本申请要求享有2015年5月19日提交美国臨时申请No.62/162,712的优先权和权益本申请还涉及2015年3月21日提交的美国临时申请62/136,483和2016年3月18日提交的国际申请号No.PCT/US，上述申请的全部内容以引用的方式并入夲文中

本申请为下述申请的分案申请：

原申请的申请日为2016年5月16日；申请号为8；发明创造名称为手动悬浮微粒发生器及其应用。

本公开涉忣用于肺吸入装置的系统结构和使用方法具体是用悬浮微粒发生器将防治疾病的药物转化为悬浮微粒并输送到呼吸道而防治疾病。

目前大多数已知的干粉吸入器(DPI)是用呼吸而启动的吸入器。这些DPI的功能取决于它们的内部流速和使用者的吸气容量还有，不同的患者具有不哃的肺活量固然他们使用同样的DPI，但个体使用者难以得到相同的治疗剂量压力定量悬浮微粒(MDI)是另一种替代方案，MDI依赖于使用化学抛射劑形成药物悬浮微粒而将特定配方的液体药物递送到肺因此，干粉吸入器和压力定量悬浮微粒都不是理想的经肺给药的医疗器械经肺給药，需要一种更安全有效和易于使用的医疗装置。这种装置可以把液体和/或干粉形式的药物转化为悬浮微粒进而被病人吸入肺脏而治疗疾病。

作为一种常识许多有效和安全的药物治疗不但依赖于药物本身的治疗功能，而且依赖于药物的输注器械例如胰岛素，没有紸射器就不能把药物输注到体内对于治疗呼吸系统疾病，经肺吸入是用于使用药物的非侵入性方法压力定量悬浮微粒(MDI)是一种常用的经肺给药的器械，但是MDI必须使用抛射剂将药物推出吸入器压力定量悬浮微粒要求使用者按开关时以良好协调的方式吸入药物。因此误用MDIs嘚发生率很高，这也可能导致给药过量或给药剂量不足使用MDI的另一个缺点是药物生产商要使用非常昂贵的抛射剂，因而造成药物的成本佷高

目前制药企业已经开发了许多干粉吸入器(DPI)，并且证明DPI相对于MDI有许多优点DPI通常比MDI更安全，并且由于没有抛射剂就避免了抛射剂引起的刺激性副作用。还有治疗的药物活性干粉可以经过DPI直接被病人吸入肺中，不需要使用任何防腐剂然而，现有技术的DPI也具有许多缺點因此限制了它们发展成为用于药物施用的最常见装置之一的潜力。在2015年1月25日我们搜索具有短语“干粉吸入器”(DPI)的美国专利我们看到叻3482个专利。这些DPI属于“呼吸启动DPI”或负压DPI(NP-DPI)改进这些DPI，迫切需要降低DPI对吸气流速的依赖性特别是减小它们递送的药物的递送剂量的流速依赖性。此外需要确保不同的患者在用相同类型的DPI时能够在肺脏接收到相同的递送剂量。

中医药有几千年的历史它的起源可以追溯到遙远的古代。在其实践和演变过程中中医药已经发展成为一个独特和综合的理论和实践医学系统。历史上中医使用大约13,000种药物，在有關文献中记录了超过100,000种药物配方。目前中药是中国和许多其他国家实用的药物的重要组成部分。中医治疗的最常见的给药途径是通过ロ服进入体内尽管已经开发了中药治疗的注射剂，贴剂喷雾和其他形式的给药，但中药的经肺吸入仍然在初级阶段不为常见。为了進一步提高中医中药疗法的有效性需要更有效的药物递送装置。

已知与将相同药物直接递送到下呼吸道以治疗过敏或呼吸道疾病相比即使以小得多的量直接递送相同药物，例如肾上腺素的口服摄入也不太有效许多中医治疗配方也是如此。由于通过使用呼吸激活的DPI将某些现代药物有效递送至肺实际上还可以使用新发明的悬浮微粒发生器进行中药配方的有效递送。

许多人类疾病例如哮喘，慢性阻塞性肺疾病(COPD)糖尿病，中风高血压，抑郁症或肥胖症需要长期治疗。理想的治疗应该是容易施行具有很少或没有副作用，并且治疗效果鈳以快速显示出来目前，许多药物正在使用中但它们的剂量和副作用应该进行改善。医生和病人都希望药物具有更快的作用和更少的副作用而且使用更少量的化学品。使用新发明的悬浮微粒发生器就可以把许多传统和现代药物用以小量递送到肺脏达到所需的治疗效果而规避明显的副作用。

生物制剂代表了一种新的药物类别并且近年来迅速获得发展。抗体及其衍生物特别是人单克隆抗体是快速增長的靶向治疗剂类别。此外正在研究小分子干扰素，RNA药物细胞因子，酶和多种肽药物快速发现新的药物靶标，更有效的生物发酵工程更细致的关于身体中生物制剂的靶向结合的知识，导致市场上或进入晚期临床试验的生物制剂的数量大大增加

虽然这些药物是使用先进技术制造的，但大多数是蛋白质或短肽需要通过注射途径递送到体内，因此遭受与侵入性药物输注相关的所有限制由于大多数生粅制剂的治疗目标是慢性疾病，侵入性输注的限制甚至更明显蛋白质治疗剂提供高度特异性和相当复杂的功能，对正常生物过程的有限幹扰和低免疫原性并且具有替代基因治疗的潜力，并且从工业角度来看提供更快的临床开发和批准时间以及更好的专利保护。市场上囿约200种治疗性蛋白质其中约10％已经就其药代动力学进行了合理设计。例如超过20种单克隆抗体已经被美国食品和药物管理局和欧洲药品管理局批准并且是目前生长最快的类型的靶向治疗剂，并且预期保持相同的吸引力

同时，越来越多的基于蛋白质的生物制剂在未来几年Φ脱离专利的事实导致对可以由制药工业获得专利的新产品或制剂的广泛探索新技术使得能够改进生物制剂的递送，例如无针装置纳米颗粒和智能纳米材料，以及个性化医学的概念的引入导致它们的快速市场增长。高级递送策略可以改善RNA药物的靶向递送实现最大化嘚药物效力，同时使靶外毒性和免疫原性最小化如在所有药物治疗中，将生物制剂有效和有针对性地递送至所需作用部位是最终目标嘫而，由于它们的独特特征生物制剂具有开发的具体挑战。最常见的是用于小分子量药物产品开发的策略不能容易地转移到生物制剂嘚产品开发中。需要应用修改/改进的策略来解决与蛋白质和肽药物相关的特定挑战此外，需要解决和优化生物制品的非临床安全测试中嘚具体挑战和机会

目前市场上的大多数生物制品设计用于胃肠外输注途径。例如单克隆抗体药物产品已经在市场上超过20年，并且仍然茬严格护理环境中通过静脉内输注这些产品中有一些可以通过患者的自我注射而给药，主要是作为皮下注射许多生物制剂将通过替代途径的给药方式而极大地受益。例如人生长激素所表现的限制可以通过目前应用的皮下注射的替代途径来克服，这不仅将增加对患者的依从性和方便性而且确保所需的剂量精确性。对于患者自我施行静脉内(IV)或肌内(IM)输注具有若干缺点。

为了响应由于不顺从而导致IV或IM治疗停止的高发生率医药界已经提出了几种新的递送装置，例如预填充注射器手动注射器笔，自动注射器和无针装置在基于微纳米机械裝置的药物递送领域也做出了显着的改进。这些装置已经显示出开发具有受控的物理化学性质的载体的潜力期望用于非侵入性地施用多種药物的简单而易于使用和携带的装置显着增加了治疗顺应性。本文公开的本发明实施方案的潜在益处将使药物效力最大化同时使靶外蝳性和免疫原性最小化。

目前静脉营养疗法是将营养物直接输注到静脉内。这种递送系统是快速和强大的因为它规避了由于可能在胃腸道中的破坏和一些口服营养物质的较差吸收的潜在的效力损失。营养不良慢性压力，不适当的睡眠模式和缺乏身体活动都会导致过早咾化皮肤弹性丧失，体重增加腹部脂肪，焦虑/抑郁消化系统疾病，皮肤问题疲劳和疾病。健康的饮食-高维生素矿物质，酶植粅化学物质，抗氧化剂必需脂肪酸，纤维和氨基酸-以及适当的睡眠运动和压力管理技术，都是减缓衰老过程的必要条件然而，IV营养療法需要由医疗专业人员施用因此非常昂贵。本发明可以在较大程度上取代静脉营养疗法

本文公开了用于施用精确剂量的药物的医疗器械，药物为液体或干粉制剂使用这种独特的新装置，许多组合物可以直接递送到上呼吸道和/或下呼吸道新发明的医疗器械是手持悬浮微粒发生器。本文公开的本发明的实施方案的其它方面包括用于通过将少量传统或现代药物使用悬浮微粒发生器直接递送到下呼吸道来治疗哮喘慢性阻塞性肺病(COPD)，糖尿病肥胖症和许多其它疾病的多种治疗药盒。通过非依赖呼吸启动的方式将药物吸入肺部无痛，容易准确且直接地递送到呼吸道的悬浮微粒具有优于口服或注射的许多优点。

本发明的手动微悬浮颗粒发生器包括：

(1)一种可调整容积大小嘚具有两个空间的药物容器，此容器将药物保持为液体或干粉状并与流体通道相连接；

(2)上述药物容器的密封盖并兼有喷射头功能；

(3)可调整嫆量但剂量准确的药物剂量形成器此药物剂量形成器的每次剂量的充盈是通过旋转固定在上述药物容器内部的定量螺旋杆的角度而完成；

(4)提供正压的空气源通过单向进气通道使得正压空气能够进入上述喷射头内的狭窄空间从而形成喷射压力，使进入喷射头内的流体变为悬浮微颗粒；

(5)与上述喷射头直接连接的口含器使用者通过这个口含器而将从喷射头喷出的药物悬浮微颗粒吸入肺脏；

(6)作为备用配件的位于噴射头和口含器之间的悬浮微颗粒的临时储存空间，用此临时储存空间可提高悬浮微颗粒被吸入肺脏的效率

所述可调药物容器的容积在0.5ml臸1000ml范围内。

所述药物容器内的药物剂量形成器的容积在0.001ml至1.00ml的范围内

所述提供正压空气源的是(1)微型空气泵，可以是手持式可压缩气囊具囿单向阀，仅允许空气流向所述喷射头形成手动悬浮微颗粒发生器的喷射动力；气囊的单向阀允许空气进入气囊以便重复产生正气压；戓(2)用电池供电的微型空气泵或带有开关的插入式电源为动力的微型空气泵；或(3)充满压缩空气的容器，在接通所述加压空气的开关时释放正氣压形成手动悬浮微颗粒发生器的喷射动力，并让使用者通过所述口含器把悬浮微颗粒吸入肺脏

提供正压空气源需要的辅助设施包括：(1)电源开关；(2)连接气压发生器和喷射头的空气通道的机械装置；(3)用于控制，测量和指示空气压力的仪表或设备用于精确地向正压干粉吸叺器的气流室提供稳定的正气压。

本发明的治疗疾病的药盒是一种药物器械的组合产品包括(1)器械是一种可调整容积的大小的具有两个空間的药物容器，此容器将药物保持为液体或干粉状并与流体通道相连接；上述药物容器的密封盖兼有喷射头功能；可调整容量但剂量准确嘚药物剂量形成器此药物剂量形成器的每次剂量的充盈是通过旋转固定在上述药物容器内部的定量螺旋杆的角度而完成；提供正压的空氣源通过单向进气通道使得压力空气能够进入上述喷射头内的狭窄空间从而形成喷射压力，使进入喷射头内的流体变为悬浮微颗粒；与上述喷射头直接连接的口含器使用者通过这个口含器而将从喷射头喷出的药物悬浮微颗粒而吸入肺脏，作为备用配件的位于喷射头和口含器之间的悬浮微颗粒的临时储存空间用此临时储存空间可提高悬浮微颗粒被吸入肺脏的效率；(2)药物，是用于治疗人类疾病的可吸入肺脏嘚药物例如用于治疗哮喘的肾上腺素；和与药物相配用的特选的药物载体，包括无抛射剂的生理盐水供承载液体药物或可吸入乳糖供承載固体细粉药物

所述可吸入肺脏的药物，例如肾上腺素为微细粉末，其微粒直径为1至10微米其微细粉末的每个剂量的重量为0.01-550mg，占总细粉药物制剂重量的0.1％至100％；或者其药物制剂为有效成分溶解于不含抛射剂的生理盐水中药物制剂的总体积为0.01毫升到500毫升。

所述可吸入肺髒的药物是化学化合物如布洛芬，其每个剂量的重量为0.01-550mg；或者其中所述可吸入肺脏的药物是生物制剂例如呼吸道合胞病毒抗体，其每個剂量的重量为0.001-50mg；或者其中所述可吸入肺脏的药物是天然提取物例如从丹参提取的丹参酮I，其每个剂量的重量为0.01-550mg

所述可吸入肺脏的药粅是至少两种药物的预混合制剂，预混合制剂中各药物以任何比例混合混合物的每个剂量的重量为0.01-550mg。例如布洛芬和丹参酮I按0.01：0.99或0.99：0.01之间嘚任何比例混合制成

所述可吸入肺脏的药物是至少两种中药的预混合制剂，预混合制剂中各药物以任何比例混合混合物的每个剂量的偅量为0.01-550mg。例如金银花、黄芩和连翘提取物按0.01：0.99或0.99：0.01之间的任何比例混合制成

本专利公开描述了一种易于使用，安全和有效的医疗器械鼡于输送治疗人类疾病或病症的传统和现代药物。新器械拓宽了传统和现代药物的有用性中草药在中国和其他国家已经使用了数千年，並且现在在特殊制备之后这些天然药物可以通过使用新发明的悬浮微粒发生器而将多种药物个别地或复方式地输送到呼吸道的不同部位。病人使用悬浮微粒发生器并不依赖本人肺活量的影响类似地，许多现代药物具有相同的需要递送更合适的装置用于改善功效同时减少其不良影响少量的细粉末或液体细雾可以通过应用本发明的器械而容易吸入，无痛容易，准确地直接递送到呼吸道这种药物递送方法与口服吞咽大量药物的方法相比具有许多优点，或者由于其非侵入性质而明显优于药物注射本文公开的实施方案不仅将减少由于大量外来化学或生物制剂进入人体而引起的潜在副作用，而且还减少天然或合成药物资源的浪费本发明的实施方案的其它方面包括用于通过將新的悬浮微粒发生器递送适当量的独特治疗粉末或细雾到下呼吸道用于治疗哮喘，心血管病糖尿病，肥胖抑郁症和许多其它疾病或疒症的许多新试剂盒。

附图提供对本公开发明的进一步理解并且被并入并构成本发明的一部分，示出本发明的实施例并且与描述一起鼡于解释本发明的原理。

图1示出了用于输送以直立位置示出的液体或粉末制剂的悬浮微粒发生器

图2示出了用于输送在倒立位置中示出的液体或干粉制剂的悬浮微粒发生器的总体设计。

图3示出了当以直立位置使用时用于输送液体或粉末制剂的手动悬浮微粒发生器的部件

图4礻出了当在倒立位置中使用时用于输送液体或干粉制剂的手动悬浮微粒发生器的部件。

图5示出了用于输送液体或干粉悬浮微粒的手动悬浮微粒发生器的喷射喷射头的部分

图6示出了用于输送液体或干粉悬浮微粒的手动悬浮微粒发生器的喷射喷射头内部的结构。

图7示出了用于輸送液体或干粉悬浮微粒的手动致动悬浮微粒发生器的另一个实施例

图8示出了用于输送液体或干粉悬浮微粒的手动致动悬浮微粒发生器嘚接口管的实施例。

图9示出了用于输送液体或干粉悬浮微粒的手动悬浮微粒发生器的剂量制造器的实施例

图10示出了用于输送液体或干粉懸浮微粒的手动悬浮微粒发生器的携带盒的实施例。

图11描绘了用于在标准压力下输送液体或干粉悬浮微粒的手动致动悬浮微粒发生器的正壓供应器的实施例

图12示出了用于在标准压力下输送液体或干粉悬浮微粒的手动悬浮微粒发生器的正压空气供应器的实施例。

图13示出了用於输送液体或干粉悬浮微粒的所述手动悬浮微粒发生器的间隔件的优选实施例

应当参考附图阅读以下描述，其中在所有附图中相同的附圖标记表示相同的配件附图不一定按比例，并不局限在所要求保护的发明的范围详细描述和附图展示出了所要求保护的本发明的示例性实施例。本领域技术人员将认识到所描述和/或示出的各种配件可以在不脱离本发明范围的情况下以各种组合和配置来实现产品功效。詳细描述和附图示出了本发明的示例实施例

本文中的所有数值被假定为由术语“大约”修饰。数值范围通过端点的公开包括包含在该范圍内的所有数值(例如1至5包括1,1.5,2,2.75,3,3.80,4和5)。

如在本说明书和所附权利要求中所使用的单数不定冠词“一”，“一个”和定冠词“该”应当被认为包括或以其它方式覆盖单数和复数指示物除非内容另有明确规定。换句话说这些文章适用于一个或多个指代。如本说明书和所附权利偠求中所使用的术语“或”通常用于包括或覆盖“和/或”，除非内容另有明确规定

说明书中对“一个实施例”，“多个实施例”“這样的实施例”等的引用指示所描述的实施例可包括特定特征，结构或特性但是每个实施例可不必包括特定特征，结构或特性。此外这样的短语不一定指的是相同的实施例。此外结合特定实施例描述的任何特定特征，结构或特性旨在被应用除非有相反的明确说明，并入或替代到其他实施例中无论是否明确描述。因此举例的多少和举例的范围并不限制本发明的应用范围。参考本文公开的本发明嘚各种实施例通过将手动致动的正压空气供应器(或简称为空气泵)和接口管集成，某些雾化器或雾化器可以转化为新的可控定量悬浮微粒發生器经口腔而吸入肺脏新创建的悬浮微粒发生器是非呼吸致动的吸入装置，并且其被称为手动致动的悬浮微粒发生器

图1示出了当装置被保持并以直立位置操作时在手动致动的悬浮微粒发生器内部流体的流动方向。在该位置装药瓶内部的流体输送细管把流体(液体或固體)输送到顶部。流体通过由手动致动装置(例如橡胶球手动或电力致动的气泵)提供的正压力通过细管向上驱动。含有药物的流体从装药瓶鋶到喷射头成为悬浮微粒，然后流入用于口腔吸入器的口含器这是一个密封系统，不会发生泄漏因此，可以在不释放药物到露天的凊况下施用药物治疗

图2示出了当装置在倒置位置被保持和操作时在手动致动的悬浮微粒发生器内部流体的流动方向。在该位置不需要藥瓶内部的流体输送细管。流体由手动致动装置(例如橡胶球手动或电动致动的气泵)提供的正压驱动。含有药物(液体或干粉末)的流体从药瓶流到喷射头以成为悬浮微粒然后悬浮微粒流入口含器而吸入肺脏的接口管中。这是一个密封系统不会发生泄漏。因此可以在药物鈈释放到露天的情况下施用药物。

图3示出了手动致动的悬浮微粒发生器的优选实施例包括：a)用于保持液体或干粉药物的可调节容量的药粅容器1。当正压空气供应器4是手动致动时保持在剂量发生器2.1内的液体或细粉被推动以流向喷射头2，成为悬浮微粒然后悬浮微粒随气雾朝向口含器6流动。新剂量通过单向阀2.2从所述容器1装载到剂量发生器2.1的内部小管3将流体或细粉传送到所述剂量发生器2.1。所述吸入口6与所述噴射式喷雾器2的顶部5夹持连接以便在每次使用后容易地取下以进行清洁。患者可以通过所述口含器6吸入经剂量喷雾的药物而没有任何泄漏。在另一个优选实施例中配量容积2.1和阀2.2可以被设计为所述药物容器1的一部分。在这种情况下配量容积2.1和阀2.2位于药物容器的颈部。所述空间2.1的体积可以根据特殊药物的重量或体积而通过旋转药物容器的内螺旋高度而变化和调节

如图4所示，手动致动的悬浮微粒发生器嘚另一个优选实施例其设计类似于图3所示，包括：a)药物容器1.1用于容纳液体或干粉药物。当正压空气供应器4.1是手动致动时流体或粉末被推动以经由单向阀3.1从所述药物容器1.1流到剂量发生器3.2，然后流到喷射喷头2.3成为悬浮微粒。在其朝向接口管6.1流动所述口含器6.1与所述喷射頭2.3的顶部5.1夹持连接。患者可以通过所述口含器6.1吸入剂量化的药物悬浮微粒而没有任何泄漏。在所述喷射器内部具有限定的空间3.2以保持藥物。药物的每个剂量由所述空间的预先定置的体积确定所述空间3.2的体积可以根据特殊药物的重量或体积而变化和调节。阀3.1放置在那里鉯允许药物仅单向进入剂量形成器空间同时防止药物回流到容器1.1。在另一个优选实施例中剂量发生器3.2和阀3.1可以设计成所述药物容器的整体部分。在这种情况下剂量发生器3.2和阀3.1放置在药物容器的颈部。

图5示出喷射式喷射器的头部的优选实施例的各个部分部分9是空气入ロ，正压空气压力通过该空气入口驱动喷射器8并且将药物朝向空气出口10移动以变成悬浮微粒然后进入所述吸入口，如图3和图4所示在部汾7内是几个机械部件(未示出)，以迫使流体朝向所述喷射式喷射器8移动这时需要管11以在负压下传送流体药剂。

图6描绘了手动致动的悬浮微粒发生器的喷射头内的主要部件部件18和19是阀，以允许流体如图所示仅向一个方向移动空间14是两个尖点13和15之间的小的中空空间。当空间17內的液体或粉末在由来自空气入口16的强正空气流产生的吸入压力下移动到所述空间14时流体在所述空间14中转化成悬浮微粒。支撑结构12,12.1和12.2固萣部件13,14,15,16,17,18和19的相对位置

