我去检查支原体结果是；uu培养是10.4阴性是—；是什么...相关问题
提问时间： 22:48:30
患者性别：女患者年龄：29
病情分析：
意见建议：UU阳性,说明你感染了解脲支原体,没感染淋病奈瑟氏菌,沙眼衣原体,淋病奈瑟氏。解脲支原体感染主要通过性生活传播,,当泌尿生殖道发生炎症,粘膜表面受损时解脲支原体易从破损口侵入,引起泌尿生
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提问时间： 15:30:09
患者性别：男患者年龄：36岁
问题分析：您好，UU是解脲支原体的简称，是常见感染病原菌，治疗这种感染可以用喹诺酮类或四环素类药物意见建议：请及时治疗，这个病原常引起生殖泌尿系疾病，注意多饮水，治疗期间避免性生活
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提问时间： 17:52:16
患者性别：女患者年龄：27岁
意见建议：下面一个+一个_是弱阳性的问题，就是阳性不是很明显，Mh下面一个_是阴性的，说明没什么问题的
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提问时间： 18:52:37
患者性别：女患者年龄：30-40
UU是解脲支原体的简写，都是常见的致病菌，您可以看看您具体检查结果 以免担心
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提问时间： 15:55:17
患者性别：男患者年龄：---
病情分析：你好，致病支原体中，肺炎支原体起肺炎，人型支原体、解脲支原体和生殖器支原体主要泌尿生殖道感染。支原体肺炎又称原发性非典型肺炎，支原体肺炎全年均可发病，以冬季多见，可有小流行。支原体肺炎是学
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提问时间： 20:40:01
患者性别：女患者年龄：21
病情分析：您描述的的培养出解脲支原体，未培养出人型支原体Uu，这说明有解脲支原体的感染，没有人型支原体感染。解脲支原体是常见的泌尿和生殖系统感染致病菌。可以引起女性尿道炎阴道炎宫颈炎等疾病。意见建议：
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提问时间： 09:05:14
患者性别：女患者年龄：25岁
病情分析：解脲支原体的阳性提示解脲支原体感染，支原体有不同的类型。解脲支原体是其中的一种，容易引起泌尿和生殖系统感染。
意见建议：
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提问时间： 15:52:07
患者性别：女患者年龄：19-29
你好！说明是正常的，没有病原体感染，不用紧张没有非淋病
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提问时间： 12:57:24
患者性别：女患者年龄：26岁
病情分析： 　　不必担心，解脲支原体阳性”,考虑 非淋病性尿道炎,是一种性传播疾病,主要通过性交传染引起的
　　意见建议：建议你口服阿奇霉素 或者 多西环素 或者美满霉素,同时 口服 黄柏胶囊，夫妇必须同时检查
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提问时间： 12:43:51
患者性别：女患者年龄：19-29
你好！需要做药敏试验，选择敏感药物治疗处理的。
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背景介绍：
&&&& 支原体是一类大小介于细菌和病毒之间，缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，最小直径0．2um，约有1%可通过滤菌器。支原体呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构，其中央有电子密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似，但微绒毛电子密度比支原体小，且中央无颗粒群
或中央束。支原体代谢需固醇类物质，部分种类需要精氨酸，O2，或葡萄糖，每一种支原体都有其自身持点。多数支原体适合于偏碱的条件下生存(PH7．6—8．0)，对酸耐受性差。对热比较敏感，对一般抗生素不敏感。 支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。
细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%。支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，但又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95％以上细胞支原体污染是由以下四种支原体引起：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和莱氏无胆甾原体（A.laidlawii）（为牛源性）。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染细胞后．培养液可不发生混浊．多数情况下细胞病理变化轻微或不显著，细微变化也可由于传代、换液而缓解．因此易被忽视。但个别严重者，可致细胞增殖缓慢．甚至从培养器皿脱落。支原体污染几乎可影响所有细胞生长参数， 代谢及研究的任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义。
