抗心磷脂抗体是什么是抗酮抗体

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硝基呋喃类抗原抗体:四环素类抗原抗体:喹诺酮类抗原抗体:激素及类固醇抗原抗体:氯霉素类抗原抗体:毒素类抗原抗体:β-内酰胺类抗原抗体:磺胺类抗原抗体:禁用色素类抗原抗体:抗球虫药品类抗原抗体:林可胺和大环内酯类抗原抗体:抗病毒类抗原抗体:硝基咪唑类抗原抗体:喹喔啉类抗原抗体:氨基糖苷类抗原抗体:毒品类抗原抗体:水产违禁药物及抗原抗体:农药类抗原抗体:其它类抗原抗体:试剂及耗材等:
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& & & & &Anti-Natrexone抗体,纳曲酮抗体IgG产品介绍:
中文名称:纳曲酮抗体IgG
英文名称:Anti-Natrexone
产品编号:BYK-0903R
产品规格:0.1ml/0.2ml
产品别名:.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
Western Blotting 具体实验步骤
Western,也称Western blot、Western blotting、Western 印迹,是用抗体检测蛋白的重要方法之一。
Western可以参考如下步骤进行操作:
1、收集蛋白样品(Protein sample preparation)
可以使用适当的裂解液裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品。对于某些特定的亚细胞组份蛋白,例如细胞核蛋白、细胞浆蛋白、线粒体蛋白等,可以参考相关文献提取这些亚细胞组份蛋白,也可以使用试剂盒进行抽提。
收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大。
2、电泳(Electrophoresis)
(1)、SDS-PAGE凝胶配制
SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制,也可以使用博研生物生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。
(2)、样品处理
在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积,在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制,也可以使用我公司生产的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 。100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
(3)、上样与电泳
冷却到室温后,把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。为了便于观察电泳效果和转膜效果,以及判断蛋白分子量大小,最好使用预染蛋白质分子量标准。
电泳时通常推荐在上层胶时使用低电压恒压电泳,而在溴酚蓝进入下层胶时使用高电压恒压电泳。对于Bio-Rad的标准电泳装置或类似电泳装置,低电压可以设置在80-100V,高电压可以设置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的电泳仪就可以满足要求。为了电泳方便起见,也可以采用整个SDS-PAGE过程恒压的方式,通常把电压设置在100V,然后设定定时时间为90-120分钟。设置定时可以避免经常发生的电泳过头。
通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳,或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况,预计目的蛋白已经被适当分离后即可停止电泳。
3、转膜(Transfer)
我们推荐在Western实验中选用PVDF膜。硝酸纤维素膜(NC膜)或PVDF膜(二氟化树脂膜膜孔径:0.45um)也可以使用,但硝酸纤维素膜比较脆,在操作过程中特别是用镊子夹取等过程中容易裂开。膜的使用请参考生产商的推荐使用步骤。
通常如果使用Bio-Rad的标准湿式转膜装置,可以设定转膜电压120V,转膜时间为30-60分钟。具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定,目的蛋白的分子量越大,需要的转膜时间越长,目的蛋白的分子量越小,需要的转膜时间越短。
在转膜过程中,特别是高电流快速转膜时,通常会有非常严重的发热现象,最好把转膜槽放置在冰浴中进行转膜。转膜的效果可以观察所使用的预染蛋白质分子量标准,通常分子量最大的1-2条带较难全部转到膜上。转膜的效果也可以用丽春红染色液对膜进行染色,以观察实际的转膜效果。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色,以观察蛋白的残留情况。
4、封闭(Blocking)
转膜完毕后,立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中,漂洗1-2分钟,以洗去膜上的转膜液。从转膜完毕后所有的步骤,一定要注意膜的保湿,避免膜的干燥,否则极易产生较高的背景。
用微型台式真空泵吸尽洗涤液,加入Western封闭液,在摇床上缓慢摇动,室温封闭60分钟。对于一些背景较高的抗体,可以在4℃ 封闭过夜。
5、一抗孵育(Primary antibody incubation)
参考一抗的说明书,按照适当比例用Western一抗稀释液稀释一抗。
用微型台式真空泵吸尽封闭液,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。回收一抗。加入Western洗涤液,在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
6、二抗孵育(Secondary antibody inucubation)
参考二抗的说明书,按照适当比例用Western二抗稀释液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。
用微型台式真空泵吸尽洗涤液,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。回收二抗,加入Western洗涤液,在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
7、蛋白检测(Detection of proteins)
参考相关说明书,使用BeyoECL, Western 荧光检测试剂等ECL类试剂来检测蛋白。
洗片时可以使用X光片自动洗片机。如果没有自动洗片机,可以用显影定影试剂盒自行配制显影液和定影液进行手工洗片。
8、膜的重复利用(Membrane recovery)
如果蛋白样品非常宝贵,可以使用Western一抗二抗去除液处理蛋白膜,以重复利用蛋白膜。
产品名称:Anti-Natrexone抗体,纳曲酮抗体IgG
产品价格:询价(电询或联系客服QQ)
性 状:Lyophilized or Liquid
浓 度:1mg/1ml
亚 型:IgG
贮 存:贮存于-20℃.