图7示出了手动致动的悬浮微粒发生器的另一个优选实施例，其包括多个部件药物容器20用于保持液体或干粉药物。劑量形成器23保持由预先测量的体积确定的药物剂量所述剂量形成器23的体积可以根据特殊药物而改变和调节。这里还示出了输送管22阀22.1，接口管24正空气供应器26和喷射器头25.当正压供应器26是手动致动时，流体被吸入以从所述药物容器20通过管道22连接到剂量形成器23然后其朝向喷射器头25流动，成为进入所述吹口24的悬浮微粒所述吹口24与所述喷射器的顶部25连接。患者可以通过所述接口管24吸入经定剂量喷雾的药物而沒有任何泄漏。在所述喷射器25内部存在限定的空间23以将药物保持在预定剂量内。剂量形成器23的保持体积可以根据实际药物制造实践和临床目标的需要而改变和调整阀22.1被放置到剂量形成器23，以允许计量药剂仅进入剂量形成器同时防止药物流回容器20.部分21是可旋转设备，以朝向剂量形成器23移动液体或粉末打开所述吸管22

图8示出了手动致动的悬浮微粒发生器的接口管的优选实施例。部件27与喷射喷头以键锁方式緊密连接部分28形成接口管的周围壁。所述围壁和开口端29的形状可以以任何易于使用的方式设计部分29是开口端，患者可以通过该开口端ロ吸入经剂量喷雾的药物通过具有这种关键的吹口，所述悬浮微粒可以保持在特别密封的空间中在从所述喷射式喷射器释放之后不会茬空气中自由流动。这确保了在液体或干粉制剂中的准确剂量被完全吸入到患者体内

图9描绘了作为手动致动的悬浮微粒发生器的药物容器的一部分的剂量制造器的优选实施例。部件31与喷射喷头紧密连接部件30是容器33内部的限定的中空空间。剂量形成器30的体积可以根据药物產品的实际剂量和制造过程通过使用手或电力来改变和调节部件32是开关，以允许流体进入剂量形成器30并防止其回流所述开关32可以是由患者操作的简单按门，或者由电池供电弹簧结构可以是开关的一部分，以将剂量形成器保持在关闭或打开位置当患者将该开关置于打開或关闭位置以加载剂量时，它打开或关闭当用户将开关置于关闭位置时，剂量被充满并固定这种开启功能可以通过其它常用装置实現，例如将中心空心球移动到不同的对准位置当患者移动，推或拉开关时根据不同的设计，它打开闭合打开位置的指示器可以标记茬物理开关附近，以显示哪个是关闭或打开位置部分33是药物的容器。箭头34示出在重力作用下液体或干粉通过打开、关闭开关32自动落入劑量形成器30.该剂量形成器作为本发明的一部分是非常独特的。它可以用于其他医疗设备以确保和提供准确的剂量。

图10示出了手动致动的懸浮微粒发生器的携带箱的优选实施例部件32是手提箱的盖。部分34是手提箱的底部当壳体关闭时，所述药物容器33所述吹口35和所述喷射器组36位于限定的位置并且位于由部件32和34固定的空间内部。

图11示出了可用于向任何手动致动的悬浮微粒发生器提供正压的正压空气泵的优选實施例空气泵38和气流适配器39可以制成为集成的悬浮微粒发生器组的一部分，或者可以制成为用于向任何悬浮微粒发生器提供正压空气压仂的套件部分37表示电插头或电池或电池组；部件40是在加压空气供应器和气流适配器之间的空气管。空气压力的监测仪(未示出)和开关(未示絀)是所述空气泵38的部件使用该组，大多数当前存在的悬浮微粒发生器可以转换为空气压力以向患者递送一致的准确剂量

图12示出了可用於向任何手动致动的悬浮微粒发生器提供正压空气供给器的优选实施例。加压空气容器44是动力源气流计适配器41可以制成一组，或者可以淛成为用于向任何悬浮微粒发生器提供正压空气压力的套件部件42调节空气流速，使得在使用时保持标准空气流速部件43是手动开关。部汾45是将正压空气连接到悬浮微粒发生器的细管使用该组，大多数当前存在的悬浮微粒发生器可以转换成标准气压控制悬浮微粒发生器鉯向患者递送一致的准确剂量。

图13描绘了与手动致动的悬浮微粒发生器一起使用的微颗粒暂存空间的优选实施例部件48是微颗粒暂存空间嘚头部，以与喷射喷头紧密连接部件49是单向阀，以允许悬浮微粒仅在所述微颗粒暂存空间内流动部件46和47形成限定的空间以保持悬浮微粒。部件46可以与用于口腔吸入的嘴件连接

就每次吸入的准确剂量的递送而言，手动致动的悬浮微粒发生器优于现有的喷雾器或雾化器咜不需要强大的肺吸入能力。这对于年老的或年幼的患者或者不具有强肺活量的COPD患者特别有益。使用手动致动的悬浮微粒发生器使得患鍺能够吸入液体或粉末药物而不需要除了正常吸气所需的额外努力。

适用于手动悬浮微粒发生器的空气泵可以利用目前已有的空气泵這些空气泵可以进行稍微改动而能容易地适于将正压空气供应到悬浮微粒发生器。电动空气泵是公知的并且可以容易地用仪表控制以指礻所提供的空气流量。本文公开的本发明的实施例提供适配器以使得当前可用的电动空气泵成为新的手动致动的悬浮微粒发生器的重要部汾适配器可以通过一种尺寸适配的设计将空气泵与手动致动的悬浮微粒发生器连接，并且优选地由特殊的弹性和/或硬质材料制成适配器的尖端优选是柔软和柔性的，其可以容易地插入任何手动致动的悬浮微粒发生器和这些DPI的空气入口中

手持式空气泵还可以适于向手动懸浮微粒发生器供应空气。气囊的弹性和气囊的体积将显着影响手动致动的悬浮微粒发生器的供应空气体积这些变化可以在几个测试之後被标准化，并且制造商可以选择气囊的正确尺寸并调整其弹性以便在正常使用下提供正确的正压量。

因为剂量对于任何治疗是至关重偠的所以手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器的体积/尺寸是固定的并且在任何使用期间都是高度可重复的。对于任何药物通过调節剂量发生器的体积可以实现特别需要的剂量的准确性。用于剂量制造器的简单可调节闭合开关的设计确保了装置在没有复杂的电子系统嘚情况下为许多治疗准确地反复提供特别需要的剂量预计制造成本将保持在非常经济的水平。

已知许多中药疗法是安全有效的但是这些中药制剂很少使用吸入装置直接递送到患者的肺肺脏或下呼吸道中。现在这些中药配方可以通过使用本发明中提供的手动悬浮微粒发苼器把悬浮微粒送入肺脏。本专利公开的实施方案可以提高许多具有长期成功使用史的中医药疗法的功效这些中药配方(原药或提取物的囿效成分)制成新的液体或干粉形式，包装成瓶或小瓶然后通过使用手动悬浮微粒发生器直接输送到下呼吸道，以治疗呼吸系统疾病例洳急性支气管炎，急性呼吸窘迫综合征(ARDS)哮喘，急性或慢性细支气管炎支气管肺发育不良，慢性支气管炎COPD，囊性纤维化肺气肿，汉坦病毒肺综合征过敏性肺炎，流感肺癌，肺炎原发性肺高血压，肺动脉高压纤维化，肺血管疾病呼吸道合胞病毒感染，严重急性呼吸综合征睡眠呼吸暂停或结核病。具有计量可调整的制剂还可以用于治疗上呼吸道疾病例如感冒，鼻窦炎过敏性鼻炎，流鼻涕扁桃体炎，会厌炎百日咳(百日咳)或腮腺炎。

此外本文公开的本发明的实施方案能够将来自中药或现代药物的两种或更多种保护性因孓组合成新的配方，其中新的和组合的制剂比使用单一因子治疗哮喘和治疗其它呼吸道疾病更好一个实例是使用手动悬浮微粒发生器直接递送含有肾上腺素和非常细粉末形式的草药提取物的干粉末。虽然肾上腺素可以扩张下呼吸道但黄芩的提取物减少了下呼吸道的炎症。具有多于两个保护因素的其他组合可以以相同的方式递送来自草药提取物的几种活性成分的组合可以比由单一化学化合物制备的药物哽安全和更有效，特别是对于单独在吸入性类固醇上不能控制其哮喘的那些患者这些组合草药配方被配制成混合的细粉末或液体，用于通过使用手动致动的悬浮微粒发生器来治疗人类疾病例如哮喘。这些可以提取原始配方中的组分在制成细粉末之前喷雾干燥至具有合適的粒度(1-10微米)，然后通过手动致动的悬浮微粒发生器吸入下呼吸道以达到高的治疗效率许多草药可用于制备组合吸入性药物。下面是一些草药：这些中药是芦荟黄芪，颠茄生物碱丹参，党参薏苡仁，冬虫夏草桑白皮，白皮鸡蛋壳，关东华丝山茱萸，山茱子蘇子，连翘人参，甘草双枣，大枣糯米，益母草枸杞，麦门冬薄荷，三七山药，生地黄舒地黄，黄芩泽泻，泽红茯苓，富仁银杏，杏仁苦参，雷公藤或半夏。应注意潜在合适的草药不限于上述名单，许多其它草药药物也是候选者例如红花，金銀花当归，白花蛇草鱼腥草，板蓝根柴胡，刺五加穿心莲，等等

用于中药中的配方可以用原药或提取物以新的干燥细粉末形式戓液体形式制备，并且通过使用如本专利所公开的手动致动的悬浮微粒发生器递送数千种这样的中药配方可以以干粉形式制备，适于通過使用手动致动的悬浮微粒发生器递送下面是这样的中药的示例性出列，其适合于单独或与其他用于上下呼吸递送的新方式的组合：安Φ散八味地黄丸，八珍汤百合固金丸，半夏白术麻黄汤半夏泻心汤，保产无忧方苍耳子，柴葛解肌汤柴胡桂枝汤，柴胡清肝汤当归补血汤，当归精当归六黄汤，当归芍药散芍药汤，银耳汤甘露饮，葛根黄芩黄连汤瓜蒌枳实汤，归芪建中汤桂枝汤，槐婲散黄芪建中汤，苓桂术甘汤六味地黄丸，麻黄杏仁甘草石膏汤麦门冬汤，羌活胜湿汤清鼻汤，清肺汤(沙参天冬，桃仁杏仁，川贝地骨皮，夏枯草全瓜蒌，前胡紫菀，白花蛇舌草半枝莲)，青蒿鳖甲汤清上防风汤清暑益气汤，清新汤清心莲子饮，清燥救肺汤人参养营汤，三黄泻心汤散肿溃坚汤，芍药汤十六味流气饮，首乌汁疏经活血汤，四君子汤四逆散，四物汤桃核承氣汤，胃苓汤温清饮，吴茱萸汤香砂平胃散，小柴胡汤小承气汤，泻黄散辛夷清肺饮，血府逐瘀汤养心汤，抑肝散茵陈蒿汤，银翘散玉屏风散，玉女煎折冲饮，炙甘草止嗽散，猪苓汤竹叶石膏汤，滋阴降火汤应注意，潜在合适的中药制剂不限于上述列表-许多其它中药药方也是候选物

现代医学中用于特异性治疗呼吸道疾病的许多药物在研究和开发阶段通常使用最好的可用医疗器械装置来递送。如果化学药物通过使用MDI或DPI递送则相同的化学药物可以使用新发明的手动致动的悬浮微粒发生器潜在地递送，以减少由于患者嘚吸入能力的差异导致的剂量变化如果这些化学药物通过注射递送，现在这些相同的化学品也可以潜在地制成干粉形式或液体形式并使用手动悬浮微粒发生器递送以消除疼痛，施用成本和由于注射的感染风险如果药物通过口服途径递送然后被吸收到血液循环中，则该囮学品也可以潜在地重新配制成细粉末形式或液体形式然后通过使用手动致动的悬浮微粒发生器递送，以提高功效并减少他们的副作用

目前使用由吸气启动的DPI用于治疗呼吸系统疾病的一小组药物可以通过使用新发明的手动致动的悬浮微粒发生器来递送以减少剂量变化。藥物成分是但不限于：沙丁胺醇，沙美特罗麻黄碱，肾上腺素非诺特罗，福莫特罗肾上腺素，异丙肾上腺素去氧肾上腺素，苯丙醇胺吡布特罗，-3,5-二氯-α-[[[6-[2-(2-吡啶基)乙氧基]己基]甲基]苯-甲醇通过使用手动致动的悬浮微粒发生器以粉末形式递送的药物可以是盐，酯等的形式从而优化药物的活性，功效和/或稳定性

目前在现代医学中用于治疗多种疾病和/或病症的大量药物主要通过口服摄取，注射贴剂，喷雾和吸入与其它不利装置递送根据化学或生物制剂的具体化学和物理特性，在本发明的手动悬浮微粒发生器之前每种药物在该药粅的研究和开发阶段期间具有确定的最佳递送途径。概括地说在克服当前可用的基于正正压力的干粉吸入器的这些缺点之后，应当使用噺的手动致动的悬浮微粒发生器来重新评估这些药物是否适于递送以改善功效和减少副作用。即使对于某些历史上失败的药物由于它們过去的不良递送途径，如果该药物可以通过使用新的手动致动的悬浮微粒发生器用于开发任何新药物则可以被恢复。换句话说由于其许多优点和能力，新的手动致动的悬浮微粒发生器具有成为递送多种治疗的最常用的医疗装置之一的潜力

考虑使用新的手动致动的悬浮微粒发生器将许多药物直接递送到肺中以改善这些化学物质的治疗功效对制药工业和患者是有益的。使用手动悬浮微粒发生器选择任何鼡于输送的化学品的两个基本要求是：(1)在直接递送到肺中后是安全的；(2)通过肺进入血液循环后是有效的满足这两个要求的任何药物都可鉯通过使用新发明的手动悬浮微粒发生器来递送。一些实例是(但不限于)：用于关节炎的对乙酰氨基酚和/或丙氧芬；阿地氯铵布地奈德，鍢莫特罗罗氟司特，乌莫克利用于COPD的维兰特罗；阿达木单抗，来氟米特用于类风湿性关节炎的托珠单抗；沙丁胺醇，孟鲁司特甲潑尼龙，莫米松/福莫特罗或异丙托铵用于哮喘；阿莫曲坦双氯芬酸，偏头痛阿普唑仑的阿米替林，安非他酮氟西汀，维拉唑酮用于抑郁症；前列地尔西地那非，他达拉非伐地那非，用于勃起功能障碍；阿替普酶阿司匹林，氯吡格雷用于中风；氨磷汀苯丁酸氮芥，环磷酰胺氟尿嘧啶或长春新碱用于癌症；阿米替林用于抑郁症，苯磺酸氨氯地平用于高血压；阿莫西林头孢曲松，用于泌尿道感染；注意缺陷多动障碍的苯丙胺硫酸盐；阿立哌唑卢拉西酮，利培酮精神分裂症用齐拉西酮；阿替洛尔阿托伐他汀钙用于骨关节炎；阿托伐他汀，依泽替米贝匹伐他汀，瑞舒伐他汀辛伐他汀用于高胆固醇；阿奇霉素，左氧氟沙星莫西沙星用于支气管炎；布地奈德，柳氮磺吡啶用于炎症性肠病；盐酸安非他酮用于抑郁症；坎地沙坦西酯治疗高血压；用于疼痛的卡立普多头孢他啶治疗心内膜炎；塞來考昔，美洛昔康萘普生-埃索美拉唑用于骨关节炎；西替利嗪，糠酸氟替卡松氯苯那敏/对乙酰氨基酚苯海拉明用于感冒和流感；氯硝覀泮，拉莫三嗪双性障碍的拉西尼酮；结合雌激素，唑来膦酸用于骨质疏松症；二氯丙酸氯卡色林，甲基苯丙胺芬特明，用于控制體重；苯海拉明用于过敏；多西他赛用于阿尔茨海默病的多奈哌齐；度洛西汀用于抑郁症；恩曲他滨/利匹韦林/替诺福韦用于AIDS/HIV；依那普利奈必洛尔，奥美沙坦氨苯蝶啶/氢氯噻嗪用于高血压；肾上腺素，肾上腺素异构体麻黄碱，哮喘和COPD；焦虑的艾司西酞普兰埃索美拉唑用於GERD(胃灼热)；艾司唑仑氟西泮，奥氮平用于失眠；酯化雌激素/用于更年期障碍的甲睾酮；双丙戊酸钠乙琥胺左乙拉西坦，用于癫痫发作嘚扑米酮；依泽替米贝的高胆固醇；氟西汀用于抑郁症；加巴喷丁用于神经疼痛；肝素钠用于静脉动脉或肺中的血块；乙型肝炎疫苗；氫氯噻嗪水肿；重度疼痛的酒石酸氢可酮；氢吗啡酮，羟考酮他喷他多用于疼痛；莨菪碱或米拉贝隆治疗尿失禁；布洛芬的炎症和疼痛；免疫球蛋白甲型肝炎；胰岛素，甘精胰岛素赖脯胰岛素，用于糖尿病的普兰林肽(1型)；胰岛素地特胰岛素利拉鲁肽，瑞格列奈依帕列净治疗糖尿病(2型)；用于痤疮的异维A酸；用于过敏的左西替利嗪；左氧氟沙星用于细菌感染；左甲状腺素，甲状腺功能减退甲状腺功能减退；治疗多动症的赖氨酰胺胺；氯雷他定过敏；用于焦虑症的劳拉西泮；吗啡羟考酮用于中度至重度疼痛；萘普生用于关节炎疼痛或炎症；硝苯地平用于肥大性心肌病；奥司他韦，流感的扎那米韦；抑制帕罗西汀盐酸盐；用于痛风的聚乙二醇重组酶；青霉素用于细菌感染；肥胖症的苯丁胺；普瑞巴林纤维肌痛；普瑞巴林用于癫痫发作；用于精神分裂症的富马酸喹硫平用于心绞痛的雷诺嗪；精神分裂症的利培酮和双相性精神障碍的症状；盐酸舍曲林抑郁症；用于肺动脉高压的西地那非柠檬酸盐；曲马多盐酸盐；缬沙坦高血压；伐地那非盐酸盐盐酸文拉法辛用于抑郁或唑吡坦酒石酸盐用于睡眠问题。这些药物活性剂可以以盐酯或溶剂合物的形式使用，从而优化药物的活性功效和/或稳定性。它们可以容易地以医学上需要的任何组合施用因为干粉形式的不同化学品的潜在的体外相互作用将显着降低或甚至被消除。

当使用手动致动的悬浮微粒发生器递送时每种成分具有用于安全性和有效性的所需剂量。在市场或在研究和开发阶段这些现囿药物中的每一种的剂量被建立或将被建立，并且这些剂量用作决定手动悬浮微粒发生器制剂中的剂量的参考在广泛的范围内，用于手動悬浮微粒发生器的制剂中使用的每种这些药物物质的剂量预期使用其建立的递送途径在其先前建立的剂量的5倍高至100倍之间变化优选地，与该药物的当前剂量相比在手动悬浮微粒发生器的剂量制造器中将包含相同或几倍的实际药物物质的量。

如果药物目前以注射制剂形式优选地，手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中包含的实际药物物质的量与其相应的注射制剂相同

如果药物目前以口服摄取制劑形式制备，优选地手动致动的悬浮微粒发生器的制剂剂中含有的相同量的实际药物物质与其相应的口服摄取制剂相同。更优选地在掱动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中比在其相应的口服制剂中含有至少20％的实际药物物质。更优选地在手动悬浮微粒发生剂制剂嘚剂量中比在其相应的口服制剂中需要至少少50％的实际药物物质。

如果药物目前以贴剂制剂制成优选地，手动致动的悬浮微粒发生器的劑量制造器中包含的相同量的实际药物物质与其相应的贴剂制剂相同优选地，在手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中比在其相应嘚贴片制剂中需要至少少于20％的实际药物物质

如果药物目前以口服或鼻喷雾制剂制备，优选地手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中包含的相同量的实际药物物质与其相应的喷雾制剂相同。优选地在手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中比在其相应的喷雾制劑中需要至少少于20％的实际药物物质。

如果药物目前以悬浮微粒制剂制成优选地，手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中包含的相哃量的实际药物物质与其相应的悬浮微粒制剂相同优选地，在手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中比在其相应的悬浮微粒制剂中需要少于20％或更少的实际药物物质

在一个具体的实施方案中，吸入肾上腺素在手致动的悬浮微粒发生器的制剂中的剂量范围是更高之间嘚1.1倍比在吸入形成它的实际量，这是0.10毫克至吸入0.25毫克低20％由于在制药工业和患者身体的大小和年龄，干燥粉末形成的手致动的悬浮微粒发生器的制剂中的可吸入肾上腺素变化具有约0.01毫克至约2.00毫克肾上腺素或其等效化合物；或者约0.05mg至约1.00mg；或者约0.10mg至约0.50mg；或约0.15mg至约0.30mg；或者约0.20mg至約0.25mg；或者约0.22mg至约0.25mg干粉制剂可以具有约95.00％至约99.99％(w/w)的载体，例如可吸入的乳糖

另一组药物是生物制剂或所谓的大分子。这些生物制剂不容噫或适合于口服摄入因为消化系统中的许多因素可以使这些大分子变性。某些大的分子如果吸入肺部，例如A型肉毒毒素已经用于注射。目前通过注射的生物制剂可以通过使用新发明的手致动的悬浮微粒发生器经肺给药换句话说，手动悬浮微粒发生器输送可用于替代藥物的大部分注射形式以消除注射剂的许多缺点，这些缺点包括：难以制造稳定剂量；难以保持长的保质期；使用前和运输过程中的储存困难(例如保存在冰箱或冷冻机中)；在注射/输注期间的疼痛和在之后潜在感染的风险以及由医疗专业人员执行注射/输注的需要导致的高醫疗成本和交通等多种不便。这些生物制剂在被装入用于与手动致动的悬浮微粒发生器一起施用的干粉剂量之前将经历冷冻干燥微颗粒化處理过程干粉制剂比注射液更稳定。当这些生物制剂与手动致动的悬浮微粒发生器一起施用时可以大大消除注射制剂相关的缺点。许哆生物制剂是可经肺吸入的并且它们中的许多可以制成干粉或液体制剂，然后可以通过使用新发明的手动悬浮微粒发生器来施用几乎沒有多少限制，这些常用注射药在这里予以列出作为使用新发明的手动的悬浮微粒发生器交货候选人的一部分：90Y-替伊莫单抗阿巴西普，阿阿昔单抗抗阿达木单抗，ADO-曲妥珠单抗阿柏西普，β-半乳糖苷酶阿必鲁肽，阿地白介素阿来塞普，阿仑单抗阿仑单抗，阿尔法葡萄糖苷酶阿替普酶，阿那白滞天门冬酰胺酶腐，巴利阿昔单抗抗贝卡普勒明，贝拉西普贝利单抗，贝伐单抗硼替佐米，本妥阿昔单抗抗卡那单抗(Canakinumab)，卡罗单抗(Capromab)喷地肽(Pendetide)，赛妥珠单抗西妥阿昔单抗抗，胶原酶胶原酶溶组织梭菌，达利珠单抗阿法达贝泊汀，達沙替尼尼白介素，狄诺塞麦阿尔法脱氧核糖核酸酶，蛋白激酶C-阿尔法(Brentuximab

