摘要:目的:制备抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a(mrsa mrse-PBP2a)抗原的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),建立检测mrsa mrse的乳胶凝集方法方法:采用体外诱导的方法制备PBP2a蛋白,胸部肌肉多點注射方式免疫6只海蓝蛋鸡,水稀释法提取IgY,BCA法测定蛋白含量,Western
blotting进行特异性分析,用提取的IgY抗体致敏聚苯乙烯乳胶,建立检测PBP2a的乳胶凝集方法。结果:荿功诱导并制备获得纯化的PBP2a蛋白,首次免疫后1月每枚鸡蛋提纯后可获得约48mgIgY抗体,Western
blotting结果显示IgY抗体能有效识别纯化的PBP2a蛋白;成功建立检测PBP2a的乳胶凝集法,敏感性达1mg·L-1结论:抗mrsa mrse-PBP2a鸡卵黄抗体具有较高的敏感性和特异性,基于其建立的乳胶凝集检测方法具有较好的灵敏性。
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