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猪皮肤成纤维细胞PERV体外和体内感染性分析
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你可能喜欢重组腺病毒Ad-HGF体外感染成纤维细胞后转染效率及表达的检测--《生物技术通讯》2004年01期
重组腺病毒Ad-HGF体外感染成纤维细胞后转染效率及表达的检测
【摘要】：押检测携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒Ad-HGF在体外对成纤维细胞的感染效率以及感染细胞对目的蛋白的表达。以不同感染复数(m.o.i.)(25,50,100,200)的Ad-GFP感染NIH3T3细胞,48h时用流式细胞仪检测转染效率;以50m.o.i.感染NIH3T3细胞后48h,用ELISA和Western印迹杂交法分别检测感染上清中HGF的表达。分别以50m.o.i.的Ad-GFP和Ad-HGF感染原代培养人瘢痕成纤维细胞,以检测重组腺病毒对原代培养人瘢痕成纤维细胞的转染效率和其对HGF的表达。结果表明,当m.o.i.为50时,重组腺病毒对NIH3T3细胞的转染效率已达95%以上;HGF的表达量可达每2×106细胞249并可检测到HGF蛋白的一特异杂交带。以50m.o.i.的Ad-GFP感染原代培养人瘢痕成纤维细胞,72h时GFP表达达高峰,此时转染效率可高达36.75%。Ad-HGF感染原代培养人瘢痕成纤维细胞后HGF的表达在72h时达高峰,表达量可达每3.3×105细胞66ng。初步认为重组腺病毒可有效地介导HGF基因转染正常或瘢痕成纤维细胞,且感染细胞可有效表达目的蛋白。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R622【正文快照】：
病理性瘢痕是创伤修复过程中的一种重要并发症,常见于外伤、深度灼伤、某些手术切口及其它损伤皮肤的创伤愈合后;除引起外观畸形、疼痛、瘙痒外,亦可因瘢痕挛缩导致生理功能障碍。其组织学特点为细胞外基质中大量胶原、蛋白多糖和糖蛋白沉积,胶原纤维排列紊乱眼1演。目前,其
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双黄连粉针剂对肺炎支原体感染大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子蛋白质水平表达的影响
摘　要：目的探讨中药制剂双黄连粉针剂(双黄连)对反复肺炎支原体肺部感染大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白质水平表达的影响;方法将大鼠于24周内反复9次经超声雾化吸入肺炎支原体以复制其慢性肺部感染模型,并应用双黄连腹腔注射进行治疗干预;随后用bFGF单克隆抗体按SABC法行免疫组织化学染色,定量图像分析.结果①感染组动物(n=4)支气管肺泡灌洗液肺炎支原体-PCR检测均为阳性,而对照组(n=4)和感染加双黄连治疗组(n=4)均为阴性(均为P＜0.05);3组动物的支气管和肺组织常规细菌培养结果均为阴性;感染组动物透射电镜检查见肺泡间隔增宽,其中有较多胶原纤维堆积,其余两组则未见明显异常.②感染组动物支气管上皮细胞胞浆内、支气管和肺小动脉肌层以及肺泡巨噬细胞胞浆内可见较多棕黄色细颗粒状bFGF阳性表达产物,其积分光密度为41.62±4.33(n=4),显著高于对照组者(10.19±2.93,n=4,P＜0.05)和感染加双黄连治疗组者(12.74±3.74,n=4,P＜0.05).结论双黄连可抑制反复肺炎支原体肺部感染大鼠肺组织中bFGF蛋白质水平的表达,对于防止肺炎支原体肺部感染所引起的肺间质纤维化可能具有一定的有益作用.