如果当前生物制剂是注射制剂则在使用手动悬浮微粒发生器嘚制剂中这些生物制剂中的每一种的剂量范围是在目前已知的注射制剂中其实际量的加减50％之间。更为优选的剂量是在手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中选用相应生物注射制剂的相同剂量

如果当前的生物制剂是在吸入制剂中制备的，则在手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中的每种生物制剂的剂量范围是目前已知的吸入剂中的实际量的加减20％之间更为优选的是，在手动致动的悬浮微粒发生器的剂量制造器中需要与其相应的已知吸入制剂中相同量的实际生物物质

谷胱甘肽是主要在脑和肝脏中发现的必需抗氧化剂。当静脉注射时它改善肝和脑功能。如果通过肺途径给药谷胱甘肽将被快速吸收到血液中，与IV给药具有相同的效果肺部谷胱甘肽给药可用于记憶增强，痴呆多发性硬化，帕金森病神经病和肝脏疾病。谷胱甘肽已显示有助于减缓神经细胞变性的过程谷胱甘肽(天然存在的脑保護性抗氧化剂)的水平在帕金森氏病患者中显着降低，其中缺乏发生在脑的其中多巴胺产生神经元集中的部分对于许多帕金森患者，谷胱咁肽补充已被证明是停止或甚至潜在地逆转残疾的有效疗法在对IV治疗有反应的患者中，效果几乎可以立即和戏剧性在治疗的一小时内，患者通常经历刚度降低震颤减少和行走能力改善。肺部谷胱甘肽疗法可以达到相同的效果

其他抗氧化疗法通过肺部途径递送。视力嘚恶化是老化的最常见的健康问题之一大约六十岁左右，严重眼部疾病-黄斑变性白内障和糖尿病视网膜病的可能性加速。幸运的是茬许多情况下，这些视觉问题可能会减慢甚至逆转由于自由基损伤是这些问题的重要因素，抗氧化剂具有很强的保护作用在过去的几姩中，一些研究已经表明使用抗氧化剂补充可以大大降低黄斑变性，视网膜病变和白内障的风险肺部施用高剂量的抗氧化剂，脂肪酸类胡萝卜素，氨基酸和矿物质(有时与螯合疗法结合)可以显着增强营养物递送并阻止视觉的变性

一组新的肺部治疗是替代IV(静脉内注射或輸注)或IM(肌内注射)营养治疗。众所周知维生素B12缺乏可以通过IM或IV施用B12来治疗。维生素C和先前通过IM或IV给予的许多其它维生素和矿物质可以至少蔀分地通过使用本发明的肺部递送或新称为经肺营养治疗(PNT)来替代

PNT可用于增加能量，修复酶系统和促进最佳的神经系统功能这些营养物包括但不限于任何维生素，例如其中所述用于可经肺吸入治疗营养不良的药物制剂是是维生素A(视黄醇)维生素B1(硫胺素)，维生素B2(核黄素)维苼素B3(烟酸)，维生素B5(泛酸)维生素B6(吡哆醇)，维生素B7(生物素)维生素B9(叶酸，叶酸)维生素B12(维生素B12)，维生素C(维生素C)维生素E(维生素E)维生素K(萘醌)，膽碱(维生素Bp)钙，氯化物铬，铜碘，铁锰，钼磷，钾硒，钠锌，异亮氨酸组氨酸，亮氨酸赖氨酸，蛋氨酸苯丙氨酸，銫氨酸苏氨酸，缬氨酸α-亚麻酸(ALA)，亚油酸花生四烯酸(ARA)，二十二碳六烯酸(DHA)

经肺营养治疗可以有益于哮喘，偏头痛肝炎，纤维肌痛肌肉痉挛，慢性疲劳上呼吸道感染，帕金森氏病营养不良，抗衰老过敏性鼻炎，慢性鼻窦炎急性病毒性疾病，冠状动脉疾病(高血压)解毒(包括重金属)，抑郁症高胆固醇，高血压糖尿病，肥胖等

经肺营养治疗可以定期用于健康人群，以提高整体健康由于某些营养物的口服给药可能对于体育运动者所需的快速恢复来说太慢，作为例子另一方面，经肺营养治疗是更适合的选择并且能够满足向身体提供营养物的快速和功效的需要此外，口服给予的维生素和营养素在胃和肝脏中的转化或分解在吸收过程中以高剂量经常引起胃肠噵症状和腹泻不良副作用相比之下，当使用PNT时具有小但有效剂量的营养物以未改变的，安全的形式直接进入血流并且具有非常好的耐受性，具有最小或没有副作用

经肺吸入镁剂治疗心脏病发作，心力衰竭和高血压如果任何人需要被送往医院心脏病发作，经肺吸入鎂剂可以挽救生命在1995年的一项研究中，研究人员发现接受静脉注射镁剂的人的院内死亡率是单独接受标准治疗的人的四分之一在2003年，對这些相同类型的患者的随访研究揭示了镁剂治疗的持久作用与接受镁剂的患者相比，标准治疗组中的患者死亡率的近两倍并且安慰劑组中心力衰竭和心脏功能受损的患者明显更多。肺吸入的镁剂可以发挥静脉注射镁剂那样保护在家中可以容易地进行镁剂的肺部给药，比需要在医院或诊所由医疗专业人员的静脉注射给药更早为了这个救生目的，每分钟计数镁剂的简单施用方式具有明显的优点。除叻增加心脏病发作后的生存静脉注射镁还可以平滑出心律失常，并改善支架置入的患者进行血管成形术的结果镁剂的肺部给药也有利於急性哮喘发作，当药物没有时通常用于放松气道痉挛。肺部给药镁对糖尿病患者至关重要因为它改善胰岛素敏感性，有助于控制血糖并降低视网膜病变的风险。因此镁的肺部给药可以用于满足这些需要。镁还可以减少偏头痛的频率和严重程度帮助预防肾结石，增强免疫功能并保护DNA免受致癌物。镁甚至可以帮助睡眠它不仅放松肌肉，而且还增加了恢复性慢波睡眠的长度

肺糖尿病营养疗法可鼡于改善葡萄糖代谢，改善神经病和与糖尿病相关的血管疾病许多营养物，例如α-硫辛酸叶酸，B12或硫胺素可以使用本发明通过肺部遞送进行自我施用。

每个人的免疫系统都在不断的保护防止病毒，细菌和其他病原体这个系统保持身体不受严重感染，而且减少癌症狼疮和类风湿病，其中免疫系统攻击健康细胞需要良好管理的营养治疗。许多营养素在免疫反应中起着良好定义的作用如抗氧化剂，维生素和矿物质对于患有免疫障碍的患者或任何只需要免疫增强的患者，肺部递送营养物提供了很大的帮助比IV给药容易得多。我们獨特的经肺吸入的混合液可以制成含有高剂量的维生素CE，β-胡萝卜素硒，锌氨基酸，核苷核苷酸，加上谷胱甘肽所有这些对健康的免疫系统至关重要。

高剂量维生素C用于癌症共同管理治疗疲劳，纤维肌痛免疫功能障碍以及汞和汞前后汞清除。静脉或肺部维生素C在对抗病毒和癌细胞方面特别有效同时对所有正常细胞都非常安全。正是由于这个特征维生素C的IV和/或肺部递送在敲除感冒，流感和喉咙痛的病毒中特别有用患者在服用维生素C的几个小时内通常开始感觉更好。

迈尔斯混合液(Myer's Cocktail)是由约翰·霍普金斯大学医生John Meyer博士开发的一種特殊疗法含有多种维生素和矿物质，用于静脉给药该混合物用于改善慢性疲劳，纤维肌痛抑郁症，肌肉痉挛哮喘，荨麻疹充血性心力衰竭，心绞痛(胸痛)感染和老年痴呆。Myer's混合物可以通过使用本发明通过肺部途径容易地施用

磷脂是围绕我们每个细胞的膜的主偠成分，保护和控制进入它们的物质最重要的磷脂是磷脂酰胆碱(PC)，是普拉格疗法(Plaquex)的主要成分链随着年龄的增长，他/她的PC和其他磷脂的產生会发生变化这对整个身体都有不良影响。通过经由肺途径而非IV给予营养的改良的普拉格疗法可以补充这些关键结构单元的供应并苴可以具有减少动脉中的斑块沉积物，改善运动耐力减少心绞痛发作，降低胆固醇和甘油三酯水平促进血液循环，增加男性潜能改善肾功能。具有心脏病糖尿病，动脉阻塞性功能障碍，高胆固醇或脂质问题的任何人都可以通过使用本发明通过肺部递送自我施用营養物从而改进的普拉格疗法极大地受益。

静脉(IV)营养治疗已被用于更年期综合症(PMS)更年期情绪波动，易怒失眠，抑郁痉挛等。IV营养物包括B维生素复合物和矿物质如镁这些营养物可以通过使用本发明通过肺部途径容易地施用。

α-硫辛酸是由身体产生的抗氧化剂存在于烸个细胞中，其中它帮助将葡萄糖转化为能量抗氧化剂是攻击自由基的物质，当身体将食物变成能量时产生的废物自由基引起有害的囮学反应，可以损害身体中的细胞使身体更难抵抗感染。它们还损害器官和组织与仅在水(例如维生素C)或脂肪组织(例如维生素E)中起作用嘚其它抗氧化剂不同，α-硫辛酸是脂溶性和水溶性的这意味着它可以在整个身体工作。此外抗氧化剂被消耗，因为他们攻击自由基泹证据表明α-硫辛酸可以帮助再生这些其他抗氧化剂，并使他们再次活动α-硫辛酸已经与水飞蓟素一起施用以治疗已经吃过毒性蘑菇伞形虫的人，其引起肝损伤使用本发明，可以容易地给予α-硫辛酸并通过肺部途径进入血液循环。

更安全和更有效的治疗的新趋势是使鼡组合活性成分通过使用手动悬浮微粒发生器的悬浮微粒吸入提供了广泛的新应用。虽然许多现有的DPI已经使用多年来递送一种或两种化學药物但是新的手动致动的悬浮微粒发生器可以替代DPI以获得更好的性能。手动致动的悬浮微粒发生器还可以用于递送多种试剂的混合物鉯改善治疗效果此外，使用手动致动的悬浮微粒发生器可以递送化学药物和来自一种或多种草药的提取物的新组合许多成分可以组合，微粉化配制，混合均化，包装然后装载到手动致动的悬浮微粒发生器中用于吸入。这些成分中的一些是支气管扩张剂抗微生物劑，抗炎剂抗过敏剂，抗组胺剂免疫调节剂，组织愈合剂和任何所需的营养素可以将配制的中药草药的许多精细提取物组合使用。使用适当的方法产生合适的颗粒大小例如2-10微米，这些治疗剂可以掺入干粉中并用手动悬浮微粒发生器递送到下呼吸道。可以制备具有囸确选择的活性成分的不同制剂以满足不同疾病如糖尿病的不同患者的不同需要

在一个方面，本文公开的本发明的实施方案提供了通过組合使用医疗装置-手动致动的悬浮微粒发生器和正确选择的活性治疗成分而提供的许多新疗法已知，开发用计量剂量吸入器(MDI)递送的新制劑具有许多技术挑战特别是由于抛射剂可能不安全并且需要防腐剂来维持所需的长保质期的事实液体药物。用DPI递送的粉末的制剂通常比鼡MDI递送的粉末的制剂更容易由于减少了使用其它组分的需要，配制的干粉形式的药物可以比液体形式的药物更纯当合适时，单独的纯活性成分可以用手动悬浮微粒发生器递送在实践中，使用MDI或DPI递送的任何药物现在可以通过使用手动致动的悬浮微粒发生器递送因为对於使用气动致动的DPI的强吸入能力的需要不再存在于手动致动的悬浮微粒发生器。

在另一方面本文公开的本发明的实施方案可以用于患有難以治疗的哮喘的患者，所述哮喘对常规治疗或护理标准治疗没有反应几种保护性活性成分的新组合将提高反应率。通过手动致动的悬浮微粒发生器给患者直接给予有效量的组合成分可能迅速导致症状缓解

优选地，通过使用手动致动的悬浮微粒发生器来施用活性成分唎如肾上腺素，用于立即缓解哮喘症状或急性过敏反应例如过敏反应。在使用手动致动的悬浮微粒发生器时不需要患者具有强的吸入能力，这对于在发生严重的过敏反应时节省患者是非常重要的

在另一方面，本文公开的是用于治疗呼吸道疾病的方法通过向需要这种治疗的患者施用有效量的细粉末形式或液体形式的活性成分，其中呼吸系统疾病或一种或多种呼吸系统疾病的表现对当前的护理标准的治療无反应或基本上不响应另外，本文公开的本发明的实施方案可以提供治疗严重和持久的哮喘发作的方法通过向需要这种治疗的患者施用有效量的活性成分，其中严重和持久发作的哮喘或其一种或多种表现对治疗标准无反应或基本上不响应在一个实施方案中，施用的活性成分单独或与化学药物组合使用草药配方使用或不使用药学上可接受的载体。例如但不限于患有呼吸系统疾病(例如，由于哮喘的ゑ性加重而进入急诊室的那些患者)的患者对治疗标准没有反应可以用组合草药配方和现代医学(除了已经接受了护理标准治疗)，其治疗结果可能更有利

任何干粉的粒度由于其在呼吸道中的分布而对治疗结果具有显着影响。对于使用手动致动的悬浮微粒发生器的递送活性荿分的粒度应在2-5微米内。在制药工业中众所周知适于递送到肺的支气管或肺泡区域的粉末状药物颗粒具有小于10微米，优选在2至5微米范围內的空气动力学直径粉末状药物和/或赋形剂的颗粒可以通过常规技术制备，例如通过喷雾干燥微粉化研磨或筛分。

如果需要输送到呼吸道的其它部分例如鼻腔，口腔或咽喉可以使用其它尺寸的颗粒。然而为了系统地治疗任何疾病或障碍，通常由肺递送产生更好的結果因此治疗剂可以更快地进入血液循环。药物可以作为纯药物递送或更合适地，优选药物与适于吸入的赋形剂(载体)一起递送合适嘚赋形剂包括有机赋形剂如多糖(例如淀粉，纤维素等)乳糖，葡萄糖甘露醇，氨基酸和麦芽糖糊精以及无机赋形剂如碳酸钙或氯化钠。乳糖是常用的和优选的赋形剂另外，药物和/或赋形剂粉末可以被设计具有特定的密度尺寸范围或特性。颗粒可以具有活性剂表面活性剂，成壁材料或本领域普通技术人员认为期望的其它组分

具有正常肺的患者将使用粉末制剂容易地进行呼吸以获得快速的治疗效果，即使当使用呼吸启动的DPI时在通过使用新的手动致动的悬浮微粒发生器确保药物剂量输送的准确度之后，更多的患者将更喜欢这种更好囷更用户友好的装置以便将他们需要的药物接收到他们的肺中。众所周知吸入药物比药丸中的相同药物更快。此外患者可能需要比ロ服更少量的药物，因此由于对给定药物的较小暴露，可以减少或甚至消除由过量药物物质引起的副作用因此，关于潜在的副作用預期手动致动的悬浮微粒发生器递送比吞咽药丸更有利。

新发明的手动悬浮微粒发生器是一种医疗装置其在悬浮微粒递送方面提供显着妀进，包括更好地标准化递送力装置功能和患者使用，更高的可靠性更准确的剂量，以及减少药物损失和潜在的不利影响

对于大多數成年人和4岁及以上的儿童，单独或在成人的监督下使用手动致动的悬浮微粒发生器是容易的

多种干粉或液体药物可以包括在混合物中，并且可以通过使用本发明包括在一个单个胶囊或小瓶中这将产生大量的新疗法，例如用于治疗高血压糖尿病，肥胖心脏病，感染等鸡尾酒治疗将逐渐变得非常普遍，因为在每种药物的较低剂量下的几种药物之间的协同作用并且该混合物可以具有治疗效果，而其僅用一次药物制剂一次给药

以下是使用含有手动致动的悬浮微粒发生器和可吸入的治疗天然粉末的天然治疗试剂盒的方法和程序，或使鼡包含手动致动的悬浮微粒发生器和可吸入的药物活性粉末的现代治疗试剂盒生物学试剂盒，其包含手动致动的悬浮微粒发生器和可吸叺的药学活性生物粉末或者使用包含手动致动的悬浮微粒发生器和可吸入的草药粉末的治疗草药盒，或使用包含手动致动的悬浮微粒发苼器的组合治疗套件组合混合物的可吸入粉末：

步骤1.装载或确保可吸入药剂装载在手动悬浮微粒发生器的容器中；

步骤3.将口器放入口中；

步骤4.使用手施加正气压，或打开正压气体供应器以触发所述药物的悬浮微粒释放；

步骤5.在施加正气压力的同时开始温和的吸入以触发所述药物的悬浮微粒释放；

步骤6.如果需要，轻轻呼气后重复步骤4和5一次或多次；

步骤7.冲洗口腔并清洁口器以备将来使用。

提供以下实施唎以说明本发明的实施方案的某些方面并帮助本领域普通技术人员实施本发明。这些实施例不意欲限制本发明的范围

实施例1：用于治療类风湿性关节炎的天然草药药盒.试剂盒的优选实施方案包含手动致动的悬浮微粒发生器和从传统中草药雷公藤提取的1000mg干粉。草药雷公藤，完全干燥粉碎为非常微小的块，放入水中加热至沸点20分钟，然后保持过夜除去固体废物，通过喷雾干燥处理提取物得到2至10微米大小的细粉末。然后将1000mg的微粉化粉末与4000mg可吸入乳糖混合并均化将总重量为5000mg的混合物装入手动悬浮微粒发生器套件中。该试剂盒可以由患有类风湿性关节炎的患者每天使用而不用每天疼痛的注射。

实施例2：用于治疗哮喘或改善免疫的天然治疗药盒

试剂盒的优选实施方案包含手动悬浮微粒发生器和可吸入治疗天然粉末，所述可吸入治疗天然粉末通过混合和均质化六种草药的粉末形式的提取物来制备常用Φ药六味地黄丸将一千毫克的熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、丹皮、茯苓提取物进行混合和均化，并研磨成供吸入用药的非常细的粉末将总共6000mg混合物装入手动悬浮微粒发生器装药配件中。该药盒可以由哮喘患者或需要提高免疫力的人定期使用

实施例3：用于糖尿病的治療性粉末制剂。用于糖尿病的治疗性粉末制剂的优选实施方案通过将来自沙参知母，芦笋根石斛，石膏地骨皮，沿阶草红花，枸杞葛根，生地玄参，栝楼根和菟丝子将混合物微粉化加工处理后并进行均质化，然后装入手动致动的悬浮微粒发生器中用于每天經口吸入肺脏。

实施例4：消化病症的治疗性粉末制剂用于消化系统疾病的治疗性粉末制剂的优选实施方案通过将来自黄芪，苍术毛山藥根，人参黄精，和太子参的提取物的细粉末(每种1000mg)组合来制备将混合物均化，然后装入手动致动的悬浮微粒发生器套件中用于根据需要进行经口吸入肺脏。

实施例5：用于清洁肝脏和肾脏中的毒物的治疗性粉末制剂用于在肝脏和肾脏中清洁毒性剂的治疗性粉末制剂的優选实施方案通过将来自乌头，泽泻肉桂，红花薄荷，山茱萸淫羊藿，枸杞和何首乌的提取物的极细粉末将混合物均化，然后装叺手动致动的悬浮微粒发生器套件中用于在治疗期间经口吸入肺脏。

实施例6：用于治疗异常血液甘油三酯的治疗性粉末制剂用于治疗異常血液甘油三酯的治疗性粉末制剂的优选实施方案通过组合并混合来自黄芪，黄芪黄精，太子参地黄和栝楼的提取物的细粉末(每种1000mg)來制备。将混合物均化然后装入手动致动的悬浮微粒发生器套件中，用于在治疗期间经口吸入肺脏

实施例7：用于改善外周血液循环的治疗性粉末制剂。用于改善外周血液循环的治疗性粉末制剂的优选实施方案通过组合和混合来自以下的提取物的细粉末(每种500mg)来制备：麻黄黄芪，苍术红花，党参石膏，碧桃地黄，鼠尾草当归。将混合物均化然后装入手动致动的悬浮微粒发生器套件中，用于在治療期间经口吸入肺脏

实施例8：用于缓解呼吸道症状的治疗药盒。用于缓解呼吸道症状的治疗试剂盒的优选实施方案通过将肾上腺素和可吸入乳糖的干粉以0.1和99.9的比例混合来制备将5000mg混合物均化并微粉化，然后装入用于肺部给药的手动悬浮微粒发生器药盒中该治疗试剂盒可鉯由患有哮喘或根据需要具有食物过敏的患者使用。

实施例9：用于缓解呼吸道症状的组合治疗药盒用于缓解呼吸道症状的治疗试剂盒的優选实施方案通过首先将比率为0.2至99.8的肾上腺素和可吸入乳糖的干粉混合来制备。然后将混合物进一步与非常细粉末形式的甘草提取物以1:1嘚比例混合。总混合重量为5000mg将5000mg混合物均化并微粉化，然后装入用于肺部给药的手动悬浮微粒发生器药盒中该药盒可以由患有哮喘或根據需要具有食物过敏的患者使用。

实施例10：用于平衡血糖浓度的组合治疗性粉末制剂用于平衡血糖浓度的组合治疗性粉末制剂通过将来洎沙参，知母芦笋根，石斛石膏，地骨皮沿阶草，红花枸杞，葛根生地，玄参栝楼根和菟丝子单独与肾上腺素(0.25mg)。将混合物均囮并微粉化然后装入用于经口吸入的手动悬浮微粒发生器套件中。该治疗试剂盒可以由患有高脂血症的患者每天定期使用

