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肾移植受者人类白细胞抗原体液免疫致敏状态的监测及其临床意义
背景:器官移植受者在受到同种抗原人类白细胞抗原(HLA)免疫致敏后,外周血中容易产生群体反应性抗体,如何提高致敏受者肾移植的成功率和移植物长期存活率值得深入研究.目的:通过检测肾移植受者的HLA-IgG抗体水平及其特异性,评估受者体液免疫致敏状态,并观察HLA交叉反应组配型可接受性错配情况与移植肾存活率的关系.设计:临床观察.单位:南方医科大学附属珠江医院.对象:选择5-12在南方医科大学附属珠江医院器官移植科接受肾移植1297例患者,男824例,女473例,平均(42±16)岁,其中HLA-IgG抗体阳性受者165例,阴性受者1 132例.初次肾移植受者1217例,2次移植77例,3次移植2例,4次移植1例.所有患者在接受本实验相关检测及治疗前均签署知情同意书,本实验经过医院伦理委员会批准许可.试剂:莱姆德抗原板和混合抗原板购自美国One Lambda公司.HLA-Ⅰ类单克隆抗体湿板和HLA-Ⅱ类DNA分型试剂购自美国OneLambda公司:Taq多聚酶购自美国PE公司:DNA抽提试剂购自德国QIAGEN公司.抗人C4d多克隆抗体和显色底物DAB购自奥地利Biomedica公司.方法:①通过酶联免疫吸附试验筛查受者术前血清中的HLA-IgG抗体,对阳性血清进一步用抗原板(LAT1240和LATIHDS)检测抗体阳性率及其特异性,采用序列特异性引物聚合酶链反应技术进行HLA基因分型.②对40例Scr升高的受者进行抗HLA抗体检测和移植肾穿刺活检,并通过免疫组织化学染色观察肾小管周围毛细血管壁上C4dd的沉积.⑧移植受者术后1,3,5年移植肾存活率及性别、移植与抗体阳性率的关系,并分析不同HLA交叉反应组错配数受者移植肾存活率的差别.主要观察指标:①肾移植患者手术前后HIA-IgG抗体阳性率及HLA分型.②移植肾活检组织中肾小管周围毛细血管壁上C4d的沉积特征.③移植肾存活率差别.结果:患者1297例均进入结果分析.①HLA-IgG抗体阴性受者1132例,阳性受者165例,Ⅰ类HLA-IgG抗体阳性受者126例,Ⅱ类HLA-IgG抗体阳性受者90例,51例受者同时存在Ⅰ类和Ⅱ类HLA-IgG抗体,抗体阳性率＞50%的高致敏受者94例.②40例移植肾穿刺活检标本中,13例患者观察到肾小管周围毛细血管壁上存在C4d的沉积.27例未见C4d沉积;13例C4d阳性受者中10例外周循环中抗HLA抗体阳性.③抗体阳性受者移植物功能延迟恢复的发生率显著高于阴性受者(P＜0.01).抗体阳性受者的1,3及5年移植肾存活率与抗体阴性受者无明显学显著性差异(P＞0.05).女性受者中抗体阳性率明显高于男性受者(P＜0.01),再次移植受者中抗体阳性率显著高于初次移植受者(P＜0.01);随着HLA交叉反应组错配数的增加,移植肾存活率呈下降趋势,0错配受者的1,3,5年移植肾存活率分别为97%,94%和92%.2错配受者1.3,5年移植肾存活率分别为91%,82%和77%,3错配受者较0错配受者下降更为明显,分别为9%,15%和24%.结论:肾小管周围毛细血管壁上C4d的沉积可作为抗体介导体液性捧斥反应的客观指标,供受者间良好的HLA配型能显著降低排斥反应发生率和改善移植物存活.
