ACS患者外周血单核细胞NLRP3及髓过氧化物酶的变化及大剂量他汀的作用--《大连医科大学》2014年硕士论文
ACS患者外周血单核细胞NLRP3及髓过氧化物酶的变化及大剂量他汀的作用
【摘要】：目的：本研究通过检测急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)不稳定型心绞痛（UA）患者外周血单核细胞（PBMCs）内NLRP3（Nod-like receptor protein3）和髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)水平，观察不稳定型心绞痛患者外周血单核细胞分子模式识别受体的（Pattern-molecular recognition receptors, PMRRs）及其相关炎症因子的变化，并探讨不同剂量瑞舒伐他汀对它们的影响和作用。
方法：本研究入选70例，UA组40例(UA，n=40)，最近一次胸痛发作12小时以内入院的患者入选，并按性别和年龄匹配入选正常健康对照组30例(C，n=30)。将UA组患者随机分入高剂量瑞舒伐他汀（20mg）（20mg/日，口服）治疗组和低剂量瑞舒伐他汀(5mg)（5mg/日，口服）治疗组，观察4周。在入院时即刻（胸痛发作平均6.19±3.56小时）、胸痛发作后24小时、1周及4周4个时间点，经肘静脉采取外周血，分离单核细胞。用流式细胞分析检测外周血单核细胞NLRP3、MPO水平，采用Rreal-time PCR检测外周血单核细胞NLRP3mRNA的表达水平，同时检测血浆中白细胞介素-1β（IL-1β）和超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平。比较各组间基线资料，观察外周血单核细胞NLRP3、MPO水平，血浆IL-1β、hs-CRP水平及外周血单核细胞NLRP3mRNA水平在四周内的动态变化情况，分析不同剂量他汀药物治疗对上述因子的影响和作用。对所得数据采用SPSS19.0统计软件分析。
结果：胸痛发作后6小时外周血单核细胞NLRP3、MPO水平在UA组较对照组显著升高（74.26±13.86vs36.37±13.37,P＜0.05；84.02±4.39vs70.59±11.95，P＜0.05），并随时间逐渐下降。与低剂量瑞舒伐他汀（5mg）治疗组相比，治疗4周后，高剂量瑞舒伐他汀（20mg）治疗组外周血单核细胞NLRP3水平下降明显(38.02±19.78vs74.29±14.91, P＜0.05)，外周血单核细胞MPO水平下降显著（74.93±3.84vs83.76±5.18, P＜0.05）；血浆IL-1β、hs-CRP水平亦明显下降(17.29±1.58vs27.90±3.54, P＜0.05；1.02±0.62vs3.97±1.96, P＜0.05)，随时间下降更为明显(P＜0.05)；外周血单核细胞NLRP3mRNA水平也显著下降（1.38±0.26vs3.62±0.34, P＜0.05）。相关性分析结果显示外周血单核细胞中NLRP3水平与血浆hs-CRP浓度呈正相关（r=0.377, P=0.000），与外周血单核细胞MPO水平呈正相关(r=0.462,p=0.000)。
结论：ACS患者外周血单核细胞NLRP3和MPO呈现高水平表达，提示NLRP3、MPO参与了ACS发病过程中的炎症反应；强化瑞舒伐他汀治疗降低了ACS患者外周血单核细胞NLRP3、MPO水平以及血浆hs-CRP、IL-1β浓度和外周血单核细胞NLRP3mRNA水平，减轻了ACS患者的炎症反应。
【关键词】：
【学位授予单位】：大连医科大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：R541.4【目录】：
摘要7-9Abstract9-11前言11-13研究对象和方法13-18 1.研究对象13-14
1.1 患者来源及分组13
1.2 入选标准13
1.3 排除标准13-14 2.研究方法14-18
2.1 基本资料采集14
2.2 常规实验室检查14
2.3 流式细胞检测14
2.4 主要试剂和仪器14-15
2.5 标本采集15-17
2.6 流式细胞检测 NLRP3、MPO 水平17
2.7 RNA 的提取和 Real-time PCR 分析17-18统计学方法18-19结果19-28讨论28-30结论30-31参考文献31-33综述33-40 参考文献38-40致谢40-41
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血管生成素样蛋白4抗体抗体的相关标记：HRP,Biotin,Gold,RBITC,AP,FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7,PE,PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7,APC,Alexa&Fluor&350,Alexa&Fluor&488,Alexa&Fluor&555,Alexa&Fluor&647抗体种属有兔抗单克隆抗体，鼠抗单克隆抗体。抗体的浓度为1mg/ml。抗体可以与人，小鼠，大鼠，鸡&，狗，猪，羊，牛，兔等交叉反应。抗体可以用于做石蜡切片免疫组化，冰冻切片免疫组化，Elisa，WB，免疫荧光等实验。