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微卫星检测
微卫星检测
遗传多样性是生物多样性的重要组成部分,也是物种多样性和生态系统多样性的基础。广义上...根据扩增的微卫星DNA片段来检测多态性在目前的人类学研究中和谱系、亲子鉴定中以及家养动物QTL基因定位中使用较多，如金力等对我国主要民族人群的Y染色体
与"微卫星检测"相关的文献前10条
目的　探讨微卫星不稳定性（ ＭＳＩ） 检测在膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ） 诊断中的价值。　方法　采用ＰＣＲ 扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染等技术。选用了２０ 种微卫星标记物对５０ 例
目的　研究肺癌患者血浆游离性肿瘤DNA微卫星不稳定 (Microsatelliteinstability ,MSI)和杂合性缺失 (Lossofheteroxygosity ,L
在牙鲆育种中基于构建的大量家系,已经筛选出生长快成活率高的F1代家系和0751,为了使其优良性状进一步纯化,采集以上3个优良家系中成熟个体的精子和卵子,分别利用
目的:检测肺鳞癌患者癌组织和外周血中微卫星DNA的变异。方法:选择30例原发性肺鳞癌患者的癌组织、外周血液标本及30例肺部良性疾病患者的外周血液标本,用PCR-银染法,对其中的2
目的建立微卫星DNA标记技术检测基因突变的方法。方法对C57BL/6J近交系小鼠腹腔注射乙基亚硝基脲(ENU)溶液后,分析其外观和精子畸形状况,应用41个在不同品系小鼠间表现多态
利用猪SCAU-LL资源群,根据猪USDA-MARC2.0连锁图谱,选取4号染色体上微卫星标记SW 1678,用变性高效液相色谱(DHPLC)系统和AB I377系统分析了F2代
目的检测和评估金黄地鼠封闭群SPF化后的遗传学变化,为SPF金黄地鼠遗传质量的控制提供技术资料。方法应用小鼠和大鼠的微卫星标记筛选适于金黄地鼠遗传检测的微卫星标记,并结合微卫星荧
目的通过检测基因突变及其产物在微卫星不稳定型大肠癌中的表达,探讨微卫星不稳定型大肠癌发生发展的分子生物学机制。方法利用PCR、RT-PCR及蛋白印迹杂交方法,在11个大肠癌细胞株
目的　探讨hMLH1及hMSH2蛋白免疫组化结合微卫星不稳定性检测在遗传性非息肉病性结直肠癌家系筛选中的敏感性、特异性及临床应用价值。　方法　对 12例符合Amsterdam标准
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<font color="#0-819-9993
<font color="#0-
<font color="#0-人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光法)产品说明书
人巨细胞病毒核酸扩增荧光定量检测试剂盒
Human cytomegalovirus Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction Diagnostic Kit
ren ju xi bao bing du he suan kuo zeng ying guang ding liang jian ce shi ji he
本品用于器官移植、骨髓移植及HIV阳性/AIDS患者人巨细胞病毒（HCMV）感染的辅助诊断和疗效监控，不用于血源筛查。本品检测结果仅供临床参考，不能单独作为确诊或排除病例的依据。对实验结果的解释，详见【实验结果的解释】及【本检测方法的局限性】。
本品选取人巨细胞病毒株（即人疱疹病毒5型）-AD169基因组中编码即刻早期转录调节蛋白的IE1基因的一高度保守的非编码区为扩增靶区域，设计特异性引物及荧光探针，扩增片段长度为86bp，利用实时荧光定量PCR技术，定量检测尿液、乳汁、血清或淋巴细胞样本中人巨细胞病毒DNA。
DNA提取液（500μl/管）&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
2管HCMV-PCR反应管（未贴标签管）&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 20管阳性定量参考品（2×108copies/ml）（50μl/管）&&&&&&&&&1管弱阳性质控品（200μl/管）&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
1管强阳性质控品（200μl/管）&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
1管阴性质控品（50μl/管）&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
1管稀释液（500μl/管）&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