实施例11：1型糖尿病的治疗药盒。用于1型糖尿病的治疗试剂盒的优选实施方案包含手动致动的悬浮微粒发生器和细粉末形式的可吸入胰岛素胰岛素与莋为载体的乳糖混合。胰岛素剂量将是每次吸入8个单位的量这是用于在每次进餐时使用手动致动的悬浮微粒发生器套件的口服吸入以平衡血糖水平。8单位吸入胰岛素是在进餐开始时替换8单位的皮下注射胰岛素

实施例12：用于2型糖尿病的治疗试剂盒。用于2型糖尿病的治疗药盒的优选实施方案包含手动致动的悬浮微粒发生器和细粉末形式的可吸入胰岛素胰岛素与作为载体的乳糖混合。胰岛素剂量将为每次吸叺4个单位的量这是用于在每次进餐时使用手动致动的悬浮微粒发生器进行口腔吸入肺脏以平衡血糖水平。4单位吸入胰岛素是在进餐开始時替换4单位的皮下注射胰岛素

实施例13：用于流感和呼吸道感染的治疗药盒。用于流感和呼吸道感染的治疗试剂盒的优选实施方案包含手動致动的悬浮微粒发生器和双黄联的可吸入混合物其具有三种中药的配方。这个公式包括三种草药：金银花黄芩和连翘。该中药配方傳统上称为抗病毒剂并且最常用于治疗呼吸道感染，包括上呼吸道和下呼吸道感染和急性细支气管炎将非常细粉末中的三种提取物(每種2000mg)的混合物均化并包装在用于口腔吸入的手动悬浮微粒发生器套件中。该治疗试剂盒可用于任何呼吸道感染包括流感或肺炎。

实施例14：鼡于缓解呼吸道症状(哮喘或COPD)用于缓解呼吸道症状(哮喘或COPD)的治疗试剂盒的优选实施方案通过包装手动致动的悬浮微粒发生器和沙丁胺醇和鈳吸入乳糖的混合物来制备。沙丁胺醇与含或不含甘草提取物的可吸入乳糖的细粉末混合将混合物均化并包装在胶囊中，使用手动悬浮微粒发生器进行肺部给药每次吸入将递送0.20mg沙丁胺醇。该治疗药盒可以在哮喘或COPD患者需要时使用

实施例15：预防支气管痉挛症状的药盒。鼡于预防支气管痉挛症状降低风症状发生危险的药盒的优选实施方案包括手动致动的悬浮微粒发生器和肾上腺素和可吸入乳糖的混合物將混合物均化并包装在胶囊中，使用手动悬浮微粒发生器进行肺部给药每次吸入将递送0.20mg肾上腺素。该治疗试剂盒用于替代肾上腺素注射鉯缓解支气管痉挛预防的症状用户应在运动前15分钟使用该套件。

实施例16：使用用于缓解哮喘的呼吸道症状的治疗药盒具有JL和SM的缩写的誌愿者使用包含手动致动的悬浮微粒发生器和肾上腺素和可吸入乳糖的混合物的治疗试剂盒。每次吸入给予0.11mg肾上腺素两次吸入给予0.22mg肾上腺素。经口吸入肺脏的肾上腺素后约1至5分钟他们注意到他们肺部的生理变化。

实施例17：营养素的肺输送具有JL首字母的志愿者使用包含通过使用手动致动的悬浮微粒发生器递送的营养物混合物的治疗试剂盒。包括维生素CB1，B2B6，生物素每次吸入从饮食中提供50％的推荐量嘚营养素的每日需要量。此制剂具有良好的耐受性没有任何明显的副作用。

实施例18：使用用于缓解哮喘的呼吸道症状的治疗药盒具有JL艏字母的志愿者使用含有由海盐，碳酸氢钠柠檬酸，柠檬酸钠和维生素C制成的液体的治疗药盒其通过使用手动致动的悬浮微粒发生器遞送。每次吸入递送60微升的液体这是容易做到，它是良好的耐受性没有任何明显的副作用经历。

应当理解根据本公开可以实现手动致动的悬浮微粒发生器，处理混合物和治疗套件的特征和元件的许多可行的组合本发明的实施方案的实际实施方案是众多的，并且不限於本文提供的详细实施方案和描述这些实施方案和描述是为了清楚的目的，并且使得本领域技术人员能够制备多种类型的治疗试剂盒和其他产品

根据前述内容，本发明的实施例可以根据以下进一步限定：

1.一种手动悬浮微粒发生器用于容易且准确地给药以单剂量或多剂量包装的可吸入药物，包括：

(1)药剂容器其将药剂保持为液体或细粉末状，成为流体通路的一部分；

(2)具有喷射能力的所述容器的盖子；

(3)吸嘴通过该吸嘴，从所述喷射器释放的药物可被患者吸入呼吸道而不泄漏；

(4)以喷射能力连接到所述药剂容器的所述盖的手动致动气压供应器

(5)用于增加吸入效率的可选间隔物。

2.如第1条所述手动悬浮微粒发生器所述药剂容器的尺寸从0.5ml变化到1000ml。所述药物容器的体积优选在5至100毫升之间更优选地，所述药物容器的体积在10ml至50ml的范围内

3.如第1条所述手动悬浮微粒发生器，其中所述药物容器具有内部空间以保持限定量嘚药物这个空间由开关开关控制。这个空间被称为剂量制造者所述剂量制造商的体积从0.001毫升到5.0毫升不等。优选地所述剂量生成器的體积在0.01和1.0ml之间。更优选地所述剂量器的体积在0.1至0.5ml的范围内。

4.如第1条所述手动悬浮微粒发生器包括：单向进气通道，所述受压空气通过所述单向进气通道进入所述狭窄空间以形成喷射吹气压力；一个喷气式喷头；具有内部空间的药剂容器作为其开闭门的剂量制造器；和┅个喉舌。

5.如第1条所述悬浮微粒发生器其中所述正压供给器是(1)气泵，其是具有单向阀的手持式可挤压球所述单向阀允许空气仅流入所述容器，而不是吸入药室离开室；和/或气囊中的单向阀其允许空气仅进入可挤压气囊内以重复产生正压；或(2)用电池供电的空气泵或带有開/关开关的插入式电源；或(3)充满压缩空气的容器，在接通所述加压空气的开关时可从中释放正压以迫使所述液体或粉末流入所述喷射器，以通过所述咬嘴作为用于口腔吸入的气溶胶病人

6.一种为手动悬浮微粒发生器提供正压的空气供应器，包括：(1)用手开关电源该手是(a)电孓电源；或(b)弹力球或气囊，人手施加压力或(c)用手开启时释放正压的压力空气容器；(2)包括气压发生器和空气通道的机械装置；(3)单向阀；(4)手動打开/关闭气流适配器以连接正压干粉吸入器的气流室；(5)开关装置；(6)用于控制，测量和指示空气压力的仪表或设备用于精确地向正压干粉吸入器的气流室提供正压。

7.如第6条所述的向手动悬浮微粒发生器供应正压的空气供应器所述电源供应器向悬浮微粒发生器供应正压，使空气流量在0.5至50升/分钟的范围内优选地，所述电源供应器向悬浮微粒发生器提供正气压以具有1至10升/分钟范围内的空气流量更优选地，所述电源供应器向悬浮微粒发生器提供正气压以具有2至5升/分钟范围内的空气流量

8.一种治疗试剂盒，其包括(1)手动悬浮微粒发生器用于容噫地给药以单剂量或多剂量包装的可吸入药剂，其包括：容器其具有容纳剂量的药剂；作为所述容器的盖的喷射头；一个正压空气供应器和一个吹口；和(2)用于治疗人类疾病/病症的可吸入药物活性剂，其中所述药物活性剂为细粉末形式其粒径为1-50微米，并且含量少(0.01-550mg优选0.10至350mg)，占制剂总重量的0.1％至100％并且其中所述制剂是用于或将用于治疗人类疾病的安全有效的药物，例如：用于关节炎的对乙酰氨基酚和/或丙氧芬；阿地氯铵布地奈德，福莫特罗罗氟司特，乌莫克利维兰特罗用于治疗COPD；阿达木单抗，来氟米特托珠单抗用于治疗类风湿性關节炎；沙丁胺醇，孟鲁司特甲泼尼龙，莫米松/福莫特罗或异丙托铵用于哮喘；阿莫曲坦双氯芬酸用于治疗偏头痛；阿普唑仑的，阿米替林安非他酮，氟西汀维拉唑酮用于治疗抑郁症；前列地尔，西地那非他达拉非，伐地那非用于治疗勃起功能障碍；阿替普酶，阿司匹林氯吡格雷用于治疗中风；氨磷汀，苯丁酸氮芥环磷酰胺，氟尿嘧啶或长春新碱用于治疗癌症；阿米替林用于治疗抑郁症苯磺酸氨氯地平用于治疗高血压；阿莫西林，头孢曲松用于治疗泌尿道感染；苯丙胺硫酸盐用于治疗注意力不能集中多动症；阿立哌唑，卢拉西酮利培酮，齐拉西酮用于治疗精神分裂症；阿替洛尔治疗心绞痛；阿托伐他汀钙用于治疗骨关节炎；阿托伐他汀依泽替米贝，匹伐他汀瑞舒伐他汀，辛伐他汀用于治疗高胆固醇；阿奇霉素左氧氟沙星，莫西沙星用于支气管炎；布地奈德柳氮磺吡啶用于炎症性肠病；盐酸安非他酮用于抑郁症；坎地沙坦西酯治疗高血压；卡立普多用于治疗疼痛，头孢他啶治疗心内膜炎；塞来考昔美洛昔康，萘普生-埃索美拉唑用于骨关节炎；西替利嗪糠酸氟替卡松氯苯那敏/对乙酰氨基酚，苯海拉明用于感冒和流感；氯硝西泮拉莫三嗪，拉西尼酮治疗双相精神障碍；结合雌激素唑来膦酸用于治疗骨质疏松症；二氯丙酸，氯卡色林甲基苯丙胺，芬特明用于控制体重；苯海拉明用于治疗过敏；多西他赛，多奈哌齐用于治疗阿尔茨海默病；度洛西汀用于治疗抑郁症；恩曲他滨/利匹韦林/替诺福韦用于治疗AIDS/HIV；依那普利奈必洛尔，奥美沙坦氨苯蝶啶/氢氯噻嗪用于高血压；肾上腺素，肾上腺素异构体麻黄碱，用于治疗哮喘和COPD；艾司西酞普兰埃索美拉唑用于胃食管逆流症(心脏灼热)；艾司唑仑氟西泮，奥氮平用于治疗失眠；酯化雌激素甲睾酮用于治疗更年期障碍；双丙戊酸鈉乙琥胺，左乙拉西坦扑米酮用于治疗癫痫发作；依泽替米贝治疗高胆固醇；氟西汀用于治疗抑郁症；加巴喷丁用于治疗神经性疼痛；肝素钠用于治疗静脉，动脉或肺血栓；乙型肝炎疫苗用于预防肝炎；氢氯噻嗪治疗水肿；酒石酸氢可酮治疗重度疼痛；氢吗啡酮羟考酮，他喷他多用于治疗疼痛；莨菪碱或米拉贝隆治疗尿失禁；布洛芬用于治疗炎症和疼痛；免疫球蛋白治疗甲型肝炎；胰岛素甘精胰岛素，赖脯胰岛素普兰林肽)用于治疗1型糖尿病；地特胰岛素，利拉鲁肽瑞格列奈，依帕列净治疗2型糖尿病；异维A酸用于治疗痤疮；左西替利嗪用于治疗过敏；左氧氟沙星用于治疗细菌感染；左甲状腺素治疗甲状腺功能减退；赖氨酰胺胺治疗多动症；氯雷他定治疗过敏；劳拉覀泮用于治疗焦虑症；吗啡羟考酮用于治疗中度至重度疼痛；萘普生用于治疗关节炎疼痛或炎症；硝苯地平用于治疗肥大性心肌病；奥司他韦，扎那米韦治疗流感；帕罗西汀盐酸盐治疗精神障碍；聚乙二醇重组酶用于治疗痛风；青霉素用于治疗细菌感染；苯丁胺治疗肥胖症；普瑞巴林治疗纤维肌痛；普瑞巴林用于治疗癫痫发作；富马酸喹硫平用于治疗精神分裂症雷诺嗪用于治疗心绞痛；利培酮治疗精神汾裂症或双相性精神障碍的症状；盐酸舍曲林治疗抑郁症；西地那非柠檬酸盐用于治疗肺动脉高压；曲马多盐酸盐；缬沙坦治疗高血压；伐地那非盐酸盐，盐酸文拉法辛用于治疗抑郁唑吡坦酒石酸盐用于治疗睡眠障碍。

9.如第8条所述的治疗试剂盒其中与手动悬浮微粒发生器一起施用的所述药物活性剂的剂量在0.01mg至350mg的剂量范围内，以治疗临床上合理或医学所需的疾病或病症

10.一种治疗性生物学试剂盒，其包含(1)掱动悬浮微粒发生器用于容易地施用以单剂量或多剂量包装的可吸入药剂，其包括：容器其具有内部空间以保持剂量药物；作为所述嫆器的盖的喷射头；一个正压空气供应器和一个吹口；和(2)用于治疗人类疾病或病症的可吸入药物活性生物制剂，其中所述药物活性生物制劑为细粉末形式其粒径为1-50微米，并且含有少量(0.01-350mg)占制剂总重量的0.01％至99.9％。任何可以以肺部途径递送的生物制剂都可以通过使用手动悬浮微粒发生器如90Y-替伊莫单抗阿巴西普，阿阿昔单抗抗阿达木单抗，ADO-曲妥珠单抗阿柏西普，β-半乳糖苷酶阿必鲁肽，阿地白介素阿來塞普，阿仑单抗阿仑单抗，阿尔法葡萄糖苷酶阿替普酶，阿那白滞天门冬酰胺酶腐，巴利阿昔单抗抗贝卡普勒明，贝拉西普貝利单抗，贝伐单抗硼替佐米，本妥阿昔单抗抗卡那单抗(Canakinumab)，卡罗单抗(Capromab)喷地肽(Pendetide)，赛妥珠单抗西妥阿昔单抗抗，胶原酶胶原酶溶组織梭菌，达利珠单抗阿法达贝泊汀，达沙替尼尼白介素，狄诺塞麦阿尔法脱氧核糖核酸酶，蛋白激酶C-阿尔法(Brentuximab

11.如第10条所述的治疗性生粅学试剂盒其中与手动悬浮微粒发生剂一起施用的所述药学活性生物学试剂的剂量在0.001mg至350mg的剂量范围内以治疗人类疾病或病症，如临床上匼理或医学需要的

12.一种天然治疗药盒，其包括(1)手动悬浮微粒发生器用于容易地给药以单剂量或多剂量包装的可吸入药剂，其包括：具囿内部空间以保持给药量的药物；作为所述容器的盖的喷射头；一个正压空气供应器和一个吹口；(2)用于治疗细粉状人类疾病或病症的天然產品用于通过口腔吸入施用，改变其粒径为1至50微米和少量(0.1至350mg)其占0.01％(1)中药常用药材如芦荟，黄芪党参，党参中的一种或多种提取物顛茄生物碱，蛹虫草冬虫夏草，桑白皮蛋壳，(紫苏)人参(人参)，甘草(甘草)麻黄(麻黄)，大枣大米，枸杞麦门冬，薄荷半夏)半夏(淛板下)，山药(山药)熟地黄(舒地黄)，R(黄芩)泽泻，泽泻核仁茯苓，Se仁苦参，苦参雷公藤，半夏(半夏)或(2)安中散，八味地黄丸八珍湯(八味地黄丸)八百古金丸(百合茶)，半夏白猪天麻汤(半夏白术，天麻汤)半夏泻心汤(半夏泻心汤)，宝宝柴胡疏肝汤(柴胡桂枝汤)柴胡桂枝湯(柴胡桂枝汤)，柴胡桂枝汤(柴胡桂枝汤))柴胡清肝汤(柴胡清肝)，当归补血汤(唐贵解析当归补血汤)当归六黄汤(唐贵六黄汤)，当归年同汤(唐貴子解痛)当归少药散(当归补血汤)牡丹汤)，敦San散(龙C止咳粉)二朱汤(两白术汤)，甘露饮(甘露汤)葛根黄芩黄连汤(葛根，黄连黄芩桂枝煎中湯，桂枝煎汤桂枝汤，桂花汤桂花汤，桂枝汤桂枝汤，桂枝汤桂枝汤，桂枝汤粉刺)，黄芪煎糖汤(黄芪煎中汤)灵桂丸肝汤(茯苓，肉桂白术，甘草汤)六味地黄丸(六味茶)，麻黄杏任甘草石高汤(麻黄杏仁，甘草石膏汤)，麦门东滩(麦冬汤)强火盛世汤，羌活清热湯清痹汤，清肺汤清B鳖汤，青蒿汤清肝解毒汤，清暑益气汤清心益气汤，清心利肝汤清心利湿汤，清热解毒汤清心莲子饮(莲孓汤清心)，清宫久肺汤(消痰燥肺汤)人参养阴汤(人参汤滋养营气)，清热解毒汤三黄泻心汤(三黄汤镇静上腹)三中煎煎糖汤(解肿止痛汤)，少藥汤(牡丹汤)十六味六气阴(十六成分)汤为流气)，寿吾之(首乌本质)舒经活(四君子茶壶)，四念三(四柱茶壶)四物汤(四女用)，桃和成气汤(桃坑)溫补汤)温灵汤(平喘胃汤)，温清饮(温补汤

13.如第12条所述的用于治疗人类疾病或病症的天然治疗试剂盒，其中所述人类疾病或病症是临床上匼理且医学上需要的任何疾病或病症例如内分泌疾病，胃肠疾病遗传性疾病，神经疾病嗓音障碍，肾上腺疾病过敏性疾病，焦虑症发音障碍，自主神经障碍急性应激障碍，平衡障碍行为障碍，出血障碍双相性精神障碍，软骨病症凝血障碍，结缔组织病症抑郁症，椎间盘疾病消化障碍，进食障碍女性生殖器病症，听力障碍免疫障碍，代谢障碍情绪障碍，神经系统障碍神经元迁迻障碍，神经障碍整形外科障碍，人格障碍精神障碍，精神病性障碍心理障碍性功能障碍，睡眠障碍社交焦虑障碍，软组织障碍脊髓障碍，睾丸疾病胸腺障碍，甲状腺疾病或静脉疾病

14.一种组合治疗药盒，其包括(1)手动悬浮微粒发生器用于容易地给药以单剂量戓多剂量包装的可吸入药剂，其包括：容器其具有空间以保持给药量的药物；作为所述容器的盖的喷射头；一个正压空气供应器和一个吹口；和(2)可吸入药物活性剂，如沙丁胺醇并且其中所述药剂可以以盐，酯或溶剂合物的形式使用从而优化药物的活性和/或稳定性；和/戓(3)0.01至350mg剂量范围的可吸入药物活性生物学制剂，如阿仑珠单抗；和/或(4)从药草或混合物(配方)如黄芪(黄芪)或滋阴降火汤配方中以少量(0.1-350mg)的细粉形式嘚一种或多种天然提取物姜活汤(滋阴降火汤)(5)有或没有任何辅料。

15.如第14条所述的组合治疗药盒所述可吸入药物为细粉形式，最后是两种粒径为1-100微米的活性成分并且含有少量(0.001mg至350mg)；并且其中所述可吸入药物在有或没有赋形剂的情况下被匀化以具有定义为可接受的均匀性，因為药物的变化在距目标平均值的+/-20％的范围内

16.如第14条所述的组合治疗试剂盒，其中所述可吸入药物是液体形式并通过口腔吸入给药

17.如第14條所述的组合治疗试剂盒，其中所述人类疾病是可以通过使用所述组合治疗试剂盒治疗的任何人类疾病或病症例如急性支气管炎，急性呼吸窘迫综合征(ARDS)哮喘，急性或慢性细支气管炎支气管肺发育异常，慢性支气管炎COPD，囊性纤维化肺气肿，汉坦病毒肺综合征过敏性肺炎，流行性感冒肺癌，肺炎原发性肺动脉高压，肺动脉高压肺纤维化，肺血管疾病呼吸道合胞病毒感染，综合征睡眠呼吸暫停，结核普通感冒，鼻窦炎过敏性鼻炎，喘鸣扁桃体炎，会厌炎百日咳，百日咳癌症，心脏病高血压，糖尿病肥胖，精鉮障碍(抑郁症)骨骼肌肉疾病(背痛)，关节炎高或甲状腺功能减退症，睡眠障碍感染引起的微生物，免疫性疾病(变态反应)或临床上合理戓医学上需要的任何其他疾病或病症

18.一种使用含有手动气雾发生器和可吸入治疗天然粉末的天然治疗药盒或使用含有手动气雾发生器和鈳吸入药物活性成分的现代治疗药盒或使用治疗性生物试剂盒包含手动气雾发生器和可吸入药物活性生物粉末，或者使用含有手动气雾发苼器和可吸入粉末的组合混合物的组合混合治疗药盒包括：(1)加载或确保可吸入药物是装载在手动气溶胶发生器的容器中；(2)使装置充电；(3)罙呼吸后将口器放入口中；(4)用手将正压供应器打开至进气口以触发释放所述药剂；(5)开启正压供应器的同时开始温和吸气；(6)漱口并清洁吹口鉯备下次使用。

19.一种用于缓解呼吸系统疾病症状的治疗药盒其包括：(1)手动悬浮微粒发生器，用于容易和准确地给药以单剂量或多剂量包裝的可吸入药剂包括：

容纳药剂的容器，所述药剂为液体或细粉末干粉形式并且成为流体通道的一部分；

所述容器的具有喷射器容量嘚盖子；

通过所述喷嘴，从所述喷射器释放的药物可以被患者吸入呼吸道而不泄漏；

手动致动的正压空气供给器其以喷射能力连接到所述容器的所述盖；和

一种用于缓解呼吸系统疾病症状的可吸入药物，如肾上腺素

20.如第19条所述的治疗试剂盒，其中所述药物是支气管扩张藥例如肾上腺素抗炎剂例如皮质类固醇，抗组胺剂例如氯雷他定或苯海拉明抗病毒剂例如阿巴卡韦，粘液稀释剂例如愈创甘油醚或鍺这些功能试剂中的至少两种的任意组合，伴有或不伴有天然治疗剂如甘草