（公司备有抗体及以下抗体做免疫组化与WB所需的二抗）1、Western Blotting (starting dilution 1:200, dilution range1:100-1:1000)2、Immunoprecipitation [1-2 &g per 100-500 &g of total protein(1 ml ofcell lysate)]3、Immunofluorescence (starting dilution 1:50, dilution&range 1:50-1:500)4、ELISA (starting dilution 1:30, dilution&range 1:30-1:3000)5、Immunohistochemistry(including paraffin-embedded&sections) (starting dilution 1:50& & &dilution range 1:50-1:500)ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体产品试验中的显色反应：免疫组化实验是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。显色反应（注：二抗一般有两种常用标记酶，HRP和AP，其相对应的显色底物试剂盒为DAB和BCIP/NBT，裂解液一般用发光法。）HRP标记二抗显色，&用DAB&KIT（KPL&LOT&NO&YM107&CAT：54-10-00）显色，按顺序依次加Tris&Buffer&3滴，DAB&Substrate&3滴,Peroxide&solution&2滴于5ml蒸馏水中，避光，混匀，将膜加入显色液中避光显色15&min左右终止反应，记录实验结果，将NC膜晾干扫描保存。AKP标记二抗显色，用AKP缓冲液洗膜5min，弃去AP缓冲液，加入显色液（66&lNBT溶液同10mlAKP缓冲液充分混合均匀后加入33&l&BCIP溶液1h内使用），室温下显色（37℃可加速反应），显色反应通常在30min内可完成。用20mM&EDTA/TBS洗膜终止反应,记录实验结果，将NC膜晾干扫描保存。反应溶液可预先配置，可在4℃储存一年以上。ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体产品WB实验中的对照系统：Western&bloting首先是要将电泳后分离的蛋白从凝胶中转移到NC膜上，通常有两种方法：毛细管印迹法和电泳印迹法。&Western&bloting是用来对蛋白质进行检测的一种常用方法，通过抗原抗体的免疫反应可以定量测出抗体的相对分子量，以及抗体的相对丰度或与已知抗原的关系等等。目前它应用在多个领域,在临床上检测传染病和自身免疫病、过敏症等，在抗体生产领域它与ELISA、ICC、IHC、IFA等免疫技术相接合已成为单克隆抗体生产的主要筛选手段。毛细管印迹法是将凝胶放在缓冲液浸湿的滤纸上，在凝胶上放一片NC膜，再在上面放一层滤纸等吸水物质并用重物压好，缓冲液就会通过毛细作用流过凝胶。缓冲液通过凝胶时会将蛋白质带到NC膜上，NC膜可以与蛋白质通过疏水作用产生不可逆的结合。电泳印迹法是用有孔的塑料和有机玻璃板将凝胶和NC膜夹成&三明治&形状，而后浸入两个平行电极中间的缓冲液中进行电泳，选择适当的电泳方向就可以使蛋白质在电场力的作用下离开凝胶结合到NC膜上。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同，只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。WB对照系统阳性对照：最好有标准品，或阳性血清、阳性上清。阴性对照：测血时用相应小鼠未免疫血清，测培养上清，用无克隆培养上清。空白对照：不加一抗，用1%BSA代替。无关对照（替代对照）：用无关项目一抗，或无关项目的抗体。ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体产品的相关产品：ATP酶测试盒（测细胞膜、线粒体、微粒体等的Na+K+、Ca2+Mg2+&ATP酶，样本前处理需高速离心）100管/96样，50管/48样比色法ATP酶测试盒（测普通组织匀浆的Na+K+&Ca+Mg2+-ATP酶，样本前处理不需高速离心）100管/96样，50管/48样比色法羟自由基测试盒50管/48样比色法乳酸（LD）测试盒（测全血）50管/48样比色法乳酸（LD）测试盒（测血清、组织等）50管/48样比色法乳酸脱氢酶（LDH）测试盒比色法100管/48样，50管/24样比色法乳酸脱氢酶（LDH）测试盒微板法48T，96T微板法苹果酸脱氢酶（MDH）测试盒（测血清）50管/48样紫外比色法苹果酸脱氢酶（MDH）测试盒（测组织）50管/48样紫外比色法琥珀酸脱氢酶（SDH）测试盒50管/48样比色法胆碱酯酶（CHE）测试盒50管/48样比色法乙酰胆碱酯酶(T-CHE)测试盒50管/24样比色法丁酰胆碱酯酶（B-CHE）测试盒50管/24样比色法总氨基酸（T-AA）测试盒80管/78样比色法葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）测试盒(只测红细胞)100管/30样比色法白蛋白测试盒（带标准，溴甲酚绿法）100管/96样比色法铜兰蛋白（CP）测试盒(测血清，除鸡血清)50管/48样比色法羟脯氨酸（Hyp）测试盒（消化法）测培养细胞、培养液50管/48样比色法羟脯氨酸（Hyp）测试盒（碱水解法）测动物血清、组织、尿液50管/48样比色法羟脯氨酸（Hyp）测试盒（酸水解法）测动物血清、组织（含骨组织）、尿液50管/48样比色法羟脯氨酸(不含前处理)50T/48样比色法&-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）测试盒50管/24样比色法肌酸激酶