尿或乳汁：取晨尿或成熟乳1ml于1.5ml的无菌离心管中，离心取沉淀即为标本。标本可立即用于测试，也可保存于-20℃待测，保存期为6个月。血清：用无菌注射器抽取受检者静脉血1ml，注入无菌1.5ml Eppendoff管，4℃静置过夜。吸取上层血清（注意勿带入红细胞）至另一无菌1.5ml Eppendoff管，即为血清标本。标本可立即用于测试（48小时以内），也可以保存于-20℃待测保存期为6个月淋巴细胞：取静脉血（EDTA抗凝）1ml，利用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞即为标本。标本可立即用于测试，也可保存于4℃待测，保存期为24小时。
标本运送应采用0℃冰壶。
PE GeneAmp 5700，ABI PRISM 7000，ABI PRISM 7700
1. 标本处理1.1 尿液或乳汁
标本12,000rpm离心5分钟,沉淀加50μl DNA提取液打匀。（提取液内含不溶于水的物质，取样时需用加样器充分混匀后吸取。如出现因吸头嘴部太细不能吸取或取样后堵塞吸头的现象，可先用洁净无污染的剪刀将吸头嘴部剪去一截）100℃保温10分钟（误差不超过1分钟）。（为保证病毒颗粒充分裂解，可转至4℃静置8~12小时）12,000rpm离心5分钟，取上清液（含病毒DNA）5μl做PCR扩增。1.2 血清
用无菌注射器抽取受检者静脉血1ml，注入无菌1.5ml Eppendoff管，4℃静置过夜。吸取上层血清（注意勿带入红细胞）至另一无菌1.5ml Eppendoff管，即为血清标本。取50μl血清加50μlDNA提取液打匀，100℃保温10分钟，12,000 rpm离心5分钟，取上清液（含病毒DNA）5μl做PCR扩增。1.3淋巴细胞
加入1ml生理盐水至装有1ml静脉血（EDTA抗凝）的离心管中，沿管壁轻轻打入并轻微混匀。将此2ml混合血液沿试管壁缓缓加入到装有2ml淋巴细胞分离液的试管中，不能震荡和混匀。2500rpm，15分钟离心后，用加样枪吸出中间的细胞层于离心管中，10,000rpm离心5分钟，沉淀加50μl DNA提取液打匀。100℃保温10分钟，12,000 rpm离心5分钟，取上清液（含病毒DNA）5μl做PCR扩增。1.4阴阳性质控品质控品加50μl DNA提取液打匀。100℃保温10分钟(误差不超过1分钟)，2,000 rpm离心5分钟，取上清液5μl做PCR扩增。2.参考品稀释和处理将阳性定量参考品（2×108copies/ml）6,000rpm离心数秒标示为108，另取4支灭菌新0.5ml离心管，分别加入90μl稀释液，依次标示为107--104。吸取108管10μl至107管，用加样器反复混匀后换新吸头取10μl至106管，依此方法依次稀释至104管。-20℃保存；吸取5个（2×108--2×104copies/ml）的阳性定量参考品梯度和阴性质控品各40μl，分别加40μl DNA提取液打匀，以下步骤同样本处理。上清液（含病毒DNA）待用于PCR扩增。3．PCR扩增ABI PRISM 7000，PE GeneAmp 5700：取HCMV-PCR反应管若干，分别加入处理后上清液（含病毒DNA）各5μl，6,000rpm离心1分钟。将各反应管放入定量PCR仪器的孔样品槽内，按对应顺序设置阴性质控品、阳性定量质控参考品梯度（应设置为108--104copies/ml）以及未知标本，并设置样品名称、标记荧光基团种类和循环条件:93℃→2分钟预变性,然后按93℃ 45秒→55℃ 60秒,先做10个循环，最后按93℃ 30秒→55℃ 45秒,做30个循环。Roche LightCycler：将处理后的样品（或阴阳性质控参考品）2μl加入专用毛细管中，盖上PCR反应盖，8,000rpm离心2分钟，插入圆形卡盘倒置10秒钟后放入仪器中设置循环条件：93℃→2分钟预变性，然后按93℃ 5秒→57℃ 45秒，做40?鲅?贰?7℃1秒。所有设置全部完成后保存文件，最后运行程序。4．结果分析条件的设定PE GeneAmp 5700 、ABI PRISM 7000的条件设置：反应结束后保存检测数据文件。根据分析后图像调节baseline的start值（2～4），stop值（7～9）以及Threshold值，使Std curve窗口下的标准曲线图达到最佳（correlation数值介于-0.97～-1之间，correlation数值等同于r值），最后到Reporter窗口下记录仪器自动分析计算出的未知标本数值（Qty）。Roche LightCycler的条件设置：反应结束后自动保存检测数据文件，调整荧光记数值(Fluorescence)为F1/F2，点击Quantification读取结果。调节噪声容限在阴性对照以上，要求在Step3:Analysis下相关性r值<-0.97，接近-1.0。并保证阴性对照Ct值不出现任何数值。最后记录仪器自动分析计算出的未知标本数值（M）。
阴性质控品：全部阴性阳性定量参考品：全部阳性|r|≥0.97（correlation数值等同于r值），弱阳性质控品数值范围：2.5×104拷贝/ml～4×105拷贝/ml强阳性质控品数值范围：2.50×106拷贝/ml～4.0×107拷贝/ml以上要求需在同一次试验中同时满足。否则，本次试验无效，全部试验应重新进行。
1.阴性结??卸ǎ?
