HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究--《中国肺癌杂志》2001年01期
HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究
【摘要】：目的　体内外观察HSV1
TK/GCV对人肺腺癌细胞A5 49的杀伤效应。方法　构建含TK基因的逆转录病毒表达载体 ,电穿孔法转化肺癌细胞A5 49。MTT法检测转染细胞对GCV的药物敏感性 ,并观察旁观者效应 ;电镜、FCM、TUNEL法检测GCV诱导转染细胞凋亡变化 ;PCR和细胞原位杂交分别检测转染细胞TK基因整合和表达 ;活体内观察GCV对转染细胞、亲代细胞接种裸鼠皮下肿瘤治疗效果。结果　转基因细胞变得较不规则 ,多角型 ,易形成空泡。A5 49、A5 49 PLXSN、A5 49 TK三种细胞体外倍增时间分别为 ( 3 6.15± 3 .2 7)、( 4 0 .82± 3 .75
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R734.2【正文快照】：
单纯疱疹病毒Ⅰ型胸腺嘧啶核苷激酶基因 (ｈｅｒｐｅｓ作者单位 :51 0 2 82　广州 ,第一军医大学珠江医院呼吸科 (何祥梁、何雪花 ) ;第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所 (郭先健、钱桂生、黄桂君、陈维中、李淑萍 )ｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ Ⅰｔｙｐｅｔｈｙｍｉｄｉｎｅ
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何祥梁!510282广州,郭先健,钱桂生,何雪花!510282广州,黄桂君,陈维中,李淑萍;[J];中国肺癌杂志;2001年01期
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【求助】Lipofectamine™ LTX & PLUS 转染试剂用法求助
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这个帖子发布于7年零136天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
有没有那位战友用过Lipofectamine(TM) LTX & PLUS这种转染试剂？我刚订了这种试剂，还不知怎么用，那位战友能指教一下？质粒和LTX还有PLUS的比例大家用多少啊？期待指点！
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蓝田玉暖 有没有那位战友用过Lipofectamine(TM) LTX & PLUS这种转染试剂？我刚订了这种试剂，还不知怎么用，那位战友能指教一下？质粒和LTX还有PLUS的比例大家用多少啊？期待指点！哇，有钱，关注下。嘻嘻
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这两个东西的比例是要自己摸索的。不同的体系可能不一样。我们原来开始试用的时候，是按1:2, 1:1,2:1，做了几个对照，其实都差不到哪里去。后来发现这个dd还不如Lipo2000，就是毒性相对小点，后来就不用了。
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谢谢wlnju,我也摸索了，感觉毒性是要小一些.对原代细胞来说，目前我感觉这个要好于lipro2000.
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我只有一点点，所以压根没摸索比例，就按protocal给的做的。plus和DNA按1：1，lipo 和DNA按3：1。对于悬浮细胞，貌似LTX比lipo2000好一点。
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学习来了，最近要用
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乌龙茶ts 学习来了，最近要用不知道你现在做了没，能不能把你的步骤告之呢
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关于丁香园利用VEGF-D转染的肺癌细胞建立小鼠淋巴结转移模型的实验研究--《四川大学》2005年博士论文
利用VEGF-D转染的肺癌细胞建立小鼠淋巴结转移模型的实验研究
【摘要】：目的 VEGF-D是一种淋巴管生长因子,能够诱导淋巴管生长并促进肿瘤淋巴道转移。本实验拟用VEGF-D基因转染Lewis肺癌细胞,并以筛选得到的高表达VEGF-D基因的肿瘤细胞接种动物,建立一种高转移和早期转移的小鼠淋巴结转移动物模型。方法 以RT-PCR从小鼠胚胎组织中扩增VEGF-D基因,经U-A克隆、酶切鉴定及测序得到完整的序列后,亚克隆并构建pcDNA3.1(+)真核表达质粒;以含有VEGF-D基因的真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞,通过体外G418抗生素筛选得到高表达VEGF-D的肿瘤细胞克隆;用这种高表达VEGF-D的肿瘤细胞分别接种于小鼠后肢肌肉、皮下和足垫,观察肿瘤淋巴道转移的情况。结果 酶切鉴定及测序证实扩增的VEGF-D序列与Gene bank中报道的序列完全相同。用构建的真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞,体外经G418筛选、RT-PCR和western blot分析得到高表达VEGF-D基因的肿瘤细胞克隆。以高表达VEGF-D的肿瘤细胞接种小鼠,动物实验结果显示,与对照组相比,转染VEGF-D基因的肿瘤细胞生长显著加快,肿瘤组织中血管和淋巴管明显增生,肿瘤在早期就会发生转移,且淋巴结转移率显著高于对照组。结论 VEGF-D能够诱导肿瘤内淋巴管生长以及促进
【关键词】：
【学位授予单位】：四川大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2005【分类号】：R734.2【目录】：
中文摘要5-7
英文摘要7-9
材料与方法14-32
参考文献54-60
文献综述60-77
综述参考文献77-87
在读期间论文发表情况87-88
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京公网安备75号HLA-A2基因转染云南个旧肺腺癌细胞GLC-82的抗肿瘤效应研究--《昆明医学院》2005年硕士论文
HLA-A2基因转染云南个旧肺腺癌细胞GLC-82的抗肿瘤效应研究
【摘要】：目的:本研究针对云南HLA Ⅰ类等位基因型及相关疾病资料的匮乏,首先对云南肺癌患者进行HLA基因座位多态性进行分析,选择HLA-A2这一肺癌相关的高频位点,成功构建HLA-A2基因的真核质粒表达载体,转染HLA-A2基因于HLA-A2表达阴性的云南个旧肺腺癌细胞株(GLC-82)中进行表达,诱导出肿瘤抗原特异性的细胞毒作用。为进一步开展HLA Ⅰ类分子限制的恶性肿瘤免疫基因防治技术提供科学的理论依据。方法:肺癌细胞培养,倒置荧光显微镜技术,HLA DNA分型,序列特异性引物扩增法(PCR-SSP)等技术筛选出HLA-A2表达阴性的肺癌细胞株和HLA-A2表达阳性的健康人CD8+T淋巴细胞。后采用阳离子脂质体介导的基因转染技术,免疫磁珠淋巴细胞分选,乳酸脱氢酶法肿瘤特异性细胞毒试验等来观察CTLs对HLA-A2基因转染后肿瘤细胞的抗肿瘤效应。结果:筛选出HLA-A2表达阴性的肺癌细胞株GLC-82,HLA-A2基因转染该细胞株,G418筛选获稳定表达的阳性克隆,培养该阳性克隆GLC-82细胞与免疫分选的HLA-A2表达阳性的CD8+T细胞进行淋巴细胞体外杀伤试验,发现CD8+T细胞对转染HLA-A2基因的肿瘤细胞有更强的杀伤活性,差异有显著性(P0.05)结论:HLA-A2基因缺失、突变或低表达,在导致肿瘤细胞免疫逃逸方面起重要作用,体外转染HLA-A2基因至HLA-A2表达缺失的肿瘤细胞可诱导HLA-A2限制性、肿瘤特异性T淋巴细胞对其的杀伤。
【关键词】：
【学位授予单位】：昆明医学院【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2005【分类号】：R734.2【目录】：
中文摘要4-5
英文摘要5-7
论文词汇中英文对照表7-8
材料与方法9-11
参考文献21-24
综述英文摘要33-34
待发表文章35-36
附件一36-37
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