（CK）测试盒50管/24样比色法脂褐质（LF）测试盒50管/48样荧光比色法单胺氧化酶（MAO）测试盒50管/48样紫外比色法D-木糖测试盒50管/48样比色法唾液酸（SA）测试盒(带SA标准)50管/48样比色法糖化血清蛋白(GSP)测试盒(果糖胺法)(带标准)25管/24样，50管/48样比色法亚硝酸盐测试盒100管/96样比色法血清铁测试盒50管/48样比色法组织铁测试盒50管/48样比色法总铁结合力(TIBC)测试盒50管/48样比色法5-核苷酸酶测试盒（5-NT）100管/48样比色法游离脂肪酸(NEFA)测试盒50管/48样比色法肝/肌糖原测试盒50管/48样比色法髓过氧化物酶（MPO）测试盒100管/48样比色法总蛋白定量测试盒（带标准，双缩脲法）100管/96样比色法总蛋白定量测试盒（带标准，考马斯亮兰法）100管/96样，50管/48样比色法总蛋白定量测试盒（带标准：BCA法）微板法96T，48T微板法总蛋白定量测试盒（带标准：BCA法）比色法50管/48样，100管/96样比色法蛋白标准品(配双缩脲、考马斯亮蓝、白蛋白试剂盒)ml&谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒50管/48样比色法腺苷脱氨酶(ADA)测试盒100管/48样比色法前列腺酸性磷酸酶（PACP）测试盒50管/25样比色法溶菌酶(LZM)测试盒（带标准）30管/28样试管比浊法微球菌粉30mg--溶菌酶标准品2mg--肝素溶液10ml--肝素抗凝管10ml，5ml--人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒&96T48THuman&granulocyte&chemotactic&protein-2,GCP-2&Elisa试剂盒人&干扰素(IFN-&)ELISA试剂盒&96T48THuman&Interferon&&,IFN-&&Elisa试剂盒人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒&96T48THuman&interferon&Regulatory&Factor,IRF&Elisa试剂盒人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒96T48THuman&CC-chemokine&receptor&1,CCR1&Elisa试剂盒人整合素&Ⅴ&3(Integrin&&Ⅴ&3)ELISA试剂盒96T48THuman&Integrin&&Ⅴ&3&Elisa试剂盒人血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒&96T48THuman&Angiopoietin&4,ANG-4&Elisa试剂盒&人叉头框蛋白03(FoxO3)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O3,FOXO3&Elisa试剂盒人叉头框蛋白02(FoxO2)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O2,FOXO2&Elisa试剂盒人叉头框蛋白01(FoxO1)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O1,FOXO1&Elisa试剂盒人叉头框蛋白04(FoxO4)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O4,FOXO4&Elisa试剂盒人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)ELISA试剂盒&96T48THuman&A&Disintegrin&And&Metalloprotease&10,ADAM10&Elisa试剂盒人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒96T48THuman&matrix&metalloproteinase&11,MMP11&Elisa试剂盒&人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒96T48THuman&epidermal&growth&factor&receptor&2,HER2&Elisa试剂盒人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒96T48THuman&Interleukin&1&receptor&antagonist,&IL-1ra&Elisa试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)ELISA试剂盒&96T48THuman&angiotension&Ⅱ&receptor&1&Antibody,ATⅡR1&Ab&Elisa试剂盒&人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA试剂盒96T48THuman&angiotension&I&receptor&Antibody,ANG-ⅠR&antibody&Elisa试剂盒人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin&2(Eotaxin&2/CCL24)ELISA试剂盒96T48THuman&Eotaxin&2/CCL24&Elisa试剂盒人淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA试剂盒96T48THuman&lymphocyte&function&associated&antigen&1,LFA-1&Elisa试剂盒人成纤维细胞生长因子23(FGF-23)ELISA试剂盒96T48THuman&fibroblast&growth&factor-23,FGF-23&Elisa试剂盒人热休克因子1(HSF-1)ELISA试剂盒&96T48THuman&Heat&Shock&Factor&1,HSF1&Elisa试剂盒人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒&96T48THuman&Interleukin-2&receptor,IL-2R&Elisa试剂盒人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒96T48THuman&Soluble&Endoglin,ENG/sCD105&Elisa试剂盒人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒96T48THuman&cutaneous&T&cell-attracting&chemokine,CTACK&Elisa试剂盒人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒96T48THuman&Breast&and&kidney&expressed&chemokine,BRAK&Elisa试剂盒人胸苷酸合成酶(TS)ELISA试剂盒96T48THuman&thymidylate&synthetase,TS&Elisa试剂盒人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA试剂盒96T48THuman&thymidinephosphorylase,TP&Elisa试剂盒人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA试剂盒96T48THuman&soluble&protein&185,sp185/HER-2&Elisa试剂盒人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒96T48THuman&8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG&Elisa试剂盒人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒96T48THuman&Intestinal&trefoil&factor,ITF&Elisa试剂盒人Dickkopf&1(DKK1)ELISA试剂盒96T48THuman&Dickkopf&1,DKK1&Elisa试剂盒人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒96T48THuman&soluble&endothelial&protein&C&receptor,sEPCR&Elisa试剂盒人乳腺癌易感蛋白1(BFAA-1)ELISA试剂盒96T48THuman&breast&cancer&susceptibility&protein&1,BFAA-1&Elisa试剂盒人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)ELISA试剂盒96T48THuman&Argyrophilic&nucleolar&organizer&region&proteins,Ag-NORs&Elisa试剂盒人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒&96T48THuman&common&acute&lymphocytic&leukaemia&antigen,CALLA&Elisa试剂盒人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒&96T48THuman&melanocyte&stimulating&hormone,MSH&Elisa试剂盒人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒96T48THuman&CA724&Elisa试剂盒人非小细胞肺癌抗原(LTA)ELISA试剂盒96T48THuman&nonsmall&cell&lung&cancer/Lung&tumor&Antigen,LTA&Elisa试剂盒人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒96T48THuman&tumor&marker&DR-70&for&lung&cancer,DR-70TM&Elisa试剂盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒96T48THuman&fetal&sulfoslycoprotein&antigen,FSA&Elisa试剂盒人类粘蛋白(ORM)&ELISA试剂盒96T48THuman&orosomucoid,&ORM&Elisa试剂盒人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒96T48THuman&targeted&ribonuclease,&TR&Elisa试剂盒人高