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WB一抗稀释液
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WB一抗稀释液由我公司独家生产销售，买就送50-100元话费优惠进行中，仅限定前1000名客户，相关标记抗体：辣根过氧化物酶标记抗体，生物素标记抗体，胶体金标记抗体，红色罗丹明（RBITC）标记抗体，橙黄色PE标记，FITC绿色荧光。WB一抗稀释液货期：3-5天全国 ；规格：100ug；200ug抗体来源（宿主）：兔源、鼠源克 隆：兔多克隆抗体鼠源单克隆抗体类 型：一抗 性 状： 冻干粉保存条件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C.WB一抗稀释液细胞流式实验检测操作方法 ：1. 每个样品取2支流式检测管，分别注明同型对照和待测，两管分别加入106-7/100μl个待侧细胞（若细胞浓度低或加入的细胞悬液较多，可1200转/每分钟，10分钟低温离心，弃上清，保证100μl被检样品） 2. 同型对照管中加入荧光标记同型对照抗体，做阴性对照；待测管中加入荧光标记的一抗，做为实验管，各加3μl (按抗体使用说明书，一抗可做选择几个梯度1：20、50、100倍稀释)混匀即可。 ……5. 上机检测，先做同型对照，调整电压至阴性区范围，再测实验管即可。推荐优质产品：Anti-CD19/Biotin??生物素标记的CD19抗体Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/Cy5??Cy5标记的磷酸化CD19抗体Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/Cy3??荧光素（Cy3）标记的磷酸化CD19抗体Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/PE??PE标记的磷酸化CD19抗体Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/FITC??荧光素（FITC）标记的磷酸化CD19抗体Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/HRP??辣根过氧化物酶标记的磷酸化CD19抗体Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/Biotin ??生物素标记的磷酸化CD19抗体Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/RBITC??罗丹明（RBITC）标记的磷酸化CD19抗体Anti-CD20/Cy3??荧光素（Cy3）标记的CD20抗体Anti-CD20/RBITC??罗丹明（RBITC）标记的CD20抗体Anti-CD20/Cy5??Cy5标记的CD20抗体Anti-CD20/PE??PE标记的CD20抗体Anti-CD20/FITC??荧光素（FITC）标记的CD20抗体Anti-CD20/HRP??辣根过氧化物酶标记的CD20抗体Anti-CD20/Biotin ??生物素标记的CD20抗体Anti-CD21/EBV receptor/Cy3??荧光素（Cy3）标记的2型补体受体抗体Anti-CD21/EBV receptor/Cy5??Cy5标记的2型补体受体抗体Anti-CD21/EBV receptor/PE??PE标记的2型补体受体抗体Anti-CD21/EBV receptor/HRP??辣根过氧化物酶标记的2型补体受体抗体Anti-CD21/EBV receptor/FITC??荧光素（FITC）标记的2型补体受体抗体Anti-CD21/EBV receptor/Biotin ??生物素标记的2型补体受体抗体Anti-CD21/EBV receptor/RBITC??罗丹明（RBITC）标记的2型补体受体抗体Anti-CD22/BLCAM/Cy5??Cy5标记的B淋巴细胞粘附分子CD22抗体Anti-CD22/BLCAM/Cy3??荧光素（Cy3）标记的B淋巴细胞粘附分子CD22抗体Anti-CD22/BLCAM/PE??PE标记的B淋巴细胞粘附分子CD22抗体Anti-CD22/BLCAM/FITC??荧光素（FITC）标记的B淋巴细胞粘附分子CD22抗体Anti-CD22/BLCAM/HRP??辣根过氧化物酶标记的B淋巴细胞粘附分子CD22抗体Rs-6163R&DIRAS1抗体,RAS相关抑细胞生长蛋白1抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6164R&GRAP2抗体,生长因子受体结合蛋白2相关接头蛋白2抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6166R&DPOLA/DNA polymerase