Abstract：
BACKGROUND: Panel reactive antibodies (PRA) easily appear in the peripheral blood of organ transplant recipients sensitized by allogeneic human leukocyte antigen (HLA).How to enhance the success rate of renal transplantation.and long-term survival rate of renal allografts in sensitized recipients should be further studied.OBJECTIVE: This study was to detecthuman leukocyte antigen immunoglobulin G(HLA-IgG) antibody level and its specificity in renal transplant recipients,evaluate humoral immunity sensitization,and investigate the relationship of the acceptable mismatching of HLA cross-reactive group and survival rate of renal allograft.DESIGN: A clinical observation.SETTING: Zhujiang Hospital Affiliated to Southern Medical University.PARTICIPANTS: A total of 1297 patients,824 males and 473 females,averaging (42±16) years of age,received renal transplantation in the Department of Organ Transplantation,Zhujiang Hospital,Southern Medical University between January 1998 and December 2005,were recruited for this study.Among these patients,165 were HLA-IgG antibody-positive recipients,1132 were HLA-IgG antibody-negative ones,1217 received renal transplantation for the first time,77 received renal transplantation twice,2 three times,and 1 four times.Written informed consent was obtained from each subject for related laboratory measurements and treatment.The protocol was approved by the Hospital's Ethics Committee.Reagents:Lamhda antigen tray (LAT),Lambda antigen tray mixed (LATM),Special Monocloneal Tray-Asian HLA Class Ⅰ,and Micro SSP? Generic HLA Class Ⅱ were purchased from One Lambda Company,USA.Taq polymerase was purchased from PE Company,USA. DNA extract reagent was from Qiagen Company,Germany.Anti-human complement 4d (C4d) polyclonal antibody and chrornogenic substrate DAB were purchased from Biomedica Company,Austria.METHODS: Prior to operation,serum HLA-IgG antibody in the recipients was determined by an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).HLA-IgG antibody-positive serum was further detected by antigen tray (LAT1240 and LATIHDS) for antibody-positive rate and specificity.HLA genotyping was performed by a sequence specific primer polymerase chain reaction (PCR-SSP).For 40 recipients who had elevated serum creatinine (Scr),anti-HLA antibody detection and renal transplant needle biopsy were conducted.At the same time,C4d deposition on the capillary wall around the renal tubule was observed by immunohistochemical staining.Survival rate of renal allografts in recipients 1,3,and 5 years after transplantation,and relationships of gender and renal transplantation and antibody-positive rate were investigated.Survival rate of renal allograft in recipients that received different mismatch of HLA cross-reactive group was analyzed.MAIN OUTCOME MEASURES: Prior to and after renal transplantation,HLA-IgG antibody-positive rate and HLA genotyping in renal transplant recipients.Characterization of C4d deposition on the capillary wall around the renal tubule in the renal transplant biopsy tissue.Difference of survival rate of renal allograft.RESULTS: All 1297 recipients were included in the final analysis.Among them,1132 were HLA-IgG antibody-negative recipients,165 were HLA-IgG antibody-positive ones,126 were anti-HLA class Ⅰ IgG antibody-positive ones,90 were anti-HLA class Ⅱ IgG antibody-pesitive ones,51 were anti-HLA class Ⅰ and Ⅱ IgG antibody-positive ones,and 94 were highly sensitized ones (antibody-positive rate ＞50%).Among 40 recipients with needle biopsy,C4d deposition was found in the 13 recipients,but not found in the 27 recipients.Ten out of thirteen C4d-positive recipients presented with anti-HLA antibody-positive in the peripheral circulation.The incidence for delayed graft function (DGF) was significantly higher in recipients with HLA-IgG antibody-positive than in recipients with HLA-IgG antibody-negative (P ＜ 0.01).There was no significant difference in the survival rates of renal allografts between recipients with HLA-IgG antibody-positive and with HLA-IgG antibody-negative 1 ,3,and 5 years after renal transplantation (P ＞ 0.05).Antibody-positive rate was significantly higher in female recipients than in male recipients (P ＜ 0.01).Antibody-positive rate was significantly higher in recipients that received renal transplantation for the second time than in recipients that received renal transplantation for the first time (P ＜ 0.01).With HLA cross-reactive group mismatching increasing,survival rate of renal allograft presented a tendency of decline.One,three and five years after renal transplantation,the survival rate of renal allograft was respectively 97%,94%,and 92% for recipients with no mismatching,and 91%,82%,and 77% for recipients with two mismatches,which was respectively decreased by 6%,12%,and 15% compared to recipients that received no mismatching.For recipients with three mismatches,the survival rate of renal allograft was respectively decreased by 9%,15%,and 24% compared to recipients with no mismatching.CONCLUSION: C4d deposition on the capillary wall around the renal tubule can be detected as an indicator of antibody-mediated humoral rejection.A good HLA matching can noticeably decrease the incidence of rejection and improve the survival of renal allograft.