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大鼠肾成纤微细胞 NRK-49F细胞
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【简单介绍】
大鼠肾成纤微细胞 NRK-49F细胞于原代末期冻存。每管含有细胞数>5×105 cells/ml，此细胞通过Cytokeratin-18, -19 and Vimentin免疫荧光染色验证，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。细胞可以达到15倍增。
【详细说明】
大鼠肾成纤微细胞 NRK-49F细胞细胞分裂展示图：胞分裂间期分有3阶段大鼠肾成纤微细胞 NRK-49F细胞从上一次分裂结束后到下一次分裂开始的一段时间成为分裂间期。分裂间期以细胞内部DNA合成为依据，又可分为：1.G1期&&DNA合成前期&该期是从上一次细胞周期完成后开始的，刚形成的两个子细胞，其体积较原有的细胞小。该期特点是物质代谢活跃，迅速合成RNA和蛋白质，细胞体积显著增大。这一期的主要意义在于为下阶段S期的DNA复制作好物质和能量的准备。细胞进入G1期后，并不是毫无例外地都进入下一期继续增殖，在此时可能会出现三种不同前景的细胞：①增殖细胞：这种细胞能及时从G1期进入S期，并保持旺盛的分裂能力。例如消化道上皮细胞及骨髓细胞等；&②暂不增殖细胞或休止细胞：大鼠肾成纤微细胞 NRK-49F细胞进入G1期后不立即转入S期，在需要时，如损伤、手术等，才进入S期继续增殖。例如肝细胞及肾小管上皮细胞等；③不增殖细胞：此种细胞进入G1期后，失去分裂能力，终身处于G1期，最后通过分化、衰老直至死亡。例如高度分化的神经细胞、肌细胞及成熟的红细胞等。2.S期&&DNA合成期&S期主要特征是复制DNA，使DNA含量增加一倍，保证将来分裂时两个子细胞的DNA含量不变。从G1期进入S期是细胞周期的关键时刻，只要DNA的复制一开始，细胞增殖活动就会进行下去，直到分裂成两个子细胞为止。该期中，如果受到某些因素干扰，会影响到DNA的复制，而引起\细胞的变异或分裂异常终止。3.G2期&&DNA合成后期&此期主要为分裂期做准备。这一期DNA合成终止，但合成少量RNA和蛋白质，可能与构成纺锤体的微管蛋白有关大鼠肾成纤微细胞 NRK-49F细胞其他相关产品：hz-E10122&& &人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒&& &Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISAkit&hz-E10123&& &人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒&& &Human Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISAkit&hz-E10124&& &人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒&& &Human monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISAkithz-E10125&& &人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒&& &Human monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISAkit&hz-E10126&& &人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒&& &Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISAkithz-E10127&& &人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒&& &Human L-Selectin ELISAkit&hz-E10128&& &人白介素9(IL-9)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 9,IL-9 ELISAkit&hz-E10129&& &人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 8,IL-8 ELISAkit&hz-E10130&& &人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 6,IL-6 ELISAkit&hz-E10131&& &人白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 5,IL-5 ELISAkit&hz-E10132&& &人白介素4(IL-4)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 4,IL-4 ELISAkit&hz-E10133&& &人白介素3(IL-3)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 3,IL-3 ELISAkit&hz-E10134&& &人白介素2可溶性受体&链(IL-2sR& )ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 2,IL-2 ELISAkit&hz-E10135&& &人白介素2可溶性受体&链(IL-2sR&/CD25)ELISA试剂盒&& &Human soluble interleukin-2 receptor,IL-2sR& ELISAkit&hz-E10136&& &人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 2,IL-2 ELISAkit&hz-E10137&& &人白介素1&(IL-1& )ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 1&,IL-1& ELISAkit&hz-E10138&& &人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒&& &Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISAkit&hz-E10139&& &人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒&& &Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISAkit&hz-E10140&& &人白介素16(IL-16)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 16,IL-16 ELISAkit&hz-E10141&& &人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 13,IL-13 ELISAkit&hz-E10142&& &人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 12,IL-12/P70 