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13C-尿素呼气试验诊断小儿幽门螺杆菌感染的研究
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张炜奇　由靖　胡冰　向祖琼　许春娣
　　摘要　目的　评估13C-尿素呼气试验检测小儿幽门螺杆菌(Hp)感染的可靠性。方法　37例具有上消化道症状的患儿行内镜检查，胃窦部粘膜活检，经快速尿素酶试验，组织学或Hp培养，以决定是否感染Hp，并作13C-尿素呼气试验。13C-尿素呼气试验的敏感性、特异性、阳性预计值、阴性预计值是与内镜检测Hp的结果比较计算得到的。结果　13C-尿素呼气试验的敏感性为100%，特异性为96%，阳性预测值为93%，阴性预测值为100%，准确率为97%。结论　13C-尿素呼气试验有高度敏感性和特异性，对测定小儿Hp感染是一种可靠的非侵入性的诊断方法。
　　关键词　尿素酶　螺杆菌，幽门
Reliability of 13C-urea breath test in detection of Helicobacter pylori infections in children
ZHANG Weiqi,YOU Jingkun,HU Bing,et al.Department of Pediatrics,Renji Hospital,Shanghai Second Medical University,Shanghai 200001
　　Abstract　Objective　To assess the reliability of 13C-urea breath test (13C-UBT) in detection of Helicobacter pylori (Hp) infections in children.Methods　Gastroscopy,rapid urease test (RUT),Warthin-Starry stain (W-S stain),bacterial cultureas well as 13C-UBT were performed in 37 children with alimentary symptoms.Sensitivity,specificity,positive predictive value (PPV),negative predictive value (NPV) of 13C-UBT were calculated against gastroscopy.Results　The senstivity,spcificity,PPV and NPV were 100%,96%,93% and 100%,respectively.Conclusion　Non-invasive 13C-UBT is highly sensitive,specific,and reliable method for detection of Hp infections in children.
　　Key words　Urease　Helicobacter pylori　Helicobacter infections
　　本研究以内镜检查结果作为诊断幽门螺杆菌(Hp)感染的金标准，将13C-尿素呼气试验结果与其比较，以评价13C-尿素呼气试验用来诊断患儿Hp感染的可靠性。
　　资料和方法
　　1997年3月～1998年3月，37例具有上消化道症状的患儿，且近4周内未作任何抗感染治疗，其中男性21例，女性16例，年龄6～12岁，平均10.2岁。
　　一、内镜检查
　　取胃窦部粘膜组织活检，同时作快速尿素酶试验(试剂为上海市惠泰医疗科技公司产品)、组织学检查(Warthin-Starry染色)或Hp培养基，上述三项中二项阳性，确诊该病例Hp感染存在。
　　二、13C-尿素呼气试验
　　患儿于空腹下进行13C-尿素呼气试验。采集基线呼气样本后，喝下含13C-尿素的桔子水(不含碳酸)，嘱患儿弯腰或平卧翻身，使13C-尿素尽可能多地接触胃粘膜，半小时后收集呼气作测定样本。用红外能谱仪(德国Wagner公司生产)测定服13C-尿素前后呼气样本，结果判断采用欧洲标准［1］，即测定呼气样本的13C原子丰度值超过基线呼气样本百万分之五(&5/百万)，为Hp阳性。
