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毒死蜱降解菌的筛选鉴定
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yuweixia…
2.1　美蓝染色法2.1.1　吕氏碱性美蓝染色液美蓝　　　　　　　　　　　0.3g95%乙醇　　　　　　　　　 30mL0.01%氢氧化钾溶液　　　　100mL将美蓝溶解于乙醇中，然后与氢氧化钾溶液混合。2.1.2　染色法将涂片在火焰上固定，待冷。滴加染液，染1～3min，水洗，待干，镜检。2.1.3　结果菌体呈蓝色。
2.2　革兰氏染色法2.2.1　结晶紫染色液结晶紫　　　　　　　　1g95%乙醇　　　　　　　 20mL1%草酸铵水溶液　　　　80mL将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。2.2.2　革兰氏碘液碘　　　　　　　　　　1g碘化钾　　　　　　　　2g蒸馏水　　　　　　　　300mL将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。2.2.3　沙黄复染液沙黄　　　　　　　　　 0.25g95%乙醇　　　　　　　　10mL蒸馏水　　　　　　　　 90mL将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。2.2.4　染色法2.2.4.1　将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。2.2.4.2　滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。2.2.4.3　滴加95%乙醇脱色，约30s；或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s。2.2.4.4　水洗，滴加复染液，复染1min。水洗，待干，镜检。2.2.5　结果革兰氏阳性菌呈紫色。革兰氏阴性菌呈红色。注：亦可用1：10稀释石炭酸复红染色液作复染液，复染时间仅需10s。
2.3　耐酸性染色法(萎－倪二氏法)2.3.1　石炭酸品红染色液碱性品红　　　　　　 0.3g95%乙醇　　　　　　　10mL5%酚水溶液　　　　　 90mL将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。2.3.2　3%盐酸－乙醇浓盐酸　　　　　　　 3mL95%乙醇　　　　　　　97mL2.3.3　复染液吕氏碱性美蓝染色液。2.3.4　染色法2.3.4.1　将涂片在火焰上加热固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸气出现，但切 不可使沸腾。染液如因蒸发减少时，应随时添加。染5min，倾去染液，水洗。 2.3.4.2　滴加盐酸－乙醇脱色，直至无红色脱落为止(所需时间视涂片厚薄而定，一般为1～3min)，水洗。2.3.4.3　滴加吕氏碱性美蓝染色液，复染30s～1min，水洗，待干，镜检。2.3.5　结果：耐酸性细菌呈红色，其他细菌、细胞等物质呈蓝色。
2.4　柯氏染色法2.4.1　染色液2.4.1.1　0.5%沙黄液。2.4.1.2　0.5%孔雀绿液。2.4.2　染色法2.4.2.1　将涂片在火焰上固定，滴加0.5%沙黄液，并加热至出现气泡，约2～3min，水洗。2.4.2.2　滴加0.5%孔雀绿液，复染40～50s。水洗，待干，镜检。2.4.3　结果布氏杆菌呈红色，其他细菌及细胞呈绿色。
2.5　奥尔特氏荚膜染色法2.5.1　染色液沙黄　　　　　　　　　　 3g蒸馏水　　　　　　　　　 100mL用乳钵研磨溶解。2.5.2　染色法将涂片在火焰上固定，滴加染色液，并加热至产生蒸气后，继续染3min。水洗，待干，镜检。2.5.3　结果炭疽芽胞杆菌菌体呈赤褐色，荚膜呈黄色。2.6　瑞氏染色法2.6.1　染色液瑞氏色素　　　　　0.1g甲醇　　　　　　　60mL用乳钵研磨溶解。2.6.2　染色法2.6.2.1　涂片待自然干燥后，滴加染色液，固定1min。2.6.2.2　加入等量蒸馏水(pH6.5)，染色3～5min。2.6.2.3　用蒸馏水冲洗，待干，镜检。
2.7　鞭毛染色法2.7.1　染色液的配制2.7.1.1　甲液：称丹宁酸5g、氯化高铁(FeCl3)1.5g，溶于100mL蒸馏水中，待溶解后加入1%的氢氧化钠溶液1mL和15%的甲醛溶液2mL。2.7.1.2　乙液：称2g硝酸银溶于100mL蒸馏水中。在90mL乙液中滴加浓氢氧化铵溶液，到出现沉淀后，再滴加使其变为澄清，然后用其余10mL乙液小心滴加至澄清液中，至出现轻微雾状为止(此为关键性操作，应特别小心)。滴加氢氧化铵和用剩余乙液回滴时，要边滴边充分摇荡，染液当天配，当天使用，2～3d基本无效。2.7.2　染色法在风干的载玻片上滴加甲液，4～6min后，用蒸馏水轻轻冲净。再加乙液，缓缓加热至冒汽，维持约半分钟(加热时注意勿使出现干燥面)。在菌体多的部位可呈深褐色到黑色，停止加热，用水冲净，干后镜检，菌体及鞭毛为深褐色到黑色。2.8　碱性复红染色法将0.5g碱性复红染料溶解于20mL95%乙醇中，然后用蒸馏水稀释至100mL。如有不溶物时，可用滤纸过滤，或静置后取上清液备用。注：本染色液系用于苏云金芽胞内蛋白质毒素结晶的染色，藉以与蜡样芽胞杆菌相区别
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摘要：自考资料教师能力学历年试题及答案打包下载自考资料教师能力学模拟试题打包下载畜牧微生物学复习参考资料绪论微生物的定义微生物是指个体微小，通常须借助显微镜才能看见的生物类群的总称。
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微生物学复习参考资料 绪论
一、微生物的定义
微生物：是指个体微小，通常须借助显微镜才能看见的生物类群的总称。
二、微生物的类型
1．三大种类
分原核细胞型、真核细胞型、非细胞型微生物三大种类
2.各自的种类：
原核细胞型：个体为单细胞，包括细菌、放线菌、螺旋体、霉形体、立克次体和衣原体。
真核细胞型：个体为单细胞或多细胞，真菌、藻类和原生动物属于此类型。
非细胞型：个体不呈细胞结构，仅含一种核酸，dna或rna，不能独立生存，必须在宿主细胞内才能增殖。病毒属于这一类型。
原核细胞微生物
一、 细菌的定义
细菌：是一大类个体微小、形态简单、结构略有分化、以二分裂法繁殖的单细胞微生物。
细菌的个体要在显微镜下才能看见。
二、细菌形态
细菌的基本形态有球菌、杆菌和螺旋状菌3大类。螺旋状菌又分弧菌和螺菌2种形状。 检查培养细菌典型形态的最好时期是对数期 。
三、细菌基本构造
细菌的基本构造是：细胞壁、细胞膜、间体、细胞浆、质粒、核体、核蛋白体和内含物等。
四、革兰氏染色的作用
用革兰氏染色可将所有细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。染色后革兰氏阴性菌为红色，革兰氏阳性菌呈紫色。
五、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁差异
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，约15～80nm，其化学成分主要是肽聚糖。革兰氏阴性菌细胞壁较薄。
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