ELISAkit&hz-E10143&& &人白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 12,IL-12/P40 ELISAkit&hz-E10144&& &人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 11,IL-11 ELISAkit&hz-E10145&& &人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒&& &Human Interleukin 10,IL-10 ELISAkit&hz-E10146&& &人胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒&& &Human insulin-like growth factors binding protein 4,IGFBP-4 ELISAkit&hz-E10147&& &人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒&& &Human insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISAkit&hz-E10148&& &人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒&& &Human insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISAkit&hz-E10149&& &人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒&& &Human insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISAkit&hz-E10150&& &人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒&& &Human insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISAkit&hz-E10151&& &人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒&& &Human insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISAkit&hz-E10152&& &人&干扰素(IFN-&)ELISA试剂盒&& &Human Interferon & ,IFN-& ELISAkithz-E10153&& &人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒&& &Human intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISAkit
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下列有关细胞结构的说法中，不正确的是①生物的细胞壁都可以通过纤维素酶和果胶酶分解掉②蓝藻在生物进化中起着重要作用，因为蓝藻具有叶绿体，能够进行光合作用③线粒体的基因在遗传时也遵循孟德尔遗传定律④在植物的叶肉细胞中，能够产生ATP的场所有叶绿体、线粒体和细胞溶胶⑤线粒体、叶绿体内可以合成DNA、RNA
A．①②③B．②③④C．③④⑤D．①②⑤
题型：单选题难度：中档来源：0114
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据魔方格专家权威分析，试题“下列有关细胞结构的说法中，不正确的是①生物的细胞壁都可以通过纤..”主要考查你对&&细胞的基本结构和功能的关系&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
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细胞的基本结构和功能的关系
细胞是一个有机的统一整体：1、细胞主要由细胞膜、细胞质和细胞核组成，是生命活动的基本单位。2、细胞能够正常完成各项生命活动的前提条件是细胞保持完整性。3、植物细胞和动物细胞的区别是有液泡和细胞壁，动物细胞有中心体。植物细胞有叶绿体。4、植物细胞的外面还有一层细胞壁，化学成分是纤维素和果胶。5、植物细胞壁的功能是支持和保护的作用。6、最能体现细胞与细胞之间功能差异的是：细胞器的种类和数量。 （1）细胞膜的结构：①细胞膜主要成分：脂质和蛋白质，还有少量糖类；②细胞膜成分特点：脂质中磷脂最丰富，功能越复杂的细胞膜，蛋白质种类和数量越多。③欧文顿得出的结论是：细胞膜是由脂质组成的。科学家用丙酮从人的红细胞中提取脂质，在空气—水界面上铺展成单分子层的面积是红细胞表面积的2倍，得出的结论是：细胞膜中的脂质分子排列为连续的两层。科学家用发绿色荧光和红色荧光的染料标记小鼠细胞和人细胞表面的蛋白质分子，然后将两种细胞融合，得出的结论是：细胞膜具有流动性。（2）细胞膜的功能：①将细胞与环境分隔开，保证细胞内部环境的相对稳定；②控制物质出入细胞；③进行细胞间信息交流。（3）细胞器的结构和功能：细胞质基质富含水、无机盐、脂质、糖类、氨基酸、核苷酸和多种酶等，为细胞进行各种生理活动提供必需的物质条件，同时也可在其内进行多种化学反应，因此它是活细胞进行新陈代谢的主要场所。值得注意的是，细胞质基质中不含有DNA，而是含有RNA。分泌蛋白的过程：（4）细胞核的结构和功能：①细胞核的结构：核膜、核仁、染色质核膜——是选择透过性膜，但不是半透膜。染色质——DNA+蛋白质。染色质和染色体是细胞中同一种物质和不同时期的两种形态功能。核孔——核质之间进行物质交换的孔道。②细胞核的功能：细胞核是遗传物质储存和复制的场所，是细胞遗传特性和细胞代谢活动的控制中心。细胞核在生命活动中起着决定作用。（5）血细胞和血红蛋白：机体缺铁时，血红蛋白的合成量会减少；成熟红细胞中没有血红蛋白mRNA的合成；血红蛋白基因突变可导致镰刀型细胞贫血症。血细胞的组成：红细胞和淋巴细胞（6）神经细胞即神经元和神经胶质细胞胶质细胞的主要功能：①支持作用；②绝缘作用；③屏障作用；④营养性作用；⑤修复和再生作用；⑥维持神经元周围的K+平衡；⑦摄取神经递质。神经元的基本结构：可分为细胞体和突起两部分。胞体包括细胞膜、细胞质和细胞核；突起由胞体发出，分为树突（dendrite）和轴突（axon）两种。树突较多，粗而短，反复分支，逐渐变细；轴突一般只有一条，细长而均匀，中途分支较少，末端则形成许多分支，每个分支末梢部分膨大呈球状，称为突触小体。（7）含核糖体和高尔基体均较多的细胞：胰腺细胞。（8）动物细胞和植物细胞结构区别是植物细胞有细胞壁。由果胶和纤维素组成的，具有保护和支持的作用。动物细胞有中心体，是有丝分裂过程中的重要细胞器。知识拓展：细胞核和细胞质都不能单独成活。1、细胞核不能脱离细胞质而独立生存，这是因为细胞核进行生命活动时所需的物质和能量均由细胞质提供，如几乎不含细胞质的精子寿命很短。 2、无核的细胞质也不能长期生存，这是由细胞的功能决定的。如哺乳动物成熟的红细胞无细胞核，其寿命较短。
发现相似题
与“下列有关细胞结构的说法中，不正确的是①生物的细胞壁都可以通过纤..”考查相似的试题有：
944967414671737758607463470090}