　　1.内镜检查37例患儿，以内镜活检粘膜标本的尿素酶试验、组织学检查或培养的结果来判断患儿的Hp感染状态，凡3项检查中2项阳性者为Hp感染，其中13例判定Hp感染存在，阳性率为35%(13/37)。
　　2.13C-尿素呼气试验测定37例患儿，其中14例阳性，阳性率为38%。
　　内镜检查及13C-尿素呼气试验测定两者结果一致的为36例，其中皆为阳性的13例，皆为阴性的23例，13C-尿素呼气试验阳性而内镜检查阴性的1例。结果相比，13C-尿素呼气试验的诊断准确率为97%(36/37)，敏感性100%(13/13)，特异性96%(23/24)，阳性预测值93%(13/14)，阴性预测值100%(23/23)(表1)。
表1　13C-尿素呼气试验检测Hp结果
13C-尿素呼气试验 Hp
+ 13 　1 14
- 　0 23 23
合计 13 24 37
　　Hp感染是小儿慢性胃炎及胃、十二指肠溃疡的重要病因之一［2］。目前诊断Hp感染的方法很多，一般分为侵入性和非侵入性两类。侵入性诊断即在进行内镜检查时取胃粘膜活检作尿素酶试验，组织学检查及Hp培养法。此方法是诊断Hp感染的可靠方法。但因其有侵入性，不易被小儿所接受。非侵入性诊断法是13C-尿素呼气试验及血清Hp抗体检测等。13C-尿素呼气试验与内镜相比具有非侵入性、无痛苦、相对简单易被小儿所接受。临床上究竟如何选择诊断Hp感染的方法，值得探讨。13C-尿素呼气试验是一种非常准确的非侵入性检测Hp感染的方法［1］。本组有上消化道症状的患儿中，内镜检查Hp阳性率为35%，13C-尿素呼气试验检测Hp阳性率38%，同国内有关报道相近［3，4］。由于13C-尿素在胃中均匀分布，其与胃粘膜的接触面更为广泛，能反应整个胃腔粘膜情况，同粘膜活检检测Hp的方法相比，呼气试验较少产生样本误差，1例内镜检查阴性而13C-尿素呼气试验测定为阳性可能与此有关。
　　14碳(14C)是一种放射性同位素，其半衰期很长。13碳(13C)是一种稳定同位素，不具放射性，对人体无伤害，13 C-尿素呼气试验有较高的敏感性(100%)与特异性(96%)，因此我们认为它是一种可靠、准确、安全、简单、实用而易被小儿所接受的检测Hp感染的方法，适用于流行病学调查和临床治疗前后复查Hp感染状态。
　　13C-尿素呼气试验不足在于13C-尿素价格较高，13CO2的测定较为复杂，需配备气体质谱仪或红外能谱仪，目前在国内尚难以普及，但是13C-尿素呼气试验具有的诸多长处，今后必将会更多地应用于临床。
作者单位：张炜奇、由靖、胡冰：200001　上海第二医科大学附属仁济医院儿科,
　　　　　向祖琼：核医学科;
　　　　　许春娣：上海第二医科大学附属瑞金医院儿科
　1　Logan RPH,Dill S,Baue FE,et al.The Eeuropean 13C-Urea breath test for the detection of Helicobacter pylori.Eur J Gastroenterol Hepatol,-921.
　2Czinn SJ,Speck WT.Campylobacter pylori:a new pathogen.J Pediatr,-672.
　3　吴秀英，叶瑞云，欧弼悠,等.胃镜在幽门螺杆菌感染诊断和治疗观察中的应用.中华儿科杂志，-303.
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13C-尿素呼气试验的临床应用与体会
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内容提示：13C-尿素呼气试验的临床应用与体会,尿素呼气试验,13碳尿素呼气试验,13c 尿素呼气试验,呼气试验,c14呼气试验,c14尿素呼气试验,碳13c尿素呼气试验,碳13呼气试验,c13呼气试验,碳13呼气试验阳性
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13C尿素呼气试验、快速尿素酶试验和组织银染法(W-S)诊断幽门螺杆菌感染的比较?