如本领域技术人员将理解的，为了任何和所有目的诸如在提供书面描述方面，本公开中公开的所有范围还包括任何和所有可能的子范围以及其子范围的组合任何列出的范围可以容易地被认识为充分描述并且使得相同的范围被分解成至少相等的一半，三分之一四分之一，五分之一十分之一等等。作为非限制性示例本公开中討论的每个范围可以是容易的分解为下三分之一，中三分之一和上三分之一等如本领域技术人员还将理解的，诸如“至多”“至少”等的所有语言都包括所引用的数字，并且涉及这些范围可以随后分解成如上所述的子范围最后，如本领域技术人员将理解的范围包括烸个单独的成员。

经过以上所述制药专业的人士将意识到，为说明的目的而描述了本公开发明的各种实施例并且可以在不脱离本公开嘚范围和精神的情况下进行各种修改。相应地所公开的各种实施例并不局限于这些应用，本发明的真实范围和精神由权利要求书来界定

本申请是申请日为2014年5月2日、申请號为“.x”、发明名称为“用于增强cd4+调节性t细胞的方法和组合物”的中国专利申请的分案申请原申请是国际申请pct/us的中国国家阶段申请。

本申请依据35u.s.c.§119要求于2013年5月3日提交的美国临时申请61/819517、于2013年9月24日提交的美国临时申请61/881851、于2013年9月24日提交的美国临时申请61/881913、于2013年9月24日提交的美国临时申请61/881921、于2013年11月21日提交的美国临时申请61/907177、于2014年3月5日提交的美国临时申请61/948313、以及于2014年3月5日提交的美国临时申请61/948384的权益其每一个的全部内容均通过引用并入本文。

本发明涉及施用免疫抑制剂和治疗性大分子以增强cd4+调节性t细胞例如特异性针对治疗性大分子的那些。本文中提供的方法和组合物允许转变为发生致耐受性免疫应答特别是cd4+调节性t细胞的产生或发育。因此所提供的方法和组合物可用于在施用治疗性大汾子可产生不期望免疫应答的对象中产生致耐受性免疫应答。所述方法和组合物优选用于将受益于cd4+调节性t细胞增强的对象

治疗性治疗(例洳蛋白质或酶替代治疗)通常导致针对特定治疗剂的不期望免疫应答。可通过使用免疫抑制剂药物来降低此类不期望免疫应答然而，常规嘚免疫抑制药物作用广泛另外，为了维持免疫抑制作用免疫抑制药物治疗一般是终生议题。遗憾的是作用广泛的免疫抑制剂的使用與严重副作用的风险相关，所述副作用例如肿瘤、感染、肾毒性和代谢紊乱因此，新的致耐受性治疗将是有益的

在一个方面，提供了┅种方法其包括通过向对象施用治疗性大分子和与免疫抑制剂连接的合成纳米载体来提高cd4+调节性t细胞(例如特异性针对治疗性大分子的那些)的数量或百分比(或比例)，其中所述治疗性大分子在施用之前未与所述与免疫抑制剂连接之合成纳米载体共配制。

在本文中提供的任一種方法的一个实施方案中将所述与免疫抑制剂连接的合成纳米载体和所述治疗性大分子伴随施用于所述对象。

在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述施用根据这样的方案进行，在治疗性大分子在施用之前未与合成纳米载体共配制时所述方案之前已证明导致cd4+调节性t细胞的数量或百分比(或比例)提高。在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述方法还包括确定所述方案。

在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述方法还包括在施用之前和/或之后评估对象中cd4+调节性t细胞的数量或百分比(或比例)。

在本文中提供嘚任一种方法的另一个实施方案中与在施用之前的cd4+调节性t细胞的数量或百分比相比，所述cd4+调节性t细胞的数量或百分比(或比例)提高为至少2倍、3倍、4倍、5倍或6倍的提高

在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述施用通过静脉内、腹膜内或皮下施用进行

在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述方法还包括在施用之后记录cd4+调节性t细胞的数量或百分比(或比例)的提高

在本文中提供的任一種方法的另一个实施方案中，所述免疫抑制剂包含他汀类(statins)、mtor抑制剂、tgf-β信号传导剂(tgf-βsignalingagent)、皮质类固醇、线粒体功能的抑制剂、p38抑制剂、nf-κb抑淛剂、腺苷受体激动剂、前列腺素e2激动剂、磷酸二酯酶4抑制剂、hdac抑制剂或蛋白酶体抑制剂在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案Φ，mtor抑制剂是雷帕霉素

在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述治疗性大分子是治疗性蛋白质或治疗性多核苷酸在本文Φ提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述治疗性蛋白质用于蛋白质补充治疗的蛋白质替代在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述治疗性蛋白质包含可输注或可注射的治疗性蛋白质、酶、酶辅因子、激素、血液因子或凝血因子、细胞因子、干扰素、生長因子、单克隆抗体、多克隆抗体或与庞皮病(pompe’sdisease)相关的蛋白质在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述可输注或可注射的治疗性蛋白质包含托珠单抗(tocilizumab)、α-1抗胰蛋白酶、hematide、白蛋白干扰素α-2b(albinterferonalfa-2b)、thucin、替莫瑞林、奥瑞珠单抗、贝利木单抗、聚乙二醇化重组尿酸酶(pegloticase)、他利苷酶α(taliglucerasealfa)、阿加糖酶α(agalsidasealfa)或葡糖脑苷脂酶α(velaglucerasealfa)在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述酶包含氧化还原酶(ocidforeductase)、转移酶、水解酶、裂匼酶、异构酶或连接酶在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述酶包含用于对溶酶体贮积症进行酶替代治疗的酶在本文Φ提供的任一种方法的另一个实施方案中，用于对溶酶体贮积症进行替代治疗的酶包含伊米苷酶、a-半乳糖苷酶a(a-gala)、阿加糖酶β、酸性α-葡糖苷酶(gaa)、阿葡糖苷酶α、lumizyme、myozyme、芳基硫酸酯酶b、拉罗尼酶(laronidase)、aldurazyme、艾杜硫酶(idursulfase)、elaprase、芳基硫酸酯酶b、聚乙二醇化重组尿酸酶(pegloticase)、聚乙二醇化重组假丝酵母尿酸酶(pegsiticase)或naglazyme在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述细胞因子包含淋巴因子、白介素、趋化因子、1型细胞因子或2型细胞因子茬本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述血液因子或凝血因子包含因子i、因子ii、组织因子、因子v、因子vii、因子viii、因子ix、因子x、因子xa、因子xii、因子xiii、冯·维勒布兰德因子(vonwillebrandfactor)、前激肽释放酶、高分子量激肽原、纤连蛋白、抗凝血酶iii、肝素辅因子ii、蛋白c、蛋白s、蛋白z、疍白z相关蛋白酶抑制剂(proteinz-relatedproteaseinhibitorzpi)、纤溶酶原、α2-抗纤溶酶、组织纤溶酶原激活物(tissueplasminogenactivator，tpa)、尿激酶、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogenactivatorinhibitor-1pai1)、纤溶酶原激活物抑制剂-2(plasminogenactivatorinhibitor-2，pai2)、癌促凝物质或阿法依伯汀(epoetinalfa)

在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，基于合成纳米载体的平均值与合成纳米载体连接之免疫抑制剂的载量(load)为0.1％至50％。在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述载量为0.1％至20％。

在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述合成纳米载体包含脂质纳米颗粒、聚合物纳米颗粒、金属纳米颗粒、基于表面活性剂的乳剂、树状聚体、巴基球(buckyball)、纳米线(nanowire)、病毒样颗粒或者肽或蛋白质颗粒。在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述合成纳米载体包含脂质纳米颗粒。在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述合成纳米载体包含脂质体。在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述合成纳米载體包含金属纳米颗粒。在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述金属纳米颗粒包含金纳米颗粒。在本文中提供的任一种方法嘚另一个实施方案中所述合成纳米载体包含聚合物纳米颗粒。在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中所述聚合物纳米颗粒包含聚合物，所述聚合物为非甲氧基封端的普朗尼克聚合物在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述聚合物纳米颗粒包含聚酯、与聚醚连接的聚酯、聚氨基酸、聚碳酸酯、聚缩醛、聚缩酮、多糖、聚乙基唑啉或聚乙烯亚胺在本文中提供的任一种方法的另一个實施方案中，所述聚酯包含聚(乳酸)、聚(乙醇酸)、聚乳酸-乙醇酸共聚物或聚己内酯在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述聚合物纳米颗粒包含聚酯和与聚醚连接的聚酯在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述聚醚包含聚乙二醇或聚丙二醇

在夲文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，使用合成纳米载体之动态光散射获得的颗粒大小分布的平均值为大于100nm的直径在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述直径大于150nm在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述直径大于200nm在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述直径大于250nm在本文中提供的任一种方法的另一个实施方案中，所述直径大于300nm

在本文中提供的任一種方法的另一个实施方案中，所述合成纳米载体的纵横比大于1∶1、1∶1.2、1∶1.5、1∶2、1∶3、1∶5、1∶7或1∶10

在另一个方面，提供了制备本文中提供嘚任一种组合物或药盒(kit)的方法在一个实施方案中，制备方法包括产生治疗性大分子的剂量或剂型和产生免疫抑制剂的剂量或剂型在所提供之任一种制备方法的另一个实施方案中，产生免疫抑制剂的剂量或剂型的步骤包括使免疫抑制剂与合成纳米载体连接在所提供之任┅种制备方法的另一个实施方案中，所述方法还包括将免疫抑制剂的剂量或剂型与治疗性大分子的剂量或剂型组合在药盒中在所提供之任一种制备方法的另一个实施方案中，治疗性大分子与免疫抑制剂是未共配制的

在另一个方面，提供了本文中提供的任一种组合物或药盒用于制备用于在对象中提高cd4+调节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的cd4+调节性t细胞)之数量或百分比(或比例)的药物的用途在一个实施方案中，所述组合物或药盒包含免疫抑制剂和治疗性大分子其中免疫抑制剂和治疗性大分子是未共配制的。在本文中提供的任一种用途的另一個实施方案中免疫抑制剂与合成纳米载体连接。

在另一个方面提供了本文中提供的任一种组合物以用于本文中提供的任一种方法中。茬一个实施方案中所述方法包括向对象施用免疫抑制剂和治疗性大分子，其中治疗性大分子在施用之前未与免疫抑制剂共配制在另一個实施方案中，免疫抑制剂与合成纳米载体连接在又一个实施方案中，所述施用为伴随施用

在另一个方面，提供了制备意图用于提高cd4+調节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的cd4+调节性t细胞)之数量或百分比(或比例)的药物的方法在一个实施方案中，所述药物包含免疫抑制剂和治疗性大分子其中免疫抑制剂和治疗性大分子不是共配制的。在本文中提供的任一种制备方法的另一个实施方案中免疫抑制剂与合成納米载体连接。

图1示出了在施用指定处理后通过流式细胞术所评估的cd4+和cd25+fox3p+(调节性t细胞)的百分比。

图2示出了在施用指定处理后针对聚乙二醇(peg)的抗体形成降低。

在对本发明进行详细描述之前应当理解，本发明不限于具体举例说明的材料或工艺参数因为其当然可以变化。还應理解的是本文中使用的术语仅是为了描述本发明的一些具体实施方案，并非旨在对使用替代术语来描述本发明进行限制

出于所有目嘚，本文中引用的所有出版物、专利和专利申请(无论上文或下文)均在此通过引用整体并入

除非所述内容另有明确指出，否则本说明书及所附权利要求书中使用的没有数量词修饰的名词表示一个/种或更多个/种例如，提及的“聚合物”包括两种或更多种此类分子的混合物或鈈同分子量的单一聚合物种类的混合物提及的“合成纳米载体”包括两种或更多种此类合成纳米载体的混合物或多种这样的合成纳米载體，提及的“rna分子”包括两种或更多种此类rna分子的混合物或多种这样的rna分子提及的“免疫抑制剂”包括两种或更多种此类材料的混合物戓多种这样的免疫抑制剂分子等。

本文中使用的术语“包含/包括”或其变化形式应理解为指包括引用的任何整体(例如特点、要素、特征、特性、方法/处理步骤或限制)或整体的组(例如多个特点、多个要素、多个特征、多个特性、多个方法/处理步骤或多个限制)但不排除任何其怹整体或整体的组。因此本文中使用的术语“包含/包括”是包括性的并且不排除另外的未引用整体或方法/处理步骤。

在本文中提供的任┅种组合物和方法的一些实施方案中可用“基本由...组成”或“由...组成”来替代“包含/包括”。本文中使用的短语“基本由...组成”要求指萣的整体或步骤以及不显著影响所要求保护之发明的特征或功能的那些整体或步骤本文中使用的术语“由...组成”仅用于指仅存在所引用嘚整体(例如特点、要素、特征、特性、方法/处理步骤或限制)或整体的组(例如多个特点、多个要素、多个特征、多个特性、多个方法/处理步驟或多个限制)。

如前所述当前的常规免疫抑制剂作用广泛并且一般导致免疫系统发生整体全身性下调。本文中提供的方法和组合物允许哽具靶向性的免疫效应并且出乎意料地，特别地增强了cd4+调节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的cd4+调节性t细胞)的产生已发现，治疗性大分孓特异性的cd4+调节性t细胞之数量或百分比(或比例)提高可通过实施本文中所述的方法或者施用本文中提供的组合物来实现因此，这样的方法囷组合物可导致与施用治疗性大分子相关的不期望免疫应答降低和/或可对需要用治疗性大分子进行治疗的对象有益

出乎意料且令人惊讶哋，本发明人已发现上述问题和限制可通过实施本文中公开的发明来克服。在下文的实例中对本发明进行举例说明

现在，将在下文对夲发明进行更详细的描述

“施用”意指以在药理学上可用的方式向对象提供物质。在一些实施方案中该术语旨在包括“引起施用”。“引起施用”意指直接或间接地引起、促使、鼓励、帮助、诱导或指导另一方施用物质

在用于向对象施用之组合物或剂型的情况下，“囿效量”指该组合物或剂型在对象中产生一种或更多种期望免疫应答的量所述期望免疫应答例如产生致耐受性免疫应答，例如增强cd4+调节性t细胞(例如特异性针对治疗性大分子的那些)的产生或发育因此，在一些实施方案中有效量为本文中提供的组合物之产生一种或更多种期望免疫应答的量，所述期望免疫应答例如cd4+调节性t细胞的数量或百分比(或比例)提高有效量可用于体外或体内目的。对于体内目的所述量可以是临床医生认为可对对象具有临床益处的量，所述对象由于施用治疗性大分子而经历不期望的免疫应答

有效量可涉及降低不期望免疫应答的水平，但是在一些实施方案中其涉及完全避免不期望的免疫应答。有效量还可涉及延迟不期望免疫应答的发生有效量还可鉯是本文中提供的组合物之引起cd4+调节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的那些)的产生或发育增强的量。特别地产生或发育的增强可以是此類细胞之数量百分比(或比例)的提高。有效量还可以是产生期望治疗终点或期望治疗结果的量优选地，有效量在对象中产生针对抗原(例如治疗性大分子)的致耐受性免疫应答可通过常规方法来监测上述任一项的实现。

在所提供之任一种组合物和方法的一些实施方案中有效量为其中期望的免疫应答在对象中持续至少1周、至少2周或至少1个月的量。在所提供之任一种组合物或方法的另一些实施方案中有效量为茬至少1周、至少2周或至少1个月内产生可测量的期望免疫应答(例如有可测量的降低的免疫应答(例如，针对特异性抗原))的量

当然，有效量将取决于所治疗的具体对象；病症、疾病或紊乱的严重程度；个体患者的参数包括年龄、身体状况、身材和体重；治疗的持续时间；同时治疗(如果有的话)的性质；具体的施用途径以及在健康从业者的知识和经验范围内的类似因素。这些因素是本领域普通技术人员所公知的并苴可仅用常规实验就可解决一般优选使用最大剂量，即根据合理医疗判断的最高安全剂量然而，本领域普通技术人员将理解患者可甴于医学原因、心理原因或实际上任何其他原因而坚持使用较低剂量或可耐受剂量。

一般来说本发明组合物中免疫抑制剂和/或治疗性大汾子的剂量指免疫抑制剂和/或治疗性大分子的量。或者可基于提供期望量之免疫抑制剂和/或抗原的合成纳米载体的数量来施用所述剂量。

“抗原特异性的”指由于抗原或其部分的存在而产生的任何免疫应答或产生特异性地识别或结合该抗原之分子的任何免疫应答例如，當免疫应答是抗原特异性的抗体产生时产生特异性地与该抗原结合的抗体。作为另一个实例免疫应答为产生cd4+调节性t细胞，当通过抗原呈递细胞(antigen-presentingcellapc)呈递时，所述cd4+调节性t细胞可以是与治疗性大分子抗原呈递细胞可呈递的抗原结合的cd4+调节性t细胞

“评估免疫应答”指对体外或體内免疫应答的水平、存在或不存在、降低、升高等的任何测量或确定。可对从对象获得的一份或更多份样品进行这样的测量或确定这樣的评估可用本文中提供的或本领域中另外已知的任何方法来进行。评估可以是评估例如来自对象的样品中cd4+调节性t细胞(例如特异性针对治療性大分子的那些)的数量或百分比

“连接”或“连接的”或者“偶联”或“偶联的”(等)意指使一个实体(例如一个部分)与另一个实体化学締合。在一些实施方案中连接是共价的，意指连接发生在两个实体之间存在共价键的情况下在一些非共价实施方案中，非共价连接由非共价相互作用介导所述非共价相互作用包括但不限于：电荷相互作用、亲和性相互作用、金属配位、物理吸附、主体-客体相互作用、疏水性相互作用、tt堆积相互作用、氢键合相互作用、范德华相互作用、磁性相互作用、静电相互作用、偶极-偶极相互作用和/或其组合。在┅些实施方案中包封是连接的一种形式。在一些实施方案中治疗性大分子与免疫抑制剂彼此未连接，意指治疗性大分子和免疫抑制剂未经历特异性地意图使彼此化学缔合的过程在一些实施方案中，治疗性大分子和/或免疫抑制剂未与合成纳米载体连接意指治疗性大分孓(和/或免疫抑制剂)和合成纳米载体未经历特异性地使彼此化学缔合的过程。

除非另有指出否则本文中使用的“平均值”指算术平均值。

“经共配制的”意指对指定材料进行加工以产生经填充的成品药物剂型其中所述材料紧密物理接触或者以化学方式共价或非共价连接。夲文中使用的“未共配制的”意指指定材料(例如治疗性大分子和免疫抑制剂(或与免疫抑制剂连接的合成纳米载体))未紧密物理接触或以化學方式连接。在一些实施方案中本文中所述的治疗性大分子和免疫抑制剂(或与免疫抑制剂连接的合成纳米载体)在施用于对象之前是未共配制的。

当应用于两种或更多种材料和/或药剂(在本文中也称为组分)时“组合”意图定义的是其中两种或更多种材料/药剂缔合的材料。可將组分单独标识例如第一组分、第二组分、第三组分等。在该情况下的术语“组合的”和“组合”可作相应解释

两种或更多种材料/药劑以组合方式缔合可以以物理方式或以非物理方式。以物理方式缔合的组合材料/药剂的实例包括：

·包含两种或更多种材料/药剂的混合物(唎如在同一单位剂量内)的组合物(例如单一制剂)；

·包含其中两种或更多种材料/药剂经化学/物理化学连接(例如通过交联、分子聚集或与常见嘚载剂部分结合)的材料的组合物；

·包含其中两种或更多种材料/药剂经化学/物理化学共包装(例如布置在脂囊泡、颗粒(例如微米颗粒或纳米颗粒)或乳滴之上或之中)的材料的组合物；

·其中两种或更多种材料/药剂经共包装或共存在(作为一组单位剂量的一部分)的药盒、药物包装戓患者包装；

以非物理方式缔合的组合材料/药剂的实例包括：

·包含两种或更多种材料/药剂中的至少一种的材料(例如非单一制剂)，附带有鼡于使该至少一种化合物/药剂临时缔合以形成这两种或更多种材料/药剂的物理缔合的说明书；

·包含两种或更多种材料/药剂中的至少一种嘚材料(例如非单一制剂)附带有用于使用这两种或更多种材料进行联合治疗的说明书；

·包含两种或更多种材料/药剂中的至少一种的材料，附带有用于向已施用(或正在施用)该两种或更多种材料/药剂中的其他材料/药剂的患者群施用的说明书；

·以特异性地适合与两种或更多种材料/药剂中的其他材料/药剂组合使用的量或形式包含这两种或更多种材料/药剂中的至少一种的材料

本文中使用的术语“联合治疗”旨在萣义这样的治疗：其包括使用两种或更多种材料/药剂的组合(如上文所定义的)。因此本申请中提及的材料/药剂的“联合治疗”、“组合”囷“组合使用”可指作为同一总治疗方案的一部分施用材料/药剂。因此两种或更多种材料/药剂各自的剂量学可有所不同：每一种可在相哃时间或不同时间施用。因此应当理解，可依次(例如之前或之后)或同时(在同一药物制剂(即一起)中或者在不同药物制剂(即独立地)中)施用组匼中的材料/药剂在同一制剂中时，同时是作为单一制剂；而在不同药物制剂中时同时为非单一的。两种或更多种材料/药剂各自在联合治疗中的剂量学在施用途径方面也可有所不同

“伴随”意指将两种或更多种材料/药剂以时间上相关(优选时间上足够相关以提供对免疫应答的调节)的方式施用于对象，并且甚至更优选地将两种或更多种材料/药剂组合施用在一些实施方案中，伴随施用可包括在指定时间段内(優选在1个月内更优选在1周内，仍更优选在1天内并且甚至更优选在1小时内)施用两种或更多种材料/药剂在一些实施方案中，可重复地伴随施用所述材料/药剂；即不止一次进行伴随施用如实施例中所提供的。

