人和类人猿的骨骼在结
人和类人猿的骨骼在结构上差不多完全相同,内脏结构也非常相似,人和类人猿的胚胎在五个月以前几乎完全一样……这些事实说明
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人和类人猿的骨骼在结
人和类人猿的骨骼在结构上差不多完全相同,内脏结构也非常相似,人和类人猿的胚胎在五个月以前几乎完全一样……这些事实说明
A．人是由类人猿进化来的
人和类人猿的骨骼在结
人和类人猿的骨骼在结构上差不多完全相同,内脏结构也非常相似,人和类人猿的胚胎在五个月以前几乎完全一样……这些事实说明
A．人是由类人猿进化来的 B．人比类人猿高等 C．人和类人猿有共同的祖先 D．现代类人猿将来可以进化成人4发现相似题研究结果表明,人和猿
研究结果表明,人和猿的骨骼在结构上几乎完全相同；人和猿的盲肠相似；人和猿的胚胎在五个月以前完全一样.这些事实说明
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研究结果表明,人和猿
研究结果表明,人和猿的骨骼在结构上几乎完全相同；人和猿的盲肠相似；人和猿的胚胎在五个月以前完全一样.这些事实说明
A．人是由猿进化来的 B．人和
研究结果表明,人和猿
研究结果表明,人和猿的骨骼在结构上几乎完全相同；人和猿的盲肠相似；人和猿的胚胎在五个月以前完全一样.这些事实说明
A．人是由猿进化来的 B．人和猿有共同的原始祖先 C．人比猿高等 D．现代的猿也能进化成人国人胚胎顶骨组织结构的胎龄性变化_百度文库
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国人胚胎顶骨组织结构的胎龄性变化
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骨形成蛋白4在小鼠牙胚形态发生初期表达和作用的研究
【摘要】：
骨形成蛋白4(BMP-4)是TGF-β超家族成员。作为一种重要的生长因子和信号分子，BMP-4与许多器官如骨、肝、心脏、眼、四肢等发育关系密切。在牙齿发育过程中，BMP-4广泛表达并发挥了重要作用。牙胚形态发生初期是一个重要的转变期，此期牙源性上皮在生牙信号的刺激下增殖并向间充质内延伸，发育为牙齿的雏形----牙蕾。BMP-4在该时期的表达特性仍有争议，其作用也不清楚。在国内，因为缺乏良好的研究模型，牙胚发育早期的研究尚未开展。针对以上问题，本课题从以下几方面进行了研究：
1．小鼠下颌弓体外培养模型的建立及牙胚发育在该模型中的动态观察
首先，探索小鼠下颌弓体外培养的可行性和条件。分离11dpc胎鼠的下颌弓，在含有950mL／L空气、50mL／L CO_2的37℃培养箱中用无血清BGJb培养液培养。小鼠下颌弓在体外生长良好。培养过程中肉眼可见下颁弓体积稍变大，下颌弓中央背侧舌生成，使下颌弓由培养开始时的两个下颁突组成变为由三个突起组成。连续培养11d后，进行组织学染色，显微镜下观察下颌弓发育情况。结果显示：牙胚发育进入帽状期，成釉器、牙乳头和牙囊形成；下颌软骨位于下颌突中央，在下颌软骨背外侧，大量成骨细胞聚集并有部分骨基质形成；下
颌弓中央背侧舌形成，舌背表面有乳头样突起；下颌弓表面上皮由培养前的单
层扁平上皮发育为为复层鳞状上皮，少部分下颌弓表面有角化物堆积。小鼠下
颌弓体外培养模型建立成功，为研究下颌软骨／下颔骨、舌、牙齿等结构的发育
提供了良好的研究模型。
其次在已建立的小鼠下颔弓体外培养模型中，观察牙胚形态发生过程。培
养开始时，牙胚形态发生尚未开始。培养3d后，在下颌弓颅侧未来磨牙区，
上皮增厚突入间充质内，牙胚形态发生开始。培养7d后，牙胚发育进入蕾状
期，由3－6层细胞组成的上皮条索延伸到间充质内，末端膨大，牙蕾周围间充
质细胞密集。培养11d后，牙胚发育进入帽状期，成釉器由内釉上皮、星网层