&&&&&&本期共收录文章20篇
　　【摘要】 目的：对比观察3种不同方法检测幽门螺杆菌(Hp)的临床效果，为临床选择最佳方案提供依据。方法：对97例消化科就诊的具有上消化道症状的患者分别采用13C尿素呼气试验、快速尿素酶试验和组织银染法（W-S）检测Hp感染，比较其检测Hp感染的效果。结果：13C尿素呼气试验敏感性为98.8%，特异性为90.9%；快速尿素酶试验敏感性为91.8%，特异性为72.7%；组织银染法（W-S）敏感性为96.5%，特异性为81.8%，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：13C尿素呼气试验法检测Hp感染具有很高的灵敏性、特异性以及准确性，而且操作方法简便，成本低廉，值得临床推广应用。? 中国论文网 /6/view-1569316.htm　　【关键词】 13C尿素呼气试验;快速尿素酶试验;组织银染法（W-S）;幽门螺杆菌? 　　【中国分类号】 R573【文献标识码】 B【文章编号】 （7-01?? 　　 幽门螺杆菌(Hp)是一种革兰阴性有芽胞且呈螺旋状弯曲的杆菌，研究表明， 幽门螺杆菌（Hp）是胃炎、消化性溃疡、MALT淋巴瘤的主要致病因素，并且与胃癌的发生有密切关系［1］，世界卫生组织已把Hp列入一级生物致癌因子［2］。同时，Hp可通过密切接触传染，在我国60%人口感染该菌。因此，快速、准确检测Hp感染具有十分重要的临床意义。? 　　1.资料与方法? 　　 选择标准：①年龄为18~65岁，性别不限；②具有上腹痛等上消化道症状需做检查者；③近2周未服用抗生素、质子泵抑制剂、H2受体阻滞剂等Hp敏感药物。排除标准：孕妇，具有胃手术史，上消化道大出血，幽门梗阻，肿瘤患者。? 　　 入选资料：选取近10个月来我院消化科因上腹疼痛等上消化道症状需进行胃镜检查的患者，共97例，男50例，女47例，年龄19~63岁，平均年龄42.6岁。? 　　试验方法：所有受检患者在进行胃镜检查时均从胃窦大弯侧靠近幽门2cm处钳取2块粘膜组织，一块做快速尿素酶试验，另一块做银染。此外，所有患者进行胃镜检查后立即行13C尿素呼气试验。胃镜检查及取材均由同一位医师使用同一部仪器完成。具体方法及诊断标准如下：? 　　 （1）13C尿素呼气试验：嘱患者呼气，先采集一气袋气体样本，然后将75mg13C-尿素颗粒溶于80ml无碳酸净水中，让患者口服，静坐30min后再采集一气袋气体样本。应用质谱法测定服药前后呼气样本中12C/13C比值（δ值），若呼气后δ值减去呼气前δ值之差即DOB值，若DOB＞4，则为Hp阳性。? 　　 （2）快速尿素酶试验：胃镜钳取的 块活检标本即时放入准备好的试剂盒中，观察5min，试剂变为浅红色-玫瑰红色，定为Hp阳性，不变色则为阴性。? 　　 （3）组织银染法（W-S）：将胃镜是钳取的另一块粘膜组织于10%甲醛中固定，常规病理切片，脱蜡到水浸入1%硝酸银液中，43℃，30min；在切片上滴显影液1～2min，呈棕黄色；用56℃水快速冲洗；蒸馏水冲洗；脱水、透明、封片。经染色后镜检见到细菌呈黑色，组织背景呈棕黄色。诊断分级标准：(-)未见到细菌；(+)细菌数很少，稀疏散在分布；(++ )细菌数较多，密集分布；(+++ )细菌数很多，密集成堆。? 　　 统计学方法：采用x?2检验? 　　2 试验结果? 　　 诊断指标：组织银染法（W-S）阳性或其他2项均为阳性者认为存在Hp感染。? 　　 观察结果：97例患者中，Hp感染为86例，未感染数为11例。检验结果见表1。? 　　表1 3种方法敏感性、特异性比较? 　　? 　　可见，??13?C尿素呼气试验对于Hp检验的敏感性和特异性均较高。现选取??13?C尿素呼气试验为标准方法，对另外2种方法的符合率进行比较，结果见表2。? 　　表2 3种方法符合率比较? 　　? 　　2.讨论? 　　 幽门螺杆菌(Hp)与消化道的多种疾病密切相关［3］，其感染能够引起慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、胃癌等器质性胃部疾病。