Li Liu-yang
Liu Zhan-guo
Chen Jian-rong
Sun Er-wei
作者单位：
南方医科大学附属珠江医院器官移植科,广东省广州市,510282
年，卷(期)：
机标分类号：
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小鼠胚胎后肾移植的胚龄选择
目的:观察小鼠不同胚龄的后肾植入同种异体远交系成年宿主体内后的生长变化,分析小鼠胚胎后肾移植的胚龄选择、血管起源.方法:实验于4-06在锦州医学院组织与胚胎学教研室完成.实验选用普通级昆明系小白鼠24只,同笼饲养.以观察到阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0 d,以观察到仔鼠出生的最早时间计为生后0 d.以随机数字表法取胚龄13,14,16 d的胎鼠及生后1 d的仔鼠,即胚龄13 d组、胚龄14 d组、胚龄16 d组、生后1 d组,每组8只.受体动物选择普通级体质量20 g～25 g的成年健康雄性小白鼠32只.对胚龄13 d的小鼠胚胎离体后肾4只进行组织培养,观察10 d后肾小体的发育情况.选择胚龄13,14,16 d及生后1 d的小鼠后肾植入同种远交系成年宿主大网膜内10 d后,采用光镜及电镜技术观察后肾脏各部(特别是肾小体)的发育情况.结果:各组进行实验的后肾及宿主小白鼠32只均进入结果分析.①胚龄13 d的小鼠肾脏中无成熟的肾小体,此胚龄的离体后肾经组织培养和移植后均可以生长和分化,产生成熟的肾小体.②胚龄14,16 d及生后1 d的小鼠肾脏中,已出现了成熟肾小体,后肾移植后则出现了排斥反应,间质水肿、出血区及淋巴细胞浸润,肾小体萎缩,甚至完全被纤维组织所取代;且排斥反应强弱与胚龄有关,胚龄越大,排斥反应越强.③培养前的后肾结构与移植前胚龄13d小鼠胚胎的后肾结构相同;培养10 d后,可见出现了发育中各个阶段肾小体,电镜下可见血管球结构完整.结论:在供体后肾肾小体出现之前移植,其排斥反应轻微,生长发育良好,表明血管球形成之前是移植的最佳时间.
作者单位：
锦州医学院,第一附属医院胸外科,辽宁省锦州市,121001
锦州医学院,组织胚胎学教研室,辽宁省锦州市,121001
年，卷(期)：
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万方数据电子出版社肾移植术后 如何保健效果最好
核心提示：肾移植术后患者要严密观察身体状态，预防感染，在饮食方面也要多加注意。
　　肾移植手术在现在的器官移植手术中是技术发展比较成熟，风险比较低的手术之一，所以肾移植手术的成功概率比较高，存活率也比较高，但是任何移植手术，后期的疗养和护理都是至关重要的，即使是成功率较高的肾移植也要注意移植后是否有排斥反应，以及恢复情况。肾移植术后的三个月到半年期间是一个非常关键阶段，因为此时身体免疫能力较差，抵抗力较低，很容易感染，还有可能会产生免疫药物排斥现象，会导致肾衰竭，影响肾脏的功能及存活期限，所以手术后一定要格外注意。 　　严密观察　　患者手术之后一定要观察自己的身体状态，判断是否有排异反应，如果有要及时去医院就医。要关注自己的体温、体重、排尿量，如果患者发现自己体温升高一直不退，体重短时突然增加，还有小便量很少甚至没有，那么就有可能是发生排异反应了，患者如果发现伤患处红肿疼痛，经常觉得乏力、疲倦，也有可能是肾脏有排异。患者发现自己有以上症状，即使不太确定，也要及时去医院检查，咨询医生，以免耽误治疗。　　饮食注意事项　　患者手术后要补充营养，但是并不建议用中医大补药补，要有一个循序渐进的过程。手术后两个月内，多食用高蛋白、高胆固醇的食物。多食用牛奶、鱼类、鸡蛋、豆制品、水果、蔬菜等，但要注意患者要避免太咸的食物，控制食盐的摄入，在手术三个月后，就要降低脂肪、胆固醇、糖分的摄入，要控制体重在正常范围内。　　预防感染　　患者在伤口恢复时期，身体免疫能力下降，尽量不要去公共场所，以免伤口感染。肾移植术后患者要格外重视自己身体伤口，即使是不小心割伤、擦伤，伤口也要慎重处理以免感染，否则会导致败血症，造成生命危险。　　39健康资讯——整合39健康网优质资讯，10分钟浏览全站精华。　　微信扫描下方二维码马上知道！
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亲属肾移植后群体反应性抗体的调查