香草酸(HVA)&ELISA试剂盒96T48THuman&Homovanillic&acid,HVA&Elisa试剂盒人垂草扁桃酸(VMA)&ELISA试剂盒96T48THuman&vanillylmandelic&acid,VMA&Elisa试剂盒人变肾上腺素(MN)&ELISA试剂盒96T48THuman&metanephrine,MN&Elisa试剂盒人本周蛋白(BJP)&ELISA试剂盒96T48THuman&Bence-Jones&protein,BJP&Elisa试剂盒人癌胚铁蛋白(CEF)&ELISA试剂盒96T48THuman&CaFAinoembryonic&Ferritin,CEF&Elisa试剂盒人&谷氨酰转移酶(GGT)&ELISA试剂盒96T48THuman&gamma&glutamyl&transpeptidase,GGT&Elisa试剂盒人C多肽(CP)&ELISA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【简单介绍】
本公司长期销售国内外科研产品，如生物试剂、生化试剂，单抗多抗，一抗二抗，各种标记抗体，蛋白抗原，各种多肽，动物细胞株、细胞系，标准品对照品，Elisa酶联免疫试剂盒，放免试剂盒，金标试剂盒，培养基，各种动物血清等产品，请客户在取材前尽量先与我公司销售技术人员沟通，前期的取材直接影响到您的实验结果。我们有成套的售前售后服务。
【详细说明】
&上海安研商贸有限公司的理念是：为您提供ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体性价比高的产品和全方位的服务。公司能够及时解决和满足客户的各方面的需求，与国内多家企业建立了良好的长期合作关系，在市场上树立了公司的良好信誉和形象。上海安研商贸有限公司，是专业经营生化试剂，抗体，细胞，培养基，试剂盒，染色液的公司，在广大用户的帮助和支持下，经过不懈的努力，已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一，代理许多国际先进水平的高科技产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。公司的服务和业务网络遍及全国，在同行获得一致好评。本公司备有上万种产品！所有生化试剂产品都具有类似以下产品价格绝对优势，质量保证!欢迎新老客户垂询！1.一抗及标记一抗抗体 &2.二抗及标记二抗抗体& 3.蛋白及抗原&&4.人Elisa试剂盒& 5.小鼠Elisa试剂盒&6.大鼠Elisa试剂盒& 7.豚鼠Elisa试剂盒 &8.猪Elisa试剂盒 &9.鸡Elisa试剂盒 &10.各种动物Elisa试剂盒& 11.植物Elisa试剂盒 &12.微生物Elisa试剂盒 &13.分离试剂& 14.酶与辅酶& 15.蛋白质 &16.抗生素& 17.放免试剂盒 &18.各种动物细胞株、细胞系..... &等等公司ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体产品经无数次市场验证，若出现质量问题可无条件换货或退货。抗体产品的基本信息，稀释与应用：抗体中英文名称：Anti-ARP2 &&&&&& 肌动蛋白相关蛋白2/3抗体&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& Anti-ARP3 &&&&&& 细胞骨架肌动蛋白样蛋白3抗体&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& Anti-ARP4 &&&& & 血管生成素样蛋白4抗体抗体的相关标记：HRP,Biotin,Gold,RBITC,AP,FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7,PE,PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7,APC,Alexa&Fluor&350,Alexa&Fluor&488,Alexa&Fluor&555,Alexa&Fluor&647抗体种属有兔抗单克隆抗体，鼠抗单克隆抗体。抗体的浓度为1mg/ml。抗体可以与人，小鼠，大鼠，鸡&，狗，猪，羊，牛，兔等交叉反应。抗体可以用于做石蜡切片免疫组化，冰冻切片免疫组化，Elisa，WB，免疫荧光等实验。（公司备有抗体及以下抗体做免疫组化与WB所需的二抗）1、Western Blotting (starting dilution 1:200, dilution range1:100-1:1000)2、Immunoprecipitation [1-2 &g per 100-500 &g of total protein(1 ml ofcell lysate)]3、Immunofluorescence (starting dilution 1:50, dilution&range 1:50-1:500)4、ELISA (starting dilution 1:30, dilution&range 1:30-1:3000)5、Immunohistochemistry(including paraffin-embedded&sections) (starting dilution 1:50& & &dilution range 1:50-1:500)ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体产品试验中的显色反应：免疫组化实验是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。