.1 实验仪器与材料17-18
2.1.1 实验仪器17
2.1.2 材料及试剂17
2.1.3 样品17-18 2.2 二氧化硫的快速检测方法研究18-21
2.2.1 对照品溶液及衍生试剂的配制18-19
2.2.2 实验方法19
2.2.3 线性范围19-20
2.2.4 样品测定20
2.2.5 小结20-21 2.3 二氧化硫残留量的测定方法研究21-49
2.3.1 荧光衍生法的建立21-34
2.3.1.1 荧光衍生条件的研究21-29
2.3.1.2 样品前处理方法研究29-34
2.3.1.3 小结34
2.3.2 样品测定34-47
2.3.2.1 荧光衍生分析方法的验证35
2.3.2.2 本方法与药典规定方法测定结果的比较35-36
2.3.2.3 根及根茎类中药材样品二氧化硫残留量的测定36-42
2.3.2.4 花类中药材样品二氧化硫残留量的测定42-43
2.3.2.5 其它类中药材样品二氧化硫残留量的测定43
2.3.2.6 食品中二氧化硫残留量的检测43-46
2.3.2.7 小结46-47
2.3.3 中药材二氧化硫残留量检测技术标准草案的编制47-49
2.3.3.1 中药材二氧化硫残留量的检测技术标准草案47-49
2.3.3.2 小结493.结论与讨论49-52参考文献52-55致谢55-56附56-57
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京公网安备75号气相色谱法测定中药材中有机氯农药的残留量--《第二届上海国际分析化学研讨会论文集》2004年
气相色谱法测定中药材中有机氯农药的残留量
【摘要】：正 有机氯类农药是一类高效广谱杀虫剂,曾是各国杀虫剂中使用最广泛的一大类。这类农药化学性质稳定,脂溶性大,残留期长,易在脂肪体内蓄积,造成慢性中毒,严重危及人体健康。国内已制定了食品中有机氯农药的GB检测方法和限量标准,而有关中药农药残留的GB检测方法和限量标准还很少。中药中农药含量超标,成为国际社会对中药安全性关注的焦点问题之一,阻碍了中药的国际化进程,因此研究中药材中的农药残留测定方法具有重要意义。本文对中药中11种有机氯农药的毛细管气相色谱法的测定进行了研究。以水一丙酮(3:7,V/V)为提取剂采用超声波辅助提取中药
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：TQ461【正文快照】：
有机氯类农药是一类高效广谱杀虫剂,曾是各国杀虫剂中使用最广泛的一大类。这类农药化学性质稳定,脂溶性大,残留期长,易在脂肪体内蓄积,造成慢性中毒,严重危及人体健康。国内已制定了食品中有机氯农药的GB检测方法H】和限量标准【2】,而有关中药农药残留的GB检测方法和限量标
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槟榔等三种中药材无机元素含量及其溶出率研究
作者：张俊清&符乃光&赖伟勇&刘明生
【关键词】&
【摘要】 目的 测定槟榔、砂仁、巴戟天中药材生药材及煎煮液中锌、铁、锰、铜、钴、镍、铅、砷及汞等元素含量，计算其溶出率。方法 用等离子发射光谱法测定锌、铁、锰、铜、钴、镍等元素含量，原子吸收石墨炉法测定铅元素含量，原子荧光法测定砷、汞元素含量。结果 海南特产三种中药材生药材中锌、铁、锰、铜、钴、镍等元素含量不同程度高于市售同种药材的含量水平，而重金属铅、砷和汞却不同程度低于市售水平;海南特产槟榔等三种中药材的锌、铁、锰、铜、钴、镍等元素的溶出率普遍低于市售同种中药材的溶出率水平。结论 海南生态环境优良，造就了品质好、药效高的地道药材，但有待进一步研究提高其溶出率，开发利用其价值。
关键词 中药材 无机元素含量 溶出率
Studies on the dissolvent rate and trace element content of&
three Chinese medicinal herbs（CMH）of semen areca etc
&Zhang Junqing，Fu Naiguang，Lai Weiyong，et al.&
Faculty of Pharmacy，Hainan Medical Collge，Haikou571101.&
【Abstract】 Objective To determine inorganic element content of Zn etc in three Chinese medicinal herbs of Semen Areca etc and their deccoctions，their dissolvent rate is calculated.Methods The content of Zn，Fe，Mn，Cu，Co and Ni are determined by plasma emission spectrometry，The Pb content is determined by graphite atomic absorpˉtion spectrophotometry，Meanwhile the As and Hg content of these TCM are determined by atomic fluorimetry.Results the nutritional element content of Hainan herbs is higher than that of CMH from market but the heavy metal content is lower than that of CMHThe dissolvent rate of Hainan herbsis lower than that of CMH from market.Conclusion The excellent ecological enironment of Hainan Island products good quality and high clinic effect herbs.Therefore in order to exploite and utilize Hainan herbs further research should be done to increase their dissolvent rate.