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&& 文章详情
肾移植受者血中PBMCs的基因表达谱分析
作者：郭义峰
谭建明 　唐 榕
【关键词】& 肾移植
　　【摘要】 目的 研究和探索与肾脏移植相关的差异表达基因。方法 选择肾移植患者30例。分术前当日和术后4周采新鲜外周血液10ml，血标本按术前（对照）和术后归类分组。用Ficoll技术，获取外周血单个核细胞。标本均置于液氮罐保存。采用一步法提取总RNA，同组RNA标本同量混合，用荧光染料Cy3-dUTP标记对照组总RNA，用Cy5-dUTP标记术后组总RNA。逆转录标记cDNA探针。采用高通量基因表达谱芯片（16，920点基因）进行芯片杂交，并用ScanArray4000扫描仪扫描芯片，得到Cy3/Cy5图像文件，通过划格确定杂交点范围，过滤背景噪声，提取基因表达的荧光信号强度值。ArrayPro Analyzer4.0分析Cy3和Cy5两种荧光信号的强度和比值。结果 术后组和对照组存在差异表达的基因，其中重复2次差异表达的基因有433条（2.56%）。显示上调基因26条，其中已知基因11条，未知基因15条;下调基因407条，其中已知基因252条，未知基因155条。结论 运用高通量、大规模基因表达谱芯片分析和研究患者基因表达谱系，能够有效筛选有关移植免疫方面的相关基因。　　　关键词 肾脏 移植 基因芯片 基因表达谱&&&&&
　　Guo Yifeng，Zheng Junhua，Tan Jianming，et al. &&& 　　Department of Urology，Changzheng Hospital，Second Military Medical University，Shanghai200003.
&&&&& 【Abstract】 Objective To explore and discover the relative genes with transplant immunity.Methods By virtue of gene microarray to analyze the differential expression of the genes in the PBMCs of the patients having acceptˉed renal transplantation.The30patients having accepted renal transplantation（4weeks after operation）were collectˉed fresh blood according to preoperation（as control group）and postoperation4weeks（as postoperation group）.By Fiˉcoll method，PBMCs was collected and preserved in liquid nitrogen.Total RNA were extracted by one-step techˉnique and purified.Samples of per group were merged into the whole by the same quantity.The total RNA of postopˉeration group were labeled with Cy5-dUTP respectively，and total RNA of control group were labeled with Cy3-dUTP，then by reverse transcript way to label the cDNA probe.High throughout gene chip（16，920）was hybrided and scanned by ScanArray4000.Cy3/Cy5image files were copied.The area of point was determined with grids，the noise of background was filtered and fluorescent signal value of gene-expressing was obtained.ArrayPro Analyzer4.0computed and analyzed