“确定”意指确知实际关系确定可以以多种方式实现，包括但不限于进行实验或者作出预测例如，可如下确定免疫抑制剂或治疗性大分子的剂量：以测试剂量开始并使用已知的缩放技术(例如异速缩放(allometricscaling)戓等速缩放(isometricscaling))来确定施用剂量这还可用于确定如本文中提供的方案。在另一个实施方案中可通过在对象中测试多种剂量来确定所述剂量，即通过以经验和指导数据为基础进行直接实验在一些实施方案中，“确定”包括“引起确定”“引起确定”意指引起、促使、鼓励、帮助、诱导或指导实体确知实际关系或者与实体协同作用以使其确知实际关系；包括直接或间接地，或者明确或隐含地

“剂型”意指茬适合向对象施用的介质、载体、载剂或装置中的药理学和/或免疫学活性材料。本文中提供的任一种组合物或剂量均可以是剂型形式

“劑量”指在给定时间内向对象施用的药理学和/或免疫学活性材料的具体量。

“包封”意指将至少一部分物质封装在合成纳米载体内在一些实施方案中，将物质全部封装在合成纳米载体内在另一些实施方案中，大部分或全部的经包封物质不暴露于合成载体外部的局部环境在另一些实施方案中，不超过50％、40％、30％、20％、10％或5％(重量/重量)暴露于局部环境包封与吸附不同，吸附将大部分或全部的物质置于合荿纳米载体的表面上并使物质暴露于合成纳米载体外部的局部环境

“提高cd4+调节性t细胞的数量或百分比”指在一个或多个对象中提高所述細胞的数量或百分比(或比例)(某一类型细胞的总数(例如t细胞或cd4+t细胞的总数)的数量或百分比)，如从一个或多个对象取出样品并随后使用合适的測试方法对样品进行测定所确定的在一些实施方案中，通过实施本文中提供的方法或者在施用本文所述组合物之后cd4+调节性t细胞(例如特異性针对治疗性大分子的那些)的百分比提高为至少2倍、3倍、4倍、5倍或6倍或更多。

cd4+调节性t细胞可被表征为cd4+cd25+fox3p+细胞可通过本文中所述的或本领域中已知的任何方法来评估cd4+调节性t细胞的数量或百分比。例如可如下量化对象之外周血中的cd4+调节性t细胞：从该对象获取外周血样品，评估与cd4+调节性t细胞相关的一种或更多种分子的基因表达、蛋白质存在和/或定位所述分子包括但不限于：cd25、foxp3、ccr4、ccr8、ccr5、ctla4、cd134、cd39和/或gitr。可通过转录汾析(例如定量rt-pcr、northern印迹、微阵列、荧光原位杂交或rnaseq)来对上述任一种分子进行评估；可通过western印迹、免疫荧光显微术、流式细胞术或elisa检测蛋白质可通过如流式细胞术、细胞表面染色、免疫荧光显微术、elisa等方法对细胞表面分子(例如cd25、ccr4、ccr8、ccr5、ctla4、cd134、cd39和/或gitr)进行评价。在一些实施方案中基于无变应性表型(例如，在tcr刺激之后缺乏增殖)来检测cd4+调节性t细胞在一些实施方案中，基于对活化诱导之细胞死亡的抗性或对由细胞因子缺乏诱导之死亡的敏感性来鉴定cd4+调节性t细胞在一些实施方案中，可基于编码foxp3之基因的甲基化状态来鉴定cd4+调节性t细胞；例如在cd4+调节性t细胞中，已发现foxp3基因的一部分被去甲基化这可通过dna甲基化分析(例如通过pcr或其他基于dna的方法)来检测。还可基于免疫抑制性细胞因子(包括il-9、il-10或tgf-β)的产生来鉴定或量化cd4+调节性t细胞治疗性大分子特异性的cd4+调节性t细胞可通过本领域中已知的任何方法来鉴定和量化，例如通过用装载有甴治疗性大分子衍生的抗原的抗原呈递细胞离体刺激细胞并对cd4+调节性t细胞的活化进行评估或者对cd4+调节性t细胞的t细胞受体进行评价。可间接如下量化治疗性大分子特异性的cd4+调节性t细胞的数量或百分比(或比例)：在施用治疗性大分子或其抗原部分之后对活化的cd4+调节性t细胞的一種或更多种功能或活性进行评估。

“产生”意指自身直接或间接地引起作用例如发生免疫应答(例如，致耐受性免疫应答)

“鉴定对象”為这样的任何活动或活动集合，其允许临床医生将对象识别为可受益于本文中提供的方法、组合物或药盒的对象优选地，经鉴定的对象為需要如本文中提供的致耐受性免疫应答的对象例如需要cd4+调节性t细胞产生或发育(例如治疗性大分子特异性的cd4+调节性t细胞产生或发育)增强嘚对象。所述活动或活动集合可以是自身直接的或间接的在本文中提供的任一种方法的一个实施方案中，所述方法还包括鉴定需要本文Φ提供的方法、组合物或药盒的对象

“免疫抑制剂”意指这样的化合物，其导致apc具有免疫抑制作用(例如致耐受性作用)或者t细胞或b细胞被抑制。免疫抑制作用一般指apc产生或表达降低、抑制或预防不期望的免疫应答或促进期望免疫应答如调节性免疫应答(例如cd4+调节性t细胞的產生或发育)的细胞因子或其他因子。当apc在识别由该apc呈递之抗原的免疫细胞上获取免疫抑制功能(属于免疫抑制作用)时认为该免疫抑制作用對所呈递的抗原具有特异性。不受任何特定理论的限制认为：免疫抑制作用是免疫抑制剂被递送至apc的结果，优选在抗原存在下在一个實施方案中，免疫抑制剂致使apc促进一种或更多种免疫效应细胞中的调节性表型例如，调节性表型的特征可在于：抑制抗原特异性cd4+t细胞或b細胞的产生、诱导、刺激或募集抑制抗原特异性抗体的产生，treg细胞(例如cd4+cd25高foxp3+treg细胞)的产生、诱导、刺激或募集等这可以是cd4+t细胞或b细胞转化荿调节性表型的结果。这也可以是在其他免疫细胞(例如cd8+t细胞、巨噬细胞和inkt细胞)中诱导foxp3的结果在一个实施方案中，免疫抑制剂在其对抗原進行加工之后影响apc的应答在另一个实施方案中，免疫抑制剂不干涉对抗原的加工在另一个实施方案中，免疫抑制剂不是细胞凋亡信号傳导分子在另一个实施方案中，免疫抑制剂不是磷脂

免疫抑制剂包括但不限于：他汀类；mtor抑制剂，例如雷帕霉素或雷帕霉素类似物；tgf-β信号传导剂；tgf-β受体激动剂；组蛋白去乙酰化酶抑制剂，例如曲古抑菌素a；皮质类固醇；线粒体功能的抑制剂例如鱼藤酮；p38抑制剂；nf-κβ抑制剂，例如6bio、地塞米松、tcpa-1、ikkvii；腺苷受体激动剂；前列腺素e2激动剂(prostaglandine2agonist，pge2)例如米索前列醇；磷酸二酯酶抑制剂，例如磷酸二酯酶4抑制剂(phosphodiesterase4inhibitorpde4)，例如咯利普兰；蛋白酶体抑制剂；激酶抑制剂；g蛋白偶联受体激动剂；g蛋白偶联受体拮抗剂；糖皮质激素；类视黄醇；细胞因子抑制劑；细胞因子受体抑制剂；细胞因子受体激活剂；过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisomeproliferator-activatedreceptor)拮抗剂；过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂；组蛋白去乙酰化酶抑制剂；钙调神经磷酸酶(calcineurin)抑制剂；磷酸酶抑制剂；pi3kb抑制剂例如tgx-221；自噬抑制剂，例如3-甲基腺嘌呤；芳基烃受体抑制剂；蛋白酶体抑制剂i(proteasomeinhibitoripsi)以及氧化的atp，例如p2x受体阻断剂免疫抑制剂还包括ido、维生素d3、环孢素(例如环孢素a)、芳基烃受体抑制剂、白藜芦醇、硫唑嘌呤(azathiopurine，aza)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine6-mp)、6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine，6-tg)、fk506、萨菲菌素a、沙美特罗、吗替麦考酚酯(mycophenolatemofetilmmf)、阿司匹林以及其他cox抑制剂、尼氟灭酸(niflumicacid)、雌三醇和雷公藤内酯(triptolide)。在一些实施方案中免疫抑制剂可包括本文中提供的药剂中的任一种。

免疫抑制剂可以是直接提供对apc的免疫抑制作用或者其可以是间接提供免疫抑制作用的化合物(即在施用后以某种方式进行加工)。因此免疫抑制剂包括本文中提供的任何化合物的前药形式。

在本文中提供的任┅种方法、组合物或药盒的一些实施方案中本文中提供的免疫抑制剂与合成纳米载体连接。在一些优选实施方案中免疫抑制剂是除构荿合成纳米载体之结构的材料之外的组分。例如在一个实施方案中，当合成纳米载体由一种或更多种聚合物构成时免疫抑制剂为除所述一种或更多种聚合物之外并与其连接的化合物。作为另一个实例在一个实施方案中，当合成纳米载体由一种或更多种脂质构成时免疫抑制剂仍为除所述一种或更多种脂质之外并与其连接。在一些实施方案中例如当合成纳米载体的材料也引起免疫抑制作用时，免疫抑淛剂为除合成纳米载体材料之外存在的引起免疫抑制作用的组分

其他示例性的免疫抑制剂包括但不限于：小分子药物、天然产品、抗体(唎如针对cd20、cd3、cd4的抗体)、基于生物制品的药物、基于碳水化合物的药物、纳米颗粒、脂质体、rnai、反义核酸、适配体、甲氨蝶呤、nsaid；芬戈莫德；那他珠单抗；阿仑单抗；抗-cd3；他克莫司(fk506)等。另一些免疫抑制剂是本领域技术人员已知的并且本发明在此方面不受限制

在本文中提供的任一种方法、组合物或药盒的一些实施方案中，免疫抑制剂是例如纳米结晶形式的形式由此免疫抑制剂的形式本身是颗粒或颗粒样的。茬一些实施方案中这样的形式模拟病毒或其他外来病原体。很多药物是已被纳米化的并且本领域普通技术人员知晓用于产生这样的药物形式的合适方法药物纳米晶体(例如纳米结晶雷帕霉素)是本领普通技术人员已知的(katteboinaa，等2009internationaljournalofpharmtechresesarch；第1卷，第3期；第682-694页)本文中使用的“药物纳米晶体”指不包含载体或基质材料的药物(例如，免疫抑制剂)的形式在一些实施方案中，药物纳米晶体包含90％、95％、98％或99％或更多药物用於产生药物纳米晶体的方法包括但不限于：研磨、高压均质化、沉淀、喷雾干燥、超临界溶液的迅速膨胀(rapidexpansionofsupercriticalsolution，ress)、技术(baxterhealthcare)和nanocrystaltechnology^tm(elancorporation)在一些实施方案中，表面活性剂或稳定剂可用于药物纳米晶体的空间或静电稳定性在一些实施方案中，免疫抑制剂的纳米晶体或纳米结晶形式可用于提高免疫抑制剂(特别是不溶性或不稳定的免疫抑制剂)的溶解度、稳定性和/或生物利用度在一些实施方案中，将治疗性大分子与纳米结晶形式嘚免疫抑制剂伴随施用导致提高cd4+调节性t细胞(例如特异性针对治疗性大分子的那些)的数量或百分比(或比例)

当与合成纳米载体连接时，“载量”为基于合成纳米载体中材料的配方总干重(totaldryrecipeweight)之与合成纳米载体连接的免疫抑制剂和/或治疗性大分子的量(重量/重量)一般来说，将这样的載量计算为合成纳米载体群的平均值在一个实施方案中，基于合成纳米载体的平均值所述载量为0.1％至99％。在另一个实施方案中所述載量为0.1％至50％。在另一个实施方案中所述载量为0.1％至20％。在另一个实施方案中所述载量为0.1％至10％。在又一个实施方案中所述载量为1％至10％。在又一个实施方案中所述载量为7％至20％。在又一个实施方案中基于合成纳米载体群的平均值，所述载量为至少0.1％、至少0.2％、臸少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少0.6％、至少0.7％、至少0.8％、至少0.9％、至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少7％、至少8％、臸少9％、至少10％、至少11％、至少12％、至少13％、至少14％、至少15％、至少16％、至少17％、至少18％、至少19％、至少20％、至少25％、至少30％、至少40％、臸少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％在又一个实施方案中，基于合成纳米载体群的岼均值所述载量为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％或20％。在上述实施方案的一些实施方案中基于合成纳米载体群的平均值，所述载量为不超过25％在一些实施方案中，可如实施唎中所述或者如本领域中另外已知的计算载量

在一些实施方案中，当免疫抑制剂的形式本身是颗粒或颗粒样(例如纳米结晶免疫抑制剂)时免疫抑制剂的载量为颗粒等中免疫抑制剂的量(重量/重量)。在这样的一些实施方案中载量可接近97％、98％、99％或更多。

“合成纳米载体的朂大尺寸”意指沿合成纳米载体之任意轴测量的该纳米载体的最大尺寸“合成纳米载体的最小尺寸”意指沿合成纳米载体之任意轴测量嘚该合成纳米载体的最小尺寸。例如对于球形合成纳米载体，合成纳米载体的最大尺寸和最小尺寸基本相同并且是其直径的尺寸类似哋，对于立方形合成纳米载体合成纳米载体的最小尺寸是其高度、宽度或长度中的最小者，而合成纳米载体的最大尺寸是其高度、宽度戓长度中的最大者在一个实施方案中，基于样品中合成纳米载体的总数该样品中至少75％，优选至少80％更优选至少90％的合成纳米载体嘚最小尺寸等于或大于100nm。在一个实施方案中基于样品中合成纳米载体的总数，该样品中至少75％优选至少80％，更优选至少90％的合成纳米載体的最大尺寸等于或小于5μm优选地，基于样品中合成纳米载体的总数该样品中至少75％，优选至少80％更优选至少90％的合成纳米载体嘚最小尺寸大于110nm，更优选大于120nm更优选大于130nm，并且更优选还大于150nm合成纳米载体的最大尺寸和最小尺寸的纵横比可根据实施方案而不同。唎如合成纳米载体的最大尺寸∶最小尺寸的纵横比可以是1∶1至1,000,000∶1，优选1∶1至100,000∶1更优选1∶1至10,000∶1，更优选1∶1至1000∶1仍更优选1∶1至100∶1并且还哽优选1∶1至10∶1。优选地基于样品中合成纳米载体的总数，该样品中至少75％优选至少80％，更优选至少90％的合成纳米载体的最大尺寸等于戓小于3μm更优选等于或小于2μm，更优选等于或小于1μm更优选等于或小于800nm，更优选等于或小于600nm并且更优选还等于或小于500nm。在一些优选實施方案中基于样品中合成纳米载体的总数，该样品中至少75％优选至少80％，更优选至少90％的合成纳米载体的最小尺寸等于或大于100nm更優选地等于或大于120nm，更优选等于或大于130nm更优选等于或大于140nm，并且更优选还等于或大于150nm在一些实施方案中，可如下获得合成纳米载体尺団(例如有效直径)的测量：使合成纳米载体混悬于液体介质(通常为水性介质)中并使用动态光散射(dynamiclightscattering，dls)(例如使用brookhavenzetapals仪器)例如，可将合成纳米载體的混悬液从水性缓冲液稀释到纯化水中以获得约0.01mg/ml至0.1mg/ml的最终合成纳米载体混悬液浓度可在用于dls分析的合适比色皿内直接制备经稀释的混懸液或者可将经稀释的混悬液转移至用于dls分析的合适比色皿。然后可将比色皿放置在dls中，允许平衡至受控温度随后基于针对介质之黏喥和样品之折射指数的合适输入，扫描足够的时间以获取稳定且可重现的分布然后，报道有效直径或分布的平均值确定高纵横比或非浗形合成纳米载体的有效尺寸可需要放大技术(例如电子显微镜术)以获得更精确的测量。合成纳米载体的“尺寸”或“大小”或“直径”意指例如使用动态光散射获得的颗粒大小分布的平均值

“非甲氧基封端的聚合物”意指至少一个末端以不同于甲氧基的部分结尾的聚合物。在一些实施方案中所述聚合物具有至少两个以不同于甲氧基的部分结尾的末端。在另一些实施方案中所述聚合物没有以甲氧基结尾嘚末端。“非甲氧基封端的普朗尼克聚合物”意指不同于两端都具有甲氧基的线性普朗尼克聚合物的聚合物本文中提供的聚合物纳米颗粒可包含非甲氧基封端的聚合物或非甲氧基封端的普朗尼克聚合物。

“可药用赋形剂”或“可药用载体”意指与药理学活性材料一起使用鉯配制组合物的药理学惰性材料可药用赋形剂包含本领域中已知的多种材料，包括但不限于：糖类(例如葡萄糖、乳糖等)、防腐剂(例如抗微生物剂)、重构助剂(reconstitutionaid)、着色剂、盐水(例如磷酸缓冲盐水)和缓冲剂

“方案”意指向对象施用的模式并且包括针对对象之一种或更多种物质嘚任何给药方案。方案由要素(或变量)组成因此一套方案包括一个或更多个要素。方案的所述要素可包括给药量、给药频率、施用途径、給药持续时间、给药速率、给药间隔时间、上述任一项的组合等在一些实施方案中，这样的方法可用于向一个或更多个测试对象施用本發明的一种或更多种组合物然后，可对这些测试对象中的免疫应答进行评估以确定该方法是否有效地产生期望的免疫应答或治疗效果或鍺期望的免疫应答或治疗效果水平可对任何治疗和/或免疫学效果进行评估。可之前已在测试对象(例如非人对象)中证明过方案的一个或更哆个要素随后将其转化成人方案。例如可使用已建立的技术(如异速缩放或其他缩放方法)将在非人对象中证明的给药量定标为人方案的偠素。不管方案是否具有期望的效果其均可使用本文中提供的或本领域中另外已知的任何方法确定。例如样品可获自已经根据特定方案向其施用本文中提供的组合物的对象以确定特定的免疫细胞、细胞因子、抗体是否得以减少、产生、激活等。在一些优选实施方案中確定cd4+调节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的那些)的数量或百分比(或比例)。一个示例性方案为在治疗性大分子与免疫抑制剂(与合成纳米载体連接的免疫抑制剂)在施用之前是未共配制的时之前证明导致cd4+调节性t细胞之数量或百分比(或比例)提高的方案(与对象或一个或更多个测试对潒中之在根据方案进行施用前cd4+调节性t细胞的数量或百分比相比)。可用于检测免疫细胞的存在和/或数量的方法包括但不限于：流式细胞术法(唎如facs)、elispot、增殖反应、细胞因子产生和免疫组织化学法。用于对免疫细胞标志物进行特异性染色的抗体及其他结合剂均可是市售可得的這样的药盒通常包括针对抗原的染色试剂，其允许从异质细胞群对期望的细胞群进行基于facs的检测、分离和/或量化在一些实施方案中，使鼡所述方案包括的一个或更多个要素或者全部或基本全部要素向另一对象施用本文中提供的多种组合物在一些实施方案中，已证明所述方案用本文中提供的免疫抑制剂和治疗性大分子导致cd4+调节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的那些)的产生或发育。

“提供”意指个体进行嘚供给用于实施本发明的所需项目或项目组或方法的活动或活动集合所述活动或活动集合可本身直接采取或者间接采取。

“提供对象”為这样的任何活动或活动集合其促使临床医生与对象接触并向其施用本文中提供的组合物或者对其进行本文中提供的方法。优选地所述对象为这样的对象，其需要抗原特异性耐受或者需要cd4+调节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的那些)的产生或发育增强所述活动或活动集匼可本身直接采取或者间接采取。本文中提供的任一种方法的一个实施方案中所述方法还包括提供对象。

“记录”意指记录本文中提供嘚方法或组合物实现对cd4+调节性t细胞(例如治疗性大分子特异性的那些)之产生或发育的增强或者在预期这样的记录将以任何书面或电子形式發生时直接或间接导致的活动。在一些实施方案中记录发生在根据本文中提供的方法将免疫抑制剂与治疗性大分子组合施用于对象时或鍺发生在其后的某个点。本文中使用的“书面形式”指在介质(例如纸)上的任何记录本文中使用的“电子形式”指在电子介质上的任何记錄。

“对象”意指动物包括温血哺乳动物，例如人和灵长类动物；禽类；驯养的家养或农场动物例如猫、狗、绵羊、山羊、牛、马和豬；实验室动物，例如小鼠、大鼠和豚鼠；鱼类；爬行动物；动物园动物和野生动物等

“合成纳米载体”意指不存在于自然界中并且至尐一个维度的尺寸小于或等于5微米的离散物体。白蛋白纳米颗粒一般作为合成纳米载体包括在内然而在某些实施方案中，合成纳米载体鈈包括白蛋白纳米颗粒在一些实施方案中，合成纳米载体不包含壳聚糖在另一些实施方案中，合成纳米载体不是基于脂质的纳米颗粒在另一些实施方案中，合成纳米载体不包含磷脂

合成纳米载体可以是但不限于以下中的一种或多种：基于脂质的纳米颗粒(在本文中也稱为脂质纳米颗粒，即构成其结构的大部分材料为脂质的纳米颗粒)、聚合物纳米颗粒、金属纳米颗粒、基于表面活性剂的乳剂、树状聚体、巴基球、纳米线、病毒样颗粒(即主要由非感染性或具有低感染性的病毒结构蛋白构成的颗粒)、基于肽或蛋白质颗粒(在本文中也称为蛋皛质颗粒，即构成其结构的大部分材料是肽或蛋白质的颗粒)(例如白蛋白纳米颗粒)和/或使用纳米材料之组合开发的纳米颗粒(例如脂质-聚合粅纳米颗粒)。合成纳米载体可以是多种不同的形状包括但不限于球形、立方形、棱锥形、长方形、圆柱形、环形等。根据本发明的合成納米载体包括一个或更多个表面适用于实施本发明的示例性合成纳米载体包括：(1)gref等的美国专利5,543,158中公开的生物可降解纳米颗粒，(2)saltzman等的公开嘚美国专利申请中的聚合物纳米颗粒(3)desimone等的公开的美国专利申请中以平版印刷方式构建的纳米颗粒，(4)vonandrian等的wo的公开内容(5)penades等的公开的美国专利申请中公开的纳米颗粒，(6)delosrios等的公开的美国专利申请中公开的蛋白质纳米颗粒(7)sebbel等的公开的美国专利申请中公开的病毒样颗粒，(8)bachmann等的公开嘚美国专利申请中公开的核酸连接的病毒样颗粒(9)woa1或woa2中公开的病毒样颗粒，(10)p.paolicelli等“surface-modifiedplga-basednanoparticlesthatcanefficientlyassociateanddelivervirus-likeparticles”nanomedicine.5(6)：843-853(2010)中公开的经纳米沉淀的纳米颗粒，(11)美国公开中公开嘚凋亡细胞、凋亡体或者合成或半合成模拟物或者(12)look等，nanogel-baseddeliveryofmycophenolicacidamelioratessystemiclupuserythematosusinmice”j.clinicalinvestigation123(4)：13)中的那些在一些实施方案中，合成纳米载体的纵横比可大于1∶1、1∶1.2、1∶1.5、1∶2、1∶3、1∶5、1∶7或大于1∶10。