Key words Chinese medicinal herb inorganic element content dissolvent rate&
2001年，国家计委启动了“现代中药产业化实施”项目。海南省委省政府，将医药工业列为省七大经济支柱之一，并将“海南省中药生态型科技产业基地”的建设列为省“十五”规划重点高技术产业项目。其宗旨是利用海南优良的生态环境，生产绿色中药材。槟榔、砂仁和巴戟天为海南特产三种中药材，对其进行深入研究开发意义重大。中药中的微量元素除直接参与补充和调节人体内必需的元素外，常与其药用有机成分形成配合物，产生协同作用，增强其疗效 ［1］ 。在治疗上，患者服用的多是中草药水煎液。因此研究中草药水煎液中微量元素的含量，对探讨其药用价值比研究消解液中微量元素的含量更具实际意义。
1 药材采集及消解液、煎煮液制备
1.1 药材采集 槟榔（Areca catechu L.）系棕榈科植物，巴戟天（Morinda officinalis How）系茜草科巴戟属植物，砂仁（Amomum Longllgulare T.L.Wu）系姜科砂仁属草本植物 ［2］ 。采集海南特产三种中药材样品各100g左右（槟榔:万宁，砂仁:东方，巴戟天:兴隆），并购买市售同类药材各100g左右（槟榔:广西，砂仁、巴戟天:广东），经医科院药植海南分所陈伟平教授逐一鉴定。药材清洗泥沙后，用自来水及 高纯水反复冲洗多遍后，置烤箱中恒温（44±2）℃干燥6h，粉碎过40目筛，再于（44±2）℃干燥1h，得生药材标本，置干燥器中备用 ［3，4］ 。
1.2 消解液制备 准确称取各生药材标本2g，置管式消化管中用高氯酸:硝酸（1:10）混合试剂10ml浸泡过夜，在管式自控电热消化器上消化完全，用高纯水定容制成消化液，用于测锌、铁、锰、铜、钴、镍和铅等元素，消化时酸试剂改用硝酸10～15ml，如上方法消化所得消化液，用于测砷、汞元素。
1.3 煎煮液制备 取每种生药材10g，置于碘量瓶（250ml）中，用8倍量的双蒸水（80ml），在室温下浸渍12h后，于超声清洗机中振摇30min，过滤，将滤液减压回收，浓缩物转移至10ml刻度管中，定容到10ml，为药材煎煮液，备用。
2 药材消解液、煎煮液中无机元素检测
2.1 等离子发射光谱法 测锌、铁、锰、铜、钴和镍等元素。
2.1.1 仪器 美国PE公司P 400 型等离子发射光谱仪。
2.1.2 仪器工作条件 载气:氩气（流量1L/min）;PMT:600V;Read Delay:30s;泵速:1ml/波长:Zn（213.856nm）、Fe（238.204nm）、Mn（257.610nm）、Cu（324.754nm）、Co（237.862nm）、Ni（221.647nm）。
2.1.3 检测方法 标准曲线法（两种混合标准溶液）。
2.2 原子吸收石墨炉法测铅元素
2.2.1 仪器 日本岛津AA-680型原子吸收分光光度计。
2.2.2 仪器工作条件 灯电流:2mA左右;灯模式:氘灯扣背景;载气:氩气（流量:0.1MPa）;狭缝:2.0波长:283.3nm。
2.2.3 检测方法 标准曲线法。
2.3 无火焰原子荧光硼氢化法测砷、汞元素
2.3.1 仪器 XDY-2A型原子荧光分析仪。
2.3.2 仪器工作条件 PMT Voltage:340V;Atomizer Height:8.0Carrier Gas:500ml/Shielded Gas:1000ml/Lamo Current:60mA;Added Reducing Agent Time:8.0m;Read Time:10.0s;Delay Time:2.0s;Atomizer Temperature:As（800℃）、Hg（200℃）;硼氢化钾溶液:As（5g/L）、Hg（1g/L）。
2.3.3 检测方法 标准曲线法。
海南与市售三种中药材（槟榔、砂仁、巴戟天）煎煮液中锌、铁、锰、铜、钴、镍、砷、汞和铅等元素含量见表1，海南与市售三种中药材生药材中锌、铁、锰、铜、钴、镍、砷、汞和铅等元素含量见表2;海南与市售三种中药材溶出率见表3。
表1 海南与市售槟榔等中药材煎煮液无机元素含量 （略）
2 海南与市售槟榔等中药材生药材无机元素含量 （略）
表3 海南与市售槟榔等中药材无机元素溶出率 （略）
观察表明，海南特产三种中药材生药材中锌、铁、锰、铜、钴、镍等元素含量不同程度高于市售同种药材的含量， 而重金属铅、砷和汞却不同程度低于市售水平。海南环境优良，对药材污染小，有利于药材从自然环境（土壤、水分及空气等）中吸取有益元素，造就了品质好、药效高的道地药材，海南特产三种中药材与市售药材相比品质更优、开发价值大。但海南特产槟榔等三种中药材的锌、铁、锰、铜、钴、镍等元素的溶出率普遍低于市售同种中药材的溶出率，有待进一步探讨。
结果表明，三种中药材无论是海南特产还是市售药材，普遍存在着砷、汞元素溶出率相对其它无机元素偏高的情况，而砷、汞对人体毒害大，易造成疾病。为有效发挥三种中药材的药效，需采取有效措施控制砷、汞两种重金属元素的溶出率。目前尚未有医药工业及站、所关于重金属溶出 率的报道，需引起重视。
1 罗辉，张建和，揭新明，等.高良姜不同部位无机元素含量及其溶出率的研究.微量元素与健康研究，）:31.
2 中国药典.2000版.
3 陈和利，于耀青，孙龙川.100种生药中15种无机元素含量关系的研究.微量元素与健康研究，）:32.
4 茅向军，杨永东，熊慧林.贵州杜仲中铅、砷、汞含量的研究.药物分析杂志，）:172.&
作者单位:571101海口海南医学院药学系&
（编辑 曲全）
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