支原体污染的来源：
包括工作环境的污染、操作者本身的污染（一些支原体在人体是正常菌群）、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
支原体的检测
1、直接培养法
（1） 原理：直接培养支原体于培养基中，观察其生长及菌落生成。
（2） 特点：是目前最直接与灵敏的方法，也是用来评估其它检测方法的金标准
（3） 缺点：培养时间长，须3－5星期才能判断。有些支原体不能在培养基培养出来 (例如M. hyorhinis)。需同时培养支原体株作为阳性对照，可能会造成污染。
（4） 材枓：dextrose、L-arginine HCl、Difco PPLO broth (Difco ) horse serum、15% yeast extract solution (autoclaved)、Bacto agar、无菌有盖螺旋试管(autoclaved)、无菌培养皿﹙60x15mm﹚、L-玻棒、37℃培养箱、厌氧缸（厌氧缸长期培养易有污染，所以厌氧包应用无菌水，每次打开厌氧缸后，用70% ethanol擦拭内壁。）
（5） 培养基制备：基本配方为Difco PPLO broth(60%), 马血清(20%), 15% yeast extreat solution (10%), 10x stock solution (10%)。由于培养时间长，可加入penicillin(50u/ml)至10x stock solution或加入thallium acetate (1：2000)至培养基中以防止其它细菌污染。
10x stock solution (1 liter) ：称取50 g dextrose，10 g L-arginine HCl，溶于1 liter蒸馏水中。以0.22μm无菌过滤膜过滤灭菌。分装100 ml至瓶中，保存于 -70℃。
液体培养基 (1 liter) ：称取21 g之Difco PPLO broth，0.02 g phenol red 于600ml蒸馏水中，加热搅拌溶解之。灭菌121℃，15分钟。待温度降低至室温后，于无菌操作台内加入200ml马血清，100ml之15% yeast extract solution，及100ml解涷之10x stock solution，混合均匀后，分装至已灭菌之有盖螺旋试管中，10ml/管。保存于4℃，期限1个月。
固体培养基 (1 liter )：称取21 g之Difco PPLO broth，0.02 g phenol red，15g Bacto agar于600ml蒸馏水中，加热溶解之。灭菌121℃，15分钟。放在50℃水中浴中，待温度降低至50℃时，于无菌操作台内加入200ml马血清，100ml之15% yeast extract solution 及100ml解冻之10x stock solution，混合均匀后，倒入60x50㎜之无菌培养皿中，5ml/培养皿。保存于4℃，期限1个月。
（6）步骤：
o 取1 ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液，接种于液体培养基中，置于37℃培养二周，观察是否有混浊或pH值的改变。培养一周及二周后，分别取0.1 ml液体培养液涂在agar plate上，将其倒放置于37℃厌氧箱培养，培养至少3星期，持续观察是否有支原体菌落出现。
o 另取1 ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液，涂抹在agar plate上，37℃厌氧培养3星期，持续观察是否支原体菌落出现。
o 另作阴性及阳性对照组，阳性对照组为Acholeplasma laidlawii (ATCC 23206) 与M. arginini (ATCC 23838)。阴性对照组为待测细胞的新鲜培养基。
结果判读：
o 支原体生长较慢，所以先在液体培养基培养1~2周增殖后，再培养于agar plate上。需至少培养3星期后，才可断定是否有支原体污染。所以整个测试需5个星期才知正确结果。
o 典型之支原体菌落类似荷包蛋(fried- egg like)，乃是由于支原体往agar下层生长所致，为圆形无色透明菌落，大小约10-55μm。但是并非所有的支原体皆为似荷包蛋菌落，有些是圆形菌落或是类似粘菌类形态（slime）。
o 若要区分细胞或是气泡造成的类似菌落，可将其自agar plate上切下，重新培养于液体培养基中，培养一星期后再种入agar plate，若是细胞则不会生长。
2 DNA荧光染色法
（1） 原理︰利用荧光染剂（bisbenzimide, Hoechst 33258）检测支原体污染。此染剂会结合到DNA的Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域，因为支原体DNA中A-T含量占多数（55～80%），所以可将其染色而得以检测。被支原体污染的细胞经染色后，在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点，即为支原体的DNA，证明有支原体之污染。
