感受态我用大肠杆菌JM110,载体使用pMD19-T载体我转化一段大概3000bp的基因,为什么一直长不了蓝斑啊IPTG、X-Gal、Amp+应该没问题吧,那到底怎麼回事呢都被老师催死了。请高手指点一下分享一下经验。
是不长斑还是不长蓝斑?
菌落很少:可能是感受态的问题
蓝斑没有,蓝白斑筛选有:问题可能在X-Gal
蓝斑很多蓝白斑筛选很少:可能是连接体系的问题
很多卫星菌落,可能是培养时间过长或者污染其他抗生素菌落抑或忘记加Amp+……
假阳性可以尝试把平板放到4度冰箱放几小时后拿出来看看,也许假阳性会露真身的
X-Gal我是新配的,用DMF溶解的会有什么问题呢?
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