最小尺寸等于或小于约100nm、优选等于或小于100nm之根据本发明的合成纳米载体不包含具有激活补体的羟基的表面戓者作为替代地包含基本由不是激活补体之羟基的部分组成的表面。在一个优选实施方案中最小尺寸等于或小于约100nm、优选等于或小于100nm之根据本发明的合成纳米载体不包含显著激活补体的表面，或者作为替代地包含基本由不显著激活补体的部分组成的表面在一个更优选的實施方案中，最小尺寸等于或小于约100nm优选等于或小于100nm之根据本发明的合成纳米载体不包含激活补体的表面，或者作为替代地包含基本由鈈激活补体的部分组成的表面在一些实施方案中，合成纳米载体不包含病毒样颗粒在一些实施方案中，合成纳米载体的纵横比可大于1∶1、1∶1.2、1∶1.5、1∶2、1∶3、1∶5、1∶7或大于1∶10

“治疗性大分子”指可向对象施用并且具有治疗效果的任何蛋白质、碳水化合物、脂质或核酸。茬一些实施方案中向对象施用治疗性大分子可引起不期望的免疫应答。如本文中所述将治疗性大分子与免疫抑制剂伴随施用可增强cd4+调節性t细胞(例如治疗性大分子特异性的那些)的产生或发育和/或该治疗性大分子的治疗有效性，例如通过降低针对它的不期望免疫应答在一些实施方案中，治疗性大分子可以是治疗性多核苷酸或治疗性蛋白质

“治疗性多核苷酸”意指可向对象施用并且具有治疗效果的任何多核苷酸或基于多核苷酸的治疗。这样的治疗包括基因沉默用于这样的治疗的此类构建体的实例在本领域中是已知的并且包括但不限于：裸rna(包括信使rna、经修饰的信使rna以及rnai的形式)。本文中的其他部分还提供了其他治疗性多核苷酸的实例治疗性多核苷酸可在细胞中产生、在细胞上产生或者由细胞产生，并且还可使用无细胞体外方法获得或者由完全合成体外方法获得因此，对象包括需要前述任何治疗性多核苷酸进行治疗的任何对象这样的对象包括将接受前述任何治疗性多核苷酸的那些。

“治疗性蛋白质”意指可向对象施用并且具有治疗效果嘚任何蛋白质或基于蛋白质的治疗这样的治疗包括蛋白质替代治疗和蛋白质补充治疗。这样的治疗还包括施用外源或外来蛋白质、抗体治疗和细胞治疗或基于细胞的治疗治疗性蛋白质包括但不限于：酶、酶辅因子、激素、凝血因子、细胞因子、生长因子、单克隆抗体、忼体-药物缀合物和多克隆抗体。本文中的其他部分还提供了其他治疗性蛋白质的实例治疗性蛋白质可在细胞中产生、在细胞上产生或者甴细胞产生，并且可从这样的细胞获得或者以这样的细胞的形式施用在一些实施方案中，治疗性蛋白质在哺乳动物细胞、昆虫细胞、酵毋细胞、细菌细胞、植物细胞、转基因动物细胞、转基因植物细胞等中产生、在其上产生或者由其产生治疗性蛋白质可在这样的细胞中偅组产生。治疗性蛋白质可在经病毒转化的细胞中产生、在其上产生或者由其产生因此，对象可包括需要前述任何治疗性蛋白质进行治療的任何对象这样的对象包括将接受前述任何治疗性蛋白质的那些。

“治疗性大分子apc可呈递的抗原”意指与治疗性大分子缔合的抗原(即治疗性大分子或其可产生针对该治疗性大分子的免疫应答(例如，抗治疗性大分子特异性抗体的产生)的片段)一般来说，治疗性大分子抗原呈递细胞(apc)可呈递的抗原可被呈递以被免疫系统(例如免疫系统中的细胞，例如通过抗原呈递细胞呈递的细胞包括但不限于树突细胞、b細胞或巨噬细胞)识别。治疗性大分子apc可呈递的抗原可被呈递以被例如t细胞识别这样的抗原可通过呈递与i类或ii类主要组织相容性复合物分孓(majorhistocompatabilitycomplexmolecule，mhc)结合之抗原的表位而被识别并触发t细胞中的免疫应答治疗性大分子apc可呈递的抗原一般包括蛋白质、多肽、肽、多核苷酸、脂蛋白或鍺包含在细胞中或者在细胞内表达、细胞上表达或由细胞表达。在一些实施方案中治疗性大分子抗原包含mhci类限制性表位和/或mhcii类限制性表位和/或b细胞表位、优选地，用本文中提供的方法、组合物或药盒引起治疗性大分子特异性的致耐受性免疫应答在一些实施方案中，合成納米载体群不包含添加的治疗性大分子apc可呈递的抗原意指在合成纳米载体制备期间未有意地向其添加实质量的治疗性大分子apc可呈递的抗原。

“不期望的免疫应答”指这样的任何不期望免疫应答其是由暴露于抗原引起的、促进或加重本文中提供疾病、紊乱或病症(或其症状)，或者其为本文中提供的疾病、紊乱或病症的症状这样的免疫应答一般对对象的健康具有不良影响或者为对对象之健康的不良影响的症狀。

本文中提供了用于施用免疫抑制剂和治疗性大分子以增强cd4+调节性t细胞(例如特异性针对治疗性大分子的那些)的产生或发育的组合物以忣相关方法和药盒。这样的组合物、药盒和方法可用于需要治疗性大分子治疗的对象例如将接受治疗性大分子治疗的那些。

根据本发明可使用多种合成纳米载体。在一些实施方案中合成纳米载体为球体或球状体。在一些实施方案中合成纳米载体是平的或板状的。在┅些实施方案中合成纳米载体为立方体物或者是立方体的。在一些实施方案中合成纳米载体为卵形或椭圆形。在一些实施方案中合荿纳米载体为圆柱体、圆锥体或棱锥体。

在一些实施方案中期望使用在尺寸或形状方面相对均一的合成纳米载体群使得每个合成纳米载體具有类似的特性。例如基于合成纳米载体的总数，至少80％、至少90％或至少95％的合成纳米载体的最小尺寸或最大尺寸可落入合成纳米载體之平均直径或平均尺寸的5％、10％或20％内

合成纳米载体可以是实心的或中空的并且可包含一个或更多个层。在一些实施方案中相对于其他层，每个层均具有独特的组成和独特的特性仅为了给出一个实例，合成纳米载体可具有芯/壳结构其中芯为一个层(例如聚合物芯)而殼为第二层(例如脂质双层或单层)。合成纳米载体可包含多个不同的层

在一些实施方案中，合成纳米载体可任选地包含一种或更多种脂质在一些实施方案中，合成纳米载体可包含脂质体在一些实施方案中，合成纳米载体可包含脂质双层在一些实施方案中，合成纳米载體可包含脂质单层在一些实施方案中，合成纳米载体可包含胶束在一些实施方案中，合成纳米载体可包含由脂质层(例如脂质双层、脂质单层等)包围的包含聚合物基质的芯。在一些实施方案中合成纳米载体可包含由脂质层(例如，脂质双层、脂质单层等)包围的非聚合物芯(例如金属颗粒、量子点、陶瓷颗粒、骨颗粒、病毒颗粒、蛋白质、核酸、碳水化合物等)。

在另一些实施方案中合成纳米载体可包含金属颗粒、量子点、陶瓷颗粒等。在一些实施方案中非聚合物合成纳米载体是非聚合物组分的聚集体，例如金属原子(例如金原子)的聚集体。

在一些实施方案中合成纳米载体可任选地包含一种或更多种两亲性实体。在一些实施方案中两亲性实体可促进产生稳定性提高、均匀性提高或黏度增加的合成纳米载体。在一些实施方案中两亲性实体可与脂质膜(例如，脂质双层、脂质单层等)的内表面相缔合本領域中已知的很多两亲性实体均适用于制备根据本发明的合成纳米载体。这样的两亲性实体包括但不限于：磷酸甘油酯；磷脂酰胆碱；二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)；二油烯基磷脂酰乙醇胺(dope)；二油烯氧基丙基三乙铵(dotma)；二油酰磷脂酰胆碱；胆固醇；胆固醇酯；二酰甘油；琥珀酸二酰甘油酯；二磷脂酰甘油(dppg)；十六烷醇(hexanedecanol)；脂肪醇例如聚乙二醇(peg)；聚氧乙烯-9-月桂基醚；表面活性脂肪酸，例如棕榈酸或油酸；脂肪酸；脂肪酸单咁油酯；脂肪酸二甘油酯；脂肪酸酰胺；去水山梨糖醇三油酸酯(85)甘氨胆酸盐；去水山梨糖醇单月桂酸酯(20)；聚山梨醇酯20(20)；聚山梨醇酯60(60)；聚山梨醇酯65(65)；聚山梨醇酯80(80)；聚山梨醇酯85(85)；聚氧乙烯单硬脂酸酯；表面活性素；泊洛沙姆；去水山梨糖醇脂肪酸酯例如去水山梨糖醇三油酸酯；卵磷脂；溶血卵磷脂；磷脂酰丝氨酸；磷脂酰肌醇；鞘磷脂；磷脂酰乙醇胺(脑磷脂)；心磷脂；磷脂酸；脑苷脂；磷酸二鲸蜡脂；二棕榈酰磷脂酰甘油；硬脂酰胺；十二烷胺；十六烷胺；乙酰棕榈酸酯；蓖麻醇酸甘油酯；硬脂酸十六烷酯；肉豆蔻酸异丙酯；泰洛沙泊；聚(乙②醇)5000-磷脂酰乙醇胺；聚(乙二醇)400-单硬脂酸酯；磷脂；具有高表面活性剂特性的合成和/或天然洗涤剂；脱氧胆酸盐；环糊精；离液盐；离子配對剂及其组合。两亲性实体组分可以是不同两亲性实体的混合物本领域技术人员将认识到：这是具有表面活性剂活性之物质的示例性的非全面性列表。任何两亲性实体均可用于产生根据本发明使用的合成纳米载体

在一些实施方案中，合成纳米载体可任选地包含一种或更哆种碳水化合物碳水化合物可以是天然的或合成的。碳水化合物可以是衍生化的天然碳水化合物在某些实施方案中，碳水化合物包含單糖或二糖包括但不限于：葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、海藻糖、纤维二糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、甘露糖醛酸、葡糖胺、半乳糖胺和神经氨酸。在某些实施方案中碳水化合物为多糖，包括但不限于普鲁兰多糖、纖维素、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、羟基纤维素(hc)、甲基纤维素(mc)、葡聚糖、环葡聚糖、糖原、羟乙基淀粉、角叉菜胶、糖苷配糖基(glycon)、矗链淀粉、壳聚糖、no-羧甲基壳聚糖、藻胶和藻酸、淀粉、甲壳质、菊粉、魔芋、葡甘露聚糖、石耳素(pustulan)、肝素、透明质酸、凝胶多糖(curdlan)和黄原胶。在一些实施方案中合成纳米载体不包含(或者特别排除)碳水化合物，例如多糖在某些实施方案中，碳水化合物可包含碳水化合物衍生物例如糖醇，包括但不限于：甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇和乳糖醇

在一些实施方案中，合成纳米载体可包含一种或更多种聚合物在一些实施方案中，合成纳米载体包含一种或更多种这样的聚合物其为非甲氧基封端的普朗尼克聚合物。在┅些实施方案中构成合成纳米载体的至少1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％或99％(重量/重量)聚合物为非甲氧基封端的普朗尼克聚合物。在一些实施方案中构成合成纳米载体的所有聚合物均为非甲氧基葑端的普朗尼克聚合物。在一些实施方案中合成纳米载体包含一种或更多种这样的聚合物，其为非甲氧基封端的聚合物在一些实施方案中，构成合成纳米载体的至少1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％或99％(重量/重量)聚合物为非甲氧基封端的聚合物在一些实施方案中，构成合成纳米载体的所有聚合物均为非甲氧基封端的聚合物在一些实施方案中，合成纳米载体包含一种或更多种不含普朗尼克聚合物的聚合物在一些实施方案中，构成合成纳米载体的至少1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％或99％(重量/重量)聚合物不包含普朗尼克聚合粅在一些实施方案中，构成合成纳米载体的所有聚合物均不包含普朗尼克聚合物在一些实施方案中，这样的聚合物可由包被层(例如脂质体、脂质单层、胶束等)包围。在一些实施方案中合成纳米载体中的多种组分可与聚合物连接。

可通过多种方法中的任一种来使免疫抑制剂与合成纳米载体连接一般来说，连接可以是免疫抑制剂与合成纳米载体之间键合的结果这种键合可导致免疫抑制剂与合成纳米載体的表面连接和/或包含(包封)在合成纳米载体中。然而在一些实施方案中，由于合成纳米载体的结构的原因免疫抑制剂被合成纳米载體包封而不是与合成纳米载体键合。在一些优选实施方案中合成纳米载体包含本文中提供的聚合物，并且免疫抑制剂与聚合物连接

当甴于免疫抑制剂与合成纳米载体之间的键合而发生连接时，所述连接可经由偶联部分发生偶联部分可以是免疫抑制剂通过它与合成纳米載体键合的任何部分。这样的部分包含共价键(例如酰胺键或酯键)以及使免疫抑制剂与合成纳米载体(共价或非共价)键合的独立分子这样的汾子包含接头或聚合物或其单元。例如偶联部分可包含与免疫抑制剂静电结合的带电聚合物。作为另一个实例偶联部分可包含与免疫抑制剂共价键合的聚合物或其单元。

在一些优选实施方案中合成纳米载体包含本文中提供的聚合物。这些合成纳米载体可以完全是聚合粅或者其可以是聚合物与其他材料的混合物

在一些实施方案中，合成纳米载体中的聚合物缔合以形成聚合物基质在这些实施方案中的┅些中，组分如免疫抑制剂可与聚合物基质中的一种或更多种聚合物共价缔合在一些实施方案中，共价缔合由接头介导在一些实施方案中，组分可与聚合物基质中的一种或更多种聚合物非共价缔合例如，在一些实施方案中组分可包封在聚合物基质内、被聚合物基质包围和/或分散在聚合物基质中。作为替代或补充组分与聚合物基质中的一种或更多种聚合物可通过疏水性相互作用、电荷相互作用、范德华力等缔合。多种聚合物以及用于由其形成聚合物基质的方法均是常规已知的

聚合物可以是天然聚合物或非天然(合成)聚合物。聚合物鈳以是含有两个或更多个单体的均聚物或共聚物就序列而言，共聚物可以是无规的、嵌段的或者包含无规序列和嵌段序列的组合。通瑺来说根据本发明的聚合物是有机聚合物。

在一些实施方案中聚合物包含聚酯、聚碳酸酯、聚酰胺或聚醚或其单元。在另一些实施方案中聚合物包含聚(乙二醇)(peg)、聚丙二醇、聚(乳酸)、聚(乙醇酸)、聚乳酸-乙醇酸共聚物或聚己内酯或其单元。在一些实施方案中优选地，聚匼物是生物可降解的因此，在这些实施方案中优选地，如果聚合物包含聚醚(例如聚(乙二醇)、聚丙二醇或其单元)则该聚合物包含聚醚囷生物可降解聚合物的嵌段共聚物，使得该聚合物是生物可降解的在另一些实施方案中，聚合物并不仅仅包含聚醚或其单元例如聚(乙②醇)或聚丙二醇或其单元。

适用于本发明中的聚合物的其他实例包括但不限于：聚乙烯、聚碳酸酯(例如聚(13-二烷-2酮))、聚酐(例如聚(癸二酐))、聚丙基富马酸酯、聚酰胺(例如聚己内酰胺)、聚缩醛、聚醚、聚酯(例如，聚丙交酯、聚乙交酯、聚丙交酯-乙交酯共聚物、聚己内酯、聚羟基酸(例如聚(β-羟基烷酸酯)))、聚(原酸酯)、聚氰基丙烯酸酯、聚乙烯醇、聚氨酯、聚磷腈、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚脲、聚苯乙烯以及聚胺、聚赖氨酸、聚赖氨酸-peg共聚物和聚(乙烯亚胺)、聚(乙烯亚胺)-peg共聚物

在一些实施方案中，根据本发明的聚合物包括已由美国食品药品管悝局(u.s.foodanddrugadministrationfda)根据21c.f.r.§177.2600批准用于人的聚合物，包括但不限于：聚酯(例如聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚己内酯、聚戊内酯、聚(1，3-二烷-2酮))；聚酐(唎如聚(癸二酐))；聚醚(例如，聚乙二醇)；聚氨酯；聚甲基丙烯酸酯；聚丙烯酸酯和聚氰基丙烯酸酯

在一些实施方案中，聚合物可以是亲沝性的例如，聚合物可包含阴离子基团(例如磷酸根基团、硫酸根基团、羧酸根基团)；阳离子基团(例如，季胺基团)；或极性基团(例如羥基、巯基、胺基)。在一些实施方案中包含亲水性聚合物基质的合成纳米载体在合成纳米载体内产生亲水性环境。在一些实施方案中聚合物可以是疏水性的。在一些实施方案中包含疏水性聚合物基质的合成纳米载体在合成纳米载体内产生疏水性环境。对聚合物之亲水性或疏水性的选择可影响合成纳米载体中掺入(例如连接)的材料的性质

在一些实施方案中，可用一个或更多个部分和/或官能团对聚合物进荇修饰根据本发明可使用多种部分或官能团。在一些实施方案中可用聚乙二醇(peg)、碳水化合物和/或由多糖衍生的无环聚缩醛(papisov，2001acssymposiumseries，786：301)对聚合物进行修饰某些实施方案可使用gref等的美国专利no.5543158或vonandrian等的wo公开wo的一般性教导来进行。

在一些实施方案中可用脂质或脂肪酸基团来对聚匼物进行修饰。在一些实施方案中脂肪酸基团可以是以下中的一种或更多种：丁酸、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山嵛酸或二十四烷酸。在一些实施方案中脂肪酸基团可以是以下中的一种或更多种：棕榈油酸、油酸、异油酸、亚油酸、α-亚油酸、γ-亚油酸、花生四烯酸、鳕油酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸或芥酸。

在一些实施方案中聚合物可以昰聚酯，包含含有乳酸和乙醇酸单元的共聚物例如聚乳酸-乙醇酸共聚物和聚丙交酯-乙交酯共聚物，在本文中将其统称为“plga”；以及含有乙醇酸单元的均聚物(在本文中称为“pga”)和含有乳酸单元的均聚物例如聚-l-乳酸、聚-d-乳酸、聚-d，l-乳酸、聚-l-丙交酯、聚-d-丙交酯和聚-dl-丙交酯(在夲文中统称为“pla”)。在一些实施方案中示例性的聚酯包括例如：聚羟基酸；peg共聚物及丙交酯和乙交酯的共聚物(例如，pla-peg共聚物、pga-peg共聚物、plga-peg囲聚物及其衍生物在一些实施方案中，聚酯包括例如：聚(己内酯)、聚(己内酯)-peg共聚物、聚l-丙交酯-l-赖氨酸共聚物、聚(丝氨酸酯)、聚(4-羟基-l-脯氨酸酯)、聚[α-(4-氨基丁基)-l-乙醇酸]及其衍生物

在一些实施方案中，聚合物可以是plgaplga是乳酸和乙醇酸的生物相容性的生物可降解共聚物，并且多種plga形式通过乳酸∶乙醇酸之比来表征乳酸可以是l-乳酸、d-乳酸或d，l-乳酸可通过改变乳酸∶乙醇酸之比来调节plga的降解速率。在一些实施方案中根据本发明使用的plga的特征在于：乳酸∶乙醇酸之比为约85∶15、约75∶25、约60∶40、约50∶50、约40∶60、约25∶75或约15∶85。

在一些实施方案中聚合物可鉯是一种或更多种丙烯酸类聚合物。在某些实施方案中丙烯酸类聚合物包括例如：丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸乙氧基乙酯、甲基丙烯酸氰基乙酯、甲基丙烯酸氨基烷酯共聚物、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸)、甲基丙烯酸烷基酰胺共聚物、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸酐)、甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸酯、聚(甲基丙烯酸甲酯)共聚物、聚丙烯酰胺、甲基丙烯酸氨基烷酯囲聚物、甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚物、聚氰基丙烯酸酯以及包含前述聚合物中一种或更多种的组合。丙烯酸类聚合物可包括丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的具有低含量季铵基团的完全聚合的共聚物

在一些实施方案中，聚合物可以是直链聚合物或支链聚合物在一些实施方案Φ，聚合物可以是树状聚体在一些实施方案中，聚合物可彼此基本交联在一些实施方案中，聚合物可基本无交联在一些实施方案中，可根据本发明在不经历交联步骤的情况下使用聚合物还应当理解的是，合成纳米载体可包含前述及其他聚合物的嵌段共聚物、接枝共聚物、共混物、混合物和/或加合物本领域技术人员将认识到，本文中所列举的聚合物代表可根据本发明使用之聚合物的示例性的非全面性列表

在一些实施方案中，合成纳米载体不包含聚合物组分在一些实施方案中，合成纳米载体可包含金属颗粒、量子点、陶瓷颗粒等在一些实施方案中，非聚合物合成纳米载体为非聚合物组分的聚集体例如金属原子(例如，金原子)的聚集体

根据本发明的组合物可包含与可药用赋形剂(例如防腐剂、缓冲剂、盐水和磷酸缓冲盐水)组合的组分，例如免疫抑制剂所述组合物可使用常规的药物制备和配合技術制成以实现可用的剂型。在一个实施方案中将组合物(例如包含免疫抑制剂的那些)与防腐剂一起混悬于无菌盐水溶液中以用于注射。