ABI Prism 7000，PE GeneAmp 5700仪器：如果增长曲线不是典型的S曲线或Ct值=30，则实验结果判为小于104copies/ml。Roche Light Cycler：如果增长曲线不是典型的S曲线或Ct值为空白，则实验结果判为小于104copies/ml。2.阳性结果判定与计算：ABI Prism 7000，PE GeneAmp 5700仪器：如果增长曲线呈典型的S曲线且Ct值＜27，则实验结果判为阳性。样品的HCMV DNA含量（copies/ml）=Qty/20。若样品为血清，则样品中的HCMV DNA含量（copies/ml）=QtyRoche Light Cycler：如果增长曲线呈典型的S曲线且Ct值＜37，则实验结果判为阳性。样品的HCMV DNA含量（copies/ml）=M/20。若样品为血清，则样品中的HCMV DNA含量（copies/ml）=M
1.对于检测结果阳性的报告，只表明该样本中有病毒的遗传物质DNA存在，并不表明有活病毒存在。2.虽然本试剂盒检测特异性、灵敏度均较高，但测定结果为阴性的并不能排除样本含有病毒，只能说明样本中含有的病毒浓度低于本试剂盒的检测灵敏度。
1.根据临床考核结果，本试剂盒的检出限度为104copies/ml。2.本检测系统的交叉反应性已经临床考核的检验而确定，EB、HPV6型、HPV11型、HSV-1、HSV-2与本品无交叉反应，阳性结果可以排除疱疹病毒群中的其它属病毒。3.根据本品对临床确诊HCMV患者连续监测的结果：人巨细胞病毒感染后为持续性或间隙性排毒，阴性结果不能排除人巨细胞病毒感染。需在不同的时间段同时取不同组织的样品以确证人巨细胞病毒DNA的存在。
中山大学达安基因股份有限公司
广州市高新技术产业开发区香山路19号
单管单人份，20人份/盒
本试剂盒保存于-20℃，试剂盒应避免反复冻融。
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《临床检验杂志》论文发表格式
周期：月刊
期刊级别：CSCD 科技统计源核心 北大核心 浙江省核心
国内统一刊号：11-2224/R
国际标准刊号：
主办单位：中国药学会
主管单位：
投稿信箱：
声明：期刊介绍仅作为参考资料，树人论文网作为展现平台，不是官方杂志社，不以期刊名义征稿论文。 如果有职称论文发表，有在线编辑人员为您提供咨询，可以解答您的疑问，介绍适合投稿期刊，并予以论文发表。
　　《临床检验杂志》杂志级别：CSCD 科技统计源核心 北大核心 浙江省核心，主办单位：中国药学会，周期：月刊，国内统一刊号：11-2224/R，国际标准刊号：，复合影响因子：0.436，综合影响因子：0.362。
　　《临床检验杂志》简介：《临床检验杂志》是我国医学检验学科重要的核心杂志，进入国家杂志方阵并列入国家百种重点杂志，被国内外众多着名数据库收录。本刊主要报道国内医学检验及交叉学科领先而实用的科研成果、理论探讨、工作实践经验和国外重要进展。本刊对基金资助的论文、研究生论文等需要加快处理的稿件开设&快速通道&。
　　《临床检验杂志》办刊宗旨：面向各级医院的医学(临床)检验实验室，根据国内外医学实验诊断学现状和发展趋势，报道相关的科研成果和学术进展，交流工作经验和学术信息，为促进我国医学实验诊断学的进步和发展服务。
　　《临床检验杂志》栏目设置：本刊常设栏目：述评、专家论坛、专题笔谈、综述、临床检验技术研究、临床实验诊断研究、基础实验诊断研究、质量管理研究、研究生园地等;主推栏目：病例报告、经验与技术交流、调查研究、产品应用研究、争鸣与评论、热点&焦点&难点、问题讨论、学科&机构&人物、读者&作者&编者、专家释疑、消息等。?