显色反应（注：二抗一般有两种常用标记酶，HRP和AP，其相对应的显色底物试剂盒为DAB和BCIP/NBT，裂解液一般用发光法。）HRP标记二抗显色，&用DAB&KIT（KPL&LOT&NO&YM107&CAT：54-10-00）显色，按顺序依次加Tris&Buffer&3滴，DAB&Substrate&3滴,Peroxide&solution&2滴于5ml蒸馏水中，避光，混匀，将膜加入显色液中避光显色15&min左右终止反应，记录实验结果，将NC膜晾干扫描保存。AKP标记二抗显色，用AKP缓冲液洗膜5min，弃去AP缓冲液，加入显色液（66&lNBT溶液同10mlAKP缓冲液充分混合均匀后加入33&l&BCIP溶液1h内使用），室温下显色（37℃可加速反应），显色反应通常在30min内可完成。用20mM&EDTA/TBS洗膜终止反应,记录实验结果，将NC膜晾干扫描保存。反应溶液可预先配置，可在4℃储存一年以上。ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体产品WB实验中的对照系统：Western&bloting首先是要将电泳后分离的蛋白从凝胶中转移到NC膜上，通常有两种方法：毛细管印迹法和电泳印迹法。&Western&bloting是用来对蛋白质进行检测的一种常用方法，通过抗原抗体的免疫反应可以定量测出抗体的相对分子量，以及抗体的相对丰度或与已知抗原的关系等等。目前它应用在多个领域,在临床上检测传染病和自身免疫病、过敏症等，在抗体生产领域它与ELISA、ICC、IHC、IFA等免疫技术相接合已成为单克隆抗体生产的主要筛选手段。毛细管印迹法是将凝胶放在缓冲液浸湿的滤纸上，在凝胶上放一片NC膜，再在上面放一层滤纸等吸水物质并用重物压好，缓冲液就会通过毛细作用流过凝胶。缓冲液通过凝胶时会将蛋白质带到NC膜上，NC膜可以与蛋白质通过疏水作用产生不可逆的结合。电泳印迹法是用有孔的塑料和有机玻璃板将凝胶和NC膜夹成&三明治&形状，而后浸入两个平行电极中间的缓冲液中进行电泳，选择适当的电泳方向就可以使蛋白质在电场力的作用下离开凝胶结合到NC膜上。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同，只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。WB对照系统阳性对照：最好有标准品，或阳性血清、阳性上清。阴性对照：测血时用相应小鼠未免疫血清，测培养上清，用无克隆培养上清。空白对照：不加一抗，用1%BSA代替。无关对照（替代对照）：用无关项目一抗，或无关项目的抗体。ARP2抗体 ARP3抗体 ARP4抗体产品的相关产品：ATP酶测试盒（测细胞膜、线粒体、微粒体等的Na+K+、Ca2+Mg2+&ATP酶，样本前处理需高速离心）100管/96样，50管/48样比色法ATP酶测试盒（测普通组织匀浆的Na+K+&Ca+Mg2+-ATP酶，样本前处理不需高速离心）100管/96样，50管/48样比色法羟自由基测试盒50管/48样比色法乳酸（LD）测试盒（测全血）50管/48样比色法乳酸（LD）测试盒（测血清、组织等）50管/48样比色法乳酸脱氢酶（LDH）测试盒比色法100管/48样，50管/24样比色法乳酸脱氢酶（LDH）测试盒微板法48T，96T微板法苹果酸脱氢酶（MDH）测试盒（测血清）50管/48样紫外比色法苹果酸脱氢酶（MDH）测试盒（测组织）50管/48样紫外比色法琥珀酸脱氢酶（SDH）测试盒50管/48样比色法胆碱酯酶（CHE）测试盒50管/48样比色法乙酰胆碱酯酶(T-CHE)测试盒50管/24样比色法丁酰胆碱酯酶（B-CHE）测试盒50管/24样比色法总氨基酸（T-AA）测试盒80管/78样比色法葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）测试盒(只测红细胞)100管/30样比色法白蛋白测试盒（带标准，溴甲酚绿法）100管/96样比色法铜兰蛋白（CP）测试盒(测血清，除鸡血清)50管/48样比色法羟脯氨酸（Hyp）测试盒（消化法）测培养细胞、培养液50管/48样比色法羟脯氨酸（Hyp）测试盒（碱水解法）测动物血清、组织、尿液50管/48样比色法羟脯氨酸（Hyp）测试盒（酸水解法）测动物血清、组织（含骨组织）、尿液50管/48样比色法羟脯氨酸(不含前处理)50T/48样比色法&-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）测试盒50管/24样比色法肌酸激酶（CK）测试盒50管/24样比色法脂褐质（LF）测试盒50管/48样荧光比色法单胺氧化酶（MAO）测试盒50管/48样紫外比色法D-木糖测试盒50管/48样比色法唾液酸（SA）测试盒(带SA标准)50管/48样比色法糖化血清蛋白(GSP)测试盒(果糖胺法)(带标准)25管/24样，50管/48样比色法亚硝酸盐测试盒100管/96样比色法血清铁测试盒50管/48样比色法组织铁测试盒50管/48样比色法总铁结合力(TIBC)测试盒50管/48样比色法5-核苷酸酶测试盒（5-NT）100管/48样比色法游离脂肪酸(NEFA)测试盒50管/48样比色法肝/肌糖原测试盒50管/48样比色法髓过氧化物酶（MPO）测试盒100管/48样比色法总蛋白定量测试盒（带标准，双缩脲法）100管/96样比色法总蛋白定量测试盒（带标准，考马斯亮兰法）100管/96样，50管/48样比色法总蛋白定量测试盒（带标准：BCA法）微板法96T，48T微板法总蛋白定量测试盒（带标准：BCA法）比