仔母猪圆环病毒毒混和感染怎么治

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仔猪圆环病毒与附红体病混合感染的诊治
摘 要:2006年9月份.本地小型规模化猪场以及农村的养猪户发生了一种以持续高热、咳嗽、气喘、背部发红、贫血、黄疸为特点的疾病,猪场主及某些兽医曾用安乃近、青霉素,链霉素、地塞米松磷酸钠、病毒灵、磺胺及喹诺酮药物治疗,但不久又复发,后经笔者采取综合防治措施,病情得到的有效控制。猪圆环病毒与猪附红体混感咋治---安徽农网农业科技
猪圆环病毒与猪附红体混感咋治
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 & 猪圆环病毒病(PCVD)是由圆环病毒科猪圆环病毒2型引起猪的一种传染病,是目前发现的最小的动物病毒。该病可引起仔猪断奶衰竭综合征、猪皮炎与肾病综合征和母猪的繁殖障碍。其临诊表现多种多样,还可导致猪群严重的免疫抑制,从而容易继发或并发其他传染病,已成为该病流行的重要特点。近年来该病在我国各地猪场广泛发生,给我国养猪业造成了严重的经济损失。猪附红细胞体病是由立克次氏体目无浆体科附红细胞体属附红细胞体引起的一种人畜共患的传染病。临床上以发热、贫血、黄疸等为特征。该病的致病力较强,流行范围广,无地域性分布特征。现就一例猪圆环病毒与猪附红细胞体混合感染的病例,介绍如下。&&& 临床表现 & 病猪体温升高达40-41.5℃,不愿走动,食欲时好时坏,生长发育不良,消瘦,全身被毛粗乱,可视黏膜苍白、黄染,体表苍白;个别猪皮肤特别是背部、腹部两侧的皮肤有豌豆大小的突出于皮肤表面的黑色或黑红色的丘疹,指压不退色;有的猪还表现呼吸困难,病程长,先后已死亡26头仔猪。&&& 剖检变化 & 剖检3头病死猪可见皮下苍白,血液稀薄,实质脏器苍白;腹股沟淋巴结肿大,切面流出淡黄色液体;肺充血、出血、肿胀,肺门淋巴结肿大,呈灰红色,弥漫性间质性肺炎;肾脏肿大,苍白,有白色坏死灶;脾脏肿大并出现梗死;肝脏肿大呈土黄色,质脆;胆汁浓稠。&&& 实验室检验 & 1.细菌培养:无菌操作取病死猪的淋巴结、肺脏、肝脏、脾脏和心血,做细菌培养,未见细菌生长。  2.圆环病毒-PCR试验:采用猪圆环病毒PCR检测试剂盒。取5头病死猪的淋巴结、脾脏、肺脏,研磨后经处理取上清液作PCR诊断。结果显示,在对照试验成立条件下,圆环病毒2型为阳性。&  3.血液直接涂片镜检:取发病猪耳静脉血,滴于载玻片上,加等量生理盐水混匀,盖上盖玻片,放在600倍显微镜下观察,可见形状呈球形或颗粒状的附红细胞体。 & 4.血液涂片染色镜检:采取病猪耳静脉血制成涂片,姬姆萨染色镜检,可见多数红细胞变形,表面凹凸不平,边缘不整齐,其表面或血浆中有许多染成紫红色球形、逗点状、杆状等各种形态的虫体。&&& 防治措施&  1.隔离病猪,对病死猪及其粪便进行无害化处理,对污染的圈舍、饲槽以及用具等进行彻底消毒。圈舍用绿威净一号进行带猪喷雾消毒,每天1次,直至猪群康复。 & 2.加强饲养管理,调整饲养密度,保持舍内通风干燥,减少对猪群的各种应激。饲喂全价饲料。做好杀虫灭蝇灭鼠工作。&  3.治疗:①对病猪用红苄星(主要成分:硫酸卡那霉素注射液等),每1克克公斤体重0.1毫升;热毒三效(主要成分:三氮眯等),每1公斤体重0.1毫升;清瘟注射液(主要成分:黄芪多糖等),每1公斤体重0.1毫升;肌肉注射,每天1次,连用3天。②对猪全群预防,饮水中加毒立克(主要成分:黄芪多糖等),本品每500克对水100公斤,每天2次,连用5天;在饲料中添加附红圆蓝康(主要成分:土霉素等),本品每500克拌料100公斤,每天2次,连用5天。③同时用中药治疗;方剂:金银花15克、野菊花15克、石膏15克、连翘15克、柴胡10克、牛蒡子10克、陈皮6克、甘草6克。共研细末,每只猪每天20克,连用5天。④饲料内增加多种维生素、矿物质和微量元素,以增强机体的抗病力。通过采取以上综合性的治疗措施,3天后病猪明显好转,采食量恢复正常,无新增病例,5天后猪群恢复正常。&( 来源:河北农民报 作者:邢台市兽医院 邢兰君 杨立凡 )
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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒美洲株与猪Ⅱ型圆环病毒混合感染仔猪的血液病理学研究