　　《临床检验杂志》收录情况：国家新闻出版总署收录杂志　全国中文核心杂志 全国优秀科技杂志 中国杂志方阵&双效&杂志 第三届国家杂志奖百种重点科技杂志 国家科技部中国科技论文统计源杂志 中国科学引文数据库医学类核心杂志
　　最新目录
　　1 心血管疾病易感基因分子预警&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 汪俊军 321-323
　　2 1 例家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变体功能研究 王海红,王春梅,徐胜媛,等 324-328
　　3 1 个遗传性长 QT 间期综合征家系成员的遗传位点检测 胡绘,干学东,熊陈岭,等 329-332
　　4 目标基因捕获测序技术检测 1 例肥厚型心肌病致病基因突变&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 刘旭霞,姜腾勇,郭俊,等 333-336
　　5 《临床检验杂志》可直接使用缩略形式的常用词汇 本刊编辑部 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&336
　　6 烟酸抗动脉粥样硬化研究进展 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&于瑞杰,洪骏,汪俊军 337-339
　　7 建立检测 18 种( 型/亚型) 呼吸道病毒的两种循环参数的实时荧光定量 PCR &&&&&&&&&&&&&&&&&&&陈钰静,丁细霞,郭勇晖,等 340-344
　　8 抗瓜氨酸化聚合兔 IgG 抗体 ELISA 法的建立及初步应用 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&李利平,王洁,张敏杰,等 345-349
　　9 人脐带间充质干细胞来源外体提取方法的比较 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&吴晓丹,张斌,朱艳华,等 350-353
　　10 人附睾蛋白 4 化学发光定量测定法的建立与评价 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&罗湘宇,刘宇思,曾令斌,等 354-357
　　11 《临床检验杂志》论文中相关词语的规范书写 本刊编辑部&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 357
　　12 实时荧光定量 PCR 检测人胰岛素样生长因子及其受体基因的方法学构建&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 彭启松,张俊,罗光华 358-361
　　13 原发性胆汁性肝硬化患者外周血 IL-8 及其受体CXCR1、CXCR2 的表达及临床意义 &&&&&&&&&&&&&&&&&杨敏,黄凤楼,傅海涛,等 362-365
　　14 血清鳞状细胞癌抗原对非小细胞肺癌患者预后判断的价值研究 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&李丹,李翀,张克新,等 366-368
　　15 临床检验杂志开通微信公众平台 本刊编辑部 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&368
　　16 多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞 NF-&B mRNA 表达水平及意义&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 张春福,雷艳花,张国梁,等 369-371
　　17 CYP3A4 基因多态性与临床疾病易感性的研究进展&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 董晓慧,刘欣跃 372-374
　　18 金黄色葡萄球菌生物膜感染的治疗新技术研究进展 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&贾蓓蓓,邵世和 375-377
　　19 氨甲喋呤对映体对急性淋巴细胞白血病的不同抑制效应 &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&张培,索美芳,陈洋,等 378-381
　　20 GUM 法与蒙特卡洛法在 IFCC 37 ℃ 肌酸激酶催化活性水平参考测量程序不确定度评定中的应用 &&&&&&&&&&汪静,张传宝,曾洁,等 382-389
　　《临床检验杂志》杂志社来稿写作注意事项
　　1、论著、综述一般不超过5 000字(包括中英文摘要、图表和参考文献所占篇幅)，其他不超过4 000字。中文文题以不超过20个汉字为宜。一般不用副标题和标点符号。论文所涉及的课题如取得国家或部、省级以上基金资助或属攻关项目，应按如下方式脚注于文题页左下方，并附基金证书或批文复印件。