当经过治疗，消灭了胃病患者体内的幽门螺旋杆菌后，许多年的胃病就可以彻底治愈。Hp感染是我国感染率最高的一种慢性疾病，是慢性胃炎的主要病因，并引发一系列致病事件，导致萎缩性胃炎、化生、异型增生和最终胃癌的发生。因此，快速准确的检验Hp感染，对于及时预防与治疗上消化道疾病，避免疾病恶化具有重要意义。? 　　自1983年通过胃镜取活检标本分离培养成功以来，对幽门螺杆菌感染的诊断已发展出了许多方法，包括有细菌学、病理学、血清学、同位素示踪、分子生物学等。但总体讲来，从标本采集角度看，可以分为侵入性和非侵入性两大类。本文论述的三种检验方法均为临床较为广泛运用的方法，其敏感性、特异性、准确性均较高，然而三种方法又各具不同特点。? 　　快速尿素酶试验和组织银染法（W-S）都需要通过胃镜取材进行Hp检测，属于侵入性方法，实施过程中会对患者造成一定的身体不适，不容易为患者所接受，并且不方便治疗后随访观察。其中快速尿素酶检测，方法简便快速，其原理是基于Hp产生极强的尿素酶活性，该酶将尿素水解产生NH3和CO?2，NH3可显著引起pH增加从而使pH指示剂变色，但由于观察时间过短，或某些胃内因素的影响，如其他某些细菌同样能够产生尿素酶，则会导致假阳性结果；另一方面，活检标本中尿素酶的含量与细菌的数量有很大关系，如果细菌数量过少，则可能导致假阴性结果。因此快速尿素酶试验的结果敏感性和特异性都会在一定程度上降低。相对而言，组织银染法（W-S）敏感性和特异性均较高，但其操作方法较复杂。并且，若幽门螺杆菌呈灶性分布，或由于药物等因素使Hp在胃内不同环境下产生"迁移"现象［4］，活检诊断则容易导致漏诊（漏诊率10％）。尽管凭借医生丰富的操作经验和正确采样，可以在一定程度上降低其漏诊率。然而单用一项检测，假阴性结果仍然较多。因此，运用多种方法联合检测，可有效提高Hp的检出率。在三种方法对比过程中可见，13C-尿素呼气试验与组织银染法（W-S）在检出结果上具有更高的符合率，因此，临床上联合使用，可以更加有效地确诊Hp感染程度，从而对选取更加高效的治疗方法提供可靠地依据。? 　　13C-尿素呼气试验是非侵入性检查手段，利用Hp能产生尿素酶的特性，予受试者口服13C尿素，在胃中有Hp存在时，其产生的尿素酶能够迅速将尿素分解为氨和二氧化碳，二氧化碳经血液进入肺而排出体外，收集排出的二氧化碳后在仪器上进行测量计算，便可以根据相关参数来判断Hp感染状况。其操作过程简便、快速、安全，且不会造成患者痛苦，因此值得临床广泛的应用。同时13C-尿素呼气试验是对于整个胃的感染情况作出评价，不存在活检误差，具有较高的敏感性、特异性。?? 　　 　　 　　参考文献? 　　［1］ 白杨，黄文，林焕健，等.表达幽门螺杆菌热休克蛋白6O克隆的构建［J］．世界华人消化杂志，7-550．? 　　［2］ Suganuma M，Kurusu M，Okabe S，et a1．Helicobacter pylori membrane protein 1：a new carcinogenic factor of Helicobacter pylori［J］．Cancer Res，56-6359．? 　　［3］ 姚家莉，徐波．幽门螺杆菌研究进展［J］．临床消化杂志，-96． ? 　　［4］ Solcia E，Villani L，Fiocca R，et a1．Effects of eradication of Helicobacter pylori on gastritis in duodenal ulcer patients ［J］．Scand J Gastroenterol，(supp1)：28-34． 　　? 　　作者简介:陈洪: 日出生;男 大学本科学历 硕士学位 主任医师;主要研究方向：大肠癌、胃癌的早期诊断与内镜下治疗。?
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