（2） 检测方法用间接法，将待测细胞悬浮液或细胞培养液接种于指示细胞培养液中（indicator cell，例如Vero cell or 3T6 cell），然后培养指示细胞再作荧光染色。阴阳性对照组亦可以接种于indicator cell内作为对照。
待测细胞亦可作直接测试，但需为贴壁细胞，培养后直接作荧光染色。有些细胞易有荧光背景，而干扰结果判读，建议使用接种于指示细胞后检测。
（3） 特点︰简单、经济与灵敏，广泛使用，可作为例行检测步骤。可以检测不易培养的支原体，例如M. hyorhinis，较直接培养法快，约一星期即可知道结果。
（4） 缺点：有时仍会有荧光背景，影响判读。
（5）材料︰
o Hanks’ balanced salt solution without NaHCO3 or phenol red (HBSS, GibcoBRL ﹚、bisbenzimide (Hoechst No.33258, Sigma B-2883)、thimerosol (Sigma T-5125)、0.1M citric acid、02M disodium phosphate、glycerol、glacial acetic acid、methanol、strerile H2O、chamber slide (Nunc 177380)或chamber slide替代物：35 or 60mm sterile plate内放置无菌22x22mm盖玻片﹙浸于酒精内，使用前过火灭菌﹚，一般贴壁细胞均能吸附在盖玻片上。染色后取出盖玻片，细胞面朝下放在玻片上观察。
o Indicator cells: Vero (African green monkey kidney, ATCC CCL-81 or CCRC 60013) or 3T6(mouse fibroblast, ATCC CCL-96 or CCRC 60070)，细胞须先测试无污染。DMEM with 10%FBS ( medium for Vero cell)
o 无菌HBSS︰配制Hanks’ balanced salt solution，以0.22mm无菌过滤膜过滤灭菌。勿用高压蒸汽灭菌。
o Hoechst 33258 stock solution（100X）︰称取5.0 mg bisbenzimide和10.0 mg thimersol溶于100 ml无菌HBSS，置于棕色瓶中，室温下以电磁搅拌器搅拌30分钟至完全溶解后，以1ml分装至1.5ml小离心管中，贮存于-20℃。
o Hoechst 33258 working reagent︰取1 ml Hoechst 33258 stock solution，加入sterile 100 ml HBSS中，室温下搅拌45分钟，置于棕色瓶中并以铝箔纸包覆，避免光照，贮存于4℃。
o mounting solution︰22.2 ml 0.1 M citric acid和27.8 ml 0.2 M Na2HPO4加入于50 ml glycerol中混合，以1 N NaOH调整pH至5.5（pH很重要），贮存于4℃。
o 固定溶液（fixative）︰冰醋酸与甲醇以1︰3之体积比例混合，使用前才配制。
（6）步骤：o 培养Vero细胞： Vero细胞可作长期培养或制作多个冷冻保存管，测试前解冻培养。测试前一周培养Vero细胞。
o 在接种测试样品前一日，以trypsin-EDTA溶液处理Vero细胞，制成细胞悬浮液，以1~2x10^4 cells／ml培养于chamber slide中，每个well加入1ml细胞悬浮液，于37℃, 5％CO2培养。隔日确定生长良好后，即可接种测试样品。
o 接种测试样品：样品种类：1ml待测培养基，1ml待测细胞培养液（可将细胞稍微刮下），0.05~0.1ml冷冻管细胞悬浮液。
o 将测试样品加入chamber slide内，培养5天后，进行Hoechst 33258的荧光染色观察。
o 以Acholeplasma laidlawii ATCC 23206 感染Vero细胞作为阳性对照组﹙或是已感染支原体细胞培养液或冷冻细胞液），阴性对照组为Vero cell新鲜培养基(DMEM +10%FBS)。
DNA荧光染色检测︰
o 取出培养5日的Vero细胞，吸除培养液，用不含酚红的Hanks液漂洗一下，于每个well中加入2 ml 1:3混合的冰醋酸/甲醇固定液，静置10 min后，吸除固定液。重复上述步骤，风干10分钟。
o 于每个well中，加入1 ml Hoechst 33258 working solution，室温下静置30 min。
o 吸掉Hoechst 33258染液后，以无菌水洗涤3次，风干后加入1滴的mounting solution，并以盖玻片覆盖之。
o 以100x-400x荧光显微镜观察。打开水银光源10 min后，以UV激发光束(330～380 nm)滤光镜，观察细胞核外是否有蓝色荧光小点或是丝状点之荧光物产生。
结果判读︰
若有支原体污染，在Vero细胞核外与细胞表面会出现蓝色荧光小点或是丝状点。其形状一致，与细胞残片染成的不规则点状物不同。其荧光可维持数星期。
