当前所在位置：&&一种假俭草总DNA提取方法
一种假俭草总DNA提取方法
项目编号：
技术简要说明
本发明公开了一种假俭草总DNA的提取方法，涉及分子生物学领域中植物提取总DNA的技术。其主要步骤是:向研磨成细粉状的假俭草叶片中加入细胞核提取缓冲液，经硅珠进行DNA吸附、洗脱及DNA纯化，析出。本发明使用硅珠，能有效吸附出DNA，去除多糖、多酚、色素和蛋白质等次生代谢物质，提取得到高质量的假俭草总DNA。本发明能从低温保存的假俭草组织和新鲜组织中提取高质量的假俭草总DNA。本发明适用于假俭草高质量总DNA的提取。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。
该专利全部权利属于广西壮族自治区林业科学研究院，未经广西壮族自治区林业科学研究院许可，擅自商用是侵权行为。
买专利，获国家政策扶持，提升产品附加值！想买这个专利请加我们的QQ：
咨询电话：022-
专利权信息
专利类型：发明
专利申请日：
公开(公告)日：
申请(专利权)人：广西壮族自治区林业科学研究院
申请人：广西壮族自治区林业科学研究院
公开(公告)号：CNA
分类号：C12N15/10(2006.01)I
发明(设计)人：王鹏良;杨利平;覃子海;吴幼媚;陈晓明;陈博雯;刘海龙;蔡玲;韦颖文;黄金使;黄宏喜
国别省市：
总流量：69
录入日期： 21:51
温馨提示：该专利受国家知识产权法保护。如您希望使用该专利，请联系专利权人，获得专利权人的授权许可。
一种假俭草总DNA提取方法，其特征在于：具体操作步骤如下：（1）称取0.2g假俭草，置于液氮研磨机中研磨，磨细后的假俭草转移至2mL的离心管中；（2）在2ml离心管中加入0.7mL的CTAB提取缓冲液和14μL?β?巯基乙醇，盖上离心管盖，混合均匀，在65℃水中温浴30min，期间颠倒混匀5?6次；（3）将温浴后的样品取出，冷却至室温，向2ml离心管中加入0.7mL含有氯仿与异戊醇比例为24:1的混合液，盖上离心管盖，上下颠倒充分混匀，置于离心机，在转速11000rpm离心15min，吸取上层清液，转移至新的1.5mL离心管中；（4）在1.5mL离心管中加入150μL?硅珠悬浮液，用涡旋震荡器混匀，室温静止10min后，在涡旋震荡器上涡旋震荡5s，再置于离心机在转速8000rpm离心15s，倒出上层清液后，得到下层的硅珠?核酸复合物；（5）将步骤（4）得到硅珠?核酸复合物置于涡旋震荡器中进行充分涡旋，使其完全分散，然后加入0.7mL漂洗液，充分混匀，置于离心机在转速8000rpm离心15s，倒出上层清液后，得到下层的硅珠?核酸复合物；（6）重复步骤（5）一次；（7）将步骤（6）得到的硅珠?核酸复合物置于涡旋震荡器中进行充分涡旋分散，加入1mL?70%酒精将硅珠?核酸复合物漂洗两次，再用无水乙醇漂洗一次后，将硅珠?核酸复合物自然风干；（8）向装有步骤（7）得到的硅珠?核酸复合物的离心管中加入100μL?TE缓冲液，并在涡旋震荡器中进行涡旋震荡，使之充分分散，在56℃水中温浴10min后，置于离心机在转速11000rpm离心5min，吸取上层清液，转移至新的1.5mL离心管中,得到分离物硅珠和上层清液；（9）将步骤（8）中得到的硅珠置于涡旋震荡器中进行涡旋震荡，使硅珠和残留的核酸充分分散，再向其加入100μL?TE缓冲液，置于涡旋震荡器中进行充分涡旋震荡后，在56℃温浴10min，置于离心机在转速12000rpm离心5min，吸取上层清液，装入步骤（8）中上层清液的1.5ml离心管；将该离心管置于离心机在转速12000rpm离心10min，吸取上层清液，并加入400μL?TE缓冲液，充分混匀，得到混合液；（10）向装有步骤（9）的混合液的离心管中加入600μL含有氯仿与异戊醇比例为24:1的混合液，混匀；置于离心机在转速12000rpm离心10min；吸取上层清液，转移至新的1.5mL离心管中；（11）重复步骤（10）一次；（12）向装有步骤（11）得到的上层清液的离心管中加入3M,?pH为5.2的60μL?NaAC，再加入600μL在?20℃预冷的异丙醇，置于离心机在转速10000rpm离心15min；倒掉上层清液，得到下层的DNA；（13）在步骤（12）中得到的DNA，加入700μL体积浓度70%的酒精洗DNA，置于离心机在转速10000rpm离心5min，倒掉上层清液，得到下层的DNA；（14）重复步骤（13）两次；（15）向步骤（14）中得到的DNA加入700μL?无水乙醇，进行清洗，置于离心机在转速10000rpm离心5min，倒掉上层清液，并用黄枪头吸干酒精，得到纯化DNA；（16）将步骤（15）得到的纯化DNA置于室温自然风干，然后向其加入200μL?TE缓冲液溶解，保存在?20℃冰箱中。