alpha抗体,DNA聚合酶α抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6167R&NET1抗体,神经上皮细胞转化基因1抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6168R&RAB8B抗体,ras癌基因家族RAB8B抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6169R&RALB抗体,Ras样蛋白B抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6170R&RALA+RALB抗体,Ras样蛋白A+B抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6171R&RASGAP抗体,RAS的GTP酶激活蛋白抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6172R&RIAM/APBB1 interacting protein 1抗体,β淀粉样蛋白前体结合蛋白B-1抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6173R&Rab11抗体,ras癌基因家族Rab11蛋白抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6174R&RAB2/RAB2A抗体,ras癌基因家族Rab2抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6175R&RAB5抗体,ras癌基因家族Rab5蛋白抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6176R&RAB8抗体,ras癌基因家族Rab8蛋白抗体(原癌基因c MEL)&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6177R&RAB9抗体,ras癌基因家族Rab9蛋白抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6178R&RAB20抗体,ras癌基因家族RAB20抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6179R&RAB3A?抗体,?ras癌基因家族Rab3a抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6180R&Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D抗体,ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6182R&RBP4??视黄醇结合蛋白4抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6183R&REG1A/REG1 alpha抗体,胰岛细胞再生因子ICRF抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6184R&Renin抗体,血管紧张素形成酶Ren1抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6185R&RSPO1抗体,分泌性蛋白RSPO1抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6186R&SERPIN A11抗体,丝氨酸蛋白酶抑制剂A11抗体&规格0.2ml和0.1ml，多数抗体有库存antibody促销Rs-6187R&SERPING1/C1 Inactivator抗体,酯酶抑制蛋白C1IN抗瑞齐生物技术最专业的抗体供应商为您提供售前、售中、售后服务，现货供应，广泛应用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA，质量保证，无效免费退换，本公司全面引进销售英国abcam公司、美国santa cruz公司、bioworld公司、cst公司及其他知名公司原装抗体以及进口分装抗体最小规格0.1ml和0.2ml的一抗、二抗、单克隆抗体和多克隆抗体，进口原装抗体到货周期为10-15个工作日，部分分装抗体均现货供应。欢迎广大新老客户来电或来函垂询！WB一抗稀释液。WB背景高的问题
想问下做实验的朋友们，每次新膜敷磷酸化的抗体都很脏，条带模糊，背景高，有时候洗过一次再敷就干净了，有时候就直接暴不出来条带了，很是郁闷啊。一抗二抗的浓度都调过，真是百思不得其解，我用TBST稀释和洗膜的。希望大家给点意见...
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标题: 用抗血清来做western blot的一抗有意义吗？
摘要: [用抗血清来做western blot的一抗有意义吗？] 在园里搜索到有战友提出同样的问题，但是没有人解答！http:
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html大家好，许多资料显示都是：把表达的目的蛋白纯化后免疫兔子，然后收集血清（多抗）再与表达的目的蛋白作western blot，用购买的二抗标记显色。我想：这有意义吗？用自己的蛋白免疫兔子，肯定能产生相应抗体，然后再用自己制备的血清（多抗） 关键词:[一抗 抗血清 免疫 血清 抗体 多抗 二抗]……
在园里搜索到有朋友提出同样的问题，但是没有人解答！大家好，许多资料显示都是：把表达的目的蛋白纯化后免疫兔子，然后收集血清（多抗）再与表达的目的蛋白作western blot，用购买的二抗标记显色。我想：这有意义吗？用自己的蛋白免疫兔子，肯定能产生相应抗体，然后再用自己制备的血清（多抗）与自己表达的蛋白作western blot，结果明摆着吗：肯定能杂交上。本人认为：任意一种蛋白刺激兔子后，都能产生相应抗体。那么western blot肯定有结果。这样做的目的和意义何在？请高人指点！