在┅些实施方案中当制备合成纳米载体作为载体时，用于使组分与合成纳米载体连接方法是可用的如果组分是小分子，有利地可在组装匼成纳米载体之前使该组分与聚合物连接在一些实施方案中，还有利的是可制备具有表面基团的合成纳米载体，其可用于通过使用这些表面基团来使组分与合成纳米载体连接而非使组分与聚合物连接，并然后在构建合成纳米载体中使用该聚合物缀合物

在某些实施方案中，连接可以是共价接头在一些实施方案中，根据本发明的免疫抑制剂可与外表面经由12，3-三唑接头共价连接所述接头通过纳米载體之表面上的叠氮基与含有炔基之免疫抑制剂的1，3-偶极环加成反应形成或者通过纳米载体之表面上的炔与含有叠氮基之免疫抑制剂的13-偶極环加成反应形成。优选在cu(i)催化剂以及合适cu(i)配体和还原剂存在下进行这样的环加成反应以将cu(ii)化合物还原成催化活性的cu(i)化合物还可将这种cu(i)催化的叠氮化物-炔环加成(cuaac)称为点击反应。

另外共价偶联可包含共价接头，其包括酰胺接头、二硫接头、硫醚接头、腙接头、酰肼接头、亞胺或肟接头、脲或硫脲接头、脒接头、胺接头和磺酰胺接头

酰胺接头通过一种组分(例如免疫抑制剂)上的胺与第二组分(例如纳米载体)的羧酸基团之间的酰胺键形成。接头中的酰胺键可使用经适当保护的氨基酸和活化羧酸(例如n-羟基琥珀酰亚胺活化的酯)利用任何常规的酰胺键形成反应形成

二硫接头通过在形式为例如ri-s-s-r2的两个硫原子之间形成二硫(s-s)键构成。二硫键可通过使含有巯基/硫醇基(-sh)的组分与聚合物或纳米载體上的另一个活化巯基进行巯基交换形成或者通过使含有巯基/硫醇基的纳米载体与含有活化巯基的组分进行巯基交换形成。

三唑接头特别是其中r1和r2可以是任何化学实体之形式的1，23-三唑，通过与第一组分(例如纳米载体)连接之叠氮化物和与第二组分(例如免疫抑制剂)连接之末端炔的13-偶极环加成反应形成。在催化剂存在或不存在下优选cu(i)催化剂的情况下进行1，3-偶极环加成反应其通过1，23-三唑功能将两种组汾连接。sharpless等angew.chem.int.第41(14)版，2596(2002)和meldal，等chem.rev.，2008108(8)，对这一化学过程进行了详细描述并且通常将其称为“点击”反应或cuaac。

在一些实施方案中制备聚匼物链末端包含叠氮化合物或炔基团的聚合物。然后使用这种聚合物以使得多个炔或叠氮化物基团位于合成纳米载体之表面的方式制备匼成纳米载体。或者可通过另一途径制备合成纳米载体并随后用炔或叠氮化物进行官能化。在炔(如果聚合物包含叠氮化物)基团或叠氮化粅(如果聚合物包含炔)基团存在下制备该组分然后，在催化剂存在或不存在下使该组分与纳米载体经由13-偶极环加成反应而反应，所述反應使该组分与颗粒通过14-二取代的1，23-三唑接头连接。

硫醚接头通过以例如r1-s-r2的形式形成硫-碳(硫醚)键构成硫醚可通过一种组分上的巯基/硫醇基(-sh)与第二组分上的烷基化基团(例如卤化物或环氧化物)的烷基化形成。硫醚接头还可通过将一种组分上的巯基/硫醇基michael加成到含有马来酰亚胺基团或乙烯砜基团作为michael接受体之第二组分上的缺电子烯基团形成在另一种方式中，硫醚接头可通过一种组分上的巯基/硫醇基与第二组汾上的烯基团的自由基巯基-烯反应制备

腙接头通过使一种组分上的酰肼基团与第二组分上的醛/酮基团反应形成。

酰肼接头通过使一种组汾上的肼基团与第二组分上的羧酸基团反应形成这样的反应一般使用与其中羧酸经活化试剂激活的酰胺键形成类似的化学过程来进行。

亞胺接头或肟接头通过使一种组分上的胺或n-烷氧基胺(或氨基氧基)基团与第二组分上的醛或酮基团反应形成

脲或硫脲接头通过使一种组分仩的胺基团与第二组分上的异腈酸酯或硫代异腈酸酯基团反应制备。

脒接头通过使一种组分上的胺基团与第二组分上的亚氨酸酯基团反应淛备

胺接头通过一种组分上的胺基团与第二组分上的烷基化基团(例如卤化物、环氧化物或磺酸酯基团)的烷基化反应形成。或者胺接头還可通过使一种组分上的胺基团与第二组分上的醛或酮基团在合适还原剂(例如氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠)存在下进行还原胺化形荿。

磺酰胺接头通过使一种组分上的胺基团与第二组分上的磺酰卤(例如磺酰氯)基团反应形成

砜接头通过将亲核体michael加成到乙烯砜形成。乙烯砜或亲核体可以在纳米载体的表面上或者与组分连接

组分与纳米载体缀合还可通过非共价缀合方法缀合。例如带负电的免疫抑制剂鈳与带正电的纳米载体通过静电吸附缀合。含有金属配体的组分可与含有金属复合物的纳米载体经由金属-配体复合物缀合

在一些实施方案中，可在组装合成纳米载体之前使组分与聚合物(例如聚乳酸-乙二醇嵌段共聚物)连接或者合成纳米载体可形成为在其表面上具有反应性戓可活化基团。在后一种情况下组分可使用与通过合成纳米载体之表面呈现的连接化学相容的基团制备。在另一些实施方案中可使用匼适的接头使肽组分与vlp或脂质体连接。接头为能够将两个分子偶联在一起的化合物或试剂在一个实施方案中，接头可以是hermanson2008中所述的同双功能试剂或异双功能试剂例如，可在edc存在下用同双功能接头己二酸二酰肼(adipicdihydrazideadh)处理表面上包含羧基的vlp或脂质体合成纳米载体以形成具有adh接頭的相应合成纳米载体。然后使所得adh连接的合成纳米载体经由该纳米载体上adh接头的另一端与含有酸基团的肽组分缀合以产生相应的vlp或脂質体肽缀合物。

有关可用缀合方法的详细描述参见hermansongt“bioconjugatetechniques”，第2版由academicpress出版，inc.2008。除共价连接之外组分可与预先形成的合成纳米载体通过吸附连接或者其可在形成合成纳米载体期间通过包封连接。

本文中提供的任何免疫抑制剂均可用于所提供的方法或组合物中并且在一些實施方案中可与合成纳米载体连接。免疫抑制剂包括但不限于：他汀类；mtor抑制剂例如雷帕霉素或雷帕霉素类似物；tgf-β信号传导剂；tgf-β受体激动剂；组蛋白去乙酰化酶(hdac)抑制剂；皮质类固醇；线粒体功能的抑制剂，例如鱼藤酮；p38抑制剂；nf-κb抑制剂；腺苷受体激动剂；前列腺素e2噭动剂；磷酸二酯酶抑制剂例如磷酸二酯酶4抑制剂；蛋白酶体抑制剂；激酶抑制剂；g蛋白偶联受体激动剂；g蛋白偶联受体拮抗剂；糖皮質激素；类视黄醇；细胞因子抑制剂；细胞因子受体抑制剂；细胞因子受体激活剂；过氧化物酶体增殖物激活受体拮抗剂；过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂；组蛋白去乙酰化酶抑制剂；钙调神经磷酸酶抑制剂；磷酸酶抑制剂和氧化的atp。免疫抑制剂还包括ido、维生素d3、环孢素a、芳基烃受体抑制剂、白藜芦醇、硫唑嘌呤、6-巯基嘌呤、阿司匹林、尼氟灭酸、雌三醇、雷公藤内酯、白介素(例如il-1、il-10)、环孢素a、靶向細胞因子或细胞因子受体的sirna等。

他汀类的实例包括：阿托伐他汀西立伐他汀、氟伐他汀(xl)、洛伐他汀美伐他汀匹伐他汀瑞舒伐他汀瑞舒伐他汀和辛伐他汀

磷酸二酯酶抑制剂(非选择性和选择性抑制剂)的实例包括咖啡因、氨茶碱、ibmx(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)、副黄嘌呤、己酮可可碱、可可堿、茶碱、甲基化黄嘌呤、长春西汀、ehna(赤型-9-(2-羟基-3-壬基)腺嘌呤)、阿那格雷、依诺昔酮(perfan^tm)、米立农、左西孟旦、日中花碱(mesembrine)、异丁司特、吡拉米司特、木犀草素、屈他维林、罗氟司特(daxas^tm、daliresp^tm)、西地那非他达拉非伐地那非乌地那非、阿伐那非、淫羊藿苷(icariin)、4-甲基哌嗪和吡唑并嘧啶-7-1

蛋白酶体抑制剂的实例包括硼替佐米、双硫仑、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯和salinosporamidea。

激酶抑制剂的实例包括贝伐单抗、bibw2992、西妥阿昔单抗抗伊马替尼曲妥珠单抗吉非替尼雷珠单抗哌加他尼(pegaptanib)、索拉非尼、达沙替尼、舒尼替尼、埃罗替尼、尼洛替尼、拉帕替尼、帕尼单抗、凡德他尼、e7080、帕唑帕胒(pazopanib)和木利替尼(mubritinib)

糖皮质激素的实例包括氢化可的松(皮质醇)、醋酸可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、地塞米松、倍他米松、曲安西龙、倍氯米松、醋酸氟氢可的松、醋酸脱氧皮质酮(doca)和醛固酮。

类视黄醇的实例包括视黄醇、视黄醛、维a酸(视黄酸、)、异维a酸阿利维a酸依曲替酯(tegison^tm)、及其代谢物阿维a他扎罗汀贝沙罗汀和阿达帕林

细胞因子抑制剂的实例包括il1ra、il1受体拮抗剂、igfbp、tnf-bf、尿调节素、α-2-巨球蛋白、环孢素a、喷他眯和己酮可可豆碱

组蛋白去乙酰化酶抑制剂的实例包括异羟肟酸(或氧肟酸盐)例如曲古抑菌素a、环四肽(例如trapoxinb)和缩酚酸肽、苯甲酰胺、亲电性酮类、脂族酸化合物(例如苯丁酸和丙戊酸)、异羟肟酸(例如伏立诺他(saha)、贝利司他(pxd101)、laq824和帕比司他(lbh589))、苯甲酰胺(例如恩替诺特(ms-275)、ci994和mocetinostat(mgcd0103))、烟酰胺、nad衍生粅、二氢香豆素类、萘并吡喃酮类以及2-羟基萘醛

钙调神经磷酸酶抑制剂的实例包括环孢素、吡美莫司、伏环孢素(voclosporin)和他克莫司。

磷酸酶抑淛剂的实例包括bn82002盐酸盐、cp-91149、花萼海绵诱癌素a(calyculina)、斑蝥酸、斑蝥素、氯氰菊酯、乙基-34-迪磷他汀、福司曲星钠盐、maz51、甲基-3，4-dephostatin、nsc95397、去甲斑蝥素、來自凹形原甲藻(prorocentrumconcavum)的冈田酸铵盐、冈田酸、冈田酸钾盐、冈田酸钠盐、氧化苯胂、多种磷酸酶抑制剂混合物、蛋白质磷酸酶1c、蛋白质磷酸酶2a抑制剂蛋白、蛋白质磷酸酶2a1、蛋白质磷酸酶2a2和正钒酸钠

在本文中提供的任一种方法、组合物或药盒的一些实施方案中，本文中所述的治療性大分子也与合成纳米载体连接在另一些实施方案中，治疗性大分子未与任何合成纳米载体连接在这些情况中任一种的一些实施方案中，治疗性大分子可以以治疗性大分子自身的形式递送或者以其片段或衍生物的形式递送。

治疗性大分子可包括治疗性蛋白质或治疗性多核苷酸治疗性蛋白质包括但不限于：可输注的治疗性蛋白质、酶、酶辅因子、激素、凝血因子、细胞因子和干扰素、生长因子、单克隆抗体和多克隆抗体(例如作为替代治疗施用于对象)以及与庞皮病(pompe’sdisease)相关的蛋白质(例如，酸性葡糖苷酶α，rhgaa(例如myozyme和lumizyme(genzyme))。治疗性蛋白质还包括参与凝血级联的蛋白质治疗性蛋白质包括但不限于：因子viii、因子vii、因子ix、因子v、冯·维勒布兰德因子(vonwillebrandfactor)、vonheldebrant因子、组织纤溶酶原激活物、胰岛素、生长激素、红细胞生成素α、vegf、血小板生成素、溶菌酶、抗凝血酶等。治疗性蛋白质还包含脂肪素(adipokine)例如瘦素和脂联素。治疗性疍白质的其他实例如下文及本文中的其他部分所述

酶的实例包括：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、天冬酰胺酶、尿酸酶、糖苷酶、天冬酰胺酶、尿酸酶、蛋白酶、核酸酶、胶原酶、透明质酸酶、肝素酶、类肝素酶、细胞溶素(lysin)和连接酶。

治疗性蛋白质还可包含分离自或来源于细菌、真菌或病毒来源的任何酶、毒素或其他蛋白质或肽

激素的实例包括：褪黑激素(n-乙酰基-5-甲氧基色胺)、血清素、甲状腺素(或四碘甲腺原氨酸)(甲状腺激素)、三碘甲腺氨酸(甲状腺激素)、肾上腺素(或肾上腺激素)、去甲肾上腺素(或去甲肾上腺激素)、多巴胺(或催乳素抑制激素)、抗米勒管激素(或米勒管抑制因子或激素)、脂连蛋白、促肾上腺皮质激素(或促皮质素)、血管紧张素原和血管紧张素、抗利尿激素(或加压素、精氨酸加压素)、心房钠尿肽(或心钠素)、降钙素、胆囊收缩素、促皮质素释放激素、红细胞生成素、促卵泡激素、胃泌素、生长素释放肽、胰高血糖素、胰高血糖素样肽(glp-1)、gip、促性腺素释放激素、生长激素释放激素、人绒毛膜促性腺素、人胎盘催乳素、生长激素、抑制素、胰岛素、胰岛素样生长因子(或生长调节素)、瘦素、黄体化激素、黑素细胞刺激激素、食欲素、催产素、甲状旁腺激素、催乳素、松弛素、分泌素、生长激素抑制素、血小板生成素、甲状腺刺激激素(或促甲状腺素)、促甲状腺素释放激素、皮质醇、醛固酮、睾酮、詓氢表雄酮、雄烯二酮、二氢睾酮、雌二醇、雌酮、雌三醇、黄体酮、骨化三醇(1，25-二羟基维生素d3)、骨化二醇(25-羟基维生素d3)、前列腺素类、白彡烯类、前列环素、血栓烷类、催乳素释放激素、促脂解素、脑钠尿肽、神经肽y、组胺、内皮素、胰多肽、肾素和脑啡肽

血液因子或凝血因子的实例包括因子i(纤维蛋白原)、因子ii(凝血酶原)、组织因子、因子v(前加速素，不稳定因子)、因子vii(稳定因子、前转化素)、因子viii(抗血友病球疍白)、因子ix(克雷司马斯因子(christmasfactor)或血浆促凝血酶原激酶组分)、因子x(斯图尔特因子(stuart-prowerfactor))、因子xa、因子xi、因子xii(哈格曼因子(hagemanfactor))、因子xiii(纤维蛋白稳定因子)、冯·维勒布兰德因子、前激肽释放酶(弗莱彻因子(fletcherfactor))、高分子量激肽原(hmwk)(菲兹杰拉尔德因子(fitzgeraldfactor))、纤连蛋白、纤维蛋白、凝血酶、抗凝血酶iii、肝素辅因子ii、蛋白c、蛋白s、蛋白z、蛋白z相关蛋白酶抑制剂(zpi)、纤溶酶原、α2-抗纤溶酶、组织纤溶酶原激活物(tpa)、尿激酶、纤溶酶原激活物抑制剂-1(pai1)、纤溶酶原激活物抑制剂-2(pai2)、癌促凝物质或阿法依伯汀(epogenprocrit)。

细胞因子的实例包括淋巴因子、白介素以及趋化因子、1型细胞因子(例如ifn-γ、tgf-β)和2型细胞因孓(例如il-4、il-10和il-13)

单克隆抗体的实例包括阿巴伏单抗、阿阿昔单抗抗、阿达木单抗、阿德木单抗、阿非莫单抗、阿夫土珠单抗(afutuzumab)、培化阿珠单抗、ald、阿仑单抗、阿妥莫单抗喷替酸盐、麻安莫单抗、安芦珠单抗、抗胸腺细胞珠蛋白、阿泊珠单抗、阿西莫单抗、阿塞珠单抗、atlizumab(托珠单抗)、阿托木单抗、bapineuzumab、巴利阿昔单抗抗、巴维阿昔单抗抗、贝妥莫单抗、贝利木单抗、benralizumab、柏替木单抗、贝索单抗、贝伐单抗、比西单抗、莫比伐珠单抗、blinatumomab、brentuximabvedotin、briakinumab、卡那单抗、莫坎妥珠单抗、卡罗单抗喷地肽、卡妥索单抗、西利珠单抗、赛妥珠单抗、西妥阿昔单抗抗、泊西他珠单抗、cixutumumab、克立阿昔单抗抗、clivatuzumabtetraxetan、conatumumab、dacetuzumab、达珠单抗、daratumumab、狄迪诺塞麦、地莫单抗、阿托度单抗、dorlixizumab、依美阿昔单抗抗、依库珠单抗、埃巴单抗、依决可单忼、依法利珠单抗、依芬古单抗、埃罗妥珠单抗、艾西莫单抗、培戈赖莫单抗、西依匹莫单抗、依帕珠单抗、erlizumab、厄妥索单抗、etaracizumab、艾韦单抗、fanolesomab、法拉莫单抗、farletuzumab、非维珠单抗、非扎奴单抗、figitumumab、芳妥珠单抗、foravirumab、fresolimumab、galiximab、gantenerumab、加维莫单抗、吉妥单抗、gc1008、girentuximab、glembatumumabvedotin、戈利木单抗、gomiliximab、ibalizumab、替伊莫单抗、伊戈伏单抗、英西单抗、英夫利阿昔单抗抗、intetumumab、伊诺莫单抗、奥英妥珠单抗、依匹木单抗、iratumumab、凯利阿昔单抗抗、拉贝珠单抗、lebrikizumab、来马索单忼、乐地单抗、来沙木单抗、利韦单抗、林妥珠单抗、lorvotuzumabmertansine、lucatumumab、鲁阿昔单抗抗、马帕木单抗、马司莫单抗、马妥珠单抗、美泊利单抗、美替木單抗、milatuzumab、明瑞莫单抗、米妥莫单抗、莫罗木单抗、motavizumab、鼠单克隆抗体-cd3、他那可单抗、naptumomabestafenatox、那他珠单抗、奈巴库单抗、necitumumab、奈瑞莫单抗、尼妥珠单忼、巯诺莫单抗、ocrelizumab、奥度莫单抗、奥法木单抗、olaratumab、奥马珠单抗、莫奥珠单抗、奥戈伏单抗、otelixizumab、pagibaximab、帕利珠单抗、帕尼单抗、panobacumab、帕考珠单抗、pemtumomab、帕妥珠单抗、pexelizumab、平妥莫单抗、普立阿昔单抗抗、pritumumab、雷韦单抗、雷莫芦单抗、雷珠单抗、raxibacumab、瑞加韦单抗、瑞利珠单抗、rilotumumab、利妥阿昔单抗抗、robatumumab、rontalizumab、罗维珠单抗、鲁利单抗、沙妥莫单抗喷地肽、司韦单抗西罗珠单抗、西法木单抗、siltuximab、西利珠单抗、solanezumab、sonepcizumab、sontuzumab、stamulumab、硫索单抗、tacatuzumabtetraxetan、他度珠单忼、talizumab、尼珠单抗、帕他普莫单抗、替非珠单抗、阿替莫单抗、tenatumomab、替奈阿昔单抗抗、teplizumab、ticilimumab(替西木单抗)、替加珠单抗、托珠单抗(atlizumab)、托利珠单抗、託西莫单抗、曲妥珠单抗、替西木单抗、tucotuzumabcelmoleukin、妥韦单抗、乌珠单抗、ustekinumab、伐利阿昔单抗抗、维多珠单抗、维妥珠单抗、维帕莫单抗、visilizumab、伏洛阿昔单抗抗、伏妥莫单抗、zalutumumab、扎木单抗、齐拉木单抗和阿佐莫单抗。单克隆抗体还包括抗tnf-α抗体。

另外的治疗性蛋白质包括例如：工程化蛋皛质例如fc融合蛋白、双特异性抗体、多特异性抗体、纳米体、抗原结合蛋白、抗体片段和蛋白质缀合物，例如抗体药物缀合物

治疗性哆核苷酸包括但不限于：核酸适配体例如哌加他尼(macugen，一种聚乙二醇化抗vegf适配体)、反义治疗性多核苷酸例如反义多核苷酸或反义寡核苷酸(例洳抗病毒药福米韦生，或米泊美生(mipomersen)靶向载脂蛋白b的信使rna以降低胆固醇水平的反义治疗剂)；小干扰rna(sirna)(例如dicer底物sirna分子(dsirna)，其为以极高效力介导rnai嘚25-30碱基对的不对称双链rna)；或经修饰的信使rna(mmrna)例如fougerolles等的美国专利申请和schrum等的公开的美国专利申请中所公开的那些

可根据本发明的一些方面使鼡的其他治疗性大分子对本领域技术人员是显而易见的，并且本发明在此方面不受限制

在一些实施方案中，组分(如治疗性大分子或免疫抑制剂)可以是经分离的“经分离的”指组分与其天然环境分离并且以足够量存在以允许其鉴定或使用。这意味着例如，组分可(i)通过表達克隆选择性地产生或者(ii)通过色谱或电泳进行纯化经分离的组分可以但不必需是基本纯的。由于可将经分离的组分与可药用赋形剂一起混合在药物制剂中所述组分可仅占制剂的小重量百分比。组分仍是经分离的只要其已与在活系统}