the fluorescent signal intensity and ratio of Cy3and Cy5.Results There are differential exˉpression433genes（2.56%），including up-regulated26（known11and unknown15）and down-regulated407（known252and unknown155）.Conclusion cDNA microarray for analysis of gene expression proflies is a powerful method to identify associated genes with transplant immunity.&&& 　　Key words kidney transplantation gene microarray Gene expression profiles&&
　　器官移植，包括肾脏移植已成为治疗终末期器官功能衰竭唯一有效的根治方法。目前在移植界仍然面临许多难题，难题之一在于如何解决肾移植术后机体产生排斥和抗排斥之间的平衡。免疫抑制剂用量过大，则造成抑制过度，全身免疫力下降，诱发各种感染 ［1，2］& ，甚至肿瘤的发生 ［3］& 。免疫抑制剂用量过小则易出现抑制力不足，急性排斥反应的发生。了解肾移植术后免疫反应状态是必要的。能否采用高通量、大规模的基因芯片去筛选和发现肾脏移植差异 表达基因，从基因水平去检测免疫反应状态，找出它们的内在联系。为临床提供理论依据和参考。
　　1 材料和方法　　　　1.1 材料
　　1.1.1 试剂
　　Ficoll-Hypaque分离液（比重1.077±0.001，上海试剂二厂出品）。Cy3-dCTP，Cy5-dCTP（美国Amerˉsham Phamacia Biotech Co.出品），Superscript II（美国Gibco BRL Co.出品）。
　　1.1.2 芯片
　　16，920点基因表达谱芯片由上海联合基因科技有限公司提供。ScanArray4000扫描仪购自美国General Scanning公司。& 　　1.1.3 主要仪器
　　ScanArray4000扫描仪，美国General Scanning Co.出品。电泳仪，美国Phamacia Biotech Co.出品。恒温杂交箱，美国Robbins Scientific Corporation出品。
　　1.2 方法
　　1.2.1 标本采集
　　选择肾移植患者30例，男18例，女12例，年龄20～45岁，平均年龄30.5岁。术前PRA（群体反应性抗体）检查阴性。所有入选人员均知情同意。分术前当日和术后4周采新鲜外周血液10ml，血标本按术前（对照）和术后归类分组，并以肝素抗凝。所有患者术后均采取免疫抑制剂三联疗法（环孢素、晓悉和强的松），无排斥反应和各种感染发生。
　　1.2.2 细胞分离
　　用Ficoll技术，获取外周血单个核细胞。置液氮保存。
　　1.2.3 总RNA
　　用酚氯法提取总RNA。电泳和测定吸光度值进行质检。为去除个体差异，将同组RNA标本同量混合，置-20℃冰箱保存。
　　1.2.4 探针制备
　　对照组和术后组各取50g总RNA。荧光染料Cy3-dUTP标记对照组总RNA，Cy5-dUTP标记术后组总RNA。逆转录合成cDNA探针。
　　1.2.5 杂交和结果分析
　　采用高通量基因表达谱芯片（16，920点基因）进行芯片杂交，并用ScanArray4000扫描芯片，得到Cy3/Cy5图像文件，提取基因表达的荧光信号强度值。用预先选定的内参照基因（40个管家基因）对Cy3和Cy5的原始提取信号进行均衡和修正。采用ArrayPro Anaˉlyzer4.0软件分析Cy3和Cy5两种荧光信号的强度。设定Cy5/Cy3的正常比值（Ratio）在0.5～2.0之间。Ratio2.0为上调表达，Ratio0.5为下调表达，图3为散点图。
　　1.2.6 生物信息学分析
　　查阅NCBI数据库（）对基因进行分析和研究。　　　　2 结果
　　2.1 总RNA抽提结果
　　术后组D260/D280值达1.893，而对照组的D260/D280值也达1.886，电泳结果显示总RNA，无降解，28S，18S，条带清晰（图1，图2）。提示得到高纯化的总RNA。　　2.2 芯片杂交的数据统计分析