1120Southwest China Journal番南农业孝蔽 of A鲥cultural Sciences2008年2l卷4期V01.21No.4文章编号:1001―4829(2008)04―1120-06猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒美洲株与 猪Ⅱ型圆环病毒混合感染仔猪的血液病理学研究娄忠子1,王天户1,杨宪勇2,刘思当h(1。山东农业大学动物辩技学院,山东泰安271018;2。泰安市啊0医院中心实验蜜,出东泰安271000)摘要:选戴3瘸龄左右旱期断奶话猪单独感染猪繁蹙鸯呼吸漳碍综合馥瘸毒(PRRSV ATCC VR-2332抹)并与猪H燕圆环病毒 (vcv2)人工共同接种,在不同时期取外周血,进行外周斑常规生理指标和血液生化指标的检测,比较不同接种组中务指标的差异 性。外周血淋殴细胞采用碘化丙啶(PI)单染色法染色,惜助流武细胞仪检测细胞凋亡情况。鳍粜农明,两病毒感染对外周血各种 指标都有一定的影响。WBC、GPT、GOT、LDH、GLO及TBlL感染组高于对照姐;RBC、HGB、PLT及ALB感染组低于对照组;PRRSV单独感染l;乏及毒憨v2在混台感絷舞变芘蔑律基本稼麓,毽瀑合感染多瑷撩据跨变竞箍度更太;MCV覆豫无胡显麓舅;嚣癣毒接释蕴羚羯斑淋魏细缝酶凋亡毙攀燕筹高子对照组,袭毒螽2―3 d达到裔洚,诧后逐驽下瘴若趋予莰复,混合感染缀的凋亡毙率又 高于单独感染组。文章就这些痨理现泉的发生及影响进行了分析讨论。 关键词:猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒;猪Ⅱ型圆环病毒;外周血生理生化指标;淋巴细胞凋亡 中图分类号:s828 文献标识码:AStudyonhematopathology of piglets infected with porcinereproductive and respiratory syndromevirus(ATCC VR-2332)and porcine circovirus type 2LOU Zhong-zil,WANG Tian―hul,YANG Xian-yon92,LIU Si-dangl+(1.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Shandong Agricultural University,Shandong Tai’an 271018,China;2.Centraltal of Tai'an,Shandong Tai’∞27 1000,China)Hospi-Abstract:Three-week--oldwaned pigletswereinoculated witheireovirusporcinereproductive andrespiratorysyndromevirus《PRRSV ATCC VR-2332)independently and combined with porcinechemicalapoptotietype2(PCV2),删pheralblood of different periods Were adopted and physieo-stainingproperties Were detected and compared with each other,respectively.PI singlelymphocytes.The detecting resu]m of physieo-ehemical properties showed thatpropertiestechnique"WaS usedtodetect them06tquantityofvirus inoculationinfluenced theof the physieo-chemicalofperipheral blood.the effects ofWBC,GPr,GOT,LDH,GLOand TBILwere higherthan that ofthe control,the effectssatneofRBC|HGB,PLTand ALBWat'elowerthanthat ofthe contrel,the changetendenciesof rimsinoculating groupswere almostthethe changes ofandmixed inoculating groupgroupWtYI_|e greater thanthat of thePRRSVininoculating group.The effects of MCV and TPdayswerenormal.Ap-ratiooptesis ratio of virus inoculatingapoptotiecould reachtothe hi【ghest levelabout 2―3and then declinedtothenormallevel.Theoflymphocytes