抗体来源:本公司抗体有兔来源和鼠来源等
克隆类型:兔来源为多抗,鼠来源为单抗
产品类型:一抗
此抗体本公司有单抗和多抗,可用于免疫组化(IHC),免疫印迹(WB),酶联免疫(ELISA),IF、IP、流式细胞术等实验(可来电索取说明)
此产品本公司有标记的一抗出售,相关标记有:Alexa Fluor 350 标记、Alexa Fluor 488 标记、Alexa Fluor 555 标记、Alexa Fluor 647 标记、AP标记、APC标记、Biotin标记、Cy3标记、Cy5标记、Cy5.5标记、Cy7标记、FITC标记、Gold标记、HRP标记、PE标记、PE-Cy3标记、PE-CY5标记、PE-CY5.5标记、PE-CY7标记、RBITC标记
保存条件:Store at -20 &C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20&C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 &C.
免疫组化实验原理:
抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后 获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部 位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。
免疫组织化学技术按照标记物的种类:
免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
&&Anti-Natrexone抗体,纳曲酮抗体IgG相关产品:
Anti-hCG receptor抗体,促黄体生成素受体抗体
Anti-HER2 receptor(NT),HER2受体抗体
Anti-Hrasls3抗体,HRAS样抑制因子3抗体
Anti-Phospho-Histone H3(Ser10),磷酸化组蛋白H3抗体
Anti-Histone H2A.x抗体,组蛋白H2AX抗体
Anti-human serum抗体,人血清抗体
Anti-Heme Oxygenase 1抗体,血红素氧合酶 1/热休克蛋白32抗体
Anti-HAVCR1抗体,肾损伤分子1/甲型肝炎病毒细胞受体1抗体
Anti-Phospho-HDAC3(Ser424),磷酸化组蛋白去乙酰化酶3抗体
Anti-phospho-Histone H1.4(Thr18),磷酸化组蛋白H1.4抗体
Anti-Hes5抗体,发状分裂相关增强子5抗体
Anti-Phospho-Histone H3(Ser28),磷酸化组蛋白H3抗体
Anti-HDAC4抗体,组蛋白去乙酰化酶4抗体
Anti-HDAC5抗体,组蛋白去乙酰化酶5抗体
Anti-Phospho-HER2(Tyr1112),磷酸化HER2受体抗体
Anti-HDAC6抗体,组蛋白去乙酰化酶6抗体
Anti-phospho-HDAC6(Ser22),磷酸化组蛋白去乙酰化酶6抗体
Anti-HDAC7抗体,组蛋白去乙酰化酶7抗体
Anti-HDAC8抗体,组蛋白去乙酰化酶8抗体
Anti-phospho-HDAC8(Ser39),磷酸化组蛋白去乙酰化酶8抗体
Anti-HDAC11抗体,组蛋白去乙酰化酶11抗体
Anti-Phospho-HER2(Tyr877),磷酸化HER2受体抗体
Anti-HER3抗体,HER3受体抗体
Anti-Phospho-HER3(Tyr1197),磷酸化HER3受体抗体
背景介绍:Naltrexone is a drug prescribed to assist people in maintaining abstinence after they have detoxified or withdrawn from opioids (eg heroin) or alcohol. Naltrexone is classed as an opioid agonist. It works by blocking the opioid receptors in the brain so that opiates have no effect on the brain.
本产品网址:/b2b/boyansw/sell/itemid-.html}

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