　　采用ArrayPro Analyzer4.0软件分析Cy3和Cy5两种荧光信号的强度。图3系散点图（Scatter plot）代表Cy3（对照组）和Cy5（术后组）荧光信号比&&& 值的离散程度，愈靠近X轴表明该点基因差异表达愈显 著。
　　2.3 基因芯片筛选的结果
　　用高通量基因表达谱芯片筛选术后组和对照组的差异表达的基因，发现术后组和对照组存在差异表达的基因，其中重复2次差异表达的基因有433条（2.56%）。移植术后组基因差异性表达显示上调基因26条，其中已知基因11条，未知基因15条;下基因407条，其中已知基因252条，未知基因155条。
　　图1 移植术后组总RNA电泳图略　　　　图2 术前对照组总RNA电泳图略
　　图3 Cy 3 （对照组）和Cy 5 （术后组）荧光信号散点图略
　　表1 肾移植受者基因上调表达（略）　　表2 肾移植受者基因下调表达（略）&& 　　3 讨论&&& 　　　　3.1 芯片扫描数据初步分析
　　在散点图数据分析中，我们发现每条基因Cy3和Cy5均值所呈现的散点分布在对称轴直线两侧的区域中。Cy5/Cy3比值在0.1和12之间呈现。而在一些肿瘤的基因表达研究中我们却可以发现其Cy5/Cy3比值高达45倍 ［4］& ，这提示我们此实验中基因表达的差异度相对较小。
　　3.2 芯片杂交结果分析
　　芯片扫描结果发现表达差异相差两倍以上的基因有433条，表达上调的有26条，其中共有已知基因11条，未知基因15条。下调的有407条，已知基因252条，未知基因155条。本实验筛选出来的已知基因（以Genbank号表示）初步归类为:
　　3.2.1 表达增加的已知基因
　　酪氨酸激酶基因:NM_022731;免疫相关基因AK000514，L26339;蛋白激酶:U47077;微管蛋白基因:U61232;超氧歧化酶:NM_005125;蛋白翻译合成基因:NM_001022;细胞受体基因:NM_030876;核仁蛋白基因:NM_006824;其他基因:，AL049989。
　　对部分表达增高的已知基因进行分析:
　　酪氨酸激酶基因:NM_022731。蛋白酪氨酸激酶（PTKase）参与能量代谢，细胞繁殖。其相对应的PTK受体通路是细胞信号传导网络中的重要通道。供肾的植入无疑产生了巨大的免疫反应，刺激机体产生大量的淋巴细胞、细胞因子和抗体。PTK基因的上调表达，从一个侧面反映了机体的抗排斥性。
　　蛋白激酶基因:U47077;参与了T细胞活化中的信号传递。当T细胞受到抗原信号刺激后，活化信号由胞外传导至胞内，需经历一个由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化的蛋白磷酸化与脱磷酸化反应的环节。
　　免疫相关基因:AK000514从人印戒细胞癌细胞株KAˉTO中分离得到的基因序列，功能尚不明确;L26339是反映人自身抗原的免疫反应区的基因序列。
　　3.2.2 表达降低的部分已知基因:
　　肿瘤基因:AF008915;离子通道和运输蛋白:NM_014753，NM_003705;细胞周期蛋白类:NM_004701;外压反应蛋白:AA514407;微管相关蛋白:NM_002373;DNA合成和修复、重组蛋白:脱氧核糖核酸酶:NM_0006730;DNA结合、转录和转录因子:鸟苷酸结合蛋白NM_020988，转录因子NM_005604;免疫相关:核糖核酸聚合酶（上游结合转录因子）NM_014233，转录因子NM_006286;有关细胞信号和传递蛋白的基因:RAS p21蛋白激活物;NM_006506;干扰素受体NM_000629;白介素-6受体NM_004304;神经钙蛋白（calcineurin）NM_005605;RAS癌基因NM_015646。代谢:细胞色素氧化酶亚单位NM_004255;与Kappa B结合蛋白相关的核因子NM_006165;蛋白翻译合成:锌指蛋白NM_003434，等。
　　对部分表达降低的已知基因进行分析:
　　白介素-6受体和干扰素受体NM_000629和NM_004304均为细胞因子受体（CKR）的相关基因。表达于细胞表面的细胞因子受体为膜结合型细胞因子受体。绝大多数存在可溶性细胞因子受体（sCKR），它们具有对膜结合型细胞因子受体的负调节作用、对细胞因子的载体作用、对细胞因子生物学活性的拮抗作用及对细胞因子信号传导的辅助作用等生物学活性。