from mixed inoculation group w聃higher than that of single inoculation group.the genesis and effect of pathologic phe- also discussedinnomena werethe article.respiratoryKey words:porcine reproductive and lymphocytes apoptesissyndrome virus;porcineeircovirustype 2;physieo--chemiealpropertiesof peripheral blood;自Meehan等‘11从断奶后多系统衰竭综合征 (Postweaning Muhisystemic WastingSyndrome,PM―circovirus type2,PCV2)以来。国内外越来越多的证据表明PCv2是断奶艨多系统衰竭综合征的主要瘸 原曙“’,主要零|超5一12溺龄仔猪进行性滚瘦,生长WS)病猿孛分离提纯了猪蠢麓匮环病毒(porcine发育迟缓,皮肤苍自和黄疸等外观表现,发生间质性收稿日期:2007一09―1l 作者简介:娄忠-T(1980一),男,在读硕士研究生,研究方向为 绉床病理学,E-mail:hin垂@8d卸.edu。Cn,?为通讯作者。肺炎、淋巴组织萎缩殿肉芽肿性炎症、坏死性肝炎、 间质性肾炎、心肌炎等多系统损伤性病理变化。 PCV2感染会造成猪鹪淋巴缨胞缺失,外鼹盎T、8万方数据 4期娄忠子等:猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒美洲株与猪Ⅱ型圆环病毒混合感染仔猪的血液病理学研究淋巴细胞数量下降,淋巴器官中的T、B淋巴细胞数 量减少,淋巴组织中巨噬细胞浸润并出现多核巨细 胞,外周血单核细胞数量升高。已有研究结果还表 明,PCV2具有严重的免疫抑制特性,是诱发或加重 其它疫病的猪重要病原体。猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)又称猪蓝耳病,主要引起猪的繁殖与呼吸 障碍,临床上常出现耳朵、乳头、外阴、腹部、尾部和 腿发绀和妊娠早期出现流产、早产、死胎、弱仔或木 乃伊等外观表现以及间质性肺炎,小叶间淋巴细胞 和巨噬细胞浸润等病理变化。猪在攻PRRSV之后, 淋巴组织(如脾动脉周围淋巴鞘、扁桃体、肠系膜淋 巴结、胸腺皮质)中的淋巴细胞数量减少,外周血中 白细胞数量降低,这些变化会导致感染猪对继发感 染的易感性增加。 国内外试验研究表明,猪圆环病毒单纯感染猪 只不发病或发病症状轻微,而与PRRSV、PRV或 PPV等病毒协同感染,则出现典型的PMWS的临床 症状和复杂的组织病理学变化,P.A.Harms(2001) 等∞J,对3周龄剖腹产不吃初乳(CD/CD)猪分别感 染Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2),猪繁殖一呼吸综合征病 毒(PRRSV),PCV2和PRRSV共同感染,比较这些 病毒的单独或联合作用的致病作用,结果发现PCV2 和PRRSV共同感染时出现典型的PMWS,共感染能 显著加重PRRSV对CD/CD猪引起的间质性肺炎的 严重程度。Datwich等∞1通过流式细胞术分析PCV2 感染猪的淋巴细胞亚类相对数量,发现外周血中 CD4+细胞比例有明显下降。张晓梅等¨1借助An―nexin1.1.3主要试剂碘化丙啶(PI)为美国Sigma公 Solution,美国B.D公司产品。司产品,RNA酶,上海奥伯生物科技公司产品;HLA.B27 FACS Lysing1.1.4主要仪器Sysmex.17820自动血液细胞分析 仪,日立7170A全自动生化分析仪,FACSCalibur E4242型流式细胞仪。 1.2方法 1.2.1试验分组将9头猪随机分为3组,每组3 头。第1组为PRRSV单独接种组,滴鼻接种PRRSV ATCC 10VR.2332型2 mL,病毒TCID50为7。5;第2组为PCV2+PRRSV混合感染组,口鼻接种,每种病毒各接种2 mL,第3组为不接种病毒的 对照组。所有病毒接种猪均在分组结束后当天接种 病毒,此后24 h称为病毒接种后第1天。 1.2.2血液的采集处理各组猪只均在第1天,第 2天,第5天,第10天,第17天和第25天前腔静脉 处采集血液,部分血样置于试管中,37℃水浴静置, 等析出血清后,吸取血清于离心管中,3000 r/min离 心10 rain制备血清样品,分装于离心管中,一30℃ 冰箱中保存,供检测用。部分血样置于抗凝管中,使 血液与抗凝剂充分混合,上机检测。