色法50管/48样，100管/96样比色法蛋白标准品(配双缩脲、考马斯亮蓝、白蛋白试剂盒)ml&谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒50管/48样比色法腺苷脱氨酶(ADA)测试盒100管/48样比色法前列腺酸性磷酸酶（PACP）测试盒50管/25样比色法溶菌酶(LZM)测试盒（带标准）30管/28样试管比浊法微球菌粉30mg--溶菌酶标准品2mg--肝素溶液10ml--肝素抗凝管10ml，5ml--人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒&96T48THuman&granulocyte&chemotactic&protein-2,GCP-2&Elisa试剂盒人&干扰素(IFN-&)ELISA试剂盒&96T48THuman&Interferon&&,IFN-&&Elisa试剂盒人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒&96T48THuman&interferon&Regulatory&Factor,IRF&Elisa试剂盒人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒96T48THuman&CC-chemokine&receptor&1,CCR1&Elisa试剂盒人整合素&Ⅴ&3(Integrin&&Ⅴ&3)ELISA试剂盒96T48THuman&Integrin&&Ⅴ&3&Elisa试剂盒人血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒&96T48THuman&Angiopoietin&4,ANG-4&Elisa试剂盒&人叉头框蛋白03(FoxO3)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O3,FOXO3&Elisa试剂盒人叉头框蛋白02(FoxO2)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O2,FOXO2&Elisa试剂盒人叉头框蛋白01(FoxO1)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O1,FOXO1&Elisa试剂盒人叉头框蛋白04(FoxO4)ELISA试剂盒96T48THuman&forkhead&box&O4,FOXO4&Elisa试剂盒人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)ELISA试剂盒&96T48THuman&A&Disintegrin&And&Metalloprotease&10,ADAM10&Elisa试剂盒人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒96T48THuman&matrix&metalloproteinase&11,MMP11&Elisa试剂盒&人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒96T48THuman&epidermal&growth&factor&receptor&2,HER2&Elisa试剂盒人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒96T48THuman&Interleukin&1&receptor&antagonist,&IL-1ra&Elisa试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)ELISA试剂盒&96T48THuman&angiotension&Ⅱ&receptor&1&Antibody,ATⅡR1&Ab&Elisa试剂盒&人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA试剂盒96T48THuman&angiotension&I&receptor&Antibody,ANG-ⅠR&antibody&Elisa试剂盒人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin&2(Eotaxin&2/CCL24)ELISA试剂盒96T48THuman&Eotaxin&2/CCL24&Elisa试剂盒人淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA试剂盒96T48THuman&lymphocyte&function&associated&antigen&1,LFA-1&Elisa试剂盒人成纤维细胞生长因子23(FGF-23)ELISA试剂盒96T48THuman&fibroblast&growth&factor-23,FGF-23&Elisa试剂盒人热休克因子1(HSF-1)ELISA试剂盒&96T48THuman&Heat&Shock&Factor&1,HSF1&Elisa试剂盒人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒&96T48THuman&Interleukin-2&receptor,IL-2R&Elisa试剂盒人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒96T48THuman&Soluble&Endoglin,ENG/sCD105