　　单种细胞因子的信号传导可涉及到多条途径。（1）Ras 途径:在早期研究生长因子信号传导过程中发现，Ras途径在生长因子促进细胞增殖信号中起重要作用。Ras通过磷酸化作用，激活丝裂原激活的蛋白激酶（mitogenactivatˉedproteinkinase，MAPK）使核糖化蛋白S6激酶（RSK）的苏氨酸残基发生磷酸化而被激活，然后进一步激活转录调节因子如c-fos、c-jun等，再通过AP-l作用于胞核，使特定基因转录激活，引起细胞增殖。（2）JAK-STAT途径:JAK-STAT途径是近年来信号传导领域中的重大进展，是人们在研究干扰素信号传导过程中发现的。目前认为，该途径在几乎所有细胞因子信号传导中均起重要作用。JAK即Janus激酶，是一种非受体型蛋白酪氨酸激酶（PTK）。JAKs代表Janus家族蛋白酪氨酸激酶（The Janus family of protein tyrosine kinases）。JAK既能催化与之相连的细胞因子受体发生酪氨酸磷酸化，又能通过磷酸化作用激活多种含特定SH2结构域的信号分子。STAT即信号传导及转录激活因子（signal transducers and activators of transcription），可与特定的含磷酸化酪氨酸的肽段结合。STAT需JAK的激活和丝氨酸激酶的作用，才能起到信号传导的作用或成为转录因子。STAT被磷酸化后形成二聚体。该二聚体形式作为转录激活因子，进入胞核并使特定基因转录激活。
　　目前认为，JAK-STAT途径介导细胞因子信号传导的大体过程，首先是由细胞因子与其特异性受体结合，使受体形成二聚体或多聚体，然后受体胞内段与JAK相互作用，使细胞因子受体发生酪氨酸磷酸化，并使JAK自身发生酪氨酸磷酸化而被激活，再与含有SH2结构域的STAT相互作用，使其磷酸化，形成二聚体后进入胞核内，使基因转录激活，使细胞表现出一定的生物学活性。此复杂的过程还涉及到Shc、Grb2、Sos、Ras和Raf.它们最终使MAPK发生磷酸化，将信号传递至胞核内。
　　IL-6曾被称为B细胞分化因子（BCDF）和T杀伤细胞分化因子（CDF），具有免疫增强作用，参与炎症反应。其细胞因子受体表达低下和缺陷，往往出现在先天性免疫缺陷和继发性免疫缺陷。肾移植术后组出现其相关基因表达不同程度的下调，可能与术后使用免疫抑制剂有关。文献报道IL-6和IL-6R在遭排斥的移植肾活检组织中表达增高 ［5］& 。有人通过检测尿中IL-6去检测和判定肾移植后排斥是否发生 ［6］& 。
　　本组差异性表达基因来看，除了与信号传导有关外，多数也表现在转录方面基因下调。
　　神经钙蛋白基因NM_005605下调是神经钙蛋白（calˉcineurin，CN）抑制剂环孢素作用的结果;神经钙蛋白（calˉcineurin，CN）是细胞因子信号转录中的重要环节，将阻断IL-2等T细胞增殖必需的一些细胞因子的转录。NM_005384 ［7］& 为IL-3DNA启动子区的转录激活因子，和其他转录因子一样，如上游结合转录因子NM_014233，转录因子NM_005604，RAS癌基因NM_015646;RAS p21蛋白激活物NM_006506，均表现基因下调。与蛋白翻译合成等有关的基因表达也出现下调，如锌指蛋白NM_003434等。总之，由于免疫抑制剂的使用，大部分基因表达下调，肾移植受者处于免疫抑制状态。
　　目前采用的基因芯片是将PCR等方法得到的cDNA、寡聚核苷酸片段等用针点或喷点的方法直接排列到玻片等介质上，从而制备成芯片 ［8，9］& 。它具有高通量、高信息量、快速、样品用量少、造价低、用途广泛等优点，能否应用于器官移植领域，去检测肾移植受者不同时期基因表达情况，从而了解其免疫反应状态，是我们需要进一步研究的问题。
　　参考文献
　　1 Sola R，Diaz JM，Guirado L，et al.Significance of cytomegalovirus inˉfection in renal transplantation.Transplant Proc，）:.
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&&&&& （收稿日期:）
　　作者单位:200003第二军医大学长征医院泌尿外科　　　上海市第一人民医院肾移植科　　　上海联合基因集团生命科学研究院 （编辑黄 杰）
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