　　2、来稿时除稿件外(网上在线投稿)，须另附第一作者单位推荐信、医学伦理知情同意书、全体作者同意发表签名书、第一作者或通讯作者简介与联系信息(电子邮箱、联系电话与传真)、基金资助及项目负责人证明、其他必要的说明与证明。
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　　2．文稿书写格式及要求。来稿请按如下顺序撰写：文题、作者姓名、摘要（不超过200字）、关键词、作者简介（真实姓名、出生年份、性别、籍贯、工作单位、职务、职称、专业学位和研究方向以及工作单位所在省、市、邮编）、中图分类号、文献标识码、正文、注释、参考文献及英文题目和作者拼音名。若有基金资助或课题经费资助的论文，请在［作者简介］后用［基金项目］注明基金项目名称或课题项目名称及编号。
　　o文题：应简明确切地反映文章的特定内容，以不超过20字为宜，一般不用副标题。
　　o关键词：2～5个，采用教育教学标准主题词，若规定标准词表中无该关键词的可使用自由词。
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　　o名词使用：文中所用专用名词不要随意缩写，如所用名词过长，而文中又需多次使用，则应在第一次使用时在全名后加圆括号注明缩写。
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　　o文献类型：以单字母标识（外加方括号），如专著（普通图书）为［M］，论文集（会议录）为［C］，汇编为［G］，报纸文章为［N］，期刊文章为［J］，学位论文为［D］，研究报告为［R］，专著论文集中析出文献为［A］，未说明的文献为［Z］，数据库为［DB］，电子公告为［EB］，联机网络为［OL］，联机网上数据为［DB/OL］，网上电子公告为［EB/OL］。
　　3．常用注释和参考文献标注举例：
　　［注释］
　　①石中英.知识转型与教育改革［M］.北京：教育科学出版社，2001：40.
　　②陈宇.我国职业资格证书制度的回顾与前瞻［J］.教育与职业，2004（1）：46.
　　④Hindson，ColinE.EducationalPlanninginVanuatu：AnAlternativeAnalysis［J］.ComparativeEducation，1995（31）：327-337.
　　［参考文献］
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　　［2］陈桂生.教育学的迷惘与迷惘的教育学［J］.华东师范大学学报（教育科学版），1989（3）.
　　［3］陶仁骥.密码学与数学［J］.自然杂志，）：527.
　　［4］蒋有绪，郭泉水，马娟，等.中国森林群落分类及其群落学特征［M］.北京：科学出版社，1998.
　　［5］（美）约翰·杜威.民主主义教育［M］.王承绪，译.北京：人民教育出版社，1990：10.
　　［6］潘懋元.开展高等教育理论的研究［N］.光明日报，.
　　［7］Barber，M.TheMakingofthe1944EducationAct［M］.GuildfordandKing’sLynn：BiddlesLtd.1994.
　　［8］Siegal，Harvey.Multiculturalism，Universalism，andScienceEducation：inSearchofCommonGround
［J］.CultureandComparativeStudies，2002（3）.
　　［9］DOWLERL.Theresearchuniversity’sdilemma；resourcesharingandresearchimatramsimstitutiomalemvironmemt［J］.JournalLibraryAdministration，/2）：5-26.
　　4．多作者文稿署名时须征得其他作者同意，排好先后次序，通知用稿后不再改动。
　　5．为便于稿件统一登记、防止丢失，请不要将稿件寄给个人。稿件一经刊用，即寄样刊，并付稿酬。来稿自寄出之日起，三个月内未刊用者，作者可自行处理。
　　6．投稿采用电子邮件方式。来稿中请注明作者详细通讯地址（收件人姓名、单位、住所、邮编、电话、电子信箱等）以便邮寄样刊与稿酬。
　　纸稿请寄：北京市邮政信箱《城市建设》杂志社编辑部
　　电子稿件信箱：
　　稿件查询电话：010-0-
论文发表流程
服务流程的详细解说
1.提出发表要求
客户发表的意向性要求，如:期刊类型、期刊级别、时间要求、文章字数、发表用途、发表数量等， 下载并填写---
2.报价推荐刊物
公司根据客户的需求，综合各方面的因素，为客户查询需要发表的期刊和时间安排，并与客户取得沟通达成一致意见。
3.付款发送样稿
达成协议后，客户支付推荐发表费用。支付方式有四种，支持网银在线、支付宝在线、银行转帐和ATM取款机转帐。[]
4.运作审稿发表
公司按照协议要求，联系相关期刊单位进行审核，具体运作，直到期刊单位发送“发表确认函”。
5.编辑部寄样刊
期刊单位赠送作者一本最新收录的期刊。销售部经理确认已经发表后，该笔交易结束。
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