1.2.3外周血淋巴细胞凋亡检测样品的制备在Falcon试管中无菌加入抗凝全血100 IXl,PBS(pH 7.4)洗涤。各试管分别加入10倍稀释的FACS溶 血素2 mL,离心后弃上清液。每管加入70%的冰 预冷酒精4℃固定,离心后PBS重悬,加入100“g/ mL的RNase500Ixl,37℃水浴30Ixl,4min,150“g/mLV.FITC+/PI一检测SPF猪外周血单核细胞和的PI染色液800oC避光保存30 rain,400目筛 取500 Ixl细胞悬液上机肺巨噬细胞早期凋亡情况,发现PRRSV感染早期可 以诱导受感染的猪单核一巨噬细胞凋亡。本研究拟 动态测定各感染组猪外周血常见生理、生化指标和 外周血淋巴细胞的凋亡情况,进一步明确PCV2单 独或与PRRSV混合感染引起的外周血病理学变化, 为阐明两病毒混合感染及PMWS发病机制提供理 论依据。网过滤,4℃保存备用。1.2.4流式细胞仪检测 检测,应用波长为488 rim激光束激发,用FL2一A探 测器接受信号,ModFit 3.0软件手动分析淋巴凋亡 情况。1.2.5 Microsoft对所得数据用SPSSl3.0统计分析软件和Excell进行处理,分析各组间检测指标的1材料与方法1.1材料1.1.1差异性以及各指标随时间的变化规律。2结果与分析猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒: VR-2332株;猪圆环病毒:PCV2均为 攻毒后相同时问点不同感染组和对照组部分血 液生理指标见表1,RBC在接毒5 d后两感染组显 著低于对照组,差异显著(P<0.05),而两病毒感染病毒PRRSV ATCC中国兽医药品监察所提供。1.1.2实验动物20―25日龄断奶仔猪12头,由组差异不显著(P>0.05)。WBC在接毒后2―5d,山东益生集团枣庄种猪场提供,经华中农业大学猪 Ⅱ型圆环病毒(PCV2)抗体检测试剂盒和猪繁殖与 呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)抗体检测试剂盒检 测,全部为阴性。混合感染组的数量始终高于其它两组,差异显著(P <0.05);单独感染组10 d内也高于对照组,但只有 第10天差异明显(P<0.05)。接毒组HGB的数量 呈逐渐下降的趋势,5 d前差异不明显(P>0.05),万方数据 1122番南农生零莰2l懑表l攻毒聪相同时间点不嗣感染组和对照组部分血液生理指标的差异性(工±s)T如le l Va―ability 0f娜me眙mm biochernic越index髑0f teB6ng掣oups蚰d thelco咖l砒the蛐elO d 霹。32士◇。lS8 4.40士O.338 5.85童O.36b 17.33士O.90a ,18。23毒4。78毒 15。I簖毫O.57b 91.00士4.00a 90.33墩1.53atir舱且fter inocIllation 17 d 4.S7土0。43嚣 4.58±O。23扭 6.34士O.77b 17.20±2.52 25 d感染时网 Rl蚝f10拉?毛’’)d2 d 5.65±0。3l 5.73±O.46 5.72±O.59 18.13±O。57a 2l。23±3。52b 17。453±1.268 102.67±4.73 114.oo±7.2l 121.33±n。505 d 5,52囊§.2li眩 4.66±O.36ab 6.40土0.19c 15.97士O.76a豫}lSV混感维 对照组5。50圭0。{0睁 5.52±0.18 5.54±0.38’ 19.40±O.205。25±O.髓鞋5.3l±O.27a 6.56±O.76b 15.80±O.36矗WBC(109?L一1)PRRSV涅感组 对照缓 HCB(孚/L)PRRSV20。∞±l。9917.90±O.5l 125.00±12.77 115.33±7.37 108.33±5。5l19.甜土2。3lb18.?籽土1.16矗 103.33±1.15 98.00土3.6119.40±O。勰lS.270。95 98.67±4.51817。∞±1.18b15.23±O.76b 98.67±2.08B混感组 对照组106.00±7.2l如91.33±3.21a108。∞士ll。36133。33土9.钟b 118.67±lO。4lk 132.57±10.69b ”譬。配±33。08 3潞.67±53,翰鑫303.67土81.5l 305.33±13.32 54。00±5.77p疆(1护?L。1)PRRSV284。∞±4l。5l幸∞+∞±嚣.∞352.职土42.678 416。33毒23。16267.33±41.55 237.33±9.50 57。