和外釉上皮组成，成釉器下方间充质细胞密集形成牙乳头，牙胚外有牙囊包绕。
在该模型中动态的观察到了牙胚形态发生过程，表明该模型可以用于研究牙胚
形态学发生的分子机制。
2．BMP4牙胚形态发生初期的表达和作用
取0、12、13、14 dPC胎鼠，采用免疫组化方法，研究牙胚从形态发生
开始到蕾状期BWi－4在蛋白水平上的表达模式。结果：牙胚形态发生最早的
迹象是原发性上皮带的形成，此时BMP－4阳性结果主要位于口腔上皮和原发
性上皮带的基底层以上细胞，在基底层细胞和基底膜中有弱阳性表达。牙源性
上皮在局部增厚并向间充质中延伸时，BMP－4在口腔上皮和增厚的牙板上皮全
层及基底膜呈强阳性表达，在上皮周围聚集的间充质内也有阳性表达。随着上
皮条索的形成和延伸，BMP－4在间充质中的表达进一步增强。牙蕾形成后，
BMP．4在牙蕾唇侧聚集的间充质内有强阳性表达，在口腔上皮、基底膜和牙蕾
的外周上皮中仍有阳性表达。本实验显示，BMP4蛋白在牙胚形态发生初期有
一个从上皮向间充质的表达转移。
利用反义核酸阻断技术，用一段长 15hp、特异的与 BMP＊ InRNA序列互
补的反义寡核昔酸（ASoDM阻断体外培养的下颌弓中 BMP＊ InRNA的翻译，
观察BMP－4 蛋白表达缺失后对牙胚形态发生的影响。实验共分为三组：
AS－ODN组、随机寡核苦酸（RS－ODM组及空白对照组。AS－ODN组和RS－ODN
组培养液中分别含有浓度为35 p。ilL左右的AS－ODN、RS－ODN，空白对照
组不加 ODN。培养9 d后，进行免疫组化及组织学染色，观察BMP．4蛋白表
达阻断情况和牙胚发育情况。结果显示：AS－ODN组BMP．4的翻译被有效阻
断，绝大部分牙胚发育停滞在上皮增厚状态，下颌弓内间充质细胞变得稀疏，
下颌软骨等结构消失；少部分下颌弓中仍有牙胚发育迹象，但是停滞在上皮条
索延伸阶段，牙蕾也未形成，同时伴有下颌软骨的发育不良。RS－ODN组及空
白对照组牙胚和下颌软骨等结构发育正常。表明在牙胚形态发生初期，BMP－4
在引导牙板上皮细胞延伸形成牙蕾及间充质细胞增殖聚集中起着重要作用。
本研究成功建立了下颌弓体外培养模型，并在该模型中动态观察了牙胚形
态发生过程，为研究牙齿早期发育提供了良好的体外研究模型。采用免疫组化
技术，研究BMP－4蛋白在牙胚形态发生初期的表达，明确了BMP－4蛋白在此
过程的表达模式。并利用反义寡核苦酸技术阻断BMP－4的翻译，通过功能丧
失性研究阐明了BMP－4在牙胚形态发生初期的作用，对揭示牙胚形态发生初
期的分子机理和牙齿组织工程具有重要意义。
【关键词】：
【学位授予单位】：中国人民解放军第四军医大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2003【分类号】：R780.2【目录】：
缩略语表5-6
中文摘要6-9
英文摘要9-13
文献回顾14-34
1 BMP-4生物学特性14-17
2 BMP-4与细胞凋亡和增殖17-19
3 BMP-4与细胞分化和器官发育19-23
4 BMP-4与牙齿发育23-28
5 国内体外牙齿发育研究模型28-34
实验研究34-58
第一部分 小鼠下颌弓体外培养模型的建立及牙胚发育在该模型中的动态观察34-49
实验一 小鼠下颌弓体外培养模型的建立34-43
实验二 小鼠牙胚发育在下颌弓体外培养模型中的动态观察43-49
第二部分 小鼠牙胚形态发生初期BMP-4的表达及作用49-58
实验一 牙胚形态发生初期BMP-4表达的免疫组化研究49-53
实验二 反义核酸阻断BMP-4的表达对牙蕾形成的影响53-58
全文总结58-59
参考文献59-66
个人简历78
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