&Elisa试剂盒人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒96T48THuman&cutaneous&T&cell-attracting&chemokine,CTACK&Elisa试剂盒人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒96T48THuman&Breast&and&kidney&expressed&chemokine,BRAK&Elisa试剂盒人胸苷酸合成酶(TS)ELISA试剂盒96T48THuman&thymidylate&synthetase,TS&Elisa试剂盒人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA试剂盒96T48THuman&thymidinephosphorylase,TP&Elisa试剂盒人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA试剂盒96T48THuman&soluble&protein&185,sp185/HER-2&Elisa试剂盒人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒96T48THuman&8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG&Elisa试剂盒人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒96T48THuman&Intestinal&trefoil&factor,ITF&Elisa试剂盒人Dickkopf&1(DKK1)ELISA试剂盒96T48THuman&Dickkopf&1,DKK1&Elisa试剂盒人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒96T48THuman&soluble&endothelial&protein&C&receptor,sEPCR&Elisa试剂盒人乳腺癌易感蛋白1(BFAA-1)ELISA试剂盒96T48THuman&breast&cancer&susceptibility&protein&1,BFAA-1&Elisa试剂盒人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)ELISA试剂盒96T48THuman&Argyrophilic&nucleolar&organizer&region&proteins,Ag-NORs&Elisa试剂盒人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒&96T48THuman&common&acute&lymphocytic&leukaemia&antigen,CALLA&Elisa试剂盒人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒&96T48THuman&melanocyte&stimulating&hormone,MSH&Elisa试剂盒人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒96T48THuman&CA724&Elisa试剂盒人非小细胞肺癌抗原(LTA)ELISA试剂盒96T48THuman&nonsmall&cell&lung&cancer/Lung&tumor&Antigen,LTA&Elisa试剂盒人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒96T48THuman&tumor&marker&DR-70&for&lung&cancer,DR-70TM&Elisa试剂盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒96T48THuman&fetal&sulfoslycoprotein&antigen,FSA&Elisa试剂盒人类粘蛋白(ORM)&ELISA试剂盒96T48THuman&orosomucoid,&ORM&Elisa试剂盒人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒96T48THuman&targeted&ribonuclease,&TR&Elisa试剂盒人高香草酸(HVA)&ELISA试剂盒96T48THuman&Homovanillic&acid,HVA&Elisa试剂盒人垂草扁桃酸(VMA)&ELISA试剂盒96T48THuman&vanillylmandelic&acid,VMA&Elisa试剂盒人变肾上腺素(MN)&ELISA试剂盒96T48THuman&metanephrine,MN&Elisa试剂盒人本周蛋白(BJP)&ELISA试剂盒96T48THuman&Bence-Jones&protein,BJP&Elisa试剂盒人癌胚铁蛋白(CEF)&ELISA试剂盒96T48THuman&CaFAinoembryonic&Ferritin,CEF&Elisa试剂盒人&谷氨酰转移酶(GGT)&ELISA试剂盒96T48THuman&gamma&glutamyl&transpeptidase,GGT&Elisa试剂盒人C多肽(CP)&ELISA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