不是每个蛋白免疫后都能产生抗体，抗体的产生和抗原的免疫原性、兔子的状态、免疫方式等等有关。这样做的意义在于，证明免疫后的确产生了抗体，而且这种抗体可以用来做WB 。
做western的目的是什么,检测目的蛋白的表达而不是检测抗体的产生。所以使用原核蛋白免疫产生的抗体去检测原核蛋白的表达是不科学的，正如楼主所说即使你纯化出的蛋白不是目的蛋白你的western也可能有阳性结果。但如果换一个角度来分析，使用原核蛋白免疫产生的抗体去检测一些真核蛋白的表达与否，如应用到细胞的westernblot或者免疫组化等实验，所产生的结果就比较可信了。
楼上说的没错 ，WB 的最终目的是检测蛋白的表达 ，但是自己做的抗体没有经过验证，是不知道是否产生了能识别抗原的抗体的，而且不是每种抗体都能用来进行WB，所以，楼主这里的WB 是想验证抗体产生与否。用原核验证只是一个初级的验证，不能完全说明问题，最终是要在细胞系里检测到才能说问题，但是在细胞系里没有检测到并不能说一定没有表达，还有可能是表达量低和WB条件的原因。原核验证是具有一定的假阳性，可以将质粒转染真核，然后用WB验证，可以检测的到，说明免疫后是有抗体产生。
western实验一个用途在于验证，另一个用途是探索发现楼主的问题问的有水平哈
感谢各位高手的指点迷津！其实我是想用Western blot定量检测乳酸菌（原核微）的一种组成型蛋白，在菌体经过某种处理之后这种蛋白的表达量同未经处理的菌体的这种蛋白表达量的差异。但是买不到这种蛋白的标准品，不过我又查到有人（1999年的SCI）用自己纯化的这种蛋白免疫兔子制得一抗，然后来进行western blot！我也想这么做，不知道是否影响发文章！请高手继续指点！！！
发文章这个问题觉得还的看你发什么样的文章。国内或者国外，国内的杂志也有一个三六九等。个人觉得你这个试验可能做起来，大的框架是如你所说，蛋白质样品---免疫动物---制的多抗（血清）----用于检测你所说的两组不同的细胞中某个蛋白质的表达情况。这个思路肯定没有。如果有疑问看看文献/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6WDG-45F533M-1C&_user=2316052&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_acct=C&_version=1&_urlVersion=0&_userid=2316052&md5=8a203a8c69fc532b7be72dev bio， if约为5点多你所问的问题，
个人觉得你这个试验可能做起来，大的框架是如你所说，蛋白质样品---免疫动物---制的多抗（血清）----用于检测你所说的两组不同的细胞中某个蛋白质的表达情况。这个思路肯定没有。如果有疑问看看文献/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6WDG-45F533M-1C&_user=2316052&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_acct=C&_version=1&_urlVersion=0&_userid=2316052&md5=8a203a8c69fc532b7be72dev bio， if约为5点多其实，我就是想按照这个思路做：蛋白质样品---免疫动物---制的抗血清（作为一抗）----用于Western检测两组不同的细胞中该质的表达情况。关键是我需要检测的蛋白质是一种细胞，我想用我制备的膜蛋白粗提物（肯定不纯，除了目的蛋白还有别的膜蛋白）直接免疫兔子制得抗作为一抗。你说的文献中他是自己合成氨基酸序列，然后免疫兔子，也就是说他是用纯品免疫兔子制得的一抗，或者说标准品。而我要用自己粗提的蛋白质（肯定不纯）来免疫兔子制得的抗作为一抗，不知道是否影响发文章（SCI）。
你这样做能说明什么问题，如果排除免疫的因素，那你的实验结果肯定是阳性，而且膜蛋白粗提物（肯定不纯，除了目的蛋白还有别的膜蛋白）将会导致在westernblot中出现多个阳性条带，文章很难发的。所以你在制备一抗的时候，尽量使用人工合成的片段免疫，或者采用原核表达的方式免疫制备相关一抗。
你这样做能说明什么问题，如果排除免疫的因素，那你的实验结果肯定是阳性，而且膜蛋白粗提物（肯定不纯，除了目的蛋白还有别的膜蛋白）将会导致在westernblot中出现多个阳性条带，文章很难发的。所以你在制备一抗的时候，尽量使用人工合成的片段免疫，或者采用原核表达的方式免疫制备相关一抗。谢谢朋友提醒！人工合成的氨基酸片段免疫会是一个很好的选择！其实，我要做的是蛋白质定量，只是不知道用测酶活力的方法比较好，还是用Western blot的方法比较好！
一般使用原核表达的蛋白免疫，然后检测不同表达系统如真核表达，或免疫组化等改种相同蛋白的表达情况。抗原免疫动物产生和这个抗原起反应的特异性（WB能够很好地显示该抗原的分子量，说明是一种特异性抗体，而不是非特性抗体）说明这个抗原具有很好的免疫原性。
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wb,一抗，二抗在25℃孵育可以嘛，看了资料有的说是室温，有的说是37℃。
求助，求助！wb,一抗，二抗在25℃孵育可以嘛，看了资料有的说是室温，有的说是37℃。
请问，& &一抗选择4℃过夜，& & ----需要染色摇床吗？& & 实验室4℃ 好像不能放进& &染色摇床}