暂无相关信息。
暂无相关信息。
暂无相关信息。
申请（专利）号
授权公告号
法律状态公告日
法律状态类型&
　费用金额
　费用种类
缴费人信息
　发明专利申请费
　广西壮族自治区林业科学研究院
　处理结束
　发明专利文印费
　广西壮族自治区林业科学研究院
　处理结束
　发明专利申请审查费
　广西壮族自治区林业科学研究院
　处理结束
上一篇：下一篇：
您如果有意向投资或咨询，请给技术持有人留言或评论该专利
您的称谓：输入您的称谓
您的电话：输入您的联系电话，您的电话是保密的，只有项目方才可以看到您的电话，不泄露。
评估价格：万您认为这个专利价值多少？
网站名称：提示：
您对此资讯有什么独到的见解？写出来，让大家看到您的观点。
还没有人发表对该专利的看法，您来做第一个吧。
共0条评论，每页显示10条
最新出售专利
说明书截图
暂无缩略图。
资讯24小时top10本站已经通过实名认证，所有内容由刘东光大夫本人发表
我想检查一下是否内分泌失调，请问刘主任，什么时间检查最好。
状态：就诊前
咨询标题：我想检查一下是否内分泌失调，请问刘主任，什么时间检查最好。
月经不调，面色发黄，浑身没劲
病情描述（发病时间、主要症状、就诊医院等）：
患者女，45岁，面色发黄，浑身没劲。近一年，又月经不定期。左下腹和左后跨部位酸痛。
曾经治疗情况和效果：
曾看过中医，效果不明显。
想得到怎样的帮助：
我想去第一医院检查一下，不知道看那个科，做什么样的检查。
m***发表于
请您详细描述月经情况，如多长时间来一次，持续几天，量多少，颜色如何，等。如果查过血常规，血色素是多少？
（大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生
指导下进行！）
刘东光大夫本人
状态：就诊前
月经是21天来一次，一般持续7天，头两天量多，颜色正常。近一年，月经不按月来，一般两三个月来一次，并且量很大，本人感到头空，很虚弱。颜色很正常。查过血常规，血大概在10克左右。
近几年，身上没劲，感到气短，身上很不舒服。
内分泌检测是次要的，一般是雌激素水平持续在高值上，因为无排卵而缺少孕激素对抗，使子宫内膜过度增生所致。建议做宫腔镜检查，了解内膜变化，明确诊断。
（大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生
指导下进行！）
刘东光大夫本人
状态：就诊前
谢谢您刘大夫。我做宫腔镜检查，什么时间去合适，比如月经完了几天？
月经干净后即可。
（大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生
指导下进行！）
刘东光大夫本人
投诉类型：
投诉说明：（200个汉字以内）
刘东光大夫的信息
妇科宫腔镜、腹腔镜手术和阴道镜诊疗技术，关注生殖健康和优生优育。
刘东光，医学硕士、硕士生导师（潍坊医学院）、主任医师、安徽医科大学兼职教授。现任济宁市第一人民医院妇...
刘东光大夫的电话咨询
90%当天通话，沟通充分!
近期通话：
妇产科可通话专家
北京朝阳医院
副主任医师
红房子医院
宫颈疾病诊疗中心
北京妇产医院
妇科微创中心
副主任医师
北京复兴医院
宫腔镜诊治中心
郑大一附院
北京复兴医院
宫腔镜诊治中心
中日友好医院
北京复兴医院
宫腔镜诊治中心
北京妇产医院
妇科微创中心
哈医大二院帮我检查一下_百度知道
提问者采纳
可以一题一题的拍吗我看不清
错的告诉我
长方形的对称轴不是只有两条吗？怎么可能有四条呢？
判断题的三小题应该是错的
其他的都是对的了
提问者评价
你的回答完美的解决了我的问题，谢谢！
和李易峰、杨幂一起看风景
来自:作业帮
其他类似问题
按默认排序
其他5条回答
全对！做得很好!继续加油！
全对，我也六年级
应该,都对的吧,
我都初三了,应该对的
你拍的不清楚，再拍一张吧
错的告诉我
对的是对的，但最后一题我不确定
等待您来回答
下载知道APP
随时随地咨询
出门在外也不愁}