67±2.58 284.oo±42.30 247.67±24.21 57.50±2.09 177.oo±13.00b 272.33±12.90a 59,23士1.52 208.67士15.14 235.33士39.00 56.60士2.45混感组 对照组 MCV(%)PRRSV281.33±“.22b250.33±25.81b 61.87±2.4l滋惑组 对照组∞+筠±7。弱54.60±1.0859.粥±l。ll55.90±2.5955.鳓±2。7756.83±2.68冀。繇童l。药56.93生1.96努。钓±l。携58.63土t.406l。∞±4。5655.50士1.15注:同一检测日龄不同接种组问桥注不同小写字母者,寝示组间差异显著(P<O.05),标注不问大写字母者,表示组间差异极显著(P《 0.01),未标掌母或标相同字母糟,表示差异不显著(P>0.05)。表2攻毒麓相霹时润点不嗣藏染组和对照组部分盘清生{i:援掭的差异性{工±s)强le感染时间2Vd卤l海《s蕊粥瓣翔m醢。cbe瞄c墨l v越u糖蠢t鼯畦鸳梦跚p8黼d氆e e蠲枉ol曩|lbe翥椭e畦me盛野inoc毽l越i黼(菇±毒)ld2 d 1.77±0.38a 2。80±O.26b5 d 3.57士O.29a 3。67±O.25alO d 2.93土O.15 3。33毒O,3117d25d1’BIL(岬彬L)PRRSV2.37±O.29 2.73±O.15 2。70±0。|0 477。00±13.45 437.00士31.24 422.00±lO.54 52。{静±5。13 48.67±2.52 48.67±2.52 42.33±3.2l2.53土0.218 3,00±O.10ab2.47±O.21 2,63土O。12混感组 霹嚣缰 LDH(IU/L)PRRSV2.87±G。笱b2。”童O,32b3.鹳土O。勰2。孵±0。35&2。50±O。筠 533.67±52.∞560.67±18.7l 525.67±42.59S30.67±74.78&“2.33±33.50A 589.oo毫22.钟ab 474.67土87.73 493.33±12.66ab690.00士12.00A“9.00患42.ooa429.67±10,26b 450.00±13.07B 511。00土34.40b 541.33±63.69 533,33土38.80混感组 对照组G双《lU/劲PRRSV50。∞±O。∞曲66。∞囊7。52352.67±3.058b 46.oo±2.oob 49.67±1.53 63。33士4.5lt 46.oo±4.36b 78,67士6.43a58。67毒6.1l∞辩。裾圭3。5lt 63。67生2.52曲54.∞±5。转瘀49.33士3.06c 66.00士2.00ab 48.33±0.58c 60.00±1.00ab 71。33±4。】68 5l。33±6.92b 59.93士3.918 47.43±2.22a 51.87±1.12b53。67±2。潞53.67±1.15 50.00±1.00 60.67±2.08a 52.67±3,5lb混感维 对照组 COT(IU/L)PRRSV霾感组 对照维 TP(∥L)PRRSV46。∞±3,6l45.33±4。16 49.90±1.30 50.90±1.47 48.83土1.78 32.17土3。Sl 30.07±O.35 29.9r7±O.2l 17.73±3.25 2l。17±2。39 18.87±1.9948。舒±5。5l4S,33土4.16 51.27±1.62 54.07±1.70 52.33±1.3579,∞土2,658 鞫.∞耄2+65b51.10±2.10 56.80士1.15 52.47虫3。307l。67毒勰。鼹A 钌.33毒2.黯b60.73土3.80a 55.53盘2.78a5l。∞±2。65b54.40±2.04 54.83±2.15 52。03±2.17混感组 对照组52。97蠹I.钧b 30,∞意O.稻839.97毒1.86b 31.13士0.50a 30.67土3.15A 32。23童l。42A 22.63童2。02B轰强(g/劲豫RS¥混感维 对照组32。彰±l。72玉29.43±O.90ab 31.27±O.70b 19.20±1.29a 24。茌3圭l。37b32。荔囊1.弱30。73土1.56 31.70土2.17 18.83生3.0133。酪±O.76&40.33土2。Olb 31.43±O.87ac 32.97±2.48A答。4殆±0.5631.93土1.42 31.50±1.70 24.73±2.54 22.90土3.57 20.53±2.2lCID(g/L)PRRSV涅感缰 对照维26。戮圣2,70 20.W毫3.79赞。77±3。辨舂 ∞,43±O.64B21.∞±O.65矗注:同一检测指标相同日龄标注不同小写字母者,表示组问差异显著(尸《O.05),标注不同大写字母者。表示组问麓异极显著(P(O.01), 未标字母哦标相同字母者,表示栽异不显著(P>O.05)。万方数据 4期娄忠子等:猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒美洲株与猪Ⅱ型圆环病毒混合感染仔猪的血液病理学研究第10天后两攻毒组显著低于对照组,差异均显著 (P<0.05)。接毒后第5天混合感染组PLT显著低 于单独感染组和对照组,差异显著(P<0.05),接毒 后25 d单独感染组高于混感组,差异显著(P<0. 05)。随着接毒时间的延长,MCV呈现先下降而后 升高的趋势。各组间差异不显著。 攻毒后相同时间点不同感染组和对照组部分血 清生化指标见表2。TBIL在第5天时感染组显著高 于对照组(P<0.05),以后各组问差异不显著(P> 0.05)。病毒感染组的LDH在第2天时感染组高于 对照组,差异显著(P<0.05),第5天时差异极显著 (P<0.01)。GPT在接种后第5天病毒接种组显著 高于对照组,差异显著(P<0.05),到接种25 d时 对照组与接种组差异不明显(P>0.05)。GOT从第 5―15天,感染组高于对照组,差异显著(P<0.05); 混感组高于单独感染组,但差异不显著(P>0.05)。 ,I’P在第10和15天时,病毒接种组与对照组的差异 均显著(P<0.05),而且其它时间点上均无明显差 异。ALB在接种10―17 d时混合感染组低于对照 组和PRRSV单独感染组,差异显著(P<0.05), PRRSV接种组与对照组高低交叉,差异在显著与不 显著之间(P>0.05或P<0.05)。GLO在lO一15 时病毒接种组显著高于对照组(P<0.01),单独感dFig.3 ≈ 360 270吕蜜需 ■口p6l●口■‘zI■_咖趣dtta,如t1 5aolOIlt-_嘶直a∞岫?五∞ElD棚】L口5‘100130■Ej∞j^_.-_title:‘-d_岣,-■O■bb¨口'∞■“'d”'●Cv:j,●口■口:}L帅*■●,』●D■5,20*‘“,:lJj{180Z10I■s_-州,20■T口‘■●^口.O】,*90 Ok0 20■j^¨●I口,k:j■j■‘●‘一:OJ’}、…公Oc--h110Z*^9q-eo捌eT 0∞■b^■口…_Lf,Tj540 60 80 100 ChannelsfFLA―A】120龆=篇::=k” 电3“图3PRRSV+PCV2混合感染组外周血淋巴细胞凋亡 比率直方图Bargraphofapoptosisproportion of lymphocytes from periph― grouperal blood of mixed inoculation染组与混合感染组的差异不显著(P>0.05)。 外周血淋巴细胞凋亡见图1―4。在凋亡比率 直方图上,凋亡细胞在G1/G0期前出现一个亚二倍 体峰,即所谓凋亡峰(图1.A),通过测定凋亡峰所 占百分含量,便可知凋亡细胞比率。对外周血淋巴 细胞凋亡比率统计分析发现,各攻毒组淋巴细胞的 凋亡比率呈先升高后降低的趋势,对照组的凋亡比 率没有明显变化(图4),不同试验组在相同时间点 的凋亡比率差异较大,在攻毒早期尤其显著,后期趋 于平稳(图5)。接种1~10 d两感染组凋亡显著高 于对照组,差异极显著(P<0.01),接种17 d时混 感组与其它两组差异显著(P<0.05)。PRRSV单吕嬲:160■口p‘1 ●D№‘2nk●mld 1●Ⅲ1D∞^-D5rA.畸-aJD^…~厉d加“h.20a‘ ‰a?Iq●t-■_-■-呐’b口b■b:1∞∞■Db甜a03ba%越!IOEO口09l120 ≈D■证1'们%叭’'l'口b Sl吕粼:360 270●o∞引 ●口∞Gl 口口pt-'dE5■GZ日1帕『■-由正a”Dm Dmf_由且口:口‘^-一2∞B Lb“}1 0^O^_叮r^^码r’k tltlat:-●n-■?^?,’■3J,电80主400¨』图1D■b■'00∞■ Db口H,D■■■’埘 D■Gz'的‰I【’d,。 ¨'y∞一Gz厄1:’’Z,●cv 3,●歉勰{180主90 O■●a●14’々,●1■‘■-:OTl●LJ }、…公Ot■’h1T】口Z一t-●^L’】1,5^9口c’’。Ic'OOD*岫由■a外周血淋巴细胞凋亡比率直方图apoptosis^-口ck…‘L’Z∞8 白cb…’L,-t―c-几-畦j,■C■:,2BFig.1Bargraph of end bloodpmportlon of lymphoeyt∞from periph?图4各组外周血淋巴细胞凋亡比率的消长趋势Fig.4Change tendency of lymphocytes apoptosis td blood of different 6.00groupsratiohmperipher-60一5.oo曼4.00一 一口乌40Z 20 O 0 20 40 60 80篓3.00 2.00 U曙1.oo0.00训l 2.囫5I.拥PC.V鲫-2+P.R舯RSV.10,1725Channe】sf兀^一A1接毒时间㈣ 图5各组外周血淋巴细胞凋亡比率比较Fig.5 Comparison of lymphocytes blood of differentgroups apoptosis ratio图2Fig.2PRRSV单独感染组外周血淋巴细胞凋亡比率直方图Bargraph of apoptosisproportionoflymphocytesfromperiph―from peripheraleral blood of PRRSV inoculationgroup万方数据 番南囊生攀羲2l卷独接种组3 d后的凋亡比率最高(图2),而混合感 染组攻毒2 d后细胞凋亡就出现高峰(图3)。化对特定疾病缺泛征病意义,通过检测生理生化指标的变化可判定疾病严重程度及相应内脏器官的损伤,结合病毒抗体试验的血液病理学检测对诊断疾 瘸更具穗床意义。 本试验结果显示,各病毒接种组外周血淋巴细 胞的凋亡比例均显著高于对照组,病毒混合感染引 起的淋巴细胞凋亡程度最高,本试验进一步证明3讨论WBC检测结果表明,混感组WBC数量高于 PRRSV单独感染组。试验后期外周血WBC数量呈 降低趋势,这与大多数研究结果相一致,可能与病毒感染引超麴免疫抑刽有关。从RBC的检测结果可以看出,PRRSV感染猪RBC的数量下降,混合感染 会使RBC的数量下降幅度更大,RBC的数艇下降可 能与再生障碍和RBC破坏有关。HGB差异情况与 RBC基本一致,但25 d时未见匿升,可能与红绥胞PRRSV能导致外髑瘟海巴缨您獭亡,进{纛;弓|起免疫抑铷,这种作用因与PCv2混合感染而显著加强。这与部分学者的研究结果相一致,Shibahara等[1训研究发现,PCV2能够诱导淋巴系统中B淋巴细胞凋亡,使患猪处于免疫搀制状态;Segales等”u诞嘎PCV2发病猪蛊液巾,lI细胞(主要是CD4+)稻B细 胞数量减少,淋巴细胞的减少与细胞的凋亡有一定 的关系。PRRSV与PCV2均是具有免疫抑制作用的 瘸原体P.A。Harms等∞’进行的人工感染中发现,的数量交纯及新生成红细稳翡HGB含繁低有关。 PLT的数量最初降低而后升高,分析其原因,可能是 初期机体受病毒感染的影响,出现轻微的造血功能 障碍,这与缀细胞数量2 d左右下降相对庶。MCV与RBC检测结果摆一致,缀差异不显著,及应攻毒PCV2蠢PRRSV共潜感染露凄联毙单独感染更加严重的病变,淋巴纽织中淋巴细胞数量明显减少,说明 两种病毒混合感染具有协同致病作用。本试验结果 进~步证明两病毒混合感染的协同致病作用。对血细胞的损伤有限,没有对血细胞的含量造成太大的影响。AllanGM(2000)等报道旧J,PMWS的病例都有黄疸表现,赞痘豹出瑰与巍泼孛红缨胞破坏及趣红 素的含量升高直接相关。本试验检测刹各试验组之 间TBIL先上升后逐渐下降,渐恢复到最初的水平。本变化趋势与RBC和HGB含量先降低后升高的趋各试验组淋巴缀魄豹凋亡毖率攻毒后2―3d时达到高峰,此嚣逐渐下降并趋予恢复。分析其原因,可能与病毒在廊液内的消长规律有关,攻毒初期 机体出现病毒血症,血液内病毒含量迅速升高,外周 盘淋巴细胞大都被感染,面出现较高的凋亡比率,随 蓉时闻的延长,橇体逐渐产生抗体,病毒在蛊内食量 趋于减少,甚至消失,血液白细胞的凋亡也随之减势摆对应。康格非(1989)报道19j,当缨胞熙菜释因素受到破坏,细旎膜逶透性羿高,细胞内酶黉释放入 血液中,造成血清酶含量升高。任何原因引起的肝 细胞损伤均可引起血清乳酸脱氢酶含量增加。血清 谷丙转氨酶(Gvr)升高表明肝脏受损,GOT在心肌少。这与本实验中采用ELISA方法进行的血液圆环病毒抗体水平测定相符合。 参考文献:[1】MeehanBM,McNeilly F。TedD,et细胞孛较多,当心肌受损时,盘溥孛谷摹转氨酶含量 往往增加。?昆感组两酶的血清含量显著高予单独感 染组,表明混感组造成的损伤较PRRSV单独感染组 更加严重。G胛与GOT的变化与肝、心病理组织学 病变摆一致。试验中GLO先升高建后下降,瑟且上升明显,说明在病毒的刺激下,机体产生了抗俸,但 随着时间的延长GLO下降很快,应该是机体免疫抑 制的结果。起初各试验组与对照组的ALB差异不 明显,但随着时闻的延长,ALB的有下降的趋势,分 析认为是脬脏损伤的结果。 外周m生理生化指标的研究的结果裘明,病毒al。Charaterization ofllOVel clreo- Syndromes invires DNAs associated with ol,1998,79:2171―2179.wastingpigs[J].JGen Vir-[2】ClarkEG.Postweaning mulfisystemic wastingsysdrome[A].Pro-ceedings of the Americans 1997.499―501.Association of Swine Practitioners【c】。[3]Meehan BM,McNeilly F,MeNairtionI,eta1.Isolation and characteriza- andporcineofporcinecireovirus 2 fromcaⅫof s州abortiondermatitis and ncphropathy 835一S42。syndrome[J].Arch Virol,2001,146(4):C4】锄intnrm j,Se#es j,RosollrationsonC,e|8l。Clinical andpathol06cal obser-wastingpigsassociatedwith post'weaning muhisystemic感染对外周血各种指标都有一定的影响,WBC、GPT、GOT、LDH、GLO及TBIL感染组高于对照组;syndrome[J].Vet Roc,2001,149(12):357-361.[5]P.A。Harms,S.D,Sorden,P.G.Halbur,etduction of Severe DiseaseType 2Porcine Virus ina1.ExperimentalRepro-RBC、HGB、P域及ALB感染组低于对照缀;嚣MCVCD/CD残gs Concurrently Infected with及口无明显差异。PRRsV单独感染以及与PCV2在混合感染的变化规律基本相同,但混合感染多项 指标的变化幅度更大。但外周血生理生化指标的变CircovirusVetand Porcine Reproductive and RespiratorySyndromePathol 2001 38:528―539.in[6]Darwich L,Se#es J。Domingo M,et a1.ChangesCIM(+),CD4(+),CD8(+),and immunoglobulin M*positive Pdphend blood万方数据 4期蛰忠子等:猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒美i}}I株与猪Ⅱ型圆环瘸繇混合感染仔猪的胤液病理学研究1125mononuclear wasted and healthy cine eireovimstypepigscorrelate with lesions andpot-[10]ShibaharaT.SatoK,IshikawaY。etal.Porcine cireovirusinduces Blymphocyte depletionVet in pigs2 load in lymp Hoidtissues[j】.Clin Di&辨Labwithwastingdiseasesyndrome[J】。Jlmmunol,2002,9(2):236―242。。 【7]张骁梅,杨汉春,攀华,等.猪繁殖与睇吸综合征病毒实验憋染 SPF猪外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞早期凋亡细胞的观察MedSci,2000,62(11):1125―1131。[11]segal端j,AlonsoF,R08ellC,etal.Changesinperipheral bloodleu?kocyte populationswasting inpigswith naturalpostweaningmultisystemic[J].中国兽医杂志.1999,25:11.syndrome(PMWS)[J】.Vet lmmunol Immunopathol,2001,C8】触腿GM,Ellis J A.Porcine circoviruses:8 review[J].Journal of Diagnostic8l(1―2):37―44.VeterinaryInvestigation。2∞e。12:3一l毒.(责任编辑李洁)【9j康格菲.撼床生物化学[M】.北京:人糙滋生出舨社,1989.181一】82.万方数据}

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