3、相差显微境检测：将细胞接种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上，24h后取出，用相差油镜观察．支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。
4、电镜检查；用扫描电镜方法简便快速．也可以利用透射电镜。
5 、PCR及DNA探针检测
对支原体污染细胞的处理：
一般情况下直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株。但是对于特别重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如 -内酰胺类、万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素（polymycin）、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮；其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。对于支原体污染抗生素应用，预防性应用比污染后使用好。
1） 抗生素除菌法：用BM－1（截耳素衍生物）和BM－2（四环素衍生物）抑制支原体
1．抗生素制备：均可用PBS配成250×浓缩液－20℃备用，使用浓度参考《组织培养和分子细胞学技术》117页表6－2。
2．处理：取受支原体污染的细胞，吸除培养液，加入含BM-1的1640培养液培养3天后，吸除培养液，再加入含BM-2的1640培养液培养4天，如此连续三个轮回。
3．检测：用33258荧光染色镜检（每个轮回末应检测一次）。
4．培养：清除支原体后的细胞，在不加上述抗生素的培养液中，再传代培养3～4次。
5．镜检：如清除不彻底可再进行处理至纯净为止（一般3个轮回即能被完全消除）。BM-1和BM-2与CIP（4-氟，2-羟基喹啉）联合应用亦可，即先用含BIP培养液培养12天后，再按上述方法处理。
2） 加温除菌法
根据支原体耐热性能差的特点。将受支原体污染的细胞置于41度中作用5-10小时可以杀灭支原体。但由于41度对培养细胞本身也有较大的影响，故处理前，应先进行预试验，确定出最大限度杀伤支原体而对细胞影响较小的处理时间。
3） 动物体内接种除菌法
把受支原体污染的肿瘤细胞接种在同种动物皮下或腹腔中，借动物免疫系统消灭支原体，而肿瘤细胞却能在体内继续生长，待一定时间后，从体内取出细胞再进行培养繁殖。
4） 巨噬细胞吞噬法
从动物腹腔采取巨噬细胞，为排除其它细胞成分，可先进行纯化，然后再加入被支原体污染的细胞培养液中混合培养。在培养过程中，为检查支原体是否已被消除干净，可利用支持物培养法验证，取出支持物逐日染色、镜检观察，至支原体已被消除干净为止。
M-Plasmocin
研究开发的新一代支原体抗生素M-Plasmocin能有效地杀灭支原体，不影响细胞本身的代谢，并且用M-Plasmocin处理过的培养细胞，不会重新感染支原体。
Plasmocin含有两种杀菌成份，可以强效对抗支原体及相关的无胞壁的细菌。Plasmocin的显著效果有赖于两种独特的抗菌成份。一种成份通过干扰核糖体的翻译功能而使蛋白合成受阻。另一种成份则通过干扰复制叉的形成而阻止DNA的复制。这两种成份的靶分子只存在于支原体和许多其它细菌中而并不存在于真核细胞中。
Plasmocin既可以用于治疗细胞培养中的支原体感染同时也可以起到预防作用。
1.无反复感染
与其它抗支原体抗生素不同的是，Plasmocin对于游离形式和胞内的支原体都有作用，这是因为Plasmocin可以被有效地转运到哺乳动物细胞中。这个特点保证了经过Plasmocin处理的细胞不会被支原体感染细胞中释放出的病原体反复感染。
2.不影响细胞的新陈代谢
在至今为止检测过的所有细胞中，使用正常浓度的5倍高浓度Plasmocin处理细胞，亦没有观察到对细胞新陈代谢的任何副作用。
3.无获得性抗性
多次针对抗药突变率检测的重复实验表明，在液体培养物中无抗性突变产生。因此培养物中不会有Plasmocin抗性支原体产生。
4.对细菌的污染同样有效
低浓度的Plasmocin还具有广谱的杀菌能力，可用于具有抗青/链霉素混合物抗性的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的防治，同时对真核细胞没有毒性。
使用方法：
治疗支原体感染：在被感染培养物中以25μg/ml的浓度持续使用治疗专用Plasmocin（#ant-mpt, 1000X）2周时间。
预防支原体感染：在普通培养物中以2.5μg/m 的浓度使用预防专用Plasmocin（#ant-mpp, 1000X）。
保存及使用
Plasmocin 是浓度为25mg/ml (治疗型) 或 2.5 mg/ml (预防型)的黄色液体。可于室温运输。若立即使用可保存于4°C，也可以于-20°C长期保存。于-20°C可稳定保存至少一年。&&&
尊敬的客户：
　　本公司有,CST,R&D,Santa cruz、Jackson ImmunoResearch等品牌试剂抗体、、、等产品终端零售和渠道销售，您可以通过网页拨打本公司的服务热线了解更多产品的详细信息，至善至美的服务是我们永无止境的追求，欢迎新老客户放心选